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一種測定血清總蛋白用的固體試劑的制作方法

文檔序號:5873587閱讀:745來源:國知局
專利名稱:一種測定血清總蛋白用的固體試劑的制作方法
技術領域
本發(fā)明涉及的是一種測定血清總蛋白用的固體試劑。
血清總蛋白對人體疾病的診斷及輔助診斷有重要價值。血清總蛋白升高常見于嘔吐,腹瀉等急性失水性疾病,多發(fā)性骨髓瘤及腎上腺機能減退等;血清總蛋白濃度降低可由蛋白質(zhì)攝入不足,嚴重消耗性疾病如結核、甲亢、腫瘤等引起,肝功能嚴重損害,腎病綜合癥如潰瘍性結腸炎等疾病均可表現(xiàn)為總蛋白濃度低下。
目前,被國內(nèi)外臨床和實驗室廣泛并長期采用的測定血清總蛋白的試劑為雙縮脲試劑,其主要成分為硫酸銅、酒石酸鉀鈉和氫氧化鈉,有的還加入碘化鉀,按傳統(tǒng)配方配制時,必須將硫酸銅、酒石酸鉀鈉和氫氧化鈉分別溶解,然后將酒石酸鉀鈉與硫酸銅混合,再加入濃度為30%的氫氧化鈉溶液,如不循此步驟則可能產(chǎn)生混濁沉淀,甚至使試劑不能使用,配方中的氫氧化鈉呈顆粒狀,腐蝕性和吸濕性都極強,所以,迄今為止,無論是國內(nèi)還是國外的試劑廠家都是將試劑制成液體形式提供給用戶,但液體試劑體積大、重量大、易滲漏、難以保證試劑質(zhì)量,且運輸費用高,增加包裝難度。
本發(fā)明的目的在于提供一種測定血清總蛋白用的固體試劑,使之不但使用方便,且其重量和體積都大大小于液體試劑,易于包裝,便于貯存和運輸,保證了試劑的貯存穩(wěn)定和配制易溶。
本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的,在進行了大量實驗篩選后,選用了主要成分為硫酸銅、酒石酸鉀鈉、磷酸鈉、迭氮鈉和非離子表面活性劑的固體試劑,其溶液配比為在每升試劑溶液中,含有
硫酸銅 2~4克/升酒石酸鉀鈉 4~8克/升磷酸鈉 10~20克/升迭氮鈉 0.5~1克/升非離子表面活性劑Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚)或Tween 20(聚氧乙烯山梨糖醇酐單月桂酸酯)或Tween 80(聚乙氧基油酸山梨糖醇) 2~4克/升或Brij 35(聚氧乙烯月桂醚) 1~3克/升其中加入的非離子表面活性劑是為使溶液不致產(chǎn)生混濁,而迭氮鈉則是作為防腐劑。
在加工中,我們將上述五種物質(zhì)分為兩組,即組分A硫酸銅和迭氮鈉組分B酒石酸鉀鈉、磷酸鈉和非離子表面活性劑在制作成品時,只需將組分A按規(guī)定配比混勻,即可分裝,為成品;組分B則按重量稱取后經(jīng)電動攪拌充分混勻,此時呈濕潤粉末狀,將粉末置于真空干燥器中至少24小時,再次攪拌混勻,即可分裝,為成品。使用時只需按比例要求取定量組分A和組分B分別以蒸餾水溶解,然后混勻,即可使用。
本發(fā)明試劑重量和體積都遠遠低于液體試劑,原液體試劑1000毫升重量1027克,固體試劑1000毫升用量僅29克,體積30毫升,其重量和體積分別比液體試劑縮小35倍和34倍,便利包裝、運輸;配方中采用了磷酸鈉代替了腐蝕性極強的氫氧化鈉,有利于安全操作;原液體試劑往往幾個月便出現(xiàn)懸浮的絮狀物,影響使用,甚至有的新購試劑(北京化工廠出品)中有明顯的絮狀物,試驗證明固體試劑在固體狀態(tài)下,至少可保質(zhì)一年,配制成液體后六個月仍然清亮,貯存時間長。為與液體試劑取得較一致的測試結果,我們以北京化工廠生產(chǎn)的作為商品出售的雙縮脲試劑做為對照進行了實驗比較,發(fā)現(xiàn)將原試劑量的4毫升改為3毫升即可達到檢測要求,換言之,可以節(jié)省四分之一的試劑量,有利于降低化驗成本。利用本發(fā)明產(chǎn)品進行檢測,操作簡單、迅速,具有優(yōu)良的準確度和精密度。
實施例取組分A 硫酸銅 1克迭氮鈉 0.25克組分B 酒石酸鉀鈉 3克磷酸鈉 10克非離子表面活性劑Tween 80(聚乙氧基油酸山梨糖醇) 2克或Brij 35(聚氧乙烯月桂醚) 1克將組分A混勻,待用,將組分B混合后經(jīng)電動攪拌機攪拌,充分混勻,將混勺后的濕潤粉末置于真空干燥器中減壓24小時,取出再次攪拌混勻,待用;將組分A和組分B分別用100毫升和200毫升蒸餾水溶解,邊攪拌邊將組分A緩緩加入組分B中,用力振搖再加水至500毫升混勻,即可裝瓶備用。
另將測試管中放入血清50微升,標準管中放入標準液50微升,并在上述測試管、標準管和另取一空試管中各放入試劑3毫升,將各管混勻,37℃水浴20分鐘,取出放置室溫冷卻5分鐘,用波長628nm,1cm的比色杯,空白管調(diào)零點進行比色。
血清總蛋白濃度(g/dl)= (測試管OD)/(標準管OD) ×標準液濃度(g/dl)正常參考值為6~8g/dl本發(fā)明的固體試劑質(zhì)量指標為精密度 批內(nèi) (n=10) SD=0.090 CV=1.29%批間 (n=25) SD=0.094 CV=1.31%準確度 回收率 97.6%線性范圍 2~10g/dl呈色后穩(wěn)定時間 60分鐘固體狀態(tài)保質(zhì)期 1年(室溫密閉保存)液體狀態(tài)保質(zhì)期 半年(室溫密閉保存)
權利要求
1.一種測定血清總蛋白用的固體試劑,其特征在于它是由硫酸銅、酒石酸鉀鈉、磷酸鈉、迭氮鈉和非離子表面活性劑組成的固體試劑。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種測定血清總蛋白用的試劑,其特征在于配成溶液后每升中的成分含量如下硫酸銅 2~4克/升酒石酸鉀鈉 4~8克/升磷酸鈉 10~20克/升迭氮鈉 0.5~1克/升非離子表面活性劑Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚)或Tween 20(聚氧乙烯山梨糖醇酐單月桂酸酯)或Tween 80(聚乙氧基油酸山梨糖醇) 2~4克/升或Brij 35(聚氧乙烯月桂醚) 1~3克/升蒸餾水 余量
全文摘要
本發(fā)明涉及的是一種測定血清總蛋白用的固體試劑,其主要成分為硫酸銅、酒石酸鉀鈉、磷酸鈉、迭氮鈉和非離子表面活性劑。本發(fā)明的固體試劑,其重量和體積均大大小于液體雙縮脲試劑,操作簡單,使用方便,呈色穩(wěn)定,便于包裝、運輸和貯存,用于實踐有著優(yōu)良的準確度和精密度。
文檔編號G01N33/50GK1057525SQ9110062
公開日1992年1月1日 申請日期1991年2月5日 優(yōu)先權日1991年2月5日
發(fā)明者趙桂蘭, 孫友波, 王鳳林, 張暉, 林濤 申請人:中國人民解放軍302醫(yī)院
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