1中的樣品冷卻到50°C時(shí)加入絲氨酸，繼續(xù)升溫至180°C微波反應(yīng)1min ；
[0042]步驟1.3、將步驟1.2中制得的樣品注入分子量為1000的透析袋中透析24小時(shí)，保留透析袋外的液體，得透析液；
[0043]步驟1.4、將所述透析液在60°C恒溫的條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)一個(gè)小時(shí)，得碳點(diǎn)；
[0044]其中，每Ig分子量為1500的聚乙二醇需要甘油的量為15ml，需要絲氨酸的量為Igo該方法制備的碳點(diǎn)適于血紅蛋白濃度檢測，檢測精度最高。
[0045]所述的以碳點(diǎn)為探針運(yùn)用共振光散射法檢測血紅蛋白的方法，各份標(biāo)準(zhǔn)溶液中碳點(diǎn)的濃度為10.7mg/ml，血紅蛋白待測溶液中碳點(diǎn)的濃度也為10.7mg/ml?碳點(diǎn)在該濃度下，血紅蛋白的檢測精度最尚。
[0046]所述的以碳點(diǎn)為探針運(yùn)用共振光散射法檢測血紅蛋白的方法，所述步驟I中，各份標(biāo)準(zhǔn)溶液中血紅蛋白的濃度依次為0、5 X I(T8moI/L、I X 10_7mol/L、5 X 10_7mol/L、I X106mol/L、2 X106mol/L。
[0047]所述的以碳點(diǎn)為探針運(yùn)用共振光散射法檢測血紅蛋白的方法，所述步驟2中，共振光散射法檢測的激發(fā)波長和發(fā)射波長均為300nm。300nm為最佳激發(fā)波長，在此波長下，共振光散射強(qiáng)度最高。
[0048]所述的以碳點(diǎn)為探針運(yùn)用共振光散射法檢測血紅蛋白的方法，在所述的步驟2中，當(dāng)血紅蛋白溶液中添加碳點(diǎn)后，需靜置3min。靜置3min能使碳點(diǎn)與血紅蛋白充分反應(yīng)，提高檢測精確度。
[0049]所述的以碳點(diǎn)為探針運(yùn)用共振光散射法檢測血紅蛋白的方法，所述的所選定波長為550nm。在該波長下，隨著標(biāo)準(zhǔn)溶液中血紅蛋白濃度的增加，共振光散射強(qiáng)度變化最大，因此選用該波長檢測待測溶液中血紅蛋白的濃度精度最高。
[0050]實(shí)施例2
[0051]制備碳點(diǎn):將1.0g分子量為1500的聚乙二醇和15ml甘油攪拌后置于微波反應(yīng)器中，將溫度設(shè)定在140°C高溫反應(yīng)15min，待試管冷卻到50°C時(shí)加入1.0g的絲氨酸，繼續(xù)升溫至180°C微波反應(yīng)lOmin，將制得的樣品注入分子量1000的透析袋中透析24小時(shí)后進(jìn)行蒸發(fā)濃縮，300ml的透析液在60°C恒溫的條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)一個(gè)小時(shí)，最后得到260ml樣品。
[0052]配置不同濃度的血紅蛋白溶液，其中標(biāo)準(zhǔn)溶液中血紅蛋白的濃度依次為Omol/L、5 X 10 8mol/L、I X 10 7mol/L、5 X 10 7mol/L、I X 10 6mol/L、2 X 10 6mol/L 向其中各份中分另丨J加入碳點(diǎn)，并使碳點(diǎn)的濃度為10.7mg/ml的，靜置3min，在激發(fā)波長與發(fā)射波長均為300nm情況下檢測300-600nm的共振散射光光譜，依次得共振散射光光譜圖a，b，c，d，e和f，如圖1所示。
[0053]以每份標(biāo)準(zhǔn)溶液的共振光散射光譜圖中550nm波長對應(yīng)的共振光散射強(qiáng)度與血紅蛋白濃度為Omol/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液的共振光散射光譜圖中550nm波長對應(yīng)的共振光散射強(qiáng)度的差值為縱坐標(biāo)，以每份標(biāo)準(zhǔn)溶液中血紅蛋白的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算線性關(guān)系，如圖2所示；
[0054]向待測溶液中加入碳點(diǎn)，使得待測溶液中的碳點(diǎn)的濃度也為10.7mg/ml，并用同樣的方法得到待測溶液的共振光散射光譜圖，將該共振光散射光譜圖中550nm波長對應(yīng)的共振光散射強(qiáng)度與血紅蛋白濃度為Omol/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液的共振光散射光譜圖中550nm波長對應(yīng)的共振光散射強(qiáng)度的差值代入到得到的線性關(guān)系中，即代入圖2的標(biāo)準(zhǔn)曲線中，即可得到待檢測溶液中血紅蛋白的濃度。
[0055]從共振散射光光譜圖可得知碳點(diǎn)的共振散射光信號強(qiáng)度隨血紅蛋白溶液的濃度增加而增強(qiáng)，且碳點(diǎn)共振散射光信號強(qiáng)度隨血紅蛋白溶液的濃度有良好的線性關(guān)系，R2 =
0.998 ο
[0056]利用碳點(diǎn)作為探針，通過碳點(diǎn)的共振散射光強(qiáng)度隨血紅蛋白溶液的濃度的增加而增強(qiáng)的特性，進(jìn)行高靈敏檢測，碳點(diǎn)的共振散射光強(qiáng)度變化值與血紅蛋白濃度呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.998。本發(fā)明方法操作簡單、檢測快速、靈敏度高且選擇性好，可對混合樣品中血紅蛋白進(jìn)行在線原位快速靈敏檢測。
[0057]盡管本發(fā)明的實(shí)施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說明書和實(shí)施方式中所列運(yùn)用。它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域。對于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實(shí)現(xiàn)另外的修改。因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細(xì)節(jié)和這里示出與描述的實(shí)施例。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種以碳點(diǎn)為探針運(yùn)用共振光散射法檢測血紅蛋白的方法，其特征在于， 向多份血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測溶液中分別加入碳點(diǎn)，分別檢測各血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測溶液的共振光散射強(qiáng)度，建立各標(biāo)準(zhǔn)溶液的共振光散射強(qiáng)度與血紅蛋白濃度為零的標(biāo)準(zhǔn)溶液的共振光散射強(qiáng)度的差值和血紅蛋白的濃度間的線性關(guān)系，根據(jù)該線性關(guān)系計(jì)算待測溶液中血紅蛋白的濃度。
2.如權(quán)利要求1所述的以碳點(diǎn)為探針運(yùn)用共振光散射法檢測血紅蛋白的方法，其特征在于，具體包括以下步驟: 步驟1、配制多份不同濃度的血紅蛋白溶液，向各份血紅蛋白溶液中分別添加碳點(diǎn)，并使各份血紅蛋白溶液中的碳點(diǎn)的濃度相同，得到多份不同濃度的血紅蛋白的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別檢測各份標(biāo)準(zhǔn)溶液的共振光散射強(qiáng)度，得到各份標(biāo)準(zhǔn)溶液的共振光散射光譜圖； 步驟2、以每份標(biāo)準(zhǔn)溶液的共振光散射光譜圖中所選定波長對應(yīng)的共振光散射強(qiáng)度與血紅蛋白濃度為零的標(biāo)準(zhǔn)溶液的共振光散射光譜圖中所選定波長對應(yīng)的共振光散射強(qiáng)度的差值為縱坐標(biāo)，以每份標(biāo)準(zhǔn)溶液中血紅蛋白的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算線性關(guān)系; 步驟3、向待測溶液中加入碳點(diǎn)，使得待測溶液中的碳點(diǎn)的濃度與各份標(biāo)準(zhǔn)溶液中碳點(diǎn)的濃度相同，并按照步驟2的方法得到待測溶液對應(yīng)的共振光散射光譜圖，將該共振光散射光譜圖中所選定波長對應(yīng)的共振光散射強(qiáng)度與血紅蛋白濃度為零的標(biāo)準(zhǔn)溶液的共振光散射光譜圖中所選定波長對應(yīng)的共振光散射強(qiáng)度的差值代入到步驟3得到的線性關(guān)系中，即可得到待檢測溶液中血紅蛋白的濃度。
3.如權(quán)利要求2所述的以碳點(diǎn)為探針運(yùn)用共振光散射法檢測血紅蛋白的方法，其特征在于，所述碳點(diǎn)的制備方法: 步驟1.1、將分子量為1500的聚乙二醇和甘油攪拌后置于微波反應(yīng)器中，設(shè)定微波反應(yīng)器的溫度為140°C，反應(yīng)時(shí)間為15min ； 步驟1.2、將步驟1.1中的樣品冷卻到50°C時(shí)加入絲氨酸，繼續(xù)升溫至180°C微波反應(yīng)1min ； 步驟1.3、將步驟1.2中制得的樣品注入分子量為1000的透析袋中透析24小時(shí)，保留透析袋外的液體，得透析液； 步驟1.4、將所述透析液在60°C恒溫的條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)一個(gè)小時(shí)，得碳點(diǎn)； 其中，每Ig分子量為1500的聚乙二醇需要甘油的量為15ml，需要絲氨酸的量為lg。
4.如權(quán)利要求2所述的以碳點(diǎn)為探針運(yùn)用共振光散射法檢測血紅蛋白的方法，其特征在于，各份標(biāo)準(zhǔn)溶液中碳點(diǎn)的濃度為10.7mg/ml，血紅蛋白待測溶液中碳點(diǎn)的濃度也為10.7mg/ml。
5.如權(quán)利要求2所述的以碳點(diǎn)為探針運(yùn)用共振光散射法檢測血紅蛋白的方法，其特征在于，所述步驟I中，各份標(biāo)準(zhǔn)溶液中血紅蛋白的濃度依次為0、5X10_8mOl/L、lX10_7mOl/L、5 X10 7mol/L、I X106mol/L、2 X106mol/L。
6.如權(quán)利要求2所述的以碳點(diǎn)為探針運(yùn)用共振光散射法檢測血紅蛋白的方法，其特征在于，所述步驟2中，共振光散射法檢測的激發(fā)波長和發(fā)射波長均為300nm。
7.如權(quán)利要求2所述的以碳點(diǎn)為探針運(yùn)用共振光散射法檢測血紅蛋白的方法，其特征在于，在所述的步驟2中，當(dāng)血紅蛋白溶液中添加碳點(diǎn)后，需靜置3min。
8.如權(quán)利要求2所述的以碳點(diǎn)為探針運(yùn)用共振光散射法檢測血紅蛋白的方法，其特征在于，所述的所選定波長為550nm。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種以碳點(diǎn)為探針運(yùn)用共振光散射法檢測血紅蛋白的方法，向多份血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測溶液中分別加入碳點(diǎn)，分別檢測各血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測溶液的共振光散射強(qiáng)度，建立各標(biāo)準(zhǔn)溶液的共振光散射強(qiáng)度與血紅蛋白濃度為零的空白碳點(diǎn)溶液的共振光散射強(qiáng)度的差值和血紅蛋白的濃度間的線性關(guān)系，根據(jù)該線性關(guān)系計(jì)算待測溶液中血紅蛋白的濃度。本發(fā)明操作簡單、檢測快速，能進(jìn)行溶液中血紅蛋白的高靈敏識別。
【IPC分類】G01N21-63
【公開號】CN104849243
【申請?zhí)枴緾N201510273998
【發(fā)明人】肖琦, 黃珊, 盧雙燕
【申請人】廣西師范學(xué)院
【公開日】2015年8月19日
【申請日】2015年5月25日