專利名稱：一種提高滇重樓根狀莖中多種甾體皂苷含量的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種提高植物體地下根狀莖部分中多種甾體皂苷含量的方法，具 體的說(shuō)，涉及一種利用二氫茉莉酮酸甲酯促進(jìn)滇重樓根狀莖中多種甾體皂苷含量 的方法。
背景技術(shù)：
滇重樓是延齡草科重樓屬的多年生草本植物，主要分布于中國(guó)西南部，特別 是云南、四川及貴州等地。滇重樓是名貴的藥用植物，其根狀莖中含有的甾體皂 苷類化合物主要包括偏諾皂苷和薯蕷皂苷，是其主要活性成分，具有抗癌、止血、 消炎、鎮(zhèn)痛、止咳平喘和免疫調(diào)節(jié)等活性。滇重樓生長(zhǎng)發(fā)育的物候特點(diǎn)表現(xiàn)在 4 6月份根狀莖頂芽出土 (出苗)，隨后展葉、展花、花粉囊開(kāi)放(或葉、花、花 粉囊同時(shí)展放)，5 7月份生長(zhǎng)停止，9 10月份果實(shí)開(kāi)裂，11 12月份地上部分枯 萎、倒苗。滇重樓植物的生理特征表現(xiàn)為光合面積小，一二年生幼苗只有1片 葉，4年生有4 6片葉，5年成熟后也只有5 11枚葉片；葉片光能利用率低，光 合能力弱；生長(zhǎng)期短，僅6 7個(gè)月時(shí)間。
由此可以看出，滇重樓每年生物量積累較少，致使從幼苗到根狀莖入藥至少 需要7 10年的時(shí)間。近年來(lái)，隨著市場(chǎng)對(duì)其需求量的迅速增長(zhǎng)，人們?cè)谝巴馑烈?地掠奪性采挖、生態(tài)環(huán)境的人為破壞、滇重樓資源分布破碎化，加之滇重樓本身 繁殖率低等因素嚴(yán)重影響了其在原產(chǎn)地的生長(zhǎng)和繁衍，導(dǎo)致滇重樓已逐步步入瀕 危植物行列，重樓的工業(yè)藥用原料出現(xiàn)嚴(yán)重緊缺。從實(shí)施可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略和保存 滇重樓自然資源的角度出發(fā)，對(duì)其進(jìn)行人工栽培是一條必然之路，因此進(jìn)行滇重 樓的人工馴化栽培已迫在眉睫。
二氫茉莉酮酸甲酯是茉莉酸類衍生物。近期發(fā)現(xiàn)茉莉酸類物質(zhì)在植物細(xì)胞的 多種逆境反應(yīng)中起信號(hào)介導(dǎo)的作用，引起細(xì)胞抗逆反應(yīng)產(chǎn)物的表達(dá)，對(duì)多種次生 代謝產(chǎn)物的合成具有誘導(dǎo)作用，被認(rèn)為是非常有效的誘導(dǎo)子。
目前尚未出現(xiàn)利用二氫茉莉酮酸甲酯來(lái)提高滇重樓根狀莖部分中甾體皂苷含 量的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種提高滇重樓根狀莖中多種甾體皂苷含量的方法。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案 一種提高滇重樓根狀莖中多種 甾體皂苷含量的方法，包括以下步驟
(1) 用質(zhì)量百分比濃度》75%的酒精將二氫茉莉酮酸甲酯溶解，然后加水稀釋 配成濃度為30~60mg/L的二氫茉莉酮酸甲酯溶液；
(2) 在一個(gè)自然年度的7~8月份對(duì)展葉完全的滇重樓葉片均勻噴施一次二氫茉
莉酮酸甲酯溶液，直到葉片上的二氫茉莉酮酸甲酯溶液將要滴落時(shí)停止噴施。
上述步驟(1)中是用質(zhì)量百分比濃度》75%的酒精將二氫茉莉酮酸甲酯溶解， 然后加水稀釋配成濃度為45mg/L的二氫茉莉酮酸甲酯溶液。
上述步驟(2)中是于傍晚時(shí)分，對(duì)展葉完全的滇重樓葉片均勻噴施一次二氫茉 莉酮酸甲酯溶液。
上述步驟(2)中是對(duì)展葉完全的滇重樓葉片的正反兩面均勻噴施一次二氫茉莉 酮酸甲酯溶液。
上述步驟(2)中是在每年的7~8月份對(duì)展葉完全的滇重樓葉片均勻噴施一次二 氫茉莉酮酸甲酯溶液，直至其根狀莖可以入藥。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明中在每年的7~8月份于傍晚時(shí)分，對(duì)展葉完全的滇重 樓植株的葉片正反兩面均勻噴施一次濃度為45mg/L的二氫茉莉酮酸甲酯溶液，直 至其根狀莖可以入藥，能夠達(dá)到最佳效果。
本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)-
(1) 所需藥品、儀器設(shè)備簡(jiǎn)單便宜，因此投入少，成本低。
(2) 實(shí)施過(guò)程簡(jiǎn)單易行，使當(dāng)年生和往年生根狀莖中總的皂苷含量分別提高了 15%和38%，對(duì)人畜無(wú)毒害，對(duì)環(huán)境無(wú)影響。該方法對(duì)于提高滇重樓大田種植的 產(chǎn)量和質(zhì)量具有重要的意義。
具體實(shí)施例方式
下面通過(guò)具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。 實(shí)施例1
用質(zhì)量百分比濃度》75%的酒精將二氫茉莉酮酸甲酯溶解，酒精用量使二氫 茉莉酮酸甲酯能完全溶解即可，再加水稀釋配成濃度為30mg/L的二氫茉莉酮酸甲 酯溶液，在每年的7~8月份于傍晚時(shí)分，對(duì)滇重樓葉片正反兩面均勻噴施二氫茉 莉酮酸甲酯溶液，另取與上述噴施量等量的水，對(duì)未噴施二氫茉莉酮酸甲酯溶液的滇重樓植株上的葉片正反兩面進(jìn)行均勻噴施，以作為對(duì)照。每年噴施一次，直 到其根狀莖可以入藥。如遇下雨，可進(jìn)行補(bǔ)噴。待滇重樓倒苗后，用RP-HPLC方 法檢測(cè)根狀莖中甾體皂苷含量。計(jì)算得出其當(dāng)年生和往年生根狀莖中總的皂苷含 量增長(zhǎng)率分別為10%和26%。 實(shí)施例2
采用與實(shí)施例1相似的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，不同之處在于采用濃度為45mg/L的二 氫茉莉酮酸甲酯溶液進(jìn)行噴施。計(jì)算得出其當(dāng)年生和往年生根狀莖中總的皂苷含 量增長(zhǎng)率分別為15%和38%。 實(shí)施例3
采用與實(shí)施例1相似的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，不同之處在于采用濃度為60mg/L的二 氫茉莉酮酸甲酯溶液進(jìn)行噴施。計(jì)算得出其當(dāng)年生和往年生根狀莖中總的皂苷含 量增長(zhǎng)率分別為10%和11%。
本發(fā)明方法效果顯著，為增加滇重樓根狀莖中甾體皂苷含量、改善根狀莖質(zhì) 量提供了一條簡(jiǎn)單可行的途徑。
權(quán)利要求
1. 一種提高滇重樓根狀莖中多種甾體皂苷含量的方法，其特征在于包括以下步驟(1)用質(zhì)量百分比濃度≥75％的酒精將二氫茉莉酮酸甲酯溶解，然后加水稀釋配成濃度為30～60mg/L的二氫茉莉酮酸甲酯溶液；(2)在一個(gè)自然年度的7～8月份對(duì)展葉完全的滇重樓葉片均勻噴施一次二氫茉莉酮酸甲酯溶液，直到葉片上的二氫茉莉酮酸甲酯溶液將要滴落時(shí)停止噴施。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高滇重樓根狀莖中多種甾體皂苷含量的方法，其特征 在于步驟(1)中是用質(zhì)量百分比濃度》75%的酒精將二氫茉莉酮酸甲酯溶解， 然后加水稀釋配成濃度為45mg/L的二氫茉莉酮酸甲酯溶液。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的提高滇重樓根狀莖中多種甾體皂苷含量的方法，其 特征在于步驟(2)中是于傍晚時(shí)分，對(duì)展葉完全的滇重樓葉片均勻噴施一次二 氫茉莉酮酸甲酯溶液。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1~3中任一項(xiàng)所述的提高滇重樓根狀莖中多種甾體皂苷含量的 方法，其特征在于步驟(2)中是對(duì)展葉完全的滇重樓葉片的正反兩面均勻噴施 一次二氫茉莉酮酸甲酯溶液。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1~4中任一項(xiàng)所述的提高滇重樓根狀莖中多種甾體皂苷含量的 方法，其特征在于步驟(2)中是在每年的7~8月份對(duì)展葉完全的滇重樓葉片 均勻噴施一次二氫茉莉酮酸甲酯溶液，直至其根狀莖可以入藥。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種提高滇重樓根狀莖中多種甾體皂苷含量的方法，采用以下步驟用質(zhì)量百分比濃度≥75％的酒精將二氫茉莉酮酸甲酯溶解，然后加水稀釋配成濃度為30～60mg/L的二氫茉莉酮酸甲酯溶液；在一個(gè)自然年度的7～8月份對(duì)展葉完全的滇重樓葉片均勻噴施一次二氫茉莉酮酸甲酯溶液，直到葉片上的二氫茉莉酮酸甲酯溶液將要滴落時(shí)停止噴施?？稍诿磕甑?～8月份噴施一次，直至滇重樓的根狀莖可以入藥。本發(fā)明方法所需藥品、儀器設(shè)備簡(jiǎn)單便宜，因此投入少，成本低。實(shí)施過(guò)程簡(jiǎn)單易行，能顯著增加皂苷含量，且本方法對(duì)人畜無(wú)毒害，對(duì)環(huán)境無(wú)污染，具有廣闊的應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)A01G1/00GK101518184SQ20091006141
公開(kāi)日2009年9月2日 申請(qǐng)日期2009年4月3日 優(yōu)先權(quán)日2009年4月3日
發(fā)明者李家儒, 樊啟龍, 艷 王, 王倩男, 青 馬 申請(qǐng)人:武漢大學(xué);云南白藥集團(tuán)股份有限公司