1.一種基于抗凝血生化指數(shù)評(píng)價(jià)三七活血作用的方法,其特征在于,包括步驟:
1)測定三七中活性成分的含量;
2)檢測活性成分的抗凝血效應(yīng);
3)計(jì)算三七抗凝血生化指數(shù);
4)根據(jù)抗凝血生化指數(shù)來評(píng)價(jià)三七的活血作用并指導(dǎo)其用藥劑量調(diào)節(jié)。
2.如權(quán)利要求1所述的基于抗凝血生化指數(shù)評(píng)價(jià)三七活血作用的方法,其特征在于:所述步驟1)中的活性成分為人參皂苷Rg1,Re,Rb1和Rd。
3.如權(quán)利要求1所述的基于抗凝血生化指數(shù)評(píng)價(jià)三七活血作用的方法,其特征在于,所述步驟2)中抗凝血效應(yīng)檢測包括步驟:
①樣品溶液配制:精取人參皂苷Rg1、Re、Rb1和Rd,分別用生理鹽水配制成濃度梯度為0.05、0.15、0.30、0.45、0.60、0.75、0.90、1.05、1.20mg/mL的溶液;
②小鼠眼球靜脈取血,全血與抗凝劑9:1體積比混勻,2500r/min離心15min制備待測血漿,以體積比血漿:生理鹽水=2:1比例共50μL加入測定杯中,37℃預(yù)溫3min后加入共同預(yù)溫3~5min的0.1mol/L pH 7.4Tris-HCl緩沖液稀釋的10U/mL凝血活酶溶液100μL,記錄下凝血酶原初始時(shí)間PT0,用不同濃度的凝血活酶,測得凝血酶原時(shí)間PT,計(jì)算PT延長率(%),以lgPT延長率(%)對凝血酶原復(fù)合物濃度作圖,得到凝血活酶濃度對lgPT延長率(%)的影響的標(biāo)準(zhǔn)曲線,每個(gè)樣品至少重復(fù)測定3次;
③血漿-活性成分(2:1)混合血漿樣品50μL加入測定杯中,37℃預(yù)溫3min后加入共同預(yù)溫3~5min的10U/mL凝血活酶溶液100μL,記錄下PT',計(jì)算lgPT'延長率(%);
④根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線相對應(yīng)的凝血活酶濃度(Ui),計(jì)算活性成分對應(yīng)的凝血活酶抑制率(%):
凝血活酶抑制率(%)=(Ui-10)/10*100%;
⑤根據(jù)活性成分對凝血活酶的抑制率計(jì)算各成分抗凝血效應(yīng)EC50。
4.如權(quán)利要求3所述的基于抗凝血生化指數(shù)評(píng)價(jià)三七活血作用的方法,其特征在于:所述抗凝劑為0.109mol/L的枸櫞酸鈉。
5.如權(quán)利要求1所述的基于抗凝血生化指數(shù)評(píng)價(jià)三七活血作用的方法,其特征在于:所述步驟3)中計(jì)算三七抗凝血生化指數(shù):
BCI抗凝血=0.1160*XRg1+0.0777*XRe+0.0553*XRb1+0.1460*XRd;其中,XRg1、XRe、XRb1、XRd分別代表每0.3g三七中人參皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd的含量,%。
6.如權(quán)利要求1所述的基于抗凝血生化指數(shù)評(píng)價(jià)三七活血作用的方法,其特征在于,所述步驟(4)根據(jù)抗凝血生化指數(shù)來評(píng)價(jià)三七的活血作用并指導(dǎo)其用藥劑量調(diào)節(jié),包括以下步驟:
①根據(jù)抗凝血生化指數(shù)值大小評(píng)價(jià)三七活血作用;
②調(diào)節(jié)三七實(shí)際用藥劑量:
D實(shí)際=D目標(biāo)/BCI抗凝血;其中,D實(shí)際為待測三七的實(shí)際用量,D目標(biāo)為待測三七的目標(biāo)用量。
7.如權(quán)利要求1所述的基于抗凝血生化指數(shù)評(píng)價(jià)三七活血作用的方法,其特征在于:所述三七為五加科人參屬植物三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥主根、剪口、側(cè)根、飲片。