線、丫射線及帶電粒子。
[0084] W下實(shí)例進(jìn)一步說明本發(fā)明。此等實(shí)例僅欲說明本發(fā)明且不應(yīng)理解為本發(fā)明的限 制。 陽0化]實(shí)例1 :制備脂質(zhì)體
[0086] 脂質(zhì)體是藉由溶劑注射法所制備出。W3:0.045:2的摩爾比組合包括DSPC、 DSPE-PEG2。。。及膽固醇的脂質(zhì)且在約60°C溶解于燒瓶中的99. 9%乙醇中。使用桌面超音波 浴進(jìn)行脂質(zhì)溶解。 陽087] 藉由蠕動累W100血/min向1.OmM憐酸鋼溶液中添加溶解的脂質(zhì)溶液且混合兩 種溶液。隨后使脂質(zhì)混合物穿過孔徑分別為0.2μπι及0.1μπι的聚碳酸醋薄膜6-10次。 形成脂質(zhì)體（或大型多層囊泡（largemultilamellarvesicles))且平均囊泡直徑為約 100-120nm(使用MalvernZetaSizerNanoZS-90 量測）。
[0088] 藉由切向流透析系統(tǒng)W0. 9% (w/w)氯化鋼及9% (w/w)薦糖溶液使用Millipore Pellicon2小型超濾模組Biomax-100C(0.Im2)對脂質(zhì)體混合物進(jìn)行透析及濃縮，隨后使用 0. 2μm無菌濾膜過濾滅菌。
[0089] 實(shí)例2:單價(jià)相對離子供體對囊封效率及保留特性的影響
[0090] 醫(yī)藥組合物是藉由混合實(shí)例1中的脂質(zhì)體與硫酸錠（一種單價(jià)相對離子供體）所 制備而得，其中使用300mM及600mM硫酸錠形成一橫跨脂質(zhì)體的脂質(zhì)雙層膜的梯度差，藉W 主動式裝載（remoteloading)長春瑞濱。使用活體外血漿釋放法評估脂質(zhì)體態(tài)長春瑞濱 (liposomalvinore化ine)的囊封（裝載）效率及保留特性，而結(jié)果概括于表1中。
[0091] 結(jié)果：數(shù)據(jù)顯示硫酸錠可有效將長春瑞濱裝載或囊封在脂質(zhì)體中。然而，硫酸錠不 能有效地將長春瑞濱保留在脂質(zhì)體中，其中24小時(shí)血漿培育后少于30%長春瑞濱保留囊 封在脂質(zhì)體中。
[0092] 表1.具有單價(jià)相對離子供體的醫(yī)藥組合物的特征
[0093]
[0094] 實(shí)例3:多價(jià)相對離子供體對囊封效率及保留特性的影響
[0095] 藉由D0WEX離子交換管柱將分子量為8, 000 (8K)道爾頓的硫酸聚葡萄糖鋼轉(zhuǎn)化為 硫酸聚葡萄糖錠（硫酸聚葡萄糖的醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽）。藉由將實(shí)例1中的脂質(zhì)體分別 與4mM及8mM硫酸聚葡萄糖錠混合，繼而主動式裝載約2mg長春瑞濱，在約60°C下培育，來 制備兩種醫(yī)藥組合物。
[0096] 使用活體外血漿釋放法評估此兩種醫(yī)藥組合物中脂質(zhì)體態(tài)長春瑞濱的囊封效率 及保留特性，而結(jié)果概括于表2中。
[0097] 結(jié)果：8mM硫酸聚葡萄糖錠所產(chǎn)生的囊封效率為93%，而4mM硫酸聚葡萄糖錠的囊 封效率低于90 %。類似地，表4中的LV009調(diào)配物僅包括多價(jià)相對離子供體且血漿培育后 24小時(shí)囊封效率小于90%，而保留率為98. 74%。
[0098] 表2.具有多價(jià)相對離子供體的醫(yī)藥組合物的特征
[0099]
[0100] 實(shí)例4 :單價(jià)與多價(jià)相對離子供體的組合的影響 陽101] 進(jìn)行活體外研究W關(guān)于脂質(zhì)體態(tài)長春瑞濱的保留特性評估單價(jià)與多價(jià)相對離子 供體的組合。 陽102] 根據(jù)實(shí)例1制備的脂質(zhì)體是與300mM硫酸錠（單價(jià)相對離子供體）及各種濃度硫 酸聚葡萄糖鋼（多價(jià)相對離子供體鹽）混合而得。
[0103] 使用24小時(shí)活體外血漿釋放法評估脂質(zhì)體態(tài)長春瑞濱的囊封效率及保留特性， 而結(jié)果概括于表3中。
[0104] 結(jié)果：數(shù)據(jù)顯示單價(jià)與多價(jià)相對離子供體的各種組合會維持長春瑞濱的囊封效 率，而脂質(zhì)體尺寸為約lOOnm。另外，脂質(zhì)體態(tài)長春瑞濱的保留特性取決于多價(jià)相對離子供 體的濃度。相較于2mM硫酸聚葡萄糖鋼巧1. 8% )，8mM硫酸聚葡萄糖鋼與24小時(shí)時(shí)長春瑞 濱的較高保留百分率（78. 9% )有關(guān)。
[0105] 表3.具有單價(jià)與多價(jià)相對離子供體組合的脂質(zhì)體態(tài)長春瑞濱的特征 陽106]
[0107] 實(shí)例5 :各種多價(jià)相對離子供體鹽的影響
[0108] 進(jìn)行活體外研究W評估不同多價(jià)相對離子供體鹽對脂質(zhì)體態(tài)長春瑞濱的保留特 性的影響。
[0109] 根據(jù)實(shí)例1制備的脂質(zhì)體是與300mM硫酸錠（A巧及兩種不同多價(jià)相對離子供體 鹽：硫酸聚葡萄糖值巧鋼鹽及DS錠鹽混合而得。
[0110] 使用24小時(shí)活體外血漿釋放法評估脂質(zhì)體態(tài)長春瑞濱的囊封效率及保留特性， 而結(jié)果概括于表4中。 陽111] 結(jié)果：數(shù)據(jù)顯示硫酸聚葡萄糖的鋼鹽及錠鹽對于24小時(shí)血漿培育后將長春瑞濱 保留在脂質(zhì)體中同等有效。另外，當(dāng)多價(jià)相對離子供體或其鹽的濃度為ΙΜ?時(shí)，單價(jià)與多 價(jià)相對離子供體組合的保留特性（24小時(shí)時(shí)100%及94. 2%長春瑞濱保留于脂質(zhì)體中）類 似于多價(jià)相對離子供體組合物（24小時(shí)后98. 7%長春瑞濱保留于脂質(zhì)體中）。將此與表3 中的資料相比，其中當(dāng)多價(jià)相對離子供體的濃度小于lOmM時(shí)，脂質(zhì)體態(tài)長春瑞濱的保留特 性取決于多價(jià)相對離子供體的濃度。
[0112] 表4.具有單價(jià)與多價(jià)相對離子供體組合的脂質(zhì)體態(tài)長春瑞濱的特征陽11引
[0114] 實(shí)例6 :各種分子量的多價(jià)相對離子供體的影響
[0115] 多價(jià)相對離子供體的分子量對脂質(zhì)體態(tài)長春瑞濱保留特性的影響。根據(jù)實(shí)例1制 備的脂質(zhì)體是與硫酸錠并且分別與5K和8K硫酸聚葡萄糖混合。
[0116] 使用24小時(shí)活體外血漿釋放法評估脂質(zhì)體態(tài)長春瑞濱的囊封效率及保留特性， 而結(jié)果概括于表5中。
[0117] 結(jié)果：多價(jià)相對離子供體的總價(jià)數(shù)影響脂質(zhì)體態(tài)長春瑞濱的保留特性。數(shù)據(jù)指明 具有較高價(jià)數(shù)的多價(jià)相對離子供體與24小時(shí)時(shí)較多囊封長春瑞濱有關(guān)。
[0118] 表5.具有各種分子量的多價(jià)相對離子供體的脂質(zhì)體態(tài)長春瑞濱的特征 陽119]
[0120] 實(shí)例7 :使用單價(jià)與多價(jià)相對離子供體組合獲得的可調(diào)節(jié)保留特性 陽121] 藉由將實(shí)例1的脂質(zhì)體與各種濃度硫酸錠及各種濃度硫酸聚葡萄糖混合，繼而主 動式裝載長春瑞濱來制備各種醫(yī)藥組合物。使用24小時(shí)活體外血漿釋放法評估脂質(zhì)體態(tài) 長春瑞濱的囊封效率及保留特性，而結(jié)果概括于表6至8中。 陽122] 表6的結(jié)果：在72小時(shí)時(shí)，72. 2%被囊封的長春瑞濱仍保留于NanoVNB組合物（醫(yī) 藥組合物僅包含多價(jià)相對離子供體八硫酸Ξ乙胺）中，而72小時(shí)時(shí)的此高保留率可能造成 毒性，最值得注意的是皮膚毒性。另一方面，LV005組合物（醫(yī)藥組合物僅包含單價(jià)相對離 子供體）中所有被囊封的長春瑞濱均在72小時(shí)時(shí)被釋放出，而此與低治療功效有關(guān)。藉由 組合單價(jià)與多價(jià)相對離子供體，獲得一定范圍的保留特性的脂質(zhì)體態(tài)長春瑞濱。值得注意 的是多價(jià)相對離子供體或其醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽的總價(jià)數(shù)當(dāng)量為約1至約240mEq。
[0123] 表6.具有l(wèi)OOmM及300mM單價(jià)相對離子供體及各種濃度多價(jià)相對離子供體的醫(yī) 藥組合物的特征 陽 124]
[0125] 表7 :具有各種濃度單價(jià)相對離子供體及固定濃度（0. 3mM)多價(jià)相對離子供體的 醫(yī)藥組合物的特征 陽 126]
[0127] 表7的結(jié)果：使用lOOmM至500mM硫酸錠，長春瑞濱的囊封效率高于70%。
[0128] 表8 :具有各種濃度單價(jià)相對離子供體及固定濃度（0. 3mM)多價(jià)相對離子供體的 醫(yī)藥組合物的特征 陽 129]
陽130] 表8的結(jié)果：使用200至-400mM硫酸錠（單價(jià)相對離子供體），24小時(shí)培育后，有 超過30%脂質(zhì)體長春瑞濱保留。 陽13U實(shí)例8 :使用HT-29人類結(jié)腸癌細(xì)胞進(jìn)行活體內(nèi)抗癌癥評估
[0132] 使用小鼠的原位HT-29人類結(jié)腸腫瘤模型進(jìn)行LV304醫(yī)藥組合物的活體內(nèi)抗癌癥 評估。 陽133] 在此試驗(yàn)期間的所有時(shí)間小鼠可自由獲取飲用水及食物。
[0134] 該研究設(shè)計(jì)如下包括3個(gè)研究組：
[0135] NanoNVB組：在第0天、第3天、第6天及第9天藉由靜脈內(nèi)注射每天一次給予6只 小鼠25mg/kgNanoVNB形式的長春瑞濱。
[0136] LV304組：在第0天、第3天、第6天及第9天藉由靜脈內(nèi)注射每天一次給予6只 小鼠25mg/kgLV304醫(yī)藥組合物形式的長春瑞濱。
[0137] 對照組：在第0天、第3天、第6天及第9天給予6只小鼠每天一次靜脈內(nèi)生理食 鹽水注射。
[0138] 在研究期間，量測W下結(jié)果：
[0139] 腫瘤生長變化百分率（T/C% )其藉由下式計(jì)算：
[0140] (腫瘤重重第X夭-腫瘤重重第。夭）化理八腫瘤重重第X夭-腫瘤重重第。夭）對照X100 %。 陽141] 與第0天的體重比較，最大體重變化。 陽142] 平均腫瘤倍增時(shí)間（TDT)。其廣泛用于定量腫瘤生長速率且藉由下式計(jì)算：
[0143] (第X天-第0天）
[0144] 第X天為相較于分期尺寸倍增的腫