背景技術(shù):
1、熒光染料是這樣的化合物,當(dāng)用其吸收的波長(zhǎng)的光照射時(shí),其發(fā)出(通常)不同波長(zhǎng)的光。熒光染料在生物化學(xué)、生物學(xué)和醫(yī)學(xué)中有多種應(yīng)用,例如用于診斷試劑盒、顯微術(shù)或藥物篩選。熒光染料的特征在于允許用戶根據(jù)期望的目的選擇合適的染料的多個(gè)參數(shù)。感興趣的參數(shù)包括激發(fā)波長(zhǎng)最大值、發(fā)射波長(zhǎng)最大值、斯托克斯位移、消光系數(shù)、熒光量子產(chǎn)額和熒光壽命。可以根據(jù)感興趣的應(yīng)用選擇染料,以便例如允許激發(fā)輻射穿透到生物樣品中,從而使背景熒光最小化并且/或者實(shí)現(xiàn)高信噪比。
2、分子識(shí)別涉及兩個(gè)分子的特異性結(jié)合。對(duì)靶標(biāo)生物分子具有結(jié)合特異性的分子可用于各種研究和診斷應(yīng)用,諸如分析物的標(biāo)記和分離、流式細(xì)胞術(shù)、原位雜交、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(elisa)、蛋白質(zhì)印跡分析、磁性細(xì)胞分離和色譜。靶標(biāo)生物分子可以通過(guò)用熒光染料標(biāo)記來(lái)檢測(cè)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本文提供了單域抗體/聚合物熒光串聯(lián)染料綴合物。本文提供的綴合物的方面包括:具有一個(gè)或多個(gè)與其綴合的聚合物串聯(lián)熒光染料的單域抗體。在一些情況下,聚合物串聯(lián)熒光染料包括:(i)由非共軛重復(fù)單元組成的聚合物骨架;(ii)多個(gè)懸垂供體生色團(tuán)基團(tuán),每個(gè)基團(tuán)獨(dú)立地連接到聚合物骨架的非共軛重復(fù)單元;以及(iii)一個(gè)或多個(gè)懸垂受體熒光團(tuán),其連接到聚合物骨架的非共軛重復(fù)單元,其中懸垂供體和受體熒光團(tuán)處于能量轉(zhuǎn)移關(guān)系。本文還提供了使用綴合物的方法,例如,用于評(píng)估樣品中靶標(biāo)分析物的存在的方法,以及包含可用于該方法的實(shí)施方案的綴合物的試劑盒。
1.一種單域抗體/聚合物熒光串聯(lián)染料綴合物,所述綴合物包含:
2.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的綴合物,其中所述單域抗體特異性地結(jié)合至細(xì)胞內(nèi)抗原或細(xì)胞表面抗原。
3.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的綴合物,其中所述單域抗體特異性地結(jié)合至一抗。
4.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的綴合物,其中所述綴合物包含綴合至所述單域抗體的兩個(gè)或更多個(gè)聚合物串聯(lián)熒光染料。
5.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的綴合物,其中所述聚合物串聯(lián)熒光染料由下式描述:
6.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的綴合物,其中所述懸垂供體熒光團(tuán)被配置成彼此鄰近能量轉(zhuǎn)移。
7.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的綴合物,其中所述懸垂供體熒光團(tuán)被水溶基團(tuán)取代。
8.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的綴合物,其中所述受體熒光團(tuán)是小分子熒光團(tuán)。
9.一種評(píng)估樣品中靶標(biāo)分析物的存在的方法,所述方法包括:
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法,其中所述靶標(biāo)分析物與細(xì)胞締合。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法,其中所述靶標(biāo)分析物是細(xì)胞表面標(biāo)志物或細(xì)胞內(nèi)靶標(biāo)。
12.根據(jù)權(quán)利要求9至11中任一項(xiàng)所述的方法,其中所述測(cè)定包括用流式細(xì)胞術(shù)分析所述測(cè)定組合物。
13.一種試劑盒,其包含: