1.一種分子印跡固相萃取-液質(zhì)聯(lián)用檢測膝溝藻毒素的分析方法,其特征在于,包括如下步驟:
第一步,準備粗提取液;
取少量加標后的貝肉溶于一定比例的甲醇-水溶液,經(jīng)渦旋震蕩、超聲、離心對目標物粗提取,得到貝肉粗提取液;
第二步,制備分子印跡固相萃取柱;
在空心固相萃取柱中采用濕法填柱法填入50~300mg的以咖啡因為虛擬模板制作的分子印跡微球,底部和上部分別用篩板封堵并壓實;
第三步,進行分子印跡固相萃??;
①活化:先、后分別用甲醇、蒸餾水通過分子印記固相萃取柱進行活化;②上樣:用鹽酸溶液調(diào)節(jié)粗提取液的pH在2~7范圍內(nèi)、固相萃取儀控制上樣流速在0.5~2ml/min;③淋洗:用體積比為90%~100%的甲醇-水溶液淋洗去除干擾物;④洗脫:用0.1mol/L冰醋酸-水溶液進行洗脫;
第四步,采用液質(zhì)聯(lián)用方法檢測固相萃取后的洗脫液;
①液質(zhì)聯(lián)用的液相條件包括色譜柱、流動相A和流動相B,其中,色譜柱為氰基柱,流動相A為體積比0.1%甲酸-水溶液,流動相B為體積比0.05%甲酸-乙腈溶液;上樣量為20ul,流速為0.6ml/min;②液質(zhì)聯(lián)用的質(zhì)譜條件包括離子源為電噴霧電離源,掃描模式為正離子掃描,檢測模式為選擇性離子檢測。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種分子印跡固相萃取-液質(zhì)聯(lián)用檢測膝溝藻毒素的分析方法,其特征在于,第二步中,分子印跡微球的填入量為150~200mg。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種分子印跡固相萃取-液質(zhì)聯(lián)用檢測膝溝藻毒素的分析方法,其特征在于,第三步中的②上樣:用鹽酸溶液調(diào)節(jié)粗提取液的pH在4~7范圍內(nèi)、固相萃取儀控制上樣流速在1~1.5ml/min;③淋洗:用體積比為96%~98%的甲醇-水溶液淋洗去除干擾物。