專利名稱：牛乳免疫球蛋白g定量技術(shù)及相關(guān)特異性抗體檢測技術(shù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體是一種牛乳及保健品中免疫球蛋白G定量技術(shù)及相關(guān)特異性抗體檢測技術(shù)。
牛奶中由于存在若干物質(zhì)如脂肪、雜蛋白質(zhì)，掩蓋了免疫球蛋白G及相關(guān)的特異性抗體反應(yīng)，所以不能采用一般的人體酶標(biāo)試劑盒來檢測特異性抗體；同時由于牛奶中免疫球蛋白G及其相關(guān)抗體的分子量較小，目前國內(nèi)還沒有一種有效簡捷的方法來定量牛奶以及保健食品中的免疫球蛋白G；新西蘭及澳大利亞的檢測技術(shù)復(fù)雜，一般條件難以操作，不夠?qū)嵱谩?br> 本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種簡捷易于操作而效果好的免疫球蛋白G定量技術(shù)及相關(guān)特異性抗體的檢測技術(shù)。
本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣的本發(fā)明采用特殊方法對牛乳及保健品作暴露隱蔽性免疫活性預(yù)處理，即將原來被遮掩的免疫球蛋白G及相關(guān)特異性抗體暴露出來，從而可直接使用人體酶標(biāo)試劑盒進(jìn)行檢測特異性抗體；利用免疫增效技術(shù)，采用最適抗原抗體配比及相應(yīng)儀器動態(tài)定量免疫球蛋白G。
本發(fā)明暴露隱蔽性免疫活性預(yù)處理是這樣實現(xiàn)的將牛乳及乳制品進(jìn)行脫脂，去除雜蛋白質(zhì)，雜蛋白質(zhì)主要是指酪蛋白。其中脫脂可采用離心脫脂，去蛋白質(zhì)采用一定PH條件下乙酸與乙酸鹽緩沖沉淀去除。
本發(fā)明免疫增效技術(shù)是指添加免疫增效劑，免疫增效劑采用聚乙二醇、氯化鈉、蒸餾水制成，它可使抗原抗體復(fù)合物顆粒增大，可辨性增強(qiáng)。
本發(fā)明免疫增效技術(shù)也可用血細(xì)胞懸浮吸附技術(shù)。
本發(fā)明的最適抗原抗體配比可根據(jù)微量濁度法來測定。
本發(fā)明在定量時，采用酶標(biāo)儀代替直接目測，提高分辨率。
本發(fā)明由于采用了暴露隱蔽性免疫活性相應(yīng)處理技術(shù)，可直接使用人體酶標(biāo)試劑盒檢測特異性抗體；同時利用免疫增效技術(shù)，免疫球蛋白G分子聚集，使生成的相應(yīng)抗原抗體復(fù)合物顆粒增大，可辨性增強(qiáng)，并可被定量檢出。
本發(fā)明實施例一、牛乳中免疫球蛋白G相關(guān)特異性抗體檢測技術(shù)1、對牛乳作暴露隱蔽性免疫活性預(yù)處理技術(shù)，將牛乳用離心法脫脂(4000轉(zhuǎn)/分，10分鐘)，或用乙醚抽取，取中下部濁液去除雜蛋白質(zhì)，將PH控制在4.6，用0.05mol乙酸與乙酸鹽緩沖沉淀，取中、下層清液；為保持樣品穩(wěn)定，可采用1％雞蛋清液覆蓋“封閉”抗原/抗體。
2、采用人體酶標(biāo)試劑檢測免疫球蛋白G相關(guān)特異性抗體。
二、牛乳中免疫球蛋白G定量技術(shù)1、在牛乳中添加免疫增效劑，免疫增效劑采用聚乙二醇5.6克，氯化鈉0.9克、蒸餾水100mol制成，或采用3％兔純紅細(xì)胞吸附技術(shù)達(dá)到免疫增效效果。
2、用微量濁度法(MFT)測定抗原抗體最適配比。
3、采用酶標(biāo)儀定量測出牛乳球蛋白含量，酶標(biāo)儀波長選擇在490mm。
權(quán)利要求
1.一種牛乳免疫球蛋白G相關(guān)特異性抗體檢測技術(shù)，其特征在于對牛乳及保健品作暴露隱蔽性免疫活性預(yù)處理，直接采用人體酶標(biāo)試劑盒進(jìn)行檢測特異性抗體。
2.據(jù)權(quán)利要求1所述的牛乳免疫球蛋白G相關(guān)特異性抗體檢測技術(shù)，其特征在于暴露隱蔽性免疫活性預(yù)處理是將牛乳及乳制品進(jìn)行離心脫脂，用乙酸與乙酸鹽緩沖液沉淀去除。
3.一種牛乳免疫球蛋白G定量技術(shù)，其特征在于利用免疫增效技術(shù)，采用最適抗原抗體配比及相應(yīng)儀器動態(tài)定量。
4.據(jù)權(quán)利要求3所述的牛乳免疫球蛋白G定量技術(shù)，其特征在于免疫增效技術(shù)是指在牛乳中添加免疫增效劑，免疫增效劑采用聚乙二醇、氯化鈉、蒸餾水制成。
5.據(jù)權(quán)利要求3所述的牛乳免疫球蛋白G定量技術(shù)，其特征在于免疫增效技術(shù)采用血細(xì)胞懸液吸附技術(shù)。
6.據(jù)權(quán)利要求3所述的牛乳免疫球蛋白G定量技術(shù)，其特征在于最適抗原抗體可根據(jù)微量濁度法來測定。
7.據(jù)權(quán)利要求3所述的牛乳免疫球蛋白G定量技術(shù)，其特征在于采用酶標(biāo)儀定量。
8.據(jù)權(quán)利要求6所述的牛乳免疫球蛋白G定量技術(shù)，其特征在于酶標(biāo)儀的波長在490mm。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種免疫球蛋白G定量技術(shù)及相關(guān)特異性抗體檢測技術(shù),采用特殊方法對牛乳及保健品作暴露隱蔽性免疫活性預(yù)處理技術(shù),利用人體酶標(biāo)試劑盒進(jìn)行檢測特異性抗體;采用免疫增效技術(shù),采用最適抗原/抗體配比及相應(yīng)儀器定量出免疫球蛋白G,本發(fā)明使用方便,經(jīng)濟(jì)實用。
文檔編號G01N33/53GK1296184SQ9912148
公開日2001年5月23日 申請日期1999年11月16日 優(yōu)先權(quán)日1999年11月16日
發(fā)明者徐明灶, 程越夫 申請人:徐明灶, 程越夫, 金華迪耳保健飲品有限公司