本發(fā)明涉及生物化學技術領域，具體涉及一種微量殘留環(huán)氧乙烷的檢測方法。
背景技術：
在無菌醫(yī)療器械領域，對產(chǎn)品進行滅菌是至關重要的步驟。環(huán)氧乙烷滅菌法是常用的滅菌方法之一，其原理是利用高濃度的有毒環(huán)氧乙烷氣體充滿產(chǎn)品所在空間，對產(chǎn)品所帶的各種微生物進行殺滅。盡管滅菌過后會對產(chǎn)品進行解析，但難免會有微量環(huán)氧乙烷的殘留，為了避免殘留的環(huán)氧乙烷在醫(yī)療器械使用過程中，對人體造成危害，需要對環(huán)氧乙烷殘留進行檢驗，以保證殘留量在安全范圍內(nèi)。
檢測環(huán)氧乙烷的殘留量，目前一般采用氣相色譜法檢測。通常采用液體進樣檢測環(huán)氧乙烷時，由于進樣量小(約1ul)，環(huán)氧乙烷濃度低，微小的進樣量誤差就會導致檢測結(jié)果的較大誤差。同時，由于制樣過程中容易混入各種雜質(zhì)，隨進樣過程進入檢測系統(tǒng)造成干擾。
為了解決上述技術問題，本發(fā)明由此而來。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明所要解決的技術問題是克服現(xiàn)有技術液體進樣檢測環(huán)氧乙烷的殘留量的誤差較大的缺陷，提供一種微量殘留環(huán)氧乙烷的檢測方法，采用頂空氣體進樣法進行測試，由于進樣介質(zhì)從液體改為氣體，可以顯著提升進樣體積，減少進樣量帶來的誤差，同時也避免了液體進樣時雜質(zhì)過多的缺點。
本發(fā)明的技術方案是，微量殘留環(huán)氧乙烷的檢測方法，其包括如下步驟：
(1)繪制環(huán)氧乙烷的標準曲線
A.取適量環(huán)氧乙烷置于頂空氣相進樣瓶中，加入適量的純化水，配制成環(huán)氧乙烷溶液，將溶液稀釋成梯度標準系列濃度，分別取各已知濃度標準品溶液，分別裝入頂空進樣瓶，
B.將裝有標準品溶液的密封頂空瓶放入60℃的恒溫水浴進行預處理，使瓶內(nèi)環(huán)氧乙烷蒸汽壓達到平衡，
C.用進樣針抽取頂空瓶內(nèi)上層氣體200μL～1000μL，進樣，使用氣相色譜儀進行檢測，記錄出峰時間和峰面積，
D.以不同的標準品溶液濃度為橫坐標，相應的峰面積為縱坐標，繪制出標準曲線；
(2)以待測樣品為試樣，將樣品截成小段裝入頂空進樣瓶，取與標準品溶液相同體積的純化水加入，采用步驟(1)中的B-C的方法，測定樣品的峰面積，對照前述的標準曲線算出樣品中環(huán)氧乙烷含量。
本發(fā)明優(yōu)選的技術方案中，所述步驟(1)中C，用進樣針抽取頂空瓶內(nèi)上層氣體500μL。
本發(fā)明優(yōu)選的技術方案中，所述步驟(1)中C，采用弱極性毛細柱對環(huán)氧乙烷進行分離檢測。
本發(fā)明優(yōu)選的技術方案中，所述步驟(1)中C，采用安捷倫HP-5柱對環(huán)氧乙烷進行分離檢測。
本發(fā)明優(yōu)選的技術方案中，所述步驟(1)中C，氣相色譜儀的檢測條件為：針對色譜柱的內(nèi)徑，將載氣，氫氣和空氣的氣壓均設置為0.12MPa，使檢測器能順利點火；測定的條件進樣器溫度200℃，柱溫120℃，檢測器溫度250℃，在此溫度下目標峰和雜峰能有效分開，且出峰時間較快，提高檢測效率，頂空瓶水浴的溫度設置為60℃，在此溫度下使環(huán)氧乙烷充分揮發(fā)至上層空氣中；分流比設置為5:1，目標峰不至于拖尾，且具有較大的峰面積，便于積分計算。
本發(fā)明的優(yōu)點在于：采用頂空進樣法，將樣品放入裝有水的頂空進樣瓶中浸提，在適當?shù)臏囟认?，環(huán)氧乙烷會揮發(fā)至上部空氣，而其他沸點較高的雜質(zhì)則不易揮發(fā)，用進樣器吸取上部空氣進樣，進樣量遠大于液體進樣，進樣誤差小。使用安捷倫HP-5或類似極性的毛細柱，出峰時間早，且能夠與雜質(zhì)峰分離，提高了檢測速率。
附圖說明
圖1為微量殘留環(huán)氧乙烷的檢測方法一實施例的流程示意圖。
具體實施方式
以下結(jié)合具體實施例對上述方案做進一步說明。應理解，這些實施例是用于說明本發(fā)明而不限于限制本發(fā)明的范圍。實施例中采用的實施條件可以根據(jù)具體廠家的條件做進一步調(diào)整，未注明的實施條件通常為常規(guī)實驗中的條件。
介紹和概述
本發(fā)明通過舉例而非給出限制的方式來進行說明。應注意的是，在本公開文件中所述的“一”或“一種”實施方式未必是指同一種具體實施方式，而是指至少有一種。
下文將描述本發(fā)明的各個方面。然而，對于本領域中的技術人員顯而易見的是，可根據(jù)本發(fā)明的僅一些或所有方面來實施本發(fā)明。為說明起見，本文給出具體的編號、材料和配置，以使人們能夠透徹地理解本發(fā)明。然而，對于本領域中的技術人員將顯而易見的是，本發(fā)明無需具體的細節(jié)即可實施。在其他例子中，為不使本發(fā)明費解而省略或簡化了眾所周知的特征。
實施例1
1.環(huán)氧乙烷標準液的配制
1.1在25ml的容量瓶中先稱取約20g水，并稱重，精確到0.1mg，用滴管吸取約50-100mg環(huán)氧乙烷，迅速加入瓶中，蓋緊瓶蓋，輕輕搖勻，稱重，精確到0.1mg。兩次的重量差為所加環(huán)氧乙烷的質(zhì)量，定容后作為母液，計算出母液中環(huán)氧乙烷濃度，放入冰箱待用。
1.2將母液分別稀釋，配制成環(huán)氧乙烷濃度為1μg/mL,2μg/mL,4μg/mL,6μg/mL,8μg/mL,10μg/mL的標準溶液，取5g標準液裝入20mL頂空瓶中(每個濃度的標準液兩份)，放入60℃水浴鍋水浴30分鐘。
2.試樣制備
試驗樣制備應在取樣后立即進行，將支架系統(tǒng)自外桿近端到尖端部分(包括襯絲)，截為5mm碎塊，放入頂空進樣瓶中稱重，加水5g，蓋緊瓶蓋，搖勻，放入60℃水浴鍋水浴30分鐘。
3.試驗步驟
用玻璃注射器按濃度由低到高的順序依次從制備好的標準樣和供試樣中取1000μL上層氣體，注入進樣器，記錄環(huán)氧乙烷的峰面積，每一樣品平行進樣2針，面積響應值的相對偏差應≤5％，取平均值含量。
4.結(jié)果計算
以同一濃度兩次進樣的平均峰面積計算標準曲線，將供試樣的峰面積帶入標準曲線，計算出供試樣中環(huán)氧乙烷的濃度。
4.1計算樣品中環(huán)氧乙烷殘留：
Md＝(C1*M水)/M樣
式中：C1---供試品溶液中環(huán)氧乙烷的濃度，μg/g；
M水---供試品溶液中水的總重量，g
M樣---樣品的質(zhì)量，g
Md---樣品中殘留環(huán)氧乙烷的量，μg/g
以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點。本行業(yè)的技術人員應該了解，本發(fā)明不受上述實例的限制，上述實例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下本發(fā)明還會有各種變化和改進，這些變化和改進都落入要求保護的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護范圍由所附的權利要求書及其等同物界定。