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實(shí)時、痕量、修飾性標(biāo)志物的免疫質(zhì)譜試劑盒及制備方法與流程

文檔序號:12713929閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種實(shí)時、痕量、修飾性標(biāo)志物的免疫質(zhì)譜試劑盒,其特征在于,該試劑盒包括:

一小管質(zhì)控品,含七種等摩爾、變異的轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白、載脂蛋白A、β2微球蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、補(bǔ)體C3a、纖維蛋白肽A、載脂蛋白C亞基等標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的質(zhì)譜標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控血清,10~30μl;

一小管含等摩爾標(biāo)記的轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白、載脂蛋白A、β2微球蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、補(bǔ)體C3a、或纖維蛋白肽A、載脂蛋白C亞基抗體的磁珠30~50μl;

一小管粘合液300~500μl,該粘合液為50~100mM PBS,pH值為7.0~7.4;

一小管清洗液10~50μl,該清洗液為dH2O溶液;

一小管洗提液10~50μl,該洗提液為1~5%三氟乙酸的水溶液;

一小管穩(wěn)定劑5~10μl,該溶液由能量吸收分子溶解在含30~60%乙腈和0.5~1%三氟乙酸的水溶液中構(gòu)成,該能量吸收分子可以采用肉桂酸衍生物、芥子酸、二羥基苯甲酸之中的任一種;上述各小管置于4~8℃冷藏盒中。

2.如權(quán)利要求1所述的免疫質(zhì)譜試劑盒,其特征在于,所述能量吸收分子采用肉桂酸衍生物、芥子酸、二羥基苯甲酸之中的任一種。

3.一種制備如權(quán)利要求1所述的免疫質(zhì)譜試劑盒的方法,其特征在于,該方法包括以下步驟:

1)質(zhì)譜標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控血清的制備:將男性、女性等量的O型血清血清稀釋在緩沖溶液中制成質(zhì)譜的標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控血清血清,并將該稀釋的血清血清分裝成10~30μl小管中;加入等摩爾七種變異的轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白、載脂蛋白A、β2微球蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、補(bǔ)體C3a、纖維蛋白肽A、載脂蛋白C亞基;

2)制備含七種等摩爾轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白、載脂蛋白A、β2微球蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、補(bǔ)體C3a、纖維蛋白肽A、載脂蛋白C亞基抗體的磁珠:將轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白、載脂蛋白A、β2微球蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、補(bǔ)體C3a、纖維蛋白肽A、載脂蛋白C亞基免疫小鼠,待免疫反應(yīng)出現(xiàn)后,從外周血中分離B細(xì)胞,按標(biāo)準(zhǔn)的單克隆抗體的制備方法制備;將購買的FC-III雙環(huán)肽(DCAWHLGELVWCT)-磁珠30~50μl標(biāo)記上等摩爾的抗體;

3)將購買的50~100mM PBS(Phosphate-Buffered Saline),pH值為7.0~7.4緩沖液、1~5%三氟乙酸的洗脫液分別分裝成300~500μl小管和10~50μl小管;

4)將能量吸收分子溶解30~60%乙腈和0.5~1%三氟乙酸的水溶液中制成能量吸收分子飽和溶液,并分裝成5~10μl小管,該能量吸收分子可以采用肉桂酸衍生物、芥子酸、二羥基苯甲酸之中的任一種;

5)將上述分裝好的各小管置于4~8℃冷藏箱中。

4.如權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于,所述磁珠可以使用C8疏水基質(zhì)、C18疏水基質(zhì)、WCX基質(zhì)、或IMAC基質(zhì)之中的任一種。

5.一種如權(quán)利要求1所述免疫質(zhì)譜試劑盒對離體生物樣品的應(yīng)用。

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