技術(shù)特征：

1.一種快速檢測唾液中甲基苯丙胺的熒光猝滅免疫層析試紙，其特征在于，包括樣品墊、玻璃纖維濾紙、金標(biāo)墊、nc膜和吸水墊，所述nc膜上依次設(shè)置量子點偶聯(lián)甲基苯丙胺抗原形成的檢測線和量子點偶聯(lián)牛血清白蛋白形成的質(zhì)控線，所述金標(biāo)墊上涂有aunps-mab猝滅劑，所述aunps-mab猝滅劑通過膠體金與甲基苯丙胺抗體偶聯(lián)制得。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的熒光猝滅免疫層析試紙，其特征在于，所述量子點作為熒光供體，所述膠體金作為熒光受體。

3.權(quán)利要求1或2所述的熒光猝滅免疫層析試紙的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述pb緩沖液由0.01m，0.72gna2hpo4和0.12g?kh2po4溶于500ml水中配制得到。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)中，將膠體金在10000rpm下離心30min，并將沉淀用pb緩沖液復(fù)溶，用0.2mol/lk2co3調(diào)節(jié)膠體金ph為7～8，加入甲基苯丙胺抗體，黑暗中輕柔攪拌孵育30～60min；加入bsa溶液(10％，w/v)封閉膠體金的空白位點，孵育30～60min，將封閉后的溶液4℃，12000rpm離心，棄上清，將沉淀用重懸緩沖液復(fù)溶，4℃避光保存。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中，取0.5～1nmol?qds，用超純水調(diào)整濃度至1～2μmol/l，然后加入60～100μl?100mg/ml的edc/nhs混合液，黑暗中孵育20～30min；加入300～400μg甲基苯丙胺抗原，黑暗中孵育40～60min；再加入100～200μl?100mg/ml的bsa溶液，黑暗中孵育40～60min；將封閉后的溶液于9000rpm離心15～20分鐘，棄上清，沉淀分散于pb緩沖液，4℃避光保存?zhèn)溆谩?/p>

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中，取0.5～1nmol?qds加入超純水至濃度1～2μmol/l，然后加入60～100μl?100mg/ml的edc/nhs混合液，黑暗中孵育20～30min；加入10～20mg?bsa，黑暗中孵育40～60min；將溶液于9000rpm離心15～20分鐘，棄上清，沉淀分散于pb緩沖液，4℃避光保存?zhèn)溆谩?/p>

8.權(quán)利要求1或2所述的熒光猝滅免疫層析試紙或者權(quán)利要求3至7任一項所述的制備方法制得的熒光猝滅免疫層析試紙在快速檢測唾液中甲基苯丙胺中的應(yīng)用。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述熒光猝滅免疫層析試紙用于定性篩查唾液中的甲基苯丙胺，檢測步驟包括：

10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述熒光猝滅免疫層析試紙用于定量檢測唾液中的甲基苯丙胺，檢測方法包括：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于毒品快速檢測技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種熒光猝滅免疫層析試紙、制備方法及其在快速檢測唾液中甲基苯丙胺的應(yīng)用，試紙包括樣品墊、玻璃纖維濾紙、金標(biāo)墊、NC膜和吸水墊，NC膜上依次設(shè)置量子點偶聯(lián)甲基苯丙胺抗原形成的檢測線和量子點偶聯(lián)牛血清白蛋白形成的質(zhì)控線，金標(biāo)墊上涂有AuNPs?mAb猝滅劑，AuNPs?mAb猝滅劑通過膠體金與甲基苯丙胺抗體偶聯(lián)制得。針對膠體金試紙條不能準(zhǔn)確定量的缺點，本發(fā)明提供的熒光猝滅免疫層析試紙可同時實現(xiàn)唾液樣品中甲基苯丙胺殘留的定性篩查和定量檢測；借助熒光定量讀卡儀，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，實現(xiàn)了唾液中甲基苯丙胺的準(zhǔn)確定量；本發(fā)明操作簡單、檢測快速、使用方便、靈敏度高、成本低。

技術(shù)研發(fā)人員：候冉冉,劉聰敏,孫一丹,張廣華,宋麗娟,曲麗華,劉志海,李秋
受保護的技術(shù)使用者：青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/26