專利名稱：一種印楝組織培養(yǎng)的快速繁殖方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于植物栽培的技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種植物組織的培養(yǎng)方法。
印楝(Azadirachta indica A.juss)屬楝科(Meliaceae)，常綠喬木(在個別地區(qū)為落葉)。其生長迅速，根系發(fā)達(dá)，枝葉茂密，喜溫耐旱，是干熱地區(qū)重要的造林和四旁綠化的優(yōu)良樹種。為了防止干熱地區(qū)荒漠化的產(chǎn)生與蔓延，印楝被廣泛種植于亞洲、非洲等干熱地區(qū)，成效顯著。印楝已被聯(lián)合國糧農(nóng)組織、國際林聯(lián)、亞太經(jīng)濟(jì)和社會發(fā)展會等推薦為非洲、南亞和東南壓的優(yōu)先發(fā)展樹種。印楝不僅是一種生態(tài)樹種，而且還是一種高經(jīng)濟(jì)價值樹種。在印度，傳統(tǒng)上作為藥用植物栽培，廣泛用于治療皮炎、牙周炎、疥癬、濕癥、結(jié)核等疾病，并有強(qiáng)心、利尿、驅(qū)蟲、避孕等功效。新近的研究表明，印楝的果實(shí)、枝、葉和樹皮中均含有以印楝素為主的多種殺蟲活性物質(zhì)，在市場上已開發(fā)出多種無公害的印楝生物農(nóng)藥，可殺滅8目200余種農(nóng)林、倉儲和衛(wèi)生害蟲，并且對人畜無害，不會形成殘留和對環(huán)境造成污染。因此，在防治干熱地區(qū)土壤沙化及制備無公害生物農(nóng)藥方面，具有其他樹種無法比擬的重要作用，被世界公認(rèn)為是“可解決全球性問題的樹”。近年來，我國對印楝的種植有了一定的發(fā)展，但還沒有形成規(guī)模，如果依靠傳統(tǒng)的種子種植方法提供種苗，需要很長的時間周期，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足市場的需要。因此，因地制宜地探索印楝栽培方法，是一個急待解決的課題。
本發(fā)明的目的是提供一種印楝組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，以達(dá)到室內(nèi)大規(guī)模繁殖種苗，為規(guī)?；l(fā)展印楝及時提供大批量優(yōu)質(zhì)種苗。
本發(fā)明所述的印楝的組織培養(yǎng)分以下不同階段實(shí)施1、選擇外植體以印楝幼嫩枝條、葉片為外植體，切成長度為0.8～1.2厘米的小段，用升汞水消毒。
2、印楝愈傷組織的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS固體培養(yǎng)基(MS培養(yǎng)基的制備方法，詳見李浚明。植物組織培養(yǎng)教程。北京農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，1992,40～43)，
6-芐基腺嘌呤(BA)的濃度為0.1～0.5毫克/立升，萘乙酸(NAA)的濃度為0.1～2.0毫克/立升，經(jīng)15～25天的培養(yǎng)便可誘導(dǎo)愈傷組織的產(chǎn)生。
3、愈傷組織的生長培養(yǎng)基MS固體培養(yǎng)基，BA濃度0.4～0.7毫克/立升，NAA濃度0.8～1.2毫克/立升，經(jīng)過20～30天的培養(yǎng)。
4、不定芽分化和植株再生培養(yǎng)基MS固體培養(yǎng)基，BA濃度0.4～0.6毫克/立升，NAA濃度0.01毫克/立升，經(jīng)過15～30天的培養(yǎng)。
5、印楝組織培苗處理直接用0.5毫克/立升的NAA預(yù)處理2天，移入無激素MS培養(yǎng)基培養(yǎng)15～25天，發(fā)育為完整的植株，生根率可達(dá)70％～80％，小苗移栽成活率可達(dá)100％。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下突出優(yōu)點(diǎn)1、植物組織培養(yǎng)技術(shù)是林業(yè)生產(chǎn)上快速無性繁殖優(yōu)良苗木，獲取無病毒植株的生物技術(shù)。本發(fā)明提供的印楝組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，可以不受季節(jié)的影響，大幅度提高植物繁殖系數(shù)，在短時間內(nèi)獲得大量優(yōu)質(zhì)印楝種苗。
2、能有效脫去印楝生長過程中感染的病毒、真菌和細(xì)菌等病害，恢復(fù)和保持品種的優(yōu)良種性，提高印楝樹的產(chǎn)量和品質(zhì)。
3、為規(guī)?；l(fā)展印楝提供大批量優(yōu)質(zhì)種苗，為退耕還林、綠化荒田荒土奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。該技術(shù)方案的實(shí)施推廣，對云南省生態(tài)建設(shè)選育速生經(jīng)濟(jì)樹種，加快建設(shè)綠色經(jīng)濟(jì)強(qiáng)省的步伐，對山區(qū)人民的脫貧致富具有良好的經(jīng)濟(jì)效益、社會效益和生態(tài)效益。
實(shí)施例1以印楝葉片為外植體，切成長度為0.8厘米的小段，用升汞水消毒。采用MS培養(yǎng)基，BA濃度為0.1毫克/立升，NAA的濃度為0.1毫克/立升，經(jīng)25天的培養(yǎng)便可誘導(dǎo)愈傷組織的產(chǎn)生。愈傷組織的生長采用MS固體培養(yǎng)基，BA濃度為0.4毫克/立升，NAA濃度為0.8毫克/立升，經(jīng)過30天的培養(yǎng)。不定芽分化和植株再生培養(yǎng)基MS固體培養(yǎng)基，BA濃度為0.4毫克/立升，NAA濃度為0.01毫克/立升，經(jīng)過30天的培養(yǎng)。印楝組織培苗處理直接用0.5毫克/立升的NAA預(yù)處理2天，移入無激素MS培養(yǎng)基培養(yǎng)25天發(fā)育為完整的植株，生根率可達(dá)70％，小苗移栽成活率可達(dá)100％。
實(shí)施例2以印楝的枝條為外植體，切成長度為1厘米的小段，用升汞水消毒。采用MS培養(yǎng)基，BA濃度為0.5毫克/立升，NAA濃度為0.1～2.0毫克/立升，經(jīng)15天的培養(yǎng)便可誘導(dǎo)愈傷組織的產(chǎn)生。愈傷組織的生長培養(yǎng)基為MS固體培養(yǎng)基，BA濃度為0.7毫克/立升，NAA濃度為1.2毫克/立升，經(jīng)過20天的培養(yǎng)。不定芽分化和植株再生采用MS固體培養(yǎng)基；BA濃度為0.6毫克/立升，NAA濃度為0.01毫克/立升，經(jīng)過15天的培養(yǎng)。印楝組織培苗處理直接用0.5毫克/立升的NAA預(yù)處理2天，移入無激素MS培養(yǎng)基培養(yǎng)15天，發(fā)育為完整的植株，生根率可達(dá)80％，小苗移栽成活率可達(dá)100％。
權(quán)利要求
1.一種印楝組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，該方法包括下述順序的步驟①選擇外植體以印楝幼嫩枝條、葉片為外植體，切成長度為0.8～1.2厘米的小段，用升汞水消毒；②印楝愈傷組織的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS固體培養(yǎng)基，即將蔗糖0.3％(重量)和瓊脂0.8％(重量)加入市售的MS培養(yǎng)基的貯備液中，6-芐基腺嘌呤(BA)的濃度為0.1～0.5毫克/立升，萘乙酸(NAA)的濃度為0.1～2.0毫克/立升，經(jīng)15～25天的培養(yǎng)便可誘導(dǎo)愈傷組織的產(chǎn)生；③愈傷組織的生長培養(yǎng)基MS固體培養(yǎng)基，BA濃度0.4～0.7毫克/立升，NAA濃度0.8～1.2毫克/立升，經(jīng)過20～30天的培養(yǎng)；④不定芽分化和植株再生培養(yǎng)基MS固體培養(yǎng)基，BA濃度0.4～0.6毫克/立升，NAA濃度0.01毫克/立升，經(jīng)過15～30天的培養(yǎng)；⑤印楝組織培苗處理直接用0.5毫克/立升的NAA預(yù)處理2天，移入無激素MS培養(yǎng)基培養(yǎng)15～25天，發(fā)育為完整的植株，生根率可達(dá)70％～80％，小苗移栽成活率可達(dá)100％。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種印楝組織培養(yǎng)的快速繁殖方法。該法包括①選擇外植體②印楝愈傷組織的誘導(dǎo)③愈傷組織的生長④不定芽分化和植株再生⑤印楝組織培苗處理等階段,培養(yǎng)基是采用MS固體培養(yǎng)基,并且在不同階段6－芐基腺嘌呤(BA)和萘乙酸(NAA)采用不同的濃度。培植所需時間短,植株生根率可達(dá)70%～80%,小苗移栽成活率可達(dá)100%。
文檔編號A01H4/00GK1296739SQ00132089
公開日2001年5月30日 申請日期2000年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2000年12月14日
發(fā)明者李云壽 申請人:云南天興生物開發(fā)有限公司生物化工研究所