本發(fā)明涉及微流控，特別涉及基于微流控技術的化學發(fā)光免疫盤片及其工作方法。
背景技術：
目前，流行的全自動管式發(fā)光檢測的流程為：1、在檢測管內完成樣本、磁珠抗體、酶標抗體的混合孵育；2、用磁鐵將磁珠吸附在管壁后將液體吸走；3、移開磁場，加入清洗液后混勻磁珠，用磁鐵將磁珠吸附在管壁后將液體吸走；4、重復步驟3兩次；5、移開磁場，加入底物混勻后進行發(fā)光檢測。
現有的管式化學發(fā)光的試劑用量比較大，對于試劑成本較高的化學發(fā)光來說減少試劑使用量可以顯著降低用戶的檢測成本，特別是對于基層的醫(yī)療機構，他們需要小型化、簡單化的檢驗設備。
基于微流控技術的化學發(fā)光免疫檢測盤片，其配套設備體積小，價格相對于大型全自動儀器大大降低，設備沒有廢液排放，對于環(huán)境的保護和用戶的安全都起到非常良好的作用。
申請?zhí)枮?01610319568.9的專利“一種微流控化學發(fā)光免疫檢測裝置及其使用方法”描述了一種用于全血化學發(fā)光免疫檢測的微流控盤片裝置，在逐步提高電機轉速的情況下，將不同的液體逐步加入到反應槽中，最終完成化學發(fā)光檢測。該專利在清洗的步驟中采用液體替換的方式，清洗效果相對來說不夠徹底。
技術實現要素：
為解決上述現有技術方案中的不足，本發(fā)明提供了一種試劑消耗量小、檢測時間短、清洗效果好、收光效率高的基于微流控技術的化學發(fā)光免疫盤片。
本發(fā)明的目的是通過以下技術方案實現的：
一種基于微流控技術的化學發(fā)光免疫盤片，所述基于微流控技術的化學發(fā)光免疫盤片包括加樣口、試劑口及檢測槽；所述基于微流控技術的化學發(fā)光免疫盤片進一步包括：
過渡槽；與所述檢測槽相比，所述過渡槽更加遠離所述盤片的旋轉中心；
第一通道，所述第一通道的一端連通所述檢測槽的遠離所述旋轉中心的端部，另一端連通所述過渡槽，中間為彎折部；所述第一通道的最小旋轉半徑小于所述檢測槽的最大旋轉半徑；
廢液槽；與所述過渡槽相比，所述廢液槽更加遠離所述盤片的旋轉中心；所述過渡槽與所述廢液槽連通。
本發(fā)明的目的還在于提供了一種試劑消耗量小、檢測時間短、清洗效果好的基于微流控技術的化學發(fā)光免疫盤片的工作方法，該發(fā)明目的是通過以下技術方案得以實現的：
根據上述的基于微流控技術的化學發(fā)光免疫盤片的工作方法，所述工作方法為：
孵育階段：通過加樣口和試劑口向檢測槽內加入樣本、磁珠抗體，并孵育；檢測槽內液面的旋轉半徑大于第一通道的最小旋轉半徑；
排廢階段：利用磁場吸住檢測槽內的磁珠；
通過所述試劑口加入清洗液，在盤片的旋轉中，檢測槽內的液面的旋轉半徑小于所述第一通道的最小旋轉半徑；檢測槽內的液體通過第一通道、過渡槽進入廢液槽；
清洗階段：通過所述試劑口加入清洗液，清洗所述磁珠。
與現有技術相比，本發(fā)明具有的有益效果為：
1.所有的試劑加樣量都在20微升級別，相對于傳統(tǒng)管式化學發(fā)光試劑量少，降低了成本；
2.整個檢測槽的面積都納入pmt的收光窗口，比管式發(fā)光的收光效率高；
3.通過電機帶動的正轉-反轉振蕩模式實現磁珠和液體充分混勻，加快了反應的進程，縮短了檢測時間；
4.通過特殊設計的第一通道和磁鐵吸附磁珠共同作用，實現良好的清洗效果。
附圖說明
參照附圖，本發(fā)明的公開內容將變得更易理解。本領域技術人員容易理解的是：這些附圖僅僅用于舉例說明本發(fā)明的技術方案，而并非意在對本發(fā)明的保護范圍構成限制。圖中：
圖1是根據本發(fā)明實施例1的基于微流控技術的化學發(fā)光免疫盤片的結構簡圖。
具體實施方式
圖1和以下說明描述了本發(fā)明的可選實施方式以教導本領域技術人員如何實施和再現本發(fā)明。為了教導本發(fā)明技術方案，已簡化或省略了一些常規(guī)方面。本領域技術人員應該理解源自這些實施方式的變型或替換將在本發(fā)明的范圍內。本領域技術人員應該理解下述特征能夠以各種方式組合以形成本發(fā)明的多個變型。由此，本發(fā)明并不局限于下述可選實施方式，而僅由權利要求和它們的等同物限定。
實施例1：
圖1示意性地給出了本發(fā)明實施例的基于微流控技術的化學發(fā)光免疫盤片的結構簡圖，如圖1所示，所述基于微流控技術的化學發(fā)光免疫盤片包括：
加樣口22、試劑口(包括磁珠抗體加入口、酶標抗體加入口及清洗液加入口)21、23-24及檢測槽；這些都是本領域的現有技術，在此不再贅述；
過渡槽；與所述檢測槽相比，所述過渡槽更加遠離所述盤片的旋轉中心11；所述過渡槽到的最小旋轉半徑大于所述檢測槽的最大旋轉半徑；
第一通道31，所述第一通道31的一端連通所述檢測槽的遠離所述旋轉中心的端部，另一端連通所述過渡槽，中間為彎折部；所述第一通道的最小旋轉半徑小于所述檢測槽的最大旋轉半徑；
廢液槽；與所述過渡槽相比，所述廢液槽更加遠離所述盤片的旋轉中心；所述過渡槽與所述廢液槽連通；
排氣口41，所述排氣口通過第二通道32連通所述過渡槽和/或廢液槽；所述排氣口的旋轉半徑小于所述檢測槽的最小旋轉半徑。
本發(fā)明實施例的根據上述化學發(fā)光免疫盤片的工作方法，所述工作方法為：
孵育階段：通過加樣口和試劑口向檢測槽內加入樣本、磁珠抗體，并孵育；檢測槽內液面的旋轉半徑大于第一通道的最小旋轉半徑；
排廢階段：利用磁場吸住檢測槽內的磁珠；
通過所述試劑口加入清洗液，在盤片的旋轉中，檢測槽內的液面的旋轉半徑小于所述第一通道的最小旋轉半徑；檢測槽內的液體通過第一通道、過渡槽進入廢液槽；
清洗階段：通過所述試劑口加入清洗液，清洗所述磁珠。
為了進一步提高磁珠的清洗效果，進一步地，所述清洗階段進一步包括以下步驟：
(a1)通過所述試劑口加入清洗液，在盤片的旋轉中，檢測槽內的液面的旋轉半徑大于所述第一通道的最小旋轉半徑；
(a2)撤去磁場，加強磁珠與清洗液的混合；
(a3)利用磁場吸住檢測槽內的磁珠；
通過所述試劑口加入清洗液，在盤片的旋轉中，檢測槽內的液面的旋轉半徑小于所述第一通道的最小旋轉半徑；檢測槽內的液體通過第一通道、過渡槽進入廢液槽。
為了進一步提高混合效果，進一步地，在孵育階段和/或清洗階段，通過盤片的正轉-反轉-正轉，提高檢測槽內磁珠和液體的混合效果。
實施例2：
本發(fā)明實施例的一種基于微流控技術的化學發(fā)光免疫盤片，與實施例1不同的是：
1.所述第一通道的最小旋轉半徑小于所述檢測槽的最小旋轉半徑。
2.所述第一通道內壁具有疏水層。
實施例3：
根據本發(fā)明實施例2的基于微流控技術的化學發(fā)光免疫盤片及工作方法在堿性磷酸酶化學發(fā)光檢測中的應用例。
在該應用例中，基于微流控技術的化學發(fā)光免疫盤片的工作方法，所述工作方法包括以下步驟：
孵育階段：
整個盤片處于37℃下的檢測倉中，加入樣本，體積為1到50微升之間，典型的為10微升；
加入磁珠抗體，體積為1到100微升之間，典型的為20微升；
加入酶標抗體，體積為1到100微升之間，典型的為20微升；
啟動電機，盤片旋轉的典型速度為1500轉/分鐘，液體進入反應檢測槽中；
進入孵育階段，電機啟動振蕩模式，在正轉-反轉-正轉的重復周期中抗原抗體充分接觸，快速地完成免疫反應，反應檢測槽和過渡槽之間通過第一通道連接在一起，由于加入的樣本、磁珠抗體及酶標抗體的總體積小于反應檢測槽的體積，檢測槽中的液面的旋轉半徑大于第一通道的最小旋轉半徑；另外第一通道的內表面為疏水特性，在整個振蕩模式過程中第一通道都處于未連通狀態(tài)；
排廢階段：
在反應檢測槽處加入磁場，將磁珠吸附在反應檢測槽的底部；
在檢測槽內中加入足夠量的清洗液啟動電機旋轉，典型轉速為1500轉/分鐘，清洗液進入反應檢測槽，液體的總體積大于反應檢測槽的體積(檢測槽中的液面的旋轉半徑小于第一通道的最小旋轉半徑)，第一通道充滿液體，典型的清洗液體積為100微升，廢液槽與過渡槽之間通過一條流道連通，過渡槽的設計有效地防止了在振蕩模式下廢液槽中的液體與第一通道發(fā)生接觸；
電機繼續(xù)旋轉，反應檢測槽中的液體都將經過第一通道和過渡槽而進入廢液槽中；
清洗階段：
加入一定量的清洗液，啟動電機旋轉，典型轉速為1500轉/分鐘，清洗液進入反應檢測槽，清洗液的體積大于反應檢測槽的體積，典型的清洗液體積為50微升；
撤掉磁場，啟動振蕩模式(盤片在電機驅動下正轉-反轉-正轉)，讓混合清洗效果達到最佳；
再次加入磁場，在反應檢測槽中吸住磁珠；
加入一定量的清洗液啟動電機旋轉，典型轉速為1500轉/分鐘，清洗液進入反應檢測槽，清洗液的總體積大于反應檢測槽的體積(檢測槽中的液面的旋轉半徑小于第一通道的最小旋轉半徑)，第一通道聯(lián)通，清洗液經過第一通道和過渡槽，最終進入廢液槽中；
重復上述清洗方式1到2次，確保清洗效果滿足要求；
檢測階段：
加入一定量的底物啟動電機旋轉，典型轉速為1500轉/分鐘，底物進入反應檢測槽，底物的體積小于反應檢測槽的體積，典型的底物體積為50微升；
撤掉磁場，啟動振蕩模式，讓磁珠與底物充分混合，在反應檢測槽中進行發(fā)光光強檢測。