本發(fā)明涉及的是海參的品種鑒定技術(shù)領(lǐng)域，具體的說是一種區(qū)分不同海參品種的分析鑒定方法。
背景技術(shù)：
海參一直是廣受人們推崇的海洋珍品，名列海味八珍之首。刺參是目前我國唯一規(guī)?；B(yǎng)殖的海參品種。但近年來刺參的養(yǎng)殖相繼出現(xiàn)了生長緩慢、死亡率升高、病害頻發(fā)等一系列問題，刺參種質(zhì)顯著下降，于是，海參的國外引種及相關(guān)養(yǎng)殖非常熱門，如從日本、俄羅斯等國家引進(jìn)了紅海參，從加拿大、美國引進(jìn)了加利福尼亞海參等，以期提高海參種質(zhì)資源的遺傳多樣性，滿足目前日益增長的市場需求及急劇下降的野生資源危機(jī)，增加國內(nèi)海參養(yǎng)殖品種的多樣性。如何區(qū)分不同的海參品種問題迫在眉睫。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的缺陷和不足，提供了一種區(qū)分不同海參品種的分析鑒定方法。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：一種區(qū)分不同海參品種的分析鑒定方法，步驟是：
一、顯微鏡骨片鑒定方法是：
(1)將采集的海參個體，用無水乙醇固定；
(2)從海參背脊中部，切取1cmzx1mm的體壁組織，作為分析樣品；
(3)每個樣品3個重復(fù)，雙蒸水洗凈，用滅菌吸水紙吸干水分，至于5ml小燒杯中(每個樣品配有單獨(dú)的燒杯和吸管，防止相互污染)；
(4)滴加1ml100onaclo溶液消化30s；
(5)挑出未消化的組織塊，滴加3ml雙蒸水，待組織塊完全消融沉淀；
(6)吸去上層溶液，滴加雙蒸水，重復(fù)漂洗3次；
(7)通過顯微鏡觀察；
二、掃描電鏡的制樣方法是：
(1)在顯微鏡下吸取骨片懸液，小心滴加在濾紙上；
(2)用65℃的溫度進(jìn)行烘干4h；
(3)輕柔抖動濾紙，使骨片散落至膠膜上；
(4)hitachie-1010型離子濺射儀噴鍍金膜；
(5)用hitachis-3400n掃描電鏡觀察并攝影。
本發(fā)明的有益效果為：除了從外形、棘刺和凸起等特征方面來區(qū)分外，采用了顯微鏡骨片差異輔助掃描電鏡的方法進(jìn)行鑒定。在顯微鏡下，可以發(fā)現(xiàn)不同形狀的骨片，骨片是隨海參胚胎發(fā)育而逐漸完善穩(wěn)定的重要特征，形狀、大小隨種類的不同而差別很大，骨片是進(jìn)行海參分類及快速鑒別的重要依據(jù)。
具體實(shí)施方式
為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合具體實(shí)施方式，對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施方式僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
實(shí)施例：
一種區(qū)分不同海參品種的分析鑒定方法，步驟是：
一、顯微鏡骨片鑒定方法是：
(1)將采集的海參個體，用無水乙醇固定；
(2)從海參背脊中部，切取1cmzx1mm的體壁組織，作為分析樣品；
(3)每個樣品3個重復(fù)，雙蒸水洗凈，用滅菌吸水紙吸干水分，至于5ml小燒杯中(每個樣品配有單獨(dú)的燒杯和吸管，防止相互污染)；
(4)滴加1ml100onaclo溶液消化30s；
(5)挑出未消化的組織塊，滴加3ml雙蒸水，待組織塊完全消融沉淀；
(6)吸去上層溶液，滴加雙蒸水，重復(fù)漂洗3次；
(7)通過顯微鏡觀察。
二、掃描電鏡的制樣方法是：
(1)在顯微鏡下吸取骨片懸液，小心滴加在濾紙上；
(2)用65℃的溫度進(jìn)行烘干4h；
(3)輕柔抖動濾紙，使骨片散落至膠膜上；
(4)hitachie-1010型離子濺射儀噴鍍金膜；
(5)用hitachis-3400n掃描電鏡觀察并攝影。
本具體實(shí)施方式除了從外形、棘刺和凸起等特征方面來區(qū)分外，采用了顯微鏡骨片差異輔助掃描電鏡的方法進(jìn)行鑒定。通過在顯微鏡下，可以發(fā)現(xiàn)不同形狀的骨片。骨片是隨海參胚胎發(fā)育而逐漸完善穩(wěn)定的重要特征，形狀、大小隨種類的不同而差別很大，骨片是進(jìn)行海參分類及快速鑒別的重要依據(jù)。骨片分析是海參快速鑒定的理想指標(biāo)。
雖然發(fā)現(xiàn)取海參的不同部位，比如背脊部、腹部觸手、口部和肛門部組織，其骨片的特征有所不同，但通過取海參相同部位可以有效規(guī)避這個問題。
對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，顯然本發(fā)明不限于上述示范性實(shí)施例的細(xì)節(jié)，而且在不背離本發(fā)明的精神或基本特征的情況下，能夠以其他的具體形式實(shí)現(xiàn)本發(fā)明。因此，無論從哪一點(diǎn)來看，均應(yīng)將實(shí)施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求而不是上述說明限定，因此旨在將落在權(quán)利要求的等同要件的含義和范圍內(nèi)的所有變化囊括在本發(fā)明內(nèi)。
此外，應(yīng)當(dāng)理解，雖然本說明書按照實(shí)施方式加以描述，但并非每個實(shí)施方式僅包含一個獨(dú)立的技術(shù)方案，說明書的這種敘述方式僅僅是為清楚起見，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)將說明書作為一個整體，各實(shí)施例中的技術(shù)方案也可以經(jīng)適當(dāng)組合，形成本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解的其他實(shí)施方式。