專利名稱：：一種喜樹堿植物滅螺劑及其制備和應(yīng)用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種用于消滅釘螺的喜樹堿植物滅螺劑及其制備和應(yīng)用方法。
背景技術(shù)：
：血吸蟲病是嚴重危害人類身體健康的疾病。釘螺是血吸蟲病傳播中不可缺少的環(huán)節(jié)，滅螺能有效地減少血吸蟲病的傳播。目前，滅螺方法大致有三種人工滅螺，化學(xué)藥物滅螺及生物滅螺。人工滅螺費工費時費用高，化學(xué)藥物滅螺價格昂貴，有效期短暫，對人、畜、魚等多有毒害，易造成環(huán)境污染。為了避免化學(xué)藥物滅螺劑對環(huán)境的污染，人們一直想獲得純天然的植物滅螺藥物。現(xiàn)已找到盾葉薯蕷的根莖粉末滅螺劑、麻瘋樹素滅螺劑等植物滅螺藥物。上述植物滅螺藥物大多用植物的粉末或用植物提取的混合物成份滅螺，效果不能進行標準化評價，難以在國際上被認可。喜樹[Ca附/toAecaacw附/watoDecne.]是一種落葉喬木，高達30m，B十互生，花期7-8月；果期11-12月。該植物的葉、樹皮、根皮及果實可治癤腫、瘡癰、牛皮癬，還可試治各種癌癥，急、慢性白血病以及血吸蟲病引起的肝脾腫大等癥。喜樹是我國的一種特產(chǎn)植物。主要分布我國秦嶺以南。多栽培于路旁或庭園。我國血吸蟲病疫區(qū)廣為栽培。資源極為豐富。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)喜樹有效成分對釘螺具有很強的毒殺作用，確認其中的喜樹堿為主要滅螺的活性成分之一。利用植物喜樹堿的這一新用途一直未見報道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是利用植物喜樹堿對釘螺的毒殺作用，提出一種以喜樹堿為原料的植物滅螺劑及其制備工藝和應(yīng)用方法。本發(fā)明使用的喜樹堿是一種從盛花期前的喜樹新鮮葉中，采用粉碎--乙醇浸泡一乙醇回收一有機溶劑氯仿萃取結(jié)晶法提取出來的喜樹堿?；蛘哂檬惺鄣?含量>95%)喜樹堿。喜樹堿為淡黃色結(jié)晶性粉末，mp264-266。C，微有引濕性，見光易變質(zhì)，不溶于水，可溶于乙醇、氯仿，遇濃硫酸即顯黃綠色，加水稀釋則產(chǎn)生綠色熒光。3溶于乙醇中能顯紫藍色熒光。一、喜樹堿植物滅螺劑水溶液的配制稱量喜樹堿結(jié)晶性粉末，用1-1.5倍75%濃度的乙醇溶解，再加入水，配制成0.05-0.lg/L濃度的水溶液。二、喜樹堿植物滅螺顆粒劑的配制1、稱量喜樹堿結(jié)晶性粉末0.1-0，15kg，2、用卜1.5倍75%濃度的乙醇溶解，3、按重量比例為4.5:40.8:4.5的糖粉面粉阿拉伯樹膠的細粉攪拌混合成混合粉，4、將喜樹堿結(jié)晶性粉末乙醇溶液與混合粉按重量比0.2-0.3%進行混合攪拌，再加入3-5%的清水?dāng)嚢杈鶆颍?、然后用改制的壓面機壓制成長為0.8-lcm，徑為0.2-0.4cm的長圓柱狀顆粒，用微波加熱至70-90°C，保溫10-15分鐘，干燥即得喜樹堿含量為0.25-0.30%規(guī)格的喜樹堿顆粒滅螺劑。喜樹堿滅螺劑對釘螺有很強的殺滅作用，濃度為0.05g/L-0.8g/L的水溶液處理時間達35天，其死螺率可達95.5%400%;毒殺作用隨處理液濃度的增加和處理時間的延長而增大，并具有明顯的季節(jié)性差異；夏季毒殺作用最強，春、秋次之，冬季釘螺休眠時毒殺作用?。黄涠練⒆饔脵C理是對釘螺造成釘螺頭、頸、足及肝臟損傷，使肝功能降低；對釘螺酯酶反應(yīng)敏感酶活性變化呈"增強一減弱一消失"的變化規(guī)律。釘螺中毒早期，藥物刺激EST的表達，增強釘螺肝臟的解毒能力，酶活升高；釘螺中毒中后期，由于藥物作用時間或強度超過其生理閾限，酶的合成受到抑制，酶活下降，直至完全消失。本發(fā)明在血吸蟲病疫區(qū)釘螺莩生地域滅螺的應(yīng)用。1)浸殺法適用于能控制水位的淺水區(qū)域，如溝渠、塘堰、稻田等釘螺孳生處，將喜樹堿顆粒滅螺劑撒布于水中浸殺釘螺，濃度控制在O.05g/L*0.8g/L范圍。2)撒播法將喜樹堿顆粒滅螺劑按每公頃100kg量撒布，3天后釘螺死亡率可達到100%。綜上所述，利用喜樹堿顆粒滅螺劑滅螺，具有如下優(yōu)點1、資源豐富喜樹是我國的一種特產(chǎn)植物，主要分布我國秦嶺以南的亞熱帶地區(qū)。多栽培于路旁、江灘或庭園。我國血吸蟲病疫區(qū)廣為栽培。資源極為豐富。資源極為豐富；種子繁殖，生長快，產(chǎn)量高，能規(guī)模栽培，喜樹堿含量較高，干品含量可達0.07%以上，不存在產(chǎn)品開發(fā)原料困難的問題；是我國著名的中草藥，可治癤腫、瘡癰、牛皮癬，還可試治各種癌癥，急、慢性白血病以及血吸蟲病引起的肝脾腫大等癥，經(jīng)濟價值大，還具有觀賞、綠化、保持水土及其他綜合效益。2、生產(chǎn)設(shè)備簡易喜樹堿生產(chǎn)工藝簡便，生產(chǎn)設(shè)備及操作都無特殊要求，生產(chǎn)過程對環(huán)境無污染；適合商品化運作，特別適合各地中小企業(yè)就地利用植物資源進行生產(chǎn)。3、使用方便該產(chǎn)品便于貯存、運輸，根據(jù)實際情景，可撒，也可浸殺，使用極為方便。純植物化學(xué)成份，滅螺效果易于進行標準化評價。4、符合環(huán)保要求該產(chǎn)品滅螺效果持續(xù)穩(wěn)定，對環(huán)境無污染，對人畜和魚類無毒害，符合環(huán)保要求。5、成本低廉該產(chǎn)品綜合成本低于化學(xué)滅螺制劑，經(jīng)濟效益、社會效益、生態(tài)效益明顯。具體實施方式實施例1取盛花期前的喜樹新鮮葉150kg，采用粉碎一乙醇浸泡一乙醇回收--有機溶劑氯仿萃取結(jié)晶法提取出來的喜樹堿O.llkg，經(jīng)配制得喜樹堿顆粒滅螺劑55.5kg。實施例2取盛花期前的喜樹新鮮葉1000kg，采用粉碎--乙醇浸泡--乙醇回收--有機溶劑氯仿萃取結(jié)晶法提取出來的喜樹堿0.7kg，經(jīng)配制得喜樹堿顆粒滅螺劑345.7kg。應(yīng)用實施例參見附件l,對魚類的影響參見附件2。附件l:本發(fā)明滅螺試驗(復(fù)試)的試驗報告實驗采用浸泡法。實驗在溫度控制在23trC條件下進行。取活釘螺IOO只為一組，每20個裝入一個尼龍網(wǎng)袋中，分別將各組(每組5袋)釘螺浸入盛有1000g不同濃度的喜樹堿水溶液的玻璃缸中，另設(shè)氯硝柳胺水溶液和無氯清水對照。于處理l、2、3、4、5d后，將各處理中的釘螺隨機取出l袋，用無氯水沖洗數(shù)次，再放入清水中靜置ld，然后作存活檢査開厴爬行者為活螺，余下的用敲碎和解剖卸剌的方法，鑒別死活。實驗重復(fù)3次，取其平均值作為實驗結(jié)果(見表1-4)。1喜樹總堿滅螺活性表1本發(fā)明的滅螺效果處理處理液濃釘螺死亡率(％)度(g/L)1d2d3d4d5d1.0099.671001001001000.8030%42.50%72.50%訓(xùn)％100喜樹堿0.400.2025%20%32.50%30%67.50%47.50%100%80%1001000.1012,50%27.50%45%77.50%95.330.0512.50%27.50%32.50%65%89.67氯硝柳胺0.000000590.33100100100100清水對照00001.6752顯著性分析顯著性分析分析出不同濃度之間，不同時間之間的方差，自由度,均方，顯著性.用統(tǒng)計軟件statistics分析結(jié)果如表2:表2濃度與時間統(tǒng)計分析結(jié)果方差自由度均方顯著性(ss)(DegnOfFreedom)(MS)(P)濃度2.05303660.3421730.OO纖l時間0.92292430.3076410.000018誤差0.329107180.018284由結(jié)果可知，濃度和時伺的顯著性分別是O.000001和0.000018，為極顯著，說明不同濃度和不同時間之間存在顯著差異。作驗后均值比較3驗后均值檢驗分析結(jié)果由顯著性分析知，濃度與濃度之間存在顯著性差異，作濃度驗后均值檢驗，如表3:_^_濃度驗后均值檢驗___添反{1}(2){3}{4){5){6}{7)(mg/L)_1500.5215840.0027660.0000030.3094580.0344630.01156662K)O0.5215840.0006460.0000130.6995110.1195870.0447613無氯水0.0027660.0006460.0000000.0002710.000019o.oooooe4氯硝柳氨0.0000030.0000130.0000000.0000280.0004180.00133752000.3094580.6995110.0002710.0000280.2301820.09453764000.0344630.1195870.0000190.0004180.2301820.6073937咖.0.-011.5.66■0..044.761化0000060.0013370.0945370.607393同理，時間與時向之間也存在顯著性差異，作時間驗后均值檢驗，如表4:表4_時間驗后均值檢驗_^_時間{1}_^__{4}1240.1834090.0028010.OOOQ032480.1834090.0525620.0000503720.0028010.0525620.謝8354960.0000030.0000500.004835_通過濃度間的驗后均值比較得出，50mg/L的濃度與無氯水，氯硝柳氨，400fflg/L,800rag/L間存在顯著性差異；100mg/L濃度與無氯水，氯硝柳氨，800ing/L濃度間存在顯著性差異；200mg/L濃度與無氯水，氯硝柳氨間存在顯著性差異。通過時間的驗后均值比較得出，處理24h與處理72h，％h之間存在顯著性差異，處理48h與處理％h間存在顯著性差異。用不同濃度的本發(fā)明水溶液處理釘螺，在不同時間的處理下，釘螺死亡率存在差異。其規(guī)律是隨處理濃度的增加，釘螺死亡率呈上升趨勢。O.05g/L*0.8g/L以上的喜樹堿水溶液具有100%的明顯毒殺釘螺致死效果，即使在很低的濃度(0.05g/L-0.10g/L)處理下，亦可達到30%以上的毒死效果；用1.0g/L以上濃度的喜樹堿水溶液處理釘螺2d，就可達到100%的殺滅效果。氯硝柳胺是普遍使用的化學(xué)滅螺劑。將本發(fā)明的滅螺效果與之對照，可知0.S0g/L的本發(fā)明水溶液約與0.0005g/L氯硝柳胺溶液的滅螺效果相當(dāng)。不過本發(fā)明藥效較氯硝柳胺略慢。用0.0005g/L氯硝柳胺溶液處理釘螺2-3d可達100%的死亡率，用0.80g/L的本發(fā)明水溶液處理需要4-5d才能達到同樣的效果。附件2:本發(fā)明魚類毒性試驗1、魚類的急性毒性實驗將魚苗(鯽魚和鯉魚)放入四個濃度(0.05g/L、0.10g/L、0.20g/L、0.40g/L)的本發(fā)明水溶液中，每天觀察魚苗的反應(yīng)，無異常現(xiàn)象發(fā)生，游動也很輕快，72小時后統(tǒng)計魚苗無死亡，再觀察48小時后，仍無異常和死亡現(xiàn)象。2、魚類的慢性毒性實驗將所買兩種魚苗(鯉魚和鯽魚)放入本發(fā)明四個濃度(O.05g/L、0.10g/L、0.20g/L、0.40g/L)和一個清水對照的處理中，30天后分別測量魚的體長、稱魚的體重，進行統(tǒng)計分析。所得數(shù)據(jù)及統(tǒng)計分析見下表表5鯽魚魚苗飼養(yǎng)30天后的體宣-;<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>從以上的方差分析可知，F(xiàn)<F。.。5，F(xiàn)〈F^，對照組和各濃度組飼養(yǎng)魚的體重?zé)o顯著差異，可見本發(fā)明水溶液對鯽魚的體重增長無顯著影響。表7鯽魚魚苗飼養(yǎng)30天后的體長(cm)對照0.05g/L0.10g/L0.20g/L0.40g/L3.413.553.443.403.283-582.993.423.323.342.942.863.263.373.162.912.893.243,183.373.303.123.212.792.753.543.283.342.762.723.253.392.973.052.983.213.553.053.713.173.523.352,853.333.333.603.082.822.992.%，4對照組和處理組鯽魚魚苗體長的方差分析變異源dfSSMSFF\).05Fo.01組間40.30.0751.322.593,79組內(nèi)452.570.057總變異49以上方差分析可知，F(xiàn)<F。.。5，F(xiàn)〈F。,m，處理組和對照組的鯽魚魚苗體長無顯著差異，也就是說四個濃度的本發(fā)明水溶液對鯽魚魚苗的生長也無顯著影響。在上述四個濃度的本發(fā)明水溶液中對鯉魚魚苗的飼養(yǎng)也無顯著影響。通過實驗數(shù)據(jù)和方差分析，結(jié)果表明在對釘螺有較強殺滅效果的不同濃度本發(fā)明中詞養(yǎng)鯽魚和鯉魚一個月后，對鯉魚和鯽魚魚苗的生長發(fā)育均無顯著影響。權(quán)利要求1、一種喜樹堿植物滅螺劑，是利用植物喜樹堿滅螺特性配制的植物化學(xué)成分滅螺劑。2、一種喜樹堿植物滅螺劑水溶液，其特征在于，稱量喜樹堿結(jié)晶性粉末，用1-1.5倍75%濃度的乙醇溶解，再加入水，配制成0.05-0.lg/L濃度的水溶液。3、一種喜樹堿植物滅螺顆粒劑，其特征在于配制步驟為1)、稱量喜樹堿結(jié)晶性粉末0.1-0.15kg，2)、用1-1.5倍75%濃度的乙醇溶解，3)、按重量比例為4.5:40.8:4.5的糖粉面粉阿拉伯樹膠的細粉攪拌混合成混合粉，4)、將喜樹堿結(jié)晶性粉末乙醇溶液與混合粉按重量比0.2-0.3%進行混合攪拌，再加入3-5%的清水?dāng)嚢杈鶆颍?)、然后用改制的壓面機壓制成長為0.8-lcm，徑為0.2-0.4cm的長圓柱狀顆粒，用微波加熱至70-9(TC，保溫10-15分鐘，干燥即得喜樹堿含量為0.25-0.30%規(guī)格的喜樹堿顆粒滅螺劑。全文摘要本發(fā)明提出了一種喜樹堿植物滅螺劑及其制備和應(yīng)用方法。它是用喜樹堿結(jié)晶性粉末配制成0.05-0.1g/L滅螺劑水溶液和喜樹堿含量為0.25-0.30％的滅螺顆粒劑。本發(fā)明為純植物化學(xué)成份，符合環(huán)保要求，滅螺效果易于進行標準化評價，本發(fā)明驅(qū)逐與毒殺釘螺效果很好，制作工藝簡單，成本較低，便于貯存、運輸，對環(huán)境無污染，對人畜和魚類無毒害。經(jīng)濟效益、社會效益、生態(tài)效益明顯。文檔編號A01P9/00GK101518250SQ20091006152公開日2009年9月2日申請日期2009年4月10日優(yōu)先權(quán)日2009年4月10日發(fā)明者楊姍姍,楊明波,王文濤,肖玉杰申請人:湖北大學(xué)