專利名稱：楊扇舟蛾顆粒體病毒殺蟲懸浮劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物殺蟲劑技術(shù)領(lǐng)域，更具體涉及一種楊扇舟蛾病毒殺蟲劑，適用于生物防治。
背景技術(shù)：
楊扇舟蛾是我國楊樹上的重要害蟲，主要危害楊樹葉片，給林農(nóng)造成了巨大的經(jīng)濟損失。楊扇舟蛾在我國均有分布，世代重疊，混代繁殖，食葉量大。今年來，隨著全球氣候變暖和其他因素的影響，楊扇舟蛾的發(fā)生和危害成逐年加重的趨勢。2005年楊扇舟蛾在河南、湖北、湖南等省多處爆發(fā)，使大片楊樹林危害及其嚴(yán)重，大大限制了我國的楊樹種植業(yè)的發(fā)展。目前的楊扇舟蛾的防治主要靠化學(xué)農(nóng)藥，但楊扇舟蛾繁殖速度快，每年發(fā)生多代，化學(xué)農(nóng)藥也需頻繁使用，這就使楊扇舟蛾對多種化學(xué)農(nóng)藥產(chǎn)生了嚴(yán)重抗性。另外，由于災(zāi)情發(fā)生嚴(yán)重的林木多為行道樹和防護(hù)林，也是人、畜活動頻繁的地區(qū)，大量使用化學(xué)農(nóng)藥勢必造成對環(huán)境的污染以及對人體健康和畜禽的危害，因此，減少和限制化學(xué)殺蟲劑的使用勢在必行。
目前主要使用棉鈴蟲核多角體病毒、甜菜夜蛾核多角體病毒等桿狀病毒殺蟲劑，由于其對宿主害蟲殺蟲效果好，對人畜及其它高等動物無害，不污染環(huán)境，不傷害天敵，是防治目標(biāo)害蟲的主要生物制劑之一。與化學(xué)農(nóng)藥相比，雖然桿狀病毒具有安全性等方面的優(yōu)點，然而，桿狀病毒殺蟲劑存在一個主要的缺陷殺蟲速度慢。在田間施用野生型病毒殺蟲劑，該殺蟲劑利用從野外分離的沒有經(jīng)過人工改造的病毒毒株，施用后3～7天才看到明顯殺蟲效果，桿狀病毒的這一缺陷極大地限制了昆蟲病毒殺蟲劑的進(jìn)一步推廣和應(yīng)用。為了克服桿狀病毒殺蟲劑的這一缺點，人們采用了許多方法進(jìn)行了改良，其中研究較多的主要有兩種方法。一種是構(gòu)建重組桿狀病毒，用基因工程方法在桿狀病毒基因組中加入昆蟲特異性的毒素基因或酶基因，這些基因在病毒感染后表達(dá)出活性蛋白質(zhì)，然后作用于靶器官，從而提高桿狀病毒殺蟲速度。但這種方法花費代價高，結(jié)果不穩(wěn)定，同時由于桿狀病毒的生產(chǎn)目前只能靠宿主昆蟲活體增殖，重組病毒殺蟲速度快主要是毒素基因表達(dá)的作用，而不是病毒快速增殖的作用。在病毒生產(chǎn)中，重組病毒難以獲得大量的子代病毒，在現(xiàn)有的條件下，重組病毒難以進(jìn)行工廠化生產(chǎn)。提高桿狀病毒殺蟲速度的另一種方法是在病毒殺蟲劑中添加增效劑?，F(xiàn)有的病毒殺蟲劑大都以化學(xué)農(nóng)藥作為它的增效劑，這就失去了生物殺蟲劑的特性。熒光增白劑對桿狀病毒也有一定的增效作用，但需要超過1％的濃度才有明顯的增效作用，因為病毒殺蟲劑在實際噴灑時稀釋500-800倍，要使熒光增白劑達(dá)到這個濃度無法在劑型中配制。今年來，一些具有生物活性的增效劑已在桿狀病毒殺蟲劑中使用，例如大量生產(chǎn)幾丁質(zhì)酶的沙雷氏桿菌，它能有效地提高HaSNPV的毒力20％～70％，LT50(半致死時間)、LT90(90％供試蟲致死時間)比對照組縮短天數(shù)最高可達(dá)1.1天、1.3天，但病毒致死時間還需進(jìn)一步提高。桿狀病毒作為殺蟲劑的另一個缺陷是病毒對紫外光有一定的敏感性，長期在陽光下暴曬容易喪失活性。為了彌補這一缺陷，需要在病毒殺蟲劑中添加光保護(hù)劑。目前病毒殺蟲劑中添加的光保護(hù)劑主要是活性炭等染料，光保護(hù)效果不是十分理想。
目前，桿狀病毒殺蟲劑的劑型研究和應(yīng)用明顯落后于其它農(nóng)藥的劑型，病毒殺蟲劑現(xiàn)仍以可濕性粉劑為主，另有少量的乳劑，這些劑型使用不方便，助劑分配不均勻。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種殺蟲速度快、對人畜無害、效果好的楊扇舟蛾顆粒體病毒殺蟲懸浮劑。
為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案一種楊扇舟蛾顆粒體病毒殺蟲懸浮劑，楊扇舟蛾顆粒體病毒的濃度為5-20億PIB/ml，其他成分由以下重量百分比的原料制成甘油2-5％芳香族氨基酸0.1-0.2％滅幼脲類似物氟啶脲 0.01-0.1％特制熒光增白劑 0.2-0.5％
分散劑1-2％水92.2-96.69％楊扇舟蛾顆粒體病毒殺蟲懸浮劑，優(yōu)選楊扇舟蛾顆粒體病毒濃度為8億PIB/ml，其他成分由以下重量比的原料制成甘油 5％芳香族氨基酸 0.1％滅幼脲類似物氟啶脲0.045％熒光增白劑0.5％分散劑2％水92.355％芳香族氨基酸為芳香族絡(luò)氨酸或芳香族色氨酸，分散劑為十二烷基二甲基芐基氯化銨。
制備楊扇舟蛾顆粒體病毒殺蟲懸浮劑的方法，選用如下重量百分比的原料楊扇舟蛾顆粒體病毒，其配制完成的最終濃度為5-20億PIB/ml，甘油2-5％，芳香族氨基酸0.1-0.2％，滅幼脲類似物氟啶脲0.01-0.1％，熒光增白劑0.2-0.5％，分散劑1-2％，水92-97％，制備步驟如下依次在楊扇舟蛾顆粒體病毒中加入甘油、芳香族氨基酸、滅幼脲類似物氟啶脲、熒光增白劑、分散劑、水，混勻即可得到懸浮劑。
制備楊扇舟蛾顆粒體病毒殺蟲懸浮劑的方法，選用如下重量百分比的原料楊扇舟蛾顆粒體病毒，其配制的最終濃度為8億PIB/ml，甘油5％，芳香族氨基酸0.1％，滅幼脲類似物氟啶脲0.045％，熒光增白劑0.5％，分散劑2％，水92.355％，制備步驟如下依次在楊扇舟蛾顆粒體病毒中加入甘油、芳香族氨基酸、滅幼脲類似物氟啶脲、熒光增白劑、分散劑、水，混勻即可得到懸浮劑。
楊扇舟蛾顆粒體病毒的濃度為配制完成的最終單位體積含量，含量通過光學(xué)顯微鏡來計數(shù)。
該殺蟲劑主要成分為楊扇舟蛾顆粒體病毒，楊扇舟蛾顆粒體病毒屬桿狀病毒科病毒，是世界糧農(nóng)組織推薦的可以用于生物防治的安全生物之一。在電鏡下觀察，病毒顆粒體形態(tài)為卵圓形，其平均大小為337nm×170nm，病毒粒子呈桿狀，兩端鈍圓，大小為250nm×46nm，病毒粒子為單核衣殼包埋型。楊扇舟蛾顆粒體病毒對3齡以上目標(biāo)幼蟲致病力很高，當(dāng)楊扇舟蛾連續(xù)大面積發(fā)生、蟲口密度大時，自然感染率可高達(dá)40％～60％，是控制揚扇舟蛾大發(fā)生的重要因素，具有很好的應(yīng)用價值。本發(fā)明的楊扇舟蛾顆粒體病毒采用病毒株從中國科學(xué)院武漢病毒研究所普通病毒保藏中心得到，編號為IVCAS1.0031。
滅幼脲類似物氟啶脲具有昆蟲特異性生物活性，氟啶脲主要通過抑制幾丁質(zhì)的合成，阻礙昆蟲正常脫皮，使卵的孵化、幼蟲蛻皮及腎的發(fā)育畸型，成蟲羽化受影響起到增效殺蟲的作用。
芳香族氨基酸含芳香環(huán)，可以吸收紫外光起到保護(hù)作用，作為病毒光保護(hù)劑。
熒光增白劑的作用是與昆蟲圍食膜幾丁質(zhì)結(jié)合，破壞昆蟲防御系統(tǒng)，作為增效劑，提高桿狀病毒殺蟲速度。
分散劑為十二烷基二甲基芐基氯化銨。
甘油具有光保護(hù)作用。
本發(fā)明既保持了病毒殺蟲劑的生物殺蟲劑特性，對人畜和高等動物無害，適于在林業(yè)上大量施用，又大大加快病毒殺蟲速度，使病毒殺蟲劑的殺蟲時間縮短到3-4天。病毒殺蟲懸浮劑克服了可濕性粉劑和乳油劑的缺陷，分散劑、光保護(hù)劑、增效劑作為助劑易于分散，田間施用更方便，沒有殘留和環(huán)境污染。利用滅幼脲類似物氟啶脲和熒光增白劑作為病毒的增效劑，不僅可以使病毒的LT50(半致死時間)縮短到2天左右，而且可以使楊扇舟蛾5齡幼蟲病毒致死率達(dá)到63％。這在實際應(yīng)用中具有明顯的優(yōu)勢。
實驗方法與步驟實驗分兩組，每組供試幼蟲24頭。A組用本發(fā)明制劑處理楊扇舟蛾5齡幼蟲，B組只用楊扇舟蛾顆粒體病毒處理5齡幼蟲，每天統(tǒng)計最終幼蟲死亡率，結(jié)果表明，對于5齡幼蟲來說，B組只有在感染的第四天，第六天和第七天里，分別有1頭蟲子死亡，剩余的21頭全部化蛹；A組的9頭幼蟲在第五天化蛹外，其余的15頭在感染的第四～十天里陸續(xù)死亡(具體死亡數(shù)分別為1、5、2、1、2、2和2頭)。從這個結(jié)果看出，A組幼蟲的死亡率大大提高，達(dá)到了63％，而B組幼蟲死亡率較低，只有12.5％。
具體實施例方式
實施例1，楊扇舟蛾顆粒體病毒殺蟲懸浮劑，楊扇舟蛾顆粒體病毒的濃度為10億PIB/ml，其他成分由以下重量百分比的原料制成甘油 2％芳香族氨基酸色氨酸0.1％滅幼脲類似物氟啶脲0.025％熒光增白劑0.2％分散劑2％滅菌水95.675％楊扇舟蛾顆粒體病毒殺蟲懸浮劑的制備步驟在楊扇舟蛾顆粒體病毒中依次加入甘油、芳香族氨基酸、滅幼脲類似物氟啶脲、熒光增白劑、分散劑、滅菌水，攪拌均勻，即可得到懸浮劑。懸浮劑中楊扇舟蛾顆粒體病毒最終含量為10億PIB/ml，病毒含量使用光學(xué)顯微鏡來計數(shù)。
實施例2，楊扇舟蛾顆粒體病毒殺蟲懸浮劑，楊扇舟蛾顆粒體病毒的濃度為5億PIB/ml，其他成分由以下重量百分比的原料制成甘油 5％芳香族氨基酸酪氨酸0.2％滅幼脲類似物氟啶脲0.045％熒光增白劑0.5％分散劑1％水93.255％配制方法與實施例1相同，懸浮劑中楊扇舟蛾顆粒體病毒最終含量為5億PIB/ml，病毒含量使用光學(xué)顯微鏡來計數(shù)。
實施例3，一種楊扇舟蛾顆粒體病毒殺蟲懸浮劑，楊扇舟蛾顆粒體病毒的濃度為8億PIB/ml，其他成分由以下重量百分比的原料制成
甘油 3％芳香族氨基酸色氨酸 0.15％滅幼脲類似物氟啶脲 0.01％熒光增白劑 0.3％分散劑 1.5％水 95.04％配制方法與實施例1相同，懸浮劑中楊扇舟蛾顆粒體病毒最終含量為8億PIB/ml，病毒含量使用光學(xué)顯微鏡來計數(shù)。
實施例4，一種楊扇舟蛾顆粒體病毒殺蟲懸浮劑，楊扇舟蛾顆粒體病毒的濃度為20億PIB/ml，其他成分由以下重量百分比的原料制成甘油 4％芳香族氨基酸酪氨酸0.1％滅幼脲類似物氟啶脲0.1％熒光增白劑0.2％分散劑1％滅菌水94.6％配制方法與實施例1相同，懸浮劑中楊扇舟蛾顆粒體病毒最終含量為20億PIB/ml，病毒含量使用光學(xué)顯微鏡來計數(shù)。
權(quán)利要求
1.一種楊扇舟蛾顆粒體病毒殺蟲懸浮劑，其特征在于，楊扇舟蛾顆粒體病毒的濃度為5-20億PIB/ml，其他成分由以下重量百分比的原料組成甘油2-5％芳香族氨基酸0.1-0.2％滅幼脲類似物氟啶脲 0.01-0.1％熒光增白劑 0.2-0.5％分散劑 1-2％水 92.2-96.69％
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的楊扇舟蛾顆粒體病毒殺蟲懸浮劑，其特征在于，楊扇舟蛾顆粒體病毒的濃度為8億PIB/ml，其他成分由以下重量百分比的原料組成甘油5％芳香族氨基酸0.1％滅幼脲類似物氟啶脲 0.045％熒光增白劑 0.5％分散劑 2％水 92.355％
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的楊扇舟蛾顆粒體病毒殺蟲懸浮劑，其特征在于，芳香族氨基酸為芳香族絡(luò)氨酸或芳香族色氨酸，分散劑為十二烷基二甲基芐基氯化銨。
4.制備楊扇舟蛾顆粒體病毒殺蟲懸浮劑的方法，其特征在于，選用如下重量百分比的原料楊扇舟蛾顆粒體病毒，其制備完成的最終濃度為5-20億PIB/ml，甘油2-5％，芳香族氨基酸0.1-0.2％，滅幼脲類似物氟啶脲0.01-0.1％，熒光增白劑0.2-0.5％，分散劑1-2％，水92.2-96.69％，制備步驟如下依次在楊扇舟蛾顆粒體病毒中加入甘油、芳香族氨基酸、滅幼脲類似物氟啶脲、熒光增白劑、分散劑、水，混勻即得到懸浮劑。
5.如權(quán)利要求4所述的制備楊扇舟蛾顆粒體病毒殺蟲懸浮劑的方法，其特征在于，選用如下重量百分比的原料楊扇舟蛾顆粒體病毒，其制備完成的最終濃度為8億PIB/ml，甘油5％，芳香族氨基酸0.1％，滅幼脲類似物氟啶脲0.045％，熒光增白劑0.5％，分散劑2％，水92.355％，制備步驟如下依次在楊扇舟蛾顆粒體病毒中加入甘油、芳香族氨基酸、滅幼脲類似物氟啶脲、熒光增白劑、分散劑、水，混勻即得到懸浮劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種楊扇舟蛾顆粒體病毒殺蟲懸浮劑，屬于生物殺蟲劑技術(shù)領(lǐng)域。該劑型的主要成分是楊扇舟蛾顆粒體病毒，懸浮劑中病毒包涵體含量5－20億PIB/ml，其他成分由滅幼脲類似物氟啶脲、芳香族氨基酸酪氨酸、熒光增白劑、分散劑、甘油、水組成。本發(fā)明對人畜及其它高等動物無害，無環(huán)境污染，無農(nóng)藥殘留，能有效控制楊扇舟蛾的發(fā)生和危害，適于在林業(yè)上大量施用，又大大加快病毒殺蟲速度，使病毒殺蟲劑的殺蟲時間縮短到3－4天。
文檔編號A01P1/00GK101091493SQ20061001798
公開日2007年12月26日 申請日期2006年6月20日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月20日
發(fā)明者張小霞, 梁振普, 高巨虎 申請人:河南農(nóng)業(yè)大學(xué)