技術(shù)特征:
技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種檢測(cè)雞蛋清中溶菌酶的方法,該方法包括如下步驟:(1)用2μg/mL的單克隆抗體3E4包被ELISA板,100μL/孔,4℃包被過(guò)夜;(2)0.5%的PBST洗滌3次,5min/次,拍干;(3)加入2.5%脫脂奶粉溶液封閉,200μL/孔,37℃包被1h;(4)0.5%的PBST洗滌3次,5min/次,拍干;(5)加入系列稀釋的溶菌酶標(biāo)準(zhǔn)品溶液、待檢樣品、及1:1600倍稀釋的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的多克隆抗體,各100μL/孔,37℃孵育1h;(6)0.5%的PBST洗滌3次,5min/次,拍干;(7)加入TMB底物溶液,100μL/孔,37℃避光反應(yīng)15min;(8)加入3M硫酸終止反應(yīng),50μL/孔;(9)酶標(biāo)儀450nm處讀值,記錄OD值;(10)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),計(jì)算待檢樣品中雞蛋蛋清中溶菌酶的含量。本發(fā)明的溶菌酶的檢測(cè)方法,檢測(cè)程序簡(jiǎn)單易操作,檢測(cè)時(shí)間不長(zhǎng),且高靈敏度,可用于制備快速、有效、低成本的抗原檢測(cè)試劑盒。
技術(shù)研發(fā)人員:李紅;嚴(yán)華祥;易建中;劉成倩
受保護(hù)的技術(shù)使用者:上海佳牧生物制品有限公司
技術(shù)研發(fā)日:2017.04.18
技術(shù)公布日:2017.08.18