一種苦茶槭的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種苦茶槭的快速繁殖方法,包括無菌苗的獲得、叢生芽的增殖、生根誘導(dǎo)、煉苗移栽等步驟,本發(fā)明方法所制備的苦茶槭生長(zhǎng)速度快,生長(zhǎng)周期短,增殖系數(shù)高,成活率高,可以在短期內(nèi)獲得大量的苦茶槭幼苗,為苦茶槭藥用價(jià)值的開發(fā)提供基礎(chǔ)。
【專利說明】 一種苦茶槭的快速繁殖方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及苦茶槭組織培養(yǎng)的快繁方法,屬于植物【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]苦茶槭,Jcer ginnala Maxim.,落葉喬木,又名茶條槭、桑芽茶、雞茶分布于湖北,湖南,廣東,廣西等地。弱陽性,耐寒,耐干燥,忌水澇,抗煙塵,具有很高的藥用價(jià)值和實(shí)用性,樹皮、葉和果實(shí)都含鞣質(zhì),可提制栲膠,又可為黑色染料。樹皮的纖維可作人造棉和造紙的原料。嫩葉烘干后可代替茶葉用為飲料,有降低血壓的作用,種子榨油,可用以制造肥皂。目前中藥的繁殖方式是種子繁殖,繁殖周期長(zhǎng),生長(zhǎng)條件要求高,不利于達(dá)規(guī)模生產(chǎn),組培技術(shù)應(yīng)用于苦茶槭的繁殖國(guó)內(nèi)外尚無研究。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種苦茶槭的快速繁殖方法,由該方法所制備的苦茶槭生長(zhǎng)速度快,生長(zhǎng)周期短,增殖系數(shù)高,成活率高,可以在短期內(nèi)獲得大量的苦茶槭幼苗,為苦茶槭藥用價(jià)值的開發(fā)提供基礎(chǔ)。
[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是通過以下方案來實(shí)現(xiàn)的:
取苦茶槭種子,在漂白粉中浸泡3min,水中浸泡1h,5h換一次水,超凈工作臺(tái)上75%酒精處理30s,氯化萊處理16min,無菌水沖洗5-7遍。滅菌處理過的苦茶槭種子接入MS+8mg/L卡那霉素培養(yǎng)基中培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6g/L,PH5.8-5.9,光照ΙΟΟΟΙχ,溫度24°C,生長(zhǎng)出來的無菌芽苗,放入增殖培養(yǎng)基 MS+IAA0.3 mg/L+ABAlmg/L+ZT2mg/L+4mg/LGA3+50mg/L谷胱甘肽,附加蔗糖30g/L,瓊脂6g/L,PH5.8-5.9,光照ΙΟΟΟΙχ,增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基White+NAA0.lmg/L+硝酸鑭lmg/L,將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出,洗去根部的培養(yǎng)基,多菌靈浸根,栽植于珍珠巖:腐殖土 =1:1的基質(zhì)中培養(yǎng),培養(yǎng)20d后,移栽入田園土中進(jìn)行大田栽種。
[0005]采用本發(fā)明制備的苦茶槭成活率為94%,周期短,產(chǎn)量高,能耗少,污染小,利于大規(guī)模種植。
[0006]下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述,但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
[0007]實(shí)施例1
取苦茶槭種子,在漂白粉中浸泡3min,水中浸泡1h,5h換一次水,超凈工作臺(tái)上75%酒精處理30s,氯化萊處理16min,無菌水沖洗5_7遍。滅菌處理過的苦茶槭種子接入MS+8mg/L卡那霉素培養(yǎng)基中培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6g/L,PH5.8-5.9,光照ΙΟΟΟΙχ,溫度24°C,生長(zhǎng)出來的無菌芽苗,放入增殖培養(yǎng)基MS+IAA0.2mg/L+ABA0.5mg/L+ZTl.5mg/L+4mg/LGA3+50mg/L谷胱甘肽,附加蔗糖30g/L,瓊脂6g/L,PH5.8-5.9,光照ΙΟΟΟΙχ,增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基White+NAA0.lmg/L+硝酸鑭0.5mg/L,生根后的苦茶槭試管苗先移栽到溫室,然后移栽到大田進(jìn)行煉苗培養(yǎng),苦茶槭成活率為90%。
[0008]實(shí)施例2
取苦茶槭種子,在漂白粉中浸泡3min,水中浸泡1h,5h換一次水,超凈工作臺(tái)上75%酒精處理30s,氯化萊處理16min,無菌水沖洗5_7遍。滅菌處理過的苦茶槭種子接入MS+8mg/L卡那霉素培養(yǎng)基中培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6g/L,PH5.8-5.9,光照ΙΟΟΟΙχ,溫度240C,生長(zhǎng)出來的無菌芽苗,放入增殖培養(yǎng)基MS+IAA0.5 mg/L+ABAl.5mg/L+ZT3mg/L+4mg/LGA3+50mg/L谷胱甘肽,附加蔗糖30g/L,瓊脂6g/L,PH5.8-5.9,光照ΙΟΟΟΙχ,增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基White+NAA0.lmg/L+硝酸鑭1.5mg/L,生根后的苦茶槭試管苗先移栽到溫室,然后移栽到大田進(jìn)行煉苗培養(yǎng),苦茶槭成活率為91%。
[0009]實(shí)施例3
取苦茶槭種子,在漂白粉中浸泡3min,水中浸泡1h,5h換一次水,超凈工作臺(tái)上75%酒精處理30s,氯化萊處理16min,無菌水沖洗5-7遍。滅菌處理過的苦茶槭種子接入MS+8mg/L卡那霉素培養(yǎng)基中培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6g/L,PH5.8-5.9,光照ΙΟΟΟΙχ,溫度24°C,生長(zhǎng)出來的無菌芽苗,放入增殖培養(yǎng)基 MS+IAA0.2mg/L+ABAlmg/L+ZT2mg/L+4mg/LGA3+50mg/L谷胱甘肽,附加蔗糖30g/L,瓊脂6g/L,PH5.8-5.9,光照ΙΟΟΟΙχ,增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基White+NAA0.lmg/L+硝酸鑭0.5mg/L,生根后的苦茶槭試管苗先移栽到溫室,然后移栽到大田進(jìn)行煉苗培養(yǎng),苦茶槭成活率為92%。
[0010]實(shí)施例4
取苦茶槭種子,在漂白粉中浸泡3min,水中浸泡1h,5h換一次水,超凈工作臺(tái)上75%酒精處理30s,氯化萊處理16min,無菌水沖洗5-7遍。滅菌處理過的苦茶槭種子接入MS+8mg/L卡那霉素培養(yǎng)基中培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6g/L,PH5.8-5.9,光照ΙΟΟΟΙχ,溫度24°C,生長(zhǎng)出來的無菌芽苗,放入增殖培養(yǎng)基 MS+IAA0.5 mg/L+ABAlmg/L+ZT3mg/L+4mg/LGA3+50mg/L谷胱甘肽,附加蔗糖30g/L,瓊脂6g/L,PH5.8-5.9,光照ΙΟΟΟΙχ,增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基White+NAA0.lmg/L+硝酸鑭0.5mg/L,生根后的苦茶槭試管苗先移栽到溫室,然后移栽到大田進(jìn)行煉苗培養(yǎng),苦茶槭成活率為93%。
【權(quán)利要求】
1.一種苦茶槭的快速繁殖方法,包括外植體的消毒、無菌苗的獲得、叢生芽增殖、生根培養(yǎng)和煉苗移栽,其主要步驟如下: (1)取苦茶槭的種子,對(duì)其進(jìn)行滅菌處理; (2)將步驟(I)滅菌處理過的苦茶槭種子接入MS+8mg/L卡那霉素培養(yǎng)基中培養(yǎng),附加蔗糖 30g/L,瓊脂 6g/L,PH5.8-5.9,光照 ΙΟΟΟΙχ,溫度 24°C ; (3)取步驟(2)生長(zhǎng)出來的無菌芽苗,放入增殖培養(yǎng)基MS+IAA0.2-0.5 mg/L+ABA0.5-1.5mg/L+ZTl.5-3mg/L+4mg/LGA3+50mg/L 谷胱甘肽,附加鹿糖 30g/L,瓊脂 6g/L,PH5.8-5.9,光照 100lx ; (4)取步驟(3)增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基White+NAA0.lmg/L+硝酸鑭0.5-1.5mg/L ; (5)取步驟(4)生根后的苦茶槭試管苗先移栽到溫室,然后移栽到大田進(jìn)行煉苗培養(yǎng)。
2.按照權(quán)利要求1所述的一種苦茶槭的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(I)中所述苦茶槭種子的滅菌處理為,取苦茶槭種子,在漂白粉中浸泡3min,水中浸泡10h,5h換一次水,超凈工作臺(tái)上75%酒精處理30s,氯化汞處理16min,無菌水沖洗5_7遍。
3.按照權(quán)利要求1所述的一種苦茶槭的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(2)無菌苗生長(zhǎng)培養(yǎng)中中附加了卡那霉素8mg/L,用來消除內(nèi)生菌。
4.按照權(quán)利要求1所述的一種苦茶槭的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(3)中的增殖培養(yǎng)基中附加了 4mg/LGA3和50mg/L谷胱甘肽,谷胱甘肽可以防止增殖過程中出現(xiàn)褐化現(xiàn)象,GA3可以促進(jìn)小苗的增殖,GA3需待滅菌后的培養(yǎng)基冷卻到60°C以下進(jìn)行過濾滅菌。
5.按照權(quán)利要求1所述的一種苦茶槭的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(4)中加入了硝酸鑭0.5-1.5mg/L,稀土物質(zhì)可以促進(jìn)植物的生根。
6.按照權(quán)利要求1所述的一種苦茶槭的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(4)中的生根培養(yǎng)條件為蔗糖20g/L,瓊脂5g/L,PH5.8-5.9,光照20001x,濕度60-70%,光期14h。
7.按照權(quán)利要求1所述的一種苦茶槭的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(5)中苦茶槭的煉苗培養(yǎng)方法為將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出,洗去根部的培養(yǎng)基,多菌靈浸根,栽植于珍珠巖:腐殖土 =1:1的基質(zhì)中培養(yǎng),培養(yǎng)20天后,移栽入田園土中進(jìn)行大田栽種。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK104170738SQ201410449536
【公開日】2014年12月3日 申請(qǐng)日期:2014年9月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月4日
【發(fā)明者】張金芳, 楊存 申請(qǐng)人:南京標(biāo)科生物科技有限公司