異亮氨酸在評估雞蛋營養(yǎng)價值中的應用及評估方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種應用異亮氨酸評估雞蛋的營養(yǎng)價值以及評估方法，屬于農(nóng)產(chǎn)品中 的畜禽產(chǎn)品營養(yǎng)價值評估領域。
【背景技術】
[0002] 異亮氨酸Isoleucine,lie，又稱"異白氨酸"，系統(tǒng)命名為"α-氨基-β-甲基戊 酸"。是人體必需氨基酸之一，屬脂肪族中性氨基酸的一種。菱形葉片狀或片狀晶體，味苦。 熔點：284°C。溶于水，微溶于乙醇。
[0003] 亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸一起合作修復肌肉，控制血糖，并給身體組織提供能 量。它還提高生長激素的產(chǎn)量，并幫助燃燒內(nèi)臟脂肪，這些脂肪由于處于身體內(nèi)部，僅通過 節(jié)食和鍛煉難以對它們產(chǎn)生有效作用。
[0004] 亮氨酸，異亮氨酸和纈氨酸都是支鏈氨基酸，它們有助于促進訓練后的肌肉恢復。 其中亮氨酸是最有效的一種支鏈氨基酸，可以有效防止肌肉損失，因為它能夠更快的分解 轉化為葡萄糖。增加葡萄糖可以防止肌肉組織受損，因此它特別適合健美運動員。白氨酸還 促進骨骼，皮膚，以及受損肌肉組織的愈合，醫(yī)生通常建議手術后患者采取亮氨酸補充劑。 亮氨酸最好的食物來源包括糙米，豆類，肉類，堅果，大豆粉，和全麥。由于它是一種必不可 少的氨基酸，這意味著身體不能自己生產(chǎn)，只能通過飲食獲得。從事高強度體力活動和低蛋 白質(zhì)飲食的人，應該考慮采取白氨酸補充。盡管有獨立補充形式，但是最好還是與異亮氨酸 和纈氨酸一起攝入。因此，選擇混合型補充劑更為方便。在化學鑒定領域中很少使用異亮氨 酸，至今尚沒有文獻報道異亮氨酸可以用于鑒定食物品質(zhì)以區(qū)別來源不同的食品的品質(zhì)。
[0005] 雞蛋作為人類的日常營養(yǎng)來源，與人們的生活息息相關。雞蛋中含有大量的營養(yǎng) 物質(zhì)，其中微量元素，粗蛋白質(zhì)，粗脂肪，膽固醇，卵磷脂，維生素B2和維生素A是其主要的 營養(yǎng)成分。雞蛋中的這些營養(yǎng)素有助于增進神經(jīng)系統(tǒng)的功能，可增強記憶，防止老年人記 憶力衰退；所含的微量元素硒、鋅，維生素均有抗癌作用。所以，經(jīng)常食用雞蛋能豐富營養(yǎng)， 健身益壽。
[0006] 現(xiàn)在市場上可以買到的雞蛋種類繁多，有規(guī)模化養(yǎng)雞場的雞蛋，也有粗放放養(yǎng)蛋 雞產(chǎn)生的柴雞蛋，還有人工雞蛋等等，各類雞蛋的營養(yǎng)價值參差不齊，而雞蛋的營養(yǎng)價值也 越來越得到人們的重視。評估雞蛋營養(yǎng)價值主要是通過表征雞蛋中營養(yǎng)物質(zhì)成分的含量高 低，進而評估營養(yǎng)價值。然而，雞蛋中營養(yǎng)化學成分參數(shù)較多，同時評估不僅工作量大，且會 導致界定標準不一，因此，亟需一種通過單一物質(zhì)或組合物迅速表征上述參數(shù)的高低進而 表征雞蛋營養(yǎng)價值。
[0007] 而雞蛋的營養(yǎng)價值與多種因素相關，其中最重要的因素包括飼養(yǎng)方式和蛋雞品 種。當?shù)半u品種相同時，其營養(yǎng)價值則主要取決于飼養(yǎng)方式的選擇。目前，市場上主要以以 下兩種飼養(yǎng)條件雞蛋為主：1)粗放養(yǎng)殖型雞蛋：指以無污染的農(nóng)作物作為主要飼料，以地 表昆蟲等作為輔助飼料，散養(yǎng)雞產(chǎn)的雞蛋，該類雞蛋是雞在正常生理環(huán)境下產(chǎn)蛋而得到的 雞蛋。其還被稱為山雞蛋，草雞蛋，土雞蛋、柴雞蛋；2)規(guī)模化養(yǎng)殖型雞蛋：是以人工合成飼 料喂養(yǎng)的雞下的蛋，一般是機械化規(guī)模化養(yǎng)雞場或養(yǎng)雞專業(yè)戶喂養(yǎng)的雞下的蛋。然而一些 廠商為了提高經(jīng)濟利潤，將本是規(guī)模化養(yǎng)殖條件下的雞蛋標注為柴雞蛋，因此如何能夠更 有效的區(qū)分不同飼養(yǎng)方式的雞蛋顯得尤為重要。
[0008] 進一步地，如果能夠找到專屬性物質(zhì)用于評估雞蛋的營養(yǎng)價值，則為市場上雞蛋 營養(yǎng)價值的評估提供了捷徑。
[0009] 質(zhì)譜與色譜分離聯(lián)用技術具有快速、高靈敏度、高選擇性等特點，尤其針對多種類 型及微量化合物的定性定量分析等特性，該技術日漸成為分析化學領域的重要手段。從現(xiàn) 有技術看，尚沒有相關的方法將質(zhì)譜和色譜聯(lián)用技術應用于雞蛋的營養(yǎng)價值評估中。本發(fā) 明基于上述問題提供一種簡便的解決方案。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010] 本發(fā)明解決的技術問題是提供一種評估雞蛋營養(yǎng)價值的方法、物質(zhì)及其應用。
[0011] 為了解決上述技術問題，本發(fā)明通過如下技術方案實現(xiàn)：
[0012] 本發(fā)明提供一種評估雞蛋營養(yǎng)價值的方法，其特征在于，檢測雞蛋中是否含有異 亮氨酸或者異亮氨酸含量高低。
[0013] 其中，該方法是通過超高效液相色譜分離系統(tǒng)（UPLC)與Q-T0F型
[0014] 質(zhì)譜儀（Q-TOFMS/MS)的聯(lián)用技術對雞蛋進行檢測。
[0015] 本發(fā)明還提供了一種評估雞蛋營養(yǎng)價值的方法，其特征在于，通過超高效液相色 譜分離系統(tǒng)（UPLC)與Q-T0F型質(zhì)譜儀（Q-TOFMS/MS)的聯(lián)用技術在如下條件下對雞蛋進 行檢測：
[0016] 所述超高效液相色譜測定條件為：色譜柱為WatersAcquityUPLCBEHC18 柱；流動相：A相為甲醇，B相為0. 05 %甲酸水-5mM醋酸銨溶液，梯度洗脫，梯度洗脫的 方案如下：〇-〇·lmin:〇 %B-0. 0 %B;0· 1-3.Omin:0· 0 %B-0. 0 %B;3· 0-15.Omin:0· 0 % B-100. 0%B；15. 0-23.Omin：100.0%B-100. 0%B；23. 0-23.lmin：100.0%B-0. 0%B； 23. 1-26.Omin：0.0%B-0. 0%B；
[0017] 所述Q-TOF型MS/MS測定采用正離子檢測模式，ESI離子源；檢測到質(zhì)譜離子特征 峰m/z132. 1016,保留時間tR= 2. 35min。
[0018] 本發(fā)明還提供了異亮氨酸在評估雞蛋營養(yǎng)價值中的應用。
[0019] 其中所述應用是通過檢測雞蛋中是否含有異亮氨酸或者異亮氨酸含量高低來實 現(xiàn)的。
[0020] 其中通過超高效液相色譜分離系統(tǒng)（UPLC)與Q-T0F型質(zhì)譜儀（Q-TOFMS/MS)的 聯(lián)用技術檢測雞蛋中是否含有異亮氨酸或者異亮氨酸含量高低。
[0021] 另外，本發(fā)明還提供一種評估雞蛋營養(yǎng)價值的物質(zhì)，其特征在于，所述物質(zhì)為異亮 氨酸。
[0022] 進一步地，本發(fā)明還提供一種評估雞蛋營養(yǎng)價值的試劑盒，其特征在于，所述試劑 盒含有能夠鑒定或定量異亮氨酸的試劑。
[0023] 本發(fā)明的有益技術效果如下：
[0024] 本發(fā)明采用超高效液相色譜分離系統(tǒng)（UPLC)與Q-T0F型質(zhì)譜儀（Q-TOFMS/MS) 的聯(lián)用技術，通過對雞蛋樣品的采集、雞蛋樣本前處理方法考察、優(yōu)化液相色譜條件和質(zhì)譜 檢測參數(shù)、以及數(shù)據(jù)的采集、數(shù)據(jù)預處理、多變量數(shù)據(jù)分析等步驟，旨在獲得可靠的評估營 養(yǎng)價值區(qū)分不同飼養(yǎng)方式雞蛋的標志物。
[0025] 本發(fā)明的物質(zhì)和方法可以用于評估雞蛋的營養(yǎng)價值，該方法簡單，迅速，準確，而 且可以進行定量，本發(fā)明試劑盒可以做到實時監(jiān)測，真正解決了雞蛋營養(yǎng)價值評定需要多 參數(shù)，耗時長的問題。
【具體實施方式】
[0026] 為充分說明本發(fā)明所解決的技術問題和達到的技術效果，通過下述【具體實施方式】 和實施例對本發(fā)明進行詳細說明。
[0027] 關于營養(yǎng)價值的評估，本發(fā)明通過對雞蛋中化學成分如粗脂肪、粗蛋白質(zhì)、灰分、 卵磷脂，VB2和VA等參數(shù)進行表征。作為本領域常識，由于粗放散養(yǎng)條件下雞蛋中上述化 學成分含量較高，因此，其營養(yǎng)價值高于規(guī)模養(yǎng)殖條件下的雞蛋。本發(fā)明創(chuàng)造性地發(fā)現(xiàn)評估 雞蛋營養(yǎng)價值高低可以通過測定其中異亮氨酸的含量進行，以異亮氨酸的含量作為營養(yǎng)價 值高低的直接標準，即，異亮氨酸含量高的雞蛋的營養(yǎng)價值高于異亮氨酸含量低的雞蛋，不 含異亮氨酸的雞蛋的營養(yǎng)價值最低。
[0028] 醫(yī)學實驗表明，放養(yǎng)型雞蛋的品質(zhì)顯著高于人工喂養(yǎng)型雞蛋，即放養(yǎng)型雞蛋營養(yǎng) 價值高于人工喂養(yǎng)型雞蛋，究其原因，因飼養(yǎng)場采用人工飼養(yǎng)，飼料單一，且飼料中含化學 添加劑，加速了雞的產(chǎn)蛋頻率，使雞蛋本身營養(yǎng)價值大打折扣。而柴雞蛋是散養(yǎng)雞產(chǎn)下的 蛋，雞飼料幾乎不含有化學添加劑，主要以天然農(nóng)作物為主要飼料，譬如：糧食、蔬菜、地表 昆蟲等，雞在正常生理環(huán)境下產(chǎn)蛋，營養(yǎng)價值頗高。
[0029] 然而，到目前為止，雖然不同來源雞蛋的營養(yǎng)價值差異確認無異，并且很多學者也 發(fā)現(xiàn)微量元素、蛋白、或其他物質(zhì)在不同雞蛋中的含量差異，但雞蛋營養(yǎng)評估仍是以多參 數(shù)、多指標做出綜合評估，尚無一種能夠區(qū)分不同來源雞蛋的營養(yǎng)價值差異的特異性標志 物。
[0030] 基于上述需要，本發(fā)明在一種【具體實施方式】中提供一種評估雞蛋營養(yǎng)價值的方 法，該方法檢測雞蛋中是否含有異亮氨酸或者異亮氨酸含量高低。在測定是否含有異亮氨 酸以及異亮氨酸含量時可以選擇任何化學的、生物的檢測方法，只要能夠對其評估或定量 即可，不限于液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術，并且進一步地還設計能夠測定異亮氨酸或其含量的 試劑盒或試紙，以用于評估雞蛋的營養(yǎng)價值。
[0031] 在一種【具體實施方式】中，該方法是通過超高效液相色譜分離系統(tǒng)（UPLC)與Q-T0F 型質(zhì)譜儀（Q-TOFMS/MS)的聯(lián)用技術對雞蛋進行檢測。
[0032] 在一種【具體實施方式】中，本發(fā)明提供一種評估雞蛋營養(yǎng)價值的方法，其特征在于， 通過超高效液相色譜分離系統(tǒng)（UPLC)與Q-T0F型質(zhì)譜儀（Q-TOFMS/MS)的聯(lián)用技術對雞 蛋進行檢測：
[0033] 所述高分辨液相色譜測定條件為：色譜柱為WatersAcquityUPLCBEHC18 柱；流動相：A相為甲醇，B相為0. 05%甲酸水-5mM醋酸銨溶液，梯度洗脫，梯度洗脫的 方案如下：〇-〇·lmin:〇 %B-0. 0 %B;0· 1-3.Omin:0· 0 %B-0. 0 %B;3· 0-15.Omin:0· 0 % B-100. 0%B；15. 0-23.Omin：100.0%B-100. 0%B；23. 0-23.lmin：100.0%B-0. 0%B； 23. 1-26.Omin：0.0%B-0. 0%B；
[0034] 所述Q-T0F型MS/MS測定采用正離子檢測模式，ESI離子源；檢測到質(zhì)譜離子特征 峰m/z132. 1016,保留時間tR= 2. 35min。
[0035] 在一種【具體實施方式】中，還提供了異亮氨酸在評估雞蛋營養(yǎng)價值中的應用；優(yōu)選 地，其中所述應用是通過檢測雞蛋中是否含有異亮氨酸或者異亮氨酸含量高低來評估雞蛋 的營養(yǎng)價值實現(xiàn)的；優(yōu)選地，其中通過超高效液相色譜分離系統(tǒng)（UPLC)與Q-T0F型質(zhì)譜儀 (Q-TOFMS/MS)的聯(lián)用技術對雞蛋進行檢測雞蛋中是否含有異亮氨酸或者異亮氨酸含量高 低。
[0036] 在一種【具體實施方式】中，本發(fā)明還提供一種評估雞蛋營養(yǎng)價值的物質(zhì)為異亮氨 酸。
[0037] 為了達到實時簡便檢測，在一種【具體實施方式】中，本發(fā)明還提供一種評估雞蛋營 養(yǎng)價值的試劑盒，所述試劑盒含有評估或定量異亮氨酸的試劑。用于評估的產(chǎn)品可以是試 劑盒，試紙，以達到方便用于評估和定量目的，并且能夠進行方便地實時檢測。
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