專利名稱：一種提高滇重樓植物體中多種甾體皂苷含量的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種提高植物體中多種甾體皂苷含量的方法，具體地說，涉及一 種利用外源植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑促進(jìn)滇重樓植物體中多種甾體皂苷含量的方法。
背景技術(shù)：
滇重樓是延齡草科重樓屬的多年生草本植物，主要分布于中國(guó)西南部，特別 是云南、四川及貴州等地。滇重樓是名貴的藥用植物，其根狀莖中含有的甾體皂 苷類化合物主要包括偏諾皂苷和薯蕷皂苷，是其主要活性成分，具有抗癌、止血、 消炎、鎮(zhèn)痛、止咳平喘和免疫調(diào)節(jié)等活性。近年來，隨著市場(chǎng)對(duì)其需求量的迅速 增長(zhǎng)，人們?cè)谝巴馑烈獾芈訆Z性采挖、生態(tài)環(huán)境的人為破壞、滇重樓資源分布破 碎化，加之滇重樓本身繁殖率低等因素嚴(yán)重影響了其在原產(chǎn)地的生長(zhǎng)和繁衍，導(dǎo) 致滇重樓己逐步步入瀕危植物行列，重樓的工業(yè)藥用原料出現(xiàn)嚴(yán)重緊缺。從實(shí)施 可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略和保存滇重樓自然資源的角度出發(fā)，對(duì)其進(jìn)行人工栽培是一條必 然之路，因此進(jìn)行滇重樓的人工馴化栽培已迫在眉睫。
滇重樓生長(zhǎng)發(fā)育的物候特點(diǎn)表現(xiàn)在4 6月份根狀莖頂芽出土 (出苗)，隨后 展葉、展花、花粉囊開放(或葉、花、花粉囊同時(shí)展放)，5 7月份生長(zhǎng)停止，9~10 月份果實(shí)開裂，11-12月份地上部分枯萎、倒苗。滇重樓植物的生理特征表現(xiàn)為 光合面積小，一二年生幼苗只有1片葉，4年生有4 6片葉，5年成熟后也只有5 ll枚葉片；葉片光能利用率低，光合能力弱；生長(zhǎng)期短，僅6 7個(gè)月時(shí)間。
由此可以看出，滇重樓每年生物量積累較少，致使從幼苗到根狀莖入藥至少 需要7 10年的時(shí)間，且藥材質(zhì)量有待提高。為改善這一狀況，研究一種簡(jiǎn)單可行 的方法來提高滇重樓中甾體皂苷含量，對(duì)于滇重樓的人工馴化栽培具有重要的作 用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種提高滇重樓植物體中多種 甾體皂苷含量的方法。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案 一種提高滇重樓植物體中多種 甾體皂苷含量的方法，包括以下步驟-
(l)將丁酰肼或2-氯乙基三甲基氯化胺或甲哌嗡溶于水中，配制成濃度為50~500 mg七"的丁酰肼溶液，或濃度為39-2500 mg七"的2-氯乙基三甲基氯化胺 溶液，或濃度為0.125-0.5 mg'g'1的甲哌嗡溶液；
(2)在一個(gè)自然年度的7~8月份對(duì)展葉完全的滇重樓葉片均勻噴施一次丁酰肼 溶液或2-氯乙基三甲基氯化胺溶液或甲哌嗡溶液，直到葉片上的溶液將要滴落時(shí) 停止噴施。
上述步驟(l)中是將丁酰肼或2-氯乙基三甲基氯化胺或甲哌嗡溶于水中，配制 成濃度為500 mg七'1的丁酰肼溶液或濃度為625 mg丄—1的2-氯乙基三甲基氯化胺 溶液，或濃度為0.125 mg，g—1的甲哌嗡溶液。
上述步驟(2)中是于傍晚時(shí)分，對(duì)展葉完全的滇重樓葉片均勻噴施一次丁酰肼 溶液或2-氯乙基三甲基氯化胺溶液或甲哌嗡溶液。
上述步驟(2)中是對(duì)展葉完全的滇重樓葉片的正反兩面均勻噴施一次丁酰肼溶 液或2-氯乙基三甲基氯化胺溶液或甲哌嗡溶液。
上述步驟(2)中是在每年的7~8月份對(duì)展葉完全的滇重樓葉片均勻噴施一次丁 酰肼溶液或2-氯乙基三甲基氯化胺溶液或甲哌嗡溶液，直至其根狀莖可以入藥。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明中采用濃度為500mg七"的丁酰肼溶液，或濃度為625 mg丄"的2-氯乙基三甲基氯化胺溶液，或濃度為0.125 mg.g"的甲哌嗡溶液，在每 年的7~8月份于傍晚時(shí)分，對(duì)展葉完全的滇重樓植株的葉片正反兩面均勻噴施一 次，直至其根狀莖可以入藥，能夠達(dá)到最佳效果。
本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)
1. 丁酰肼、2-氯乙基三甲基氯化胺和甲哌嗡是用途很廣的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，在 適宜濃度下，將它們分別噴施于滇重樓植株上，可以調(diào)節(jié)植株生長(zhǎng)，優(yōu)化株型， 使植株堅(jiān)實(shí)抗倒伏，提高植株根狀莖產(chǎn)量，且能提高葉片的光能利用率，增加滇 重樓中甾體皂苷含量。本發(fā)明中采用上述三種溶液，使滇重樓中甾體皂苷含量分 別提高了 11%、 26%和25%;
2. 所需藥品、儀器設(shè)備簡(jiǎn)單便宜，因此投入少，成本低；
3. 實(shí)施過程簡(jiǎn)單易行，可以顯著提高甾體皂苷含量，對(duì)人畜無毒害，對(duì)環(huán)境無 影響。
具體實(shí)施例方式
下面通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一歩說明，其目的在于幫助更好地理解本 發(fā)明的內(nèi)容，但這些具體實(shí)施例不以任何方式限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。
4實(shí)施例1
將丁酰肼溶于水配制成濃度為50、 500 11^丄'1的溶液，在每年的7 8月份于
傍晚時(shí)分對(duì)展葉完全的滇重樓葉片的正反兩面均勻噴施一次，直到葉片上的丁酰 肼溶液將要滴落時(shí)停止噴施。另取分別與上述噴施量等量的水，采用同樣的方式 對(duì)沒有噴施丁酰肼溶液的滇重樓植株的葉片正反兩面均勻噴施一次，以作為對(duì)照。 如遇下雨，可進(jìn)行補(bǔ)噴。待噴施水和噴施丁酰肼溶液的滇重樓植株倒苗后，用
RP-HPLC方法分別檢測(cè)滇重樓植株中甾體皂苷的含量，與噴施水的滇重樓作對(duì)比， 結(jié)果表明噴施500 mg七"丁酰肼溶液的滇重樓根狀莖偏諾皂苷含量提高了 14%， 噴施50、 500 mg丄'1的丁酰肼溶液的滇重樓根狀莖薯蕷皂苷含量分別提高了 9%、 7%，使總甾體皂苷含量分別提高了 10%、 11%。 實(shí)施例2
按照與實(shí)施例1相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，不同之處在于采用濃度為10、 39、 625、 2500 mg丄"的2-氯乙基三甲基氯化胺溶液進(jìn)行噴施。滇重樓根狀莖偏諾皂苷含量 分別提高了55%、 12%、 47%、 37%,噴施625 mg七'1 2-氯乙基三甲基氯化胺溶液 的滇重樓根狀莖薯蕷皂苷含量提高了 23%，使總甾體皂苷含量提高了 26%。 實(shí)施例3
按照與實(shí)施例1相同的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，不同之處在于采用濃度為0.125、 0.25、 0.5mg'g"的甲哌嗡溶液進(jìn)行噴施。滇重樓根狀莖偏諾皂苷含量分別提高了 80%、 21%、 49%，根狀莖薯蕷皂苷含量分別提高了 18%、 1%、 3%，總甾體皂苷含量分 別提高了 25%、 5%、 8%。
權(quán)利要求
1. 一種提高滇重樓植物體中多種甾體皂苷含量的方法，其特征在于包括以下步驟(1)將丁酰肼或2-氯乙基三甲基氯化胺或甲哌嗡溶于水中，配制成濃度為50～500mg·L-1的丁酰肼溶液，或濃度為39～2500mg·L-1的2-氯乙基三甲基氯化胺溶液，或濃度為0.125～0.5mg·g-1的甲哌嗡溶液；(2)在一個(gè)自然年度的7～8月份對(duì)展葉完全的滇重樓葉片均勻噴施一次丁酰肼溶液或2-氯乙基三甲基氯化胺溶液或甲哌嗡溶液，直到葉片上的溶液將要滴落時(shí)停止噴施。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高滇重樓植物體中多種甾體皂苷含量的方法，其特征 在于步驟(l)中是將丁酰肼或2-氯乙基三甲基氯化胺或甲哌嗡溶于水中，配制 成濃度為500 mg七-1的丁酰肼溶液，或濃度為625 mg.L/1的2-氯乙基三甲基氯 化胺溶液，或濃度為0.125 mg'g"的甲哌嗡溶液。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的提高滇重樓植物體中多種甾體皂苷含量的方法，其 特征在于步驟(2)中是于傍晚時(shí)分，對(duì)展葉完全的滇重樓葉片均勻噴施一次丁 酰肼溶液或2-氯乙基三甲基氯化胺溶液或甲哌嗡溶液。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1~3中任一項(xiàng)所述的提高滇重樓植物體中多種甾體皂苷含量的 方法，其特征在于步驟(2)中是對(duì)展葉完全的滇重樓葉片的正反兩面均勻噴施 一次丁酰肼溶液或2-氯乙基三甲基氯化胺溶液或甲哌嗡溶液。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1~4中任一項(xiàng)所述的提高滇重樓植物體中多種甾體皂苷含量的 方法，其特征在于步驟(2)中是在每年的7 8月份對(duì)展葉完全的滇重樓葉片均 勻噴施一次丁酰肼溶液或2-氯乙基三甲基氯化胺溶液或甲哌嗡溶液，直至其根 狀莖可以入藥。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種提高滇重樓植物體中多種甾體皂苷含量的方法，包括以下步驟將丁酰肼或2-氯乙基三甲基氯化胺或甲哌嗡溶于水中，配制成濃度為50～500mg·L^-1的丁酰肼溶液，或濃度為39～2500mg·L^-1的2-氯乙基三甲基氯化胺溶液，或濃度為0.125～0.5mg·g^-1的甲哌嗡溶液；在一個(gè)自然年度的7～8月份對(duì)展葉完全的滇重樓葉片均勻噴施一次丁酰肼溶液或2-氯乙基三甲基氯化胺溶液或甲哌嗡溶液，直到葉片上的溶液將要滴落時(shí)停止噴施。可在每年的7～8月份噴施一次，直至根狀莖可以入藥。采用本發(fā)明方法使滇重樓甾體皂苷含量分別提高了11％、26％和25％，且所需藥品、儀器設(shè)備簡(jiǎn)單便宜，因此投入少，成本低。此外，實(shí)施過程簡(jiǎn)單易行，對(duì)人畜無毒害，對(duì)環(huán)境無影響。
文檔編號(hào)A01N43/34GK101518185SQ20091006142
公開日2009年9月2日 申請(qǐng)日期2009年4月3日 優(yōu)先權(quán)日2009年4月3日
發(fā)明者坤 余, 李家儒, 韋建榮, 青 馬 申請(qǐng)人:武漢大學(xué);云南白藥集團(tuán)股份有限公司