本發(fā)明屬于食品檢測領(lǐng)域，具體地涉及一種紅棗中甜蜜素的殘留量的檢測方法。
背景技術(shù)：
：甜蜜素，別名環(huán)己基氨基磺酸鈉，化學(xué)分子式C6H11NHSO3Na，屬于一種非營養(yǎng)型合成添加劑，其甜度是蔗糖的30倍，而價(jià)格卻是蔗糖的3倍，因而作為常用的食品添加劑用于飲料、糕點(diǎn)、蜜餞等食品中。有研究表明，食用甜蜜素過量不僅會(huì)對人體肝臟和神經(jīng)系統(tǒng)造成很大危害，而且其代謝物環(huán)己胺對心血管系統(tǒng)和睪丸也有毒理作用，因此部分國家已經(jīng)禁止使用該種添加劑。我國雖然未禁止此類添加劑的使用，但在國家標(biāo)準(zhǔn)GB2760中明確規(guī)定安賽蜜在各類食品中的最大添加限量。紅棗，是一種藥食同源的果品，其含有蛋白質(zhì)、糖類、有機(jī)酸、脂肪、人體所必需的18種氨基酸以及鐵、鋅、磷、鈣、硒等。紅棗最突出的特點(diǎn)是維生素含量非常高，可達(dá)400～600mg/kg，如含維生素B1、B2、尼克酸等，素有“活性維生素”之稱，并有“天然維生素丸”的美譽(yù)，具有很高的營養(yǎng)保健價(jià)值。紅棗不但含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，而且還含有豐富的藥用物質(zhì)，具有養(yǎng)胃健脾、補(bǔ)血益氣、和解藥毒、保護(hù)肝臟、增強(qiáng)肌力等功效，可潤肺、止咳、治虛、養(yǎng)胃。因此，紅棗是一種不同于一般的果品，它集藥用、保健、食用等多功能于一體，而成為果中珍品。紅棗深受人們的喜愛，隨著人們對健康越來越重視，對紅棗是否經(jīng)過甜蜜素處理的問題產(chǎn)生了質(zhì)疑。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：有鑒于此，確有必要提供一種紅棗中甜蜜素的殘留量的檢測方法，以解決上述問題。一種紅棗中甜蜜素的殘留量的檢測方法，其包括以下步驟：配制甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液，繪制甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液曲線；將10～15g鮮紅棗清洗干凈后去核，得到無核紅棗和紅棗核；對所述無核紅棗進(jìn)行打漿處理，得到紅棗漿；將所述紅棗核干燥后破碎研磨成粉，獲得棗核粉；將所述紅棗漿和所述棗核粉混合置于50mL離心管中，并加入10mL純凈水；然后，先超聲提取15～18min，在以1×104～2.5×104r/min的轉(zhuǎn)速離心分離8～10min，獲得首次上清液和首次沉淀物，并收集全部所述首次上清液；向所述首次沉淀物中加入10mL純凈水并超聲提取8～12min，再離心分離5～7min，收集全部二次上清液；將該二次上清液與所述首次上清液均勻混合，得到紅棗上清液；將所述紅棗上清液過0.22μm膜，得到紅棗樣品溶液；采用液相色譜-質(zhì)譜法檢測所述紅棗樣品溶液，并將所述紅棗樣品溶液的測定結(jié)果與所述標(biāo)準(zhǔn)溶液曲線進(jìn)行比對，得到所述紅棗樣品溶液中的甜蜜素含量。其中，所述液相色譜-質(zhì)譜法的檢測條件為：所用色譜柱采用：反相C18色譜柱、直徑2.1mm、柱長50mm、填料粒徑1.7μm；流動(dòng)相：乙腈-0.02mol/L乙酸銨溶液（10/90，υ/υ）；流速：0.25mL/min；柱溫:40℃；進(jìn)樣量：10μL；液相色譜分析時(shí)間不超過3min；質(zhì)譜離子源：ESI；掃描方式：負(fù)離子模式；毛細(xì)管電壓：3.0kV；離子源溫度：110℃；脫溶劑氣溫度：350℃；脫溶劑氣流量：600L/h；錐孔反吹氣流量：50L/h；錐孔電壓：40V?；谏鲜?，繪制所述甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液曲線的方法為：首先，量取濃度為1mg/ml的甜蜜素原液200μL，并轉(zhuǎn)移至100ml的容量瓶中，用純凈水定容，配制成濃度為2μg/mL的甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液；其次，分別量取所述甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.5mL、1mL、2.5mL、5mL、15mL、30mL并轉(zhuǎn)移至六個(gè)100mL的容量瓶中，再分別用純凈水定容，配制成濃度分別為10μg/L、20μg/L、50μg/L、100μg/L、300μg/L、600μg/L的甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液系列；然后，采用色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測器對上述六個(gè)甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液系列進(jìn)行檢測，得到甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液的六次平行測量結(jié)果；最后，以上述六次平行測量結(jié)果中的目標(biāo)峰的峰面積為縱坐標(biāo)(y)，甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液系列的濃度為橫坐標(biāo)(x)，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。在本發(fā)明提供的紅棗中甜蜜素的殘留量的檢測方法中，在對無核紅棗進(jìn)行打漿處理的過程中，紅棗中的纖維受到剪切、揉搓及梳理等作用，并產(chǎn)生細(xì)纖維化團(tuán)聚，而紅棗中的甜蜜素及其他成分則由于受到機(jī)械外力而被擠出來，并部分吸附在纖維上，形成所述紅棗漿；在所述紅棗漿加入棗核粉，由于棗核粉具有粗糙的摩擦面和較大的硬度，在超聲萃取過程中可以增強(qiáng)因超聲波輻射壓強(qiáng)而產(chǎn)生的機(jī)械振動(dòng)幅度、擾動(dòng)效應(yīng)強(qiáng)度、擊碎強(qiáng)度和攪拌作用等，增大物質(zhì)分子運(yùn)動(dòng)頻率和速度，增加溶劑穿透力，從而紅棗中的營養(yǎng)成分更加容易進(jìn)入純凈水中，達(dá)到加快萃取速度、縮短萃取時(shí)間、提高萃取效果的目的。另外，由于紅棗經(jīng)過打漿處理，其中的纖維比較難于進(jìn)入紅棗樣品溶液中，而且也有利于幫助離心分離產(chǎn)物上清液和沉淀物分離，使得紅棗樣品溶液中的各組分含量更加接近鮮紅棗中對應(yīng)組分的真實(shí)含量，從而提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度，能夠更加準(zhǔn)確判斷紅棗是否經(jīng)過甜蜜素處理。具體實(shí)施方式圖1為本發(fā)明實(shí)施例提供的甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。圖2為本發(fā)明實(shí)施例提供的甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖。圖3為本發(fā)明實(shí)施例提供的紅棗樣品溶液中的甜蜜素的色譜圖。具體實(shí)施方式下面通過具體實(shí)施方式，對本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步的詳細(xì)描述。本發(fā)明實(shí)施例提供一種紅棗中甜蜜素的殘留量的檢測方法，其包括以下步驟：（一）配制甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液，繪制甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液曲線；該步驟（一）具體包括以下分步驟：首先，量取濃度為1mg/ml的甜蜜素原液200μL，并轉(zhuǎn)移至100ml的容量瓶中，用純凈水定容，配制成濃度為2μg/mL的甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。其次，分別量取所述甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.5mL、1mL、2.5mL、5mL、15mL、30mL并轉(zhuǎn)移至六個(gè)100mL的容量瓶中，再分別用純凈水定容，配制成濃度分別為10μg/L、20μg/L、50μg/L、100μg/L、300μg/L、600μg/L的甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液系列。然后，采用色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測器對上述六個(gè)甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液系列進(jìn)行檢測，其中，該液相色譜-質(zhì)譜法的檢測條件為：所用色譜柱采用：反相C18色譜柱、直徑2.1mm、柱長50mm、填料粒徑1.7μm；流動(dòng)相：乙腈-0.02mol/L乙酸銨溶液（10/90，υ/υ）；流速：0.25mL/min；柱溫:40℃；進(jìn)樣量：10μL；液相色譜分析時(shí)間不超過3min；梯度洗脫程序見表1。質(zhì)譜離子源：ESI；掃描方式：負(fù)離子模式；毛細(xì)管電壓：3.0kV；離子源溫度：110℃；脫溶劑氣溫度：350℃；脫溶劑氣流量：600L/h；錐孔反吹氣流量：50L/h；錐孔電壓：45V；母離子(m/z)177.4；子離子(m/z)80.12、95.9；對應(yīng)的碰撞能量為20.0V、15.0V；定量離子(m/z)80.12。表1梯度洗脫程序上述六個(gè)甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液系列的六次平行測量結(jié)果如表2所示。甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖如圖2所示。表2甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液系列的測量結(jié)果濃度（μg/L）102050100300600峰面積515498642394247382141298282104最后，以上述表2中的峰面積為縱坐標(biāo)(y)，甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液系列的濃度為橫坐標(biāo)(x)，建立繪制圖1所示的標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液的線性回歸方程：y=469.4x+464.5，相關(guān)系數(shù)平方1.0，線性范圍10～600μg/L，檢出限0.9μg/L。（二）將12.6g鮮紅棗清洗干凈后去核，得到無核紅棗和紅棗核；對所述無核紅棗進(jìn)行打漿處理，得到紅棗漿；將所述紅棗核干燥后破碎研磨成粉，獲得棗核粉。（三）將所述紅棗漿和所述棗核粉混合置于50mL離心管中，并加入10mL純凈水；然后，先超聲提取15min，在以2.5×104r/min的轉(zhuǎn)速離心分離10min，獲得首次上清液和首次沉淀物，并收集全部所述首次上清液；向所述首次沉淀物中加入10mL純凈水并超聲提取8min，再離心分離7min，收集全部二次上清液；將該二次上清液與所述首次上清液均勻混合，得到紅棗上清液；將所述紅棗上清液過0.22μm膜，得到紅棗樣品溶液。（四）采用與步驟（一）相同條件的檢測條件檢測所述紅棗樣品溶液，所述紅棗樣品溶液的色譜圖如3所示，從圖3中可以看出在1.52min處有甜蜜素的特征峰，且所述紅棗樣品溶液中甜蜜素的峰面積為11903，帶入上述甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液的線性回歸方程中，即可得到紅棗樣品中的甜蜜素的濃度為24.37μg/L。由于我國不允許鮮水果中添加甜蜜素，所以本發(fā)明實(shí)施例提供的鮮紅棗的甜味異常，有影響消費(fèi)者身體健康的隱患。本發(fā)明提供的檢測方法的空白加標(biāo)回收率試驗(yàn)按照現(xiàn)有的空白加標(biāo)回收試驗(yàn)方法，制得甜蜜素濃度為50μg/L、200μg/L的加標(biāo)溶液，按照步驟（一）中提供的檢測方法進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果為：濃度為50μg/L的峰面積為24241，計(jì)算得出加標(biāo)回收率為101.3%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1%；濃度為200μg/L的峰面積為95683，計(jì)算得出加標(biāo)回收率為101.4%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2%。最后應(yīng)當(dāng)說明的是：以上實(shí)施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非對其限制；盡管參照較佳實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說明，所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解：依然可以對本發(fā)明的具體實(shí)施方式進(jìn)行修改或者對部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換；而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的精神，其均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明請求保護(hù)的技術(shù)方案范圍當(dāng)中。當(dāng)前第1頁1 2 3