專利名稱：弄崗馬兜鈴組織培養(yǎng)的增殖培養(yǎng)基及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)種植領(lǐng)域，具體而言，涉及一種弄崗馬兜鈴組織培養(yǎng)的增殖培養(yǎng)基及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
弄崗馬兜鈴為胡椒目馬兜鈴科馬兜鈴屬植物，學(xué)名:Aristolochia 1nggonensisC.F.Liang，別名弄崗?fù)ǔ腔ⅰ?979年由廣西弄崗綜合考察隊(duì)在廣西弄崗國家級(jí)自然保護(hù)區(qū)調(diào)查時(shí)發(fā)現(xiàn)，是廣西熱帶北緣巖溶森林下的一種藤本藥用植物，其性味功能與廣西著名民間草藥通城虎相似，有良好的鎮(zhèn)痛作用，民間用于痛傷、蛇傷、高熱等疾病的治療。中國野生弄崗馬兜鈴多分布于廣西弄崗國家級(jí)自然保護(hù)區(qū)內(nèi)?！澳就R兜鈴的組織培養(yǎng)和快速繁殖”(《植物生理學(xué)通訊》第4卷第I期，2008年2月，136頁)，公開了:使用1/2B5+IBA0.05+1 %蔗糖作為木通馬兜鈴節(jié)增殖的培養(yǎng)基配方。而本發(fā)明涉及的弄崗馬兜鈴與木通馬兜鈴分布地域不相同，生長(zhǎng)條件差異大，雖然同科同屬，但不同種，通過試驗(yàn)，該現(xiàn)有技術(shù)所公開的培養(yǎng)基配方不適合弄崗馬兜鈴的組織培養(yǎng)節(jié)增殖。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對(duì)上述存在問題，提供一種弄崗馬兜鈴組織培養(yǎng)的增殖培養(yǎng)基，所述的培養(yǎng)基包括:大量元素:KN031 800-20 00mg/L ；NH4NO3 1600-1700mg/L ；MgS04.7H20350_390mg/L ；CaCl2 400-480mg/L ；KH2PO4 300_380mg/L ；微量元素:KI0.63-1.0mg/L ；H3BO3 5.2-7.2mg/L ；MnSO4.4H20 20_25mg/L ；ZnSO4.7H20 7.6-9.6mg/L ；Na2Mo04.2H20 0.2-0.3mg/L ；CuSO4.5H20 0.02-0.03mg/L ；CoCl2.6H20 0.02-0.03mg/L ；植物激素:6_BA0.5mg/L-l.0mg/L ；其他:蔗糖20_40g/L ;瓊脂 3_5g/L ；余量為水，所述培養(yǎng)基的ρΗ5.5-6.0。本發(fā)明通過改良MS培養(yǎng)基+—定濃度的植物激素進(jìn)行弄崗馬兜鈴的節(jié)增殖培養(yǎng)。本發(fā)明解決了其他節(jié)增殖培養(yǎng)基配方不適合弄崗馬兜鈴組培節(jié)增殖培養(yǎng)的問題，使用本發(fā)明的培養(yǎng)基可以提高其增殖效果。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1: 配制培養(yǎng)基，其中每升該培養(yǎng)基的組分及各組分的含量如下:1、大量元素:KNO3 1900mg/L ；NH4NO3 1650mg/L ；MgS04.7H20370mg/L ；CaCl2440mg/L ；KH2PO4 340mg/Lo
2、微量元素:KI 0.83mg/L ；H3BO3 6.2mg/L ；MnS04.4H20 22.3mg/L ；ZnSO4.7H20
8.6mg/L ；Na2MoO4.2H20 0.25mg/L ；CuSO4.5H20 0.025mg/L ；CoCl2.6H200.025mg/L。3、植物激素:6-BA0.5mg/L_l.0mg/L。4、其他:蔗糖 30g/L ;瓊脂 4g/L ；/jC ；pH5.8。5、培養(yǎng)基配制:按各組分含量分別添加，次序?yàn)檎崽且淮罅吭匾晃⒘吭匾恢参锛に匾灰呀?jīng)煮沸的 瓊脂和水的混合物一加水定容一調(diào)節(jié)pH至5.8 —分裝至果醬瓶中并密封好一高壓鍋滅菌滅菌溫度121°C 20分鐘。6、接種方法:在超凈工作臺(tái)上取已接至果醬瓶中并已長(zhǎng)出莖、芽的弄崗馬兜鈴瓶苗，將其切割成長(zhǎng)約為2cm的一葉一段，接至已配制好并經(jīng)過高壓滅菌過的培養(yǎng)基中。接種完畢后，放于恒溫27°C，光照強(qiáng)度為300-7001x的培養(yǎng)間中培養(yǎng)。7、增殖過程:在培養(yǎng)間中培養(yǎng)約7天左右，開始出現(xiàn)腋芽，約14天后，腋芽開始伸長(zhǎng)，達(dá)到增殖目的。8、增殖試驗(yàn)8.1、試驗(yàn)設(shè)計(jì):試驗(yàn)以改良MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，添加6-BA或IBA激素，激素濃度分別為 6-BA0.5mg/l、lmg/1 ；IBA0.05mg/l,以 1/2B5+IBA0.05mg/l 為 CK0 共得 5 種培養(yǎng)基，分別為:⑴改良MS培養(yǎng)基；⑵改良MS培養(yǎng)基+6-BA0.5mg/l ； (3)改良MS培養(yǎng)基+6-BAlmg/l ； (4)改良 MS 培養(yǎng)基 +ΙΒΑ0.05mg/l ； (5) 1/2B5+IBA0.05mg/l (CK)。按接種方法，每個(gè)處理16瓶，每瓶接種一葉一段。8.2、數(shù)據(jù)記錄7d后腋芽統(tǒng)計(jì)表
權(quán)利要求
1.一種弄崗馬兜鈴組織培養(yǎng)的增殖培養(yǎng)基，所述的培養(yǎng)基包括:大量元素:KN03 1 800-20 00mg/L ；NH4NO3 1600-1700mg/L ；MgS04.7H20350_390mg/L ；CaCl2 400-480mg/L ；KH2PO4 300-380mg/L ；微量元素:KI 0.63-1.0mg/L ；H3BO3 5.2-7.2mg/L ；MnS04.4Η20 20_25mg/L ；ZnSO4 *7H207.6-9.6mg/L ；Na2MoO4.2H20 0.2-0.3mg/L ；CuSO4.5H200.02-0.03mg/L ；CoCl2.6H200.02-0.03mg/L ； 植物激素:6-ΒΑ0.5mg/L-l.0mg/L 和 / 或 6-BA 細(xì)胞分裂素 0.5mg/L_l.5mg/L ； 其他:蔗糖20-40g/L ;瓊脂3-5g/L ； 余量為水，培養(yǎng)基的PH5.5-6.0。
2.權(quán)利要求1所述的培養(yǎng) 基在弄崗馬兜鈴組織培養(yǎng)的增殖培養(yǎng)中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了弄崗馬兜鈴組織培養(yǎng)的增殖培養(yǎng)基及其應(yīng)用，通過改良MS培養(yǎng)基+一定濃度的植物激素進(jìn)行弄崗馬兜鈴的節(jié)增殖培養(yǎng)。本發(fā)明解決了其他節(jié)增殖培養(yǎng)基配方不適合弄崗馬兜鈴組培節(jié)增殖培養(yǎng)的問題，使用改良的MS培養(yǎng)基+合理濃度的6-BA細(xì)胞分裂素可使其增殖效果達(dá)到最佳，提高增殖效率。
文檔編號(hào)A01H4/00GK103168693SQ20131012641
公開日2013年6月26日 申請(qǐng)日期2013年4月12日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月12日
發(fā)明者廖韋衛(wèi), 謝君鋒, 唐君海, 羅晟昇, 李 根, 蔣亞琴, 俸青, 莫周美, 何洪良, 陸祖正, 唐利球, 符策, 秦昌鮮 申請(qǐng)人:廣西橡膠研究所