一種復(fù)雜基質(zhì)中二溴氯丙烷殘留量的gc-nci-ms檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種二溴氯丙烷殘留量的檢測方法，更具體地說，涉及一種采用氣相 色譜-負(fù)化學(xué)源-質(zhì)譜法（GC-NCI-MS)定性定量測定動物源性食品等復(fù)雜基質(zhì)中二溴氯丙 烷殘留量的方法，屬于農(nóng)藥殘留的檢測技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 二溴氯丙烷，俗稱黑藥，學(xué)名1，2_二溴-3-氯丙烷，英文名稱1， 2-Dibrom〇-3-chloropropane(簡稱：DBCP)，CAS號為 96-12-8,分子量 236. 3328,結(jié)構(gòu)式為：
二溴氯丙烷是液態(tài)熏蒸性殺線蟲劑的活性成份。它是一種農(nóng)業(yè)上使用的土壤熏蒸劑， 適用于蔬菜、花卉、煙草、草莓等作物的苗床和溫室大棚的熏蒸，防治根結(jié)線蟲、孢囊線蟲、 短體線蟲、螺旋線蟲、紐帶線蟲、矮化線蟲等。眾多研究表明二溴氯丙烷對人體有劇毒，具有 高殘留、致畸、致不育的特點(diǎn)。在發(fā)現(xiàn)它對人類健康造成不良影響之后，此化合物于1979年 被禁止及限制使用。但仍有不法分子為取得高效的種植效果，暗地使用該農(nóng)藥，為社會留下 不少隱患。
[0003] 國內(nèi)外對動物源性食品中二溴氯丙烷的檢測研究尚未見開展。已有的關(guān)于二溴氯 丙烷的檢測主要集中在上世紀(jì)80年代，且僅僅是針對花生和糧食上的二溴氯丙烷，采用氣 相色譜技術(shù)進(jìn)行其殘留量檢測，但前處理手段落后、過程繁瑣、檢測效率低，且溶劑多為毒 性較大的苯、乙烷、濃硫酸等，對人體有較大危害。另外，氣相色譜技術(shù)無法克服基質(zhì)干擾、 假陽性等問題，不能進(jìn)行復(fù)雜基質(zhì)中二溴氯丙烷的檢測，限制了其使用范圍。因此，迫切需 要建立一種操作簡單、回收率高、重復(fù)性好、檢出限低、選擇性好的方法，適用于動物源性食 品等復(fù)雜基質(zhì)中^漠氣丙烷的檢測。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明要解決的問題是針對以上不足，首次提供一種復(fù)雜基質(zhì)中二溴氯丙烷殘留 量的GC-NCI-MS檢測方法，克服傳統(tǒng)技術(shù)檢測步驟繁瑣、溶劑用量大且毒性較大、靈敏度 低、回收率低、重現(xiàn)性差、方法不適用于動物源性食品等復(fù)雜基質(zhì)的缺陷，采用本發(fā)明方法， 具有快速簡便、溶劑用量小且毒性小、靈敏度高、選擇性強(qiáng)、重現(xiàn)性好，適用于各種動物源性 食品中二溴氯丙烷檢測的優(yōu)點(diǎn)。
[0005] 為解決以上問題，本發(fā)明采取以下技術(shù)方案：一種復(fù)雜基質(zhì)中二溴氯丙烷殘留量 的GC-NCI-MS檢測方法，其特征在于，包括如下步驟： (1) 提?。悍Q取粉碎好的樣品置于具塞離心管中，加入純乙腈，均質(zhì)，再加入氯化鈉，再 次均質(zhì)，離心； (2) 凈化：移取樣品提取液上清液于旋蒸瓶中，旋蒸至近干，加入體積比為3 :1的乙 腈-乙酸乙酯混合溶劑于旋蒸瓶中溶解殘渣，經(jīng)Pr〇ElutCARB/NH2固相萃取小柱凈化，體積 比為3 :1的乙腈-乙酸乙酯混合溶劑洗脫，收集洗脫液，濃縮至近干后，用體積比為1 :1的 正己烷-丙酮定容，離心，過膜得樣品液； (3) 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制：采用樣品空白基質(zhì)提取液配制不同濃度標(biāo)準(zhǔn)工作液，然后用 標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度-色譜峰面積作標(biāo)準(zhǔn)工作曲線； (4) 氣相色譜-負(fù)化學(xué)源-質(zhì)譜（GC-NCI-MS)測定 將步驟（3)中的各濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)行GC-NCI-MS測定，用標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度-色譜峰 面積作出標(biāo)準(zhǔn)工作曲線； 在相同條件下將步驟（2)中得到的樣品液進(jìn)行GC-NCI-MS測定，測得樣品中二溴氯丙 烷的色譜峰面積，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到樣品液中二溴氯丙烷的含量，然后根據(jù)樣品液所代表 的質(zhì)量計算得到樣品中二溴氯丙烷的殘留量。
[0006] 以下是對上述技術(shù)方案的進(jìn)一步說明： 步驟（1)中樣品若為動物肝臟等含水量較少的樣品，需加入稱樣量五分之一的水，浸泡 半小時后進(jìn)行提取。
[0007] 步驟（4)中氣相色譜條件為：色譜柱HP-5MS毛細(xì)管色譜柱，30*0. 25*0. 25;進(jìn)樣口 溫度270°C;載氣：He氣，不分流模式進(jìn)樣，進(jìn)樣量IuL;恒流模式，柱流量I.OmL/min;程序 升溫：初溫50°C保持2min，以每分鐘5°C的速度升至180°C，保持5min，然后以每分鐘20°C 的速度升至210°C，保持5min;傳輸線溫度250°C。
[0008] 步驟（4)中質(zhì)譜條件為：離子源溫度：200°C;電離模式：NCI;掃描模式：選擇離子 監(jiān)測（SHO模式；甲烷氣流量：2ml/min;監(jiān)測的離子：79、81、160、162，其中162為定量離 子。
[0009] 步驟（4)中測定樣品和標(biāo)準(zhǔn)工作溶液時，若兩者相應(yīng)農(nóng)藥的保留時間一致，并且在 扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖中所選擇的離子均出現(xiàn)，且離子豐度比與標(biāo)準(zhǔn)溶液一致，則可判 斷樣品中殘留此種農(nóng)藥，若不能同時滿足上述兩個條件，則判斷不含該種農(nóng)藥。
[0010]回收率為 88. 82-94. 17%，檢出限為 0? 98ug/kg，RSD為 2. 48-3. 77%。
[0011] 本發(fā)明采用以上技術(shù)方案，與傳統(tǒng)技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)：采用固相萃取前處 理技術(shù)與氣相色譜-負(fù)化學(xué)源-質(zhì)譜（GC-NCI-MS)結(jié)合的方法，實現(xiàn)了動物源性食品中二 溴氯丙烷的定性確證和定量檢測?？焖俸啽?、采用乙酸乙酯、乙腈作為溶劑，毒性小。檢出 限低至〇.98ug/kg，所以靈敏度高。回收率88.82-94. 17%，所以選擇性強(qiáng)。相對標(biāo)準(zhǔn)偏差 2. 48-3. 77%，所以重現(xiàn)性好。有效的去除了基質(zhì)的干擾，適用于各種動物源性食品中二溴氯 丙烷的檢測。
[0012] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作詳細(xì)說明。
【附圖說明】
[0013] 附圖1為添加在空白豬肉基質(zhì)中的二溴氯丙烷標(biāo)液的選擇離子色譜圖； 附圖2為空白豬肉樣品的選擇離子色譜圖； 附圖3為添加在空白豬肉基質(zhì)中的二溴氯丙烷標(biāo)液的質(zhì)譜圖。
【具體實施方式】
[0014] 現(xiàn)以以下實施實例來說明本發(fā)明，但并不是限制本發(fā)明的范圍。
[0015] 實施例1 :下面以豬肉為例，說明二溴氯丙烷殘留量的GC-NCI-M檢測方法， (1)樣品前處理 稱取樣品10. 〇〇g，置于IOOmL塑料離心管中，加入40mL乙腈溶液，高速均質(zhì)lmin，再加 入5g氯化鈉，再高速均質(zhì)lmin，以4000r/min的轉(zhuǎn)速離心5min; 取出20mL乙腈層于250mL尖底旋蒸瓶中，在旋蒸儀上蒸至近干，加入體積比為3 :1的 3mL乙腈-乙酸乙酯混合溶劑于旋蒸瓶中溶解殘渣，待凈化； 將Pr〇ElutCARB/NH2小柱裝在固相萃取裝置上，在小柱中先加入2g無水硫酸鈉，再用 體積比為3 :1的8mL乙腈-乙酸乙酯混合溶劑預(yù)淋洗小柱，保持流速約為lmL/min; 將溶解液過柱，再用體積比為3 :1的3mL乙腈-乙酸乙酯混合溶劑洗旋蒸瓶過柱。然 后用體積比為3 :1的25mL乙腈-乙酸乙酯混合溶劑洗脫，收集全部洗脫液于250mL尖底旋 蒸瓶中，置于旋蒸儀上旋蒸至近干，用體積比為1 :1的正己燒-丙酮定容至2mL，離心IOmin 后用0. 45um濾膜過濾，供GC-NCI-MS分析。
[0016] (2)氣相色譜-負(fù)化學(xué)源-質(zhì)譜（GC-NCI-MS)測定 將不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)行GC-NCI-MS測定，用標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度-色譜峰面積作出標(biāo) 準(zhǔn)工作曲線；在相同條件下將樣品液進(jìn)行GC-NCI-MS測定，測得