專利名稱：：一種含林蛙抗菌肽的消毒制劑及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：-本發(fā)明涉及一種消毒制劑及其應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域：
，尤其是提供一種含有林蛙抗菌肽的消毒制劑及其制備方法和應(yīng)用。技術(shù)背景-目前國內(nèi)市場上銷售的濕巾、消毒濕巾，其中所含的消毒成分都是化學(xué)成分，如漂粉精、新潔爾滅、碘伏、過氧乙酸或乙二醛等，雖然具有一定的消毒殺菌作用，但對皮膚有刺激甚至?xí)卸拘?，特別不適合與破損皮膚、嬰兒嬌嫩的皮膚。如果為了減少刺激而減少化學(xué)消毒成分的含量，又會使使勁的消毒效果減弱，不能有效地抑制細(xì)菌的生長。同時化學(xué)成分的殘留又會對環(huán)境造成污染。目前迫切需要一種既能有效地消毒滅菌又不會產(chǎn)生刺激和毒副作用的濕巾。因此，如何解決上述問題成為研究的熱點。而隨著社會進(jìn)歩，衛(wèi)生巾己大大方便了婦女的日常生活，目前已發(fā)明了各種規(guī)格型號、具有特殊性能的衛(wèi)生巾產(chǎn)品。然而，目前這些產(chǎn)品普遍存在一些不足，其一，一些藥物衛(wèi)生巾沒有添加具有防腐功能的物質(zhì)，因此藥物易發(fā)霉，使藥物衛(wèi)生巾在存儲期間可能被污染；其二，為防止霉變，添加了有機(jī)或無機(jī)化學(xué)防腐劑，而衛(wèi)生巾在使用過程中直接與人體接觸，所填加的防腐劑對人體可能造成毒副作用。從最初人們研究北美天蠶的免疫機(jī)制時發(fā)現(xiàn)了其血淋巴產(chǎn)生具有抑菌作用的多肽物質(zhì)以來，相繼從其他昆蟲以及兩棲類動物、哺乳動物中，也分離到結(jié)構(gòu)相似的抗菌多肽。迄今為止，在不同動物組織中已發(fā)現(xiàn)了很多具有抗菌作用的蛋白質(zhì)和多肽，已有70多種抗菌多肽的結(jié)構(gòu)被測定，抗菌肽的概念得到了極大的擴(kuò)展。然而，作為一種多肽類物質(zhì)，其生物活性也易隨時間的延長而喪失，因此，如何在較長時間使其維持在較高的活性水平是近年來研究多肽類物質(zhì)的熱點。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明公開了一種含林蛙抗菌肽的消毒制劑，消毒劑中加入了多肽保護(hù)劑，使其抑菌活性能在較長時間內(nèi)維持在較高的水平。本發(fā)明還公開了一種含林蛙抗菌肽的消毒濕巾、抑菌衛(wèi)生巾及其制備方法。本發(fā)明的含林蛙抗菌肽的消毒制劑，其特征在于由以下原料按重量比制成的林蛙抗菌肽0.00002—0.02wt%，白蛋白0.005-0.05wt%，去污劑0.015—2.4wt%，潤膚劑0.15—15.6wt%，穩(wěn)定劑0.003—2.4wt%，余量為水。本發(fā)明所述的消毒制劑可用于制備殺滅細(xì)菌、真菌衛(wèi)生消毒制品；所述的細(xì)菌和真菌包括大腸桿菌、綠膿桿菌等革蘭氏陰性菌和金黃色葡萄球菌等革蘭氏陽性菌及臨床耐藥菌克雷伯桿菌、鮑曼不動桿菌、白色念珠菌、酵母菌的一種或多種。本發(fā)明所述的消毒制劑可用于在制備殺滅病毒衛(wèi)生消毒制品；所述的病毒包括艾滋病病毒、乙型肝炎病毒、流感病毒中的一種或多種。上述的所述衛(wèi)生消毒制品，包括衛(wèi)生巾、濕巾、噴霧劑。本發(fā)明涉及的消毒濕巾是經(jīng)如下步驟得到的(1)按各物質(zhì)比例配制消毒制劑。(2)將配制好的溶液噴涂于所需規(guī)格的載體上或?qū)⑤d體浸漬與溶液中，取出，即獲得本發(fā)明的濕巾。本發(fā)明涉及的抑菌衛(wèi)生巾是經(jīng)如下歩驟得到的(1)按各物質(zhì)比例配制消毒制劑。(2)將配制好的溶液噴涂于衛(wèi)生巾使用面無紡布上，紫外照射，烘干即得。本發(fā)明消毒制劑的體外抑菌試驗如下(以消毒濕巾為例)1試驗樣品的制備(1)抑菌濕巾樣品按照實施例一的方法制備。(2)對照濕巾:其中聚乙二醇0.15wt%，潤膚劑10wt%，聚山梨醇酯2.0wt%，余量為水。2實驗菌株大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、蠟狀芽孢桿菌、鮑曼不動桿菌、克雷伯菌。3實驗步驟-(1)將培養(yǎng)好的實驗菌株用1%蛋白胨PBS洗下新鮮斜面，并稀釋到適宜濃度，在105-10(;cfu/ml。濕巾制成1X3cm大小，并置于無菌平皿中。(3)取30vl菌液滴加到濕巾上，涂抹均勻同時開始計時。(4)作用到6-8h后用無菌鑷子將濕巾投入含有5ml中和劑的試管中，充分震蕩混勻。(5)對照濕巾投入中和劑試管中，充分振蕩后做適當(dāng)稀釋。(6)取終液1.Oml進(jìn)行傾注平板，37匸恒溫倒置培養(yǎng)48h。(7)計算對照回收菌量及樣品回收菌量，得出殺滅率。4實驗結(jié)果表l殺菌濕巾體外殺菌試驗殺滅率結(jié)果序齒株大腸桿金黃色綠膿桿蠟狀芽鮑曼不克雷伯內(nèi)色念酵母齒_「菌葡萄球菌菌孢桿齒動桿菌菌珠菌實殺菌99.94%99.92%99.45%99.76%99.89%99.91%99.56%99.73%施濕巾例對照000000001濕巾實殺菌99.98%99.47%99.65%99.56%99.87%99.39%99.87%99.73%施濕巾例對照000000002濕巾實殺齒99.74%99.690/099.71%99.49%99.59%99.84%99.51%99.91%施濕屮例對照000000003濕i"實殺齒99.92%99.57%99.65%99.72%99.39%99.63%99.63%99.89%施濕屮例對照000000()04濕巾實驗證明它對一些主要的致病菌大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌的抑菌效果十分理想，抑菌率均超過99%。本發(fā)明的含林蛙抗菌肽的消毒劑的抗病毒活性試驗是經(jīng)如下歩驟完成的在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板上，將該洗劑用完全培養(yǎng)基進(jìn)行2倍倍比稀釋，共6個稀釋度，每孔100vl,同時設(shè)置^常細(xì)胞對照，病毒感染細(xì)胞對照。每實驗孔滴加3X10'個C8166細(xì)胞和200TC瓜。的病毒，每孔的總體積為200vL。置37。C,5%0)2培養(yǎng)箱5內(nèi)培養(yǎng)。感染后第三天觀察待測化合物對合胞體形成的影響。在100倍的倒置顯微鏡下，選取5個不重疊的視野，計數(shù)病毒誘導(dǎo)C8166細(xì)胞形成的合胞體數(shù)。工C50為抑制合胞體形成達(dá)50。/。時的藥物濃度。EC50是對5(W宿主細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞毒作用時的藥物濃度，治療指數(shù)(SI)為IC50/EC50的比值。實驗表明抗菌肽在高效殺菌的同時也能作用于高等有機(jī)體包括人體細(xì)胞，抗菌肽的作用方式都是在細(xì)胞膜上穿孔使得細(xì)胞發(fā)生滲漏凋亡。本發(fā)明檢測了林蛙抗菌肽對正常人體紅細(xì)胞的溶血活性，即根據(jù)4%的新鮮紅細(xì)胞懸液在414nm下血紅蛋白的釋放來檢測的。檢測步驟如下人紅細(xì)胞經(jīng)PBS(35mM磷酸鹽緩沖溶液/0.15MNaCl,pH7.0)洗滌，取100^1的8%人紅細(xì)胞懸液于96孔板中，每孔加入100u1抗菌肽溶液，37。C一小時后，1500rpm離心5min，轉(zhuǎn)移100u1上清于新的96孔板中，通過酶標(biāo)儀檢測414nm下的吸收，陰性對照用PBS，陽性對照用0.l%TritonX-100檢測，結(jié)果見附表。實驗表明，抗菌肽溶血率值很低，證明本發(fā)明涉及的林蛙抗菌肽的溶血毒性極小。表2:本發(fā)明消毒劑的抗病毒活性<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>表3:添加了多肽保護(hù)劑的消毒劑與未加多肽保護(hù)劑的消毒劑的抑菌活性比較<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注I:添加了多肽保護(hù)劑的消毒劑II:未加多肽保護(hù)劑的消毒劑表4本發(fā)明溶血活性檢測結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>從以上數(shù)據(jù)可以看出，本發(fā)明的積極效果在于涉及的消毒劑中加入了多肽保護(hù)劑，使其抑菌活性能在較長時間內(nèi)維持在較高的水平。本發(fā)明的積極效果在于該消毒制劑具有明顯的滅菌消毒作用，制成的衛(wèi)生巾、濕巾、噴霧劑等衛(wèi)生消毒制品，有效地消毒滅菌乂不會產(chǎn)生刺激和毒副作用，可廣泛的用于n常生活中的衛(wèi)生消毒。具體實施例通過以下實施例進(jìn)一歩舉例描述本發(fā)明，并不以任何方式限制本發(fā)明，在不背離本發(fā)明的技術(shù)解決方案的前提下，對本發(fā)明所作的本領(lǐng)域普通技術(shù)人員容易實現(xiàn)的任何改動或改變都將落入本發(fā)明的權(quán)利要求范圍之內(nèi)。實施例1:消毒制劑的制備按照各物質(zhì)比例，林蛙抗菌肽0.005kg，聚乙二醇O.15kg，潤膚劑10kg，聚山梨醇酯2.0kg，白蛋白0.()5kg，加水至1000kg配制消毒制劑。實施例2消毒制劑的制備按照各物質(zhì)比例，林蛙抗菌肽0.0i5kg，聚乙二醇1.5kg，潤膚劑50kg，聚山梨醇酯5.Okg，白蛋白0.15kg，加水至1000kg配制消毒制劑。實施例3消毒制劑的制備按照各物質(zhì)比例，林蛙抗菌肽O.10kg，聚乙二醇5.0kg，潤膚劑80kg，聚山梨醇酯20.Okg，白蛋白0.25kg，加水至1000kg配制消毒制劑。實施例4消毒制劑的制備按照各物質(zhì)比例，林蛙抗菌肽O.20kg，聚乙二醇10.0kg,潤膚劑90kg，聚山梨醇酯22.Okg，白蛋白0.50kg，加水至1000kg配制消毒制劑。實施例5消毒濕巾的制備將無紡布剪裁成8cmX8cm，經(jīng)過紫外消毒20分鐘后，浸入實施例廣4制備的消毒制劑溶液中，待浸透后撈出，滴去多余溶液，即獲得本發(fā)明的濕巾；實施例6利用衛(wèi)生巾的常規(guī)生產(chǎn)方法通過在衛(wèi)生巾的載體上浸透本發(fā)明消毒制劑溶液制成消毒衛(wèi)生巾。8權(quán)利要求1、一種含林蛙抗菌肽的消毒制劑，其特征在于由以下原料按重量比制成的林蛙抗菌肽0.00002-0.02wt％，白蛋白0.005-0.05wt％，去污劑0.015-2.4wt％，潤膚劑0.15-15.6wt％，穩(wěn)定劑0.003-2.4wt％，余量為水。2、權(quán)利要求1所述的消毒制劑在制備殺滅細(xì)菌、真菌衛(wèi)生消毒制品中的用途。3、權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于所述的細(xì)菌和真菌包括大腸桿菌、綠膿桿菌等革蘭氏陰性菌和金黃色葡萄球菌等革蘭氏陽性菌及臨床耐藥菌克雷伯桿菌、鮑曼不動桿菌、白色念珠菌、酵母菌的一種或多種。4、權(quán)利要求1所述的消毒制劑在制備殺滅病毒衛(wèi)生消毒制品中的用途。5、權(quán)利要求4所述的用途，其特征在于所述的病毒包括艾滋病病毒、乙型肝炎病毒、流感病毒中的一種或多種。6、權(quán)利要求4所述的衛(wèi)生消毒制品，包括衛(wèi)生巾、濕巾、噴霧劑。全文摘要本發(fā)明公開一種含林蛙抗菌肽的消毒制劑及其制備方法和應(yīng)用，其消毒制劑由林蛙抗菌肽、保護(hù)劑、去污劑、潤膚劑、穩(wěn)定劑等制成，加入了多肽保護(hù)劑白蛋白，既保持了多肽本身的抑菌活性，又使其有效抑菌時間大大延長。本發(fā)明還提供了上述消毒劑負(fù)載于載體制成的消毒濕巾、抑菌衛(wèi)生巾；本發(fā)明的消毒濕巾對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、白色念珠菌、酵母菌的殺菌效果十分理想，殺滅率均超過99％，可用于成人手、臉、皮膚粘膜的清潔和傷口創(chuàng)面的消毒，保持皮膚滋潤，又能防止細(xì)菌的生長；本發(fā)明對流感病毒、艾滋病病毒及乙肝病毒具有很好的抑制作用。文檔編號A01N37/18GK101491245SQ200910066568公開日2009年7月29日申請日期2009年2月25日優(yōu)先權(quán)日2009年2月25日發(fā)明者杰周,孟慶繁,安金雙,李青山,滕利榮,王貞佐,田曉樂,逯家輝,高朝輝申請人:吉林大學(xué)