本發(fā)明涉及試劑穩(wěn)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體而言，涉及一種穩(wěn)定的氯化鈣溶液及其制備方法。
背景技術(shù)：
：在應(yīng)用化學(xué)及臨床檢驗領(lǐng)域，氯化鈣水溶液可用作功能性添加劑、分析試劑、醫(yī)療試劑等，一般采用粉末氯化鈣與純化水或去離子水制備氯化鈣溶液。氯化鈣與水的混合過程，會釋放出大量的熱。現(xiàn)有技術(shù)制備過程中，需要將固體氯化鈣緩慢地加入冷水中，并不斷攪拌，以免氯化鈣硬化而難以溶解。同時，氯化鈣溶液的pH易于降低，特別是盛放容器不斷開啟的過程中，空氣中包括二氧化碳在內(nèi)的物質(zhì)會與溶液中的物相反應(yīng)。另外，由于氯化鈣溶液近于中性或略偏弱堿性，在長時間盛放的過程中，易于滋生細(xì)菌微生物，導(dǎo)致氯化鈣溶液的性質(zhì)發(fā)生變化。現(xiàn)有技術(shù)中的氯化鈣水溶液往往是現(xiàn)配現(xiàn)用，穩(wěn)定期有限，無法長期穩(wěn)定儲存；目前，尚未見到解決上述問題的研究報告或?qū)＠墨I(xiàn)。有鑒于此，特提出本發(fā)明。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的第一目的在于提供一種穩(wěn)定的氯化鈣溶液，所述的穩(wěn)定的氯化鈣溶液pH值和氯化鈣濃度能夠長期保持穩(wěn)定，便于長期儲存使用，可用于分子生物學(xué)及臨床檢測領(lǐng)域。本發(fā)明的第二目的在于提供一種所述的穩(wěn)定的氯化鈣溶液的制備方法，該方法工藝簡單，各原料均能夠充分溶解，得到pH值和氯化鈣濃度能夠長期保持穩(wěn)定的氯化鈣溶液，能夠長期儲存，適于大規(guī)模生產(chǎn)。為了實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術(shù)方案：一種穩(wěn)定的氯化鈣溶液，所述氯化鈣溶液中還溶解有生物緩沖劑和氯化鈉。本發(fā)明在氯化鈣溶液中添加了生物緩沖劑和氯化鈉，通過生物緩沖劑和氯化鈉的綜合作用，能夠使氯化鈣溶液的pH值和濃度長期保持穩(wěn)定，便于長期儲存，可用于分子生物學(xué)及臨床檢測領(lǐng)域。優(yōu)選地，所述生物緩沖劑包括4-羥乙基哌嗪乙磺酸、三羥甲基氨基甲烷和3-嗎啉丙磺酸中的一種或多種，進(jìn)一步優(yōu)選包括4-羥乙基哌嗪乙磺酸、三羥甲基氨基甲烷或3-嗎啉丙磺酸。優(yōu)選地，所述氯化鈣溶液中氯化鈣的濃度為20-50mM，進(jìn)一步優(yōu)選為20-30mM。優(yōu)選地，所述氯化鈣溶液中生物緩沖劑的濃度為10-300mM，進(jìn)一步優(yōu)選為20-100mM。優(yōu)選地，所述氯化鈣溶液中氯化鈉的濃度為20-200mM，優(yōu)選為50-100mM。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述氯化鈣溶液中還溶解有苯酚。優(yōu)選地，所述氯化鈣溶液中苯酚的濃度為10-50mM，進(jìn)一步優(yōu)選為20-40mM。上述的一種穩(wěn)定的氯化鈣溶液的制備方法，將各原料在水中充分溶解得到穩(wěn)定的氯化鈣溶液。本發(fā)明方法工藝簡單，各原料均能夠充分溶解，得到pH值和氯化鈣濃度能夠長期保持穩(wěn)定的氯化鈣溶液，能夠長期儲存，適于大規(guī)模生產(chǎn)。優(yōu)選地，將除氯化鈣以外的其它原料分別在水中充分溶解，然后加入氯化鈣充分溶解得到穩(wěn)定的氯化鈣溶液。進(jìn)一步優(yōu)選地，所得穩(wěn)定的氯化鈣溶液經(jīng)過微孔濾膜過濾。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明在氯化鈣溶液中添加了生物緩沖劑和氯化鈉，通過生物緩沖劑和氯化鈉的綜合作用，能夠使氯化鈣溶液的pH值和濃度長期保持穩(wěn)定，便于長期儲存，可用于分子生物學(xué)及臨床檢測領(lǐng)域。本發(fā)明方法工藝簡單，各原料均能夠充分溶解，得到pH值和氯化鈣濃度能夠長期保持穩(wěn)定的氯化鈣溶液，能夠長期儲存，適于大規(guī)模生產(chǎn)。具體實施方式下面將結(jié)合具體實施方式對本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解，下列所描述的實施例是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例，僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限制本發(fā)明的范圍。基于本發(fā)明中的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。實施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。本發(fā)明提供了一種穩(wěn)定的氯化鈣溶液，所述氯化鈣溶液中還溶解有生物緩沖劑和氯化鈉。本發(fā)明在氯化鈣溶液中添加了生物緩沖劑和氯化鈉，通過生物緩沖劑和氯化鈉的綜合作用，能夠使氯化鈣溶液的pH值和濃度長期保持穩(wěn)定，便于長期儲存，可用于分子生物學(xué)及臨床檢測領(lǐng)域。優(yōu)選地，所述生物緩沖劑包括4-羥乙基哌嗪乙磺酸、三羥甲基氨基甲烷和3-嗎啉丙磺酸中的一種或多種，進(jìn)一步優(yōu)選包括4-羥乙基哌嗪乙磺酸、三羥甲基氨基甲烷或3-嗎啉丙磺酸。本發(fā)明選用特定成分的生物緩沖劑，能夠使氯化鈣溶液pH值保持長期穩(wěn)定的同時，還能夠使氯化鈣溶液的濃度長期保持穩(wěn)定，起到了意想不到的技術(shù)效果，采用特定成分的生物緩沖劑還能增強(qiáng)所得氯化鈣溶液的抗氧化性，進(jìn)一步促進(jìn)所得氯化鈣溶液保持長期穩(wěn)定；此外，采用生物緩沖劑可以使所得氯化鈣溶液能夠很好的用于分子生物學(xué)及臨床檢測領(lǐng)域。優(yōu)選地，所述氯化鈣溶液中氯化鈣的濃度為20-50mM，進(jìn)一步優(yōu)選為20-30mM。所述氯化鈣溶液中氯化鈣的濃度在特定范圍內(nèi)，能夠充分地受生物緩沖劑和氯化鈉的影響，有助于此濃度范圍內(nèi)的氯化鈣溶液的pH值和氯化鈣濃度保持長期穩(wěn)定，便于長期儲存，并且在此濃度范圍的氯化鈣溶液也能夠較好地用于分子生物學(xué)及臨床檢測領(lǐng)域。優(yōu)選地，所述氯化鈣溶液中生物緩沖劑的濃度為10-300mM，進(jìn)一步優(yōu)選為20-100mM。本發(fā)明氯化鈣溶液中生物緩沖劑的濃度在特定范圍內(nèi)，有助于其充分發(fā)揮作用，促進(jìn)氯化鈣溶液的pH值和氯化鈣濃度保持長期穩(wěn)定，便于長期儲存，并且生物緩沖劑在此濃度范圍內(nèi)也能夠較好地用于分子生物學(xué)及臨床檢測領(lǐng)域。優(yōu)選地，所述氯化鈣溶液中氯化鈉的濃度為20-200mM，優(yōu)選為50-100mM。氯化鈉是生物化學(xué)和醫(yī)藥領(lǐng)域常用的添加劑，本發(fā)明氯化鈣溶液中氯化鈉的濃度在特定范圍內(nèi)，有助于其充分發(fā)揮作用，促進(jìn)氯化鈣濃度保持長期穩(wěn)定，便于長期儲存，并且氯化鈉在此濃度范圍內(nèi)還能夠調(diào)節(jié)氯化鈣溶液的離子強(qiáng)度，同時也可以改善所得氯化鈣溶液在進(jìn)一步應(yīng)用時的蛋白反應(yīng)情況，并調(diào)節(jié)生物分子的電動電勢和等電點，能夠較好地用于分子生物學(xué)及臨床檢測領(lǐng)域。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述氯化鈣溶液中還溶解有苯酚。本發(fā)明氯化鈣溶液中還可以溶解部分苯酚，苯酚具有抗氧化性和抗菌性，可避免液相中溶質(zhì)的氧化，同時避免液相中滋長微生物，從而進(jìn)一步保護(hù)溶液長期穩(wěn)定。優(yōu)選地，所述氯化鈣溶液中苯酚的濃度為10-50mM，進(jìn)一步優(yōu)選為20-40mM。本發(fā)明氯化鈣溶液中苯酚的濃度在特定范圍內(nèi)，有助于其充分發(fā)揮作用，促進(jìn)所得氯化鈣溶液的抗氧化性和抗菌性的提高，進(jìn)一步避免液相中溶質(zhì)的氧化，同時避免液相中滋長微生物，促進(jìn)所得氯化鈣溶液的濃度保持長期穩(wěn)定。上述的一種穩(wěn)定的氯化鈣溶液的制備方法，將各原料在水中充分溶解得到穩(wěn)定的氯化鈣溶液。本發(fā)明方法工藝簡單，各原料均能夠充分溶解，得到pH值和氯化鈣濃度能夠長期保持穩(wěn)定的氯化鈣溶液，能夠長期儲存，適于大規(guī)模生產(chǎn)。優(yōu)選地，將除氯化鈣以外的其它原料分別在水中充分溶解，然后加入氯化鈣充分溶解得到穩(wěn)定的氯化鈣溶液。先將除氯化鈣以外的其它原料分別在水中充分溶解，然后加入氯化鈣充分溶解得到穩(wěn)定的氯化鈣溶液，氯化鈣直接溶解到穩(wěn)定體系中，有助于其充分完全溶解，降低其溶解難度，避免其在溶解過程中發(fā)生硬化或氧化還原反應(yīng)。進(jìn)一步優(yōu)選地，可以將各原料分別溶解在水中，然后將所得溶液分別混合攪拌均勻，促進(jìn)原料的快速充分溶解。優(yōu)選地，所述水包括純化水或注射用水。進(jìn)一步優(yōu)選地，所得穩(wěn)定的氯化鈣溶液經(jīng)過微孔濾膜過濾。經(jīng)過微孔濾膜過濾，可以有效除去溶液中可能含有的不溶部分，避免溶質(zhì)進(jìn)一步析出。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述微孔濾膜的孔徑為0.22μm。實施例1一種穩(wěn)定的氯化鈣溶液的制備方法，包括如下步驟：稱取2.38g4-羥乙基哌嗪乙磺酸、1.17g氯化鈉和2.22g氯化鈣，加入900mL純化水中，攪拌均勻，補水至1000mL，混勻，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾，得濃度為20mM的氯化鈣溶液。實施例2一種穩(wěn)定的氯化鈣溶液的制備方法，包括如下步驟：稱取23.83g4-羥乙基哌嗪乙磺酸、12.11g三羥甲基氨基甲烷、20.93g3-嗎啉丙磺酸、11.7g氯化鈉和5.55g氯化鈣，加入900mL純化水中，攪拌均勻，補水至1000mL，混勻，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾，得濃度為50mM的氯化鈣溶液。實施例3一種穩(wěn)定的氯化鈣溶液的制備方法，包括如下步驟：稱取2.42g三羥甲基氨基甲烷、2.93g氯化鈉、0.941g苯酚和2.22g氯化鈣，加入900mL純化水中，攪拌均勻，補水至1000mL，混勻，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾，得濃度為20mM的氯化鈣溶液。實施例4一種穩(wěn)定的氯化鈣溶液的制備方法，包括如下步驟：稱取20.93g3-嗎啉丙磺酸、5.85g氯化鈉、4.75g苯酚和3.33g氯化鈣，加入900mL純化水中，攪拌均勻，補水至1000mL，混勻，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾，得濃度為30mM的氯化鈣溶液。實施例5一種穩(wěn)定的氯化鈣溶液的制備方法，包括如下步驟：稱取4.77g4-羥乙基哌嗪乙磺酸、2.93g氯化鈉和1.88g苯酚，加入900mL純化水中，攪拌均勻，再加入2.22g氯化鈣，補水至1000mL，混勻，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾，得濃度為20mM的氯化鈣溶液。實施例6一種穩(wěn)定的氯化鈣溶液的制備方法，包括如下步驟：稱取4.77g4-羥乙基哌嗪乙磺酸、5.85g氯化鈉、3.76g苯酚和3.33g氯化鈣，加入900mL純化水中，攪拌均勻，補水至1000mL，混勻，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾，得濃度為30mM的氯化鈣溶液。實施例7制備兩種氯化鈣溶液：溶液1：稱取4.77g4-羥乙基哌嗪乙磺酸和5.85g氯化鈉，加入900mL純化水中，攪拌均勻，加入2.22g氯化鈣，補水至1000mL，混勻，經(jīng)微孔濾膜過濾，得濃度為20mM的氯化鈣溶液。溶液2：稱取2.22g氯化鈣，加入1000mL純化水中，混勻，經(jīng)微孔濾膜過濾，得到理論值為20mM的氯化鈣溶液。將制備的氯化鈣溶液1和2，在室溫條件下保存1個月，每天定時檢測溶液1和溶液2的氯化鈣濃度，測量中，每次取各溶液10mL，分別加入過量的碳酸鈉溶液，對生成的沉淀物(碳酸鈣)洗滌、干燥，測定碳酸鈣的重量，計算溶液中氯化鈣的濃度值。計算結(jié)果見表1。結(jié)果表明，在共計30天的測量期內(nèi)，溶液1中氯化鈣的濃度值變化很小，而溶液2的氯化鈣濃度變化較大，減少幅度大。表1室溫條件下溶液1和溶液2的濃度變化溶液1/mM溶液2/mM均值19.8919.52最大值2020最小值19.719.1均方差0.1320.328變異系數(shù)CV0.66％1.68％線性方程y＝-0.0134x+20.098y＝-0.0365x+20.089上述結(jié)果表明，在一個月之內(nèi)，在氯化鈣溶液中，添加4-羥乙基哌嗪乙磺酸和氯化鈉后，氯化鈣的濃度變化CV值小于單純的氯化鈣溶液，添加4-羥乙基哌嗪乙磺酸和氯化鈉的氯化鈣溶液更為穩(wěn)定。實施例8制備兩種氯化鈣溶液：溶液3：稱取4.77g4-羥乙基哌嗪乙磺酸、5.85g氯化鈉和3g苯酚，加入900mL純化水中，攪拌均勻，加入2.22g氯化鈣，補水至1000mL，混勻，經(jīng)微孔濾膜過濾，得理論值濃度為20mM的氯化鈣溶液。溶液4：稱取2.22g氯化鈣，加入1000mL純化水中，混勻，經(jīng)微孔濾膜過濾，得到理論值為20mM的氯化鈣溶液。將制備的氯化鈣溶液3和4，在室溫條件下保存1個月，每天定時檢測溶液3和溶液4的氯化鈣濃度，測量中，每次取各溶液10mL，分別加入過量的碳酸鈉溶液，對生成的沉淀物(碳酸鈣)洗滌、干燥，測定碳酸鈣的重量，計算溶液中氯化鈣的濃度值。計算結(jié)果見表2。結(jié)果表明，在共計30天的測量期內(nèi)，溶液3中氯化鈣的濃度值變化很小，而溶液4的氯化鈣濃度變化較大，減少幅度大。表2室溫條件下溶液3和溶液4的濃度變化上述結(jié)果表明，在一個月之內(nèi)，在氯化鈣溶液中，添加4-羥乙基哌嗪乙磺酸、氯化鈉和苯酚后，氯化鈣的濃度變化CV值小于單純的氯化鈣溶液，且其CV值低于僅添加4-羥乙基哌嗪乙磺酸和氯化鈉的氯化鈣溶液濃度變化CV值，添加4-羥乙基哌嗪乙磺酸、氯化鈉和苯酚的氯化鈣溶液更為穩(wěn)定。實施例9制備兩種氯化鈣溶液：溶液5：稱取2.42g三羥甲基氨基甲烷、5.85g氯化鈉和3g苯酚，加入900mL純化水中，攪拌均勻，加入2.22g氯化鈣，補水至1000mL，混勻，經(jīng)微孔濾膜過濾，得理論值濃度為20mM的氯化鈣溶液。溶液6：稱取2.22g氯化鈣，加入1000mL純化水中，混勻，經(jīng)微孔濾膜過濾，得到理論值為20mM的氯化鈣溶液。將制備的氯化鈣溶液5和6，在室溫條件下保存1個月，每天定時檢測溶液5和溶液6的氯化鈣濃度，測量中，每次取各溶液10mL，分別加入過量的碳酸鈉溶液，對生成的沉淀物(碳酸鈣)洗滌、干燥，測定碳酸鈣的重量，計算溶液中氯化鈣的濃度值。計算結(jié)果見表3。結(jié)果表明，在共計30天的測量期內(nèi)，溶液5中氯化鈣的濃度值變化很小，而溶液6的氯化鈣濃度變化較大，減少幅度大。表3室溫條件下溶液5和溶液6的濃度變化溶液5/mM溶液6/mM均值19.8919.52最大值2020最小值19.619.1均方差0.1220.328變異系數(shù)CV0.61％1.68％線性方程y＝-0.0122x+20.082y＝-0.0365x+20.089上述結(jié)果表明，在一個月之內(nèi)，在氯化鈣溶液中，添加三羥甲基氨基甲烷、氯化鈉和苯酚后，氯化鈣的濃度變化CV值小于單純的氯化鈣溶液，添加三羥甲基氨基甲烷、氯化鈉和苯酚的氯化鈣溶液更為穩(wěn)定。實施例10制備兩種氯化鈣溶液：溶液7：稱取4.6g3-嗎啉丙磺酸、5.85g氯化鈉和3g苯酚，加入900mL純化水中，攪拌均勻，加入2.22g氯化鈣，補水至1000mL，混勻，經(jīng)微孔濾膜過濾，得理論值濃度為20mM的氯化鈣溶液。溶液8：稱取2.22g氯化鈣，加入1000mL純化水中，混勻，經(jīng)微孔濾膜過濾，得到理論值為20mM的氯化鈣溶液。將制備的氯化鈣溶液7和8，在室溫條件下保存1個月，每天定時檢測溶液7和溶液8的氯化鈣濃度，測量中，每次取各溶液10mL，分別加入過量的碳酸鈉溶液，對生成的沉淀物(碳酸鈣)洗滌、干燥，測定碳酸鈣的重量，計算溶液中氯化鈣的濃度值。計算結(jié)果見表4。結(jié)果表明，在共計30天的測量期內(nèi)，溶液7中氯化鈣的濃度值變化很小，而溶液8的氯化鈣濃度變化較大，減少幅度大。表4室溫條件下溶液7和溶液8的濃度變化溶液7/mM溶液8/mM均值19.8919.52最大值2020最小值19.719.1均方差0.1200.328變異系數(shù)CV0.60％1.68％線性方程y＝-0.0121x+20.081y＝-0.0365x+20.089上述結(jié)果表明，在一個月之內(nèi)，在氯化鈣溶液中，添加3-嗎啉丙磺酸、氯化鈉和苯酚后，氯化鈣的濃度變化CV值小于單純的氯化鈣溶液，添加3-嗎啉丙磺酸、氯化鈉和苯酚的氯化鈣溶液更為穩(wěn)定。盡管已用具體實施例來說明和描述了本發(fā)明，然而應(yīng)意識到，以上各實施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案，而非對其限制；本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解：在不背離本發(fā)明的精神和范圍的情況下，可以對前述各實施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對其中部分或者全部技術(shù)特征進(jìn)行等同替換；而這些修改或者替換，并不使相應(yīng)技術(shù)方案的本質(zhì)脫離本發(fā)明各實施例技術(shù)方案的范圍；因此，這意味著在所附權(quán)利要求中包括屬于本發(fā)明范圍內(nèi)的所有這些替換和修改。當(dāng)前第1頁1 2 3