1.比率型三維金屬增強(qiáng)熒光Pb2+生物傳感器的構(gòu)建,其特征是包括以下步驟:
1.1設(shè)計(jì)比率型三維金屬增強(qiáng)熒光紙芯片的疏水蠟打印區(qū)域和親水工作區(qū)域;
1.2通過蠟打印機(jī)將步驟1.1中設(shè)計(jì)的紙芯片打印上疏水圖案,隨后將得到的紙芯片于60-150 oC下加熱,直到蠟融化并浸透整個(gè)紙,形成疏水層;
1.3在步驟1.2中得到的紙芯片的親水工作區(qū)域生長十面體銀;
1.4 將石墨烯量子點(diǎn)功能化的催化鏈,定義為DNA1,固定在步驟1.3所得紙芯片的親水區(qū)域,隨后用緩沖溶液進(jìn)行沖洗;
1.5 將染料和二氧化鈰功能化的Pb2+識別基質(zhì)鏈,定義為17DS,滴加到步驟1.4所得紙芯片的親水區(qū)域,最后用緩沖溶液進(jìn)行沖洗;
1.6 將不同濃度的Pb2+加入到步驟1.5所得紙芯片的親水區(qū)域,隨后放入熒光設(shè)備中,分別測定在不同濃度的Pb2+下石墨烯量子點(diǎn)和染料的熒光強(qiáng)度;
1.7繪制兩種熒光強(qiáng)度比率的變化與Pb2+濃度關(guān)系曲線,完成Pb2+的測定。
2.根據(jù)權(quán)利要求書1所述的比率型三維金屬增強(qiáng)熒光Pb2+生物傳感器的構(gòu)建,其特征在于,在步驟1.2中得到的紙芯片的親水工作區(qū)域生長十面體銀,具體步驟如下:
將1.5 mL 50 mM 檸檬酸鈉,1.5 mL 6% 聚乙烯吡咯烷酮,0.15 mL 10 mM精氨酸及0.6 mL 10 mM硝酸銀加入到6 mL二次水中,隨后在攪拌下加入0.24 mL 0.1 M新鮮制備的硼氫化鈉,制得銀種子;取20 μL 的銀種子滴加到工作區(qū)域,在室溫下放置45 min,反復(fù)滴加三次;將滴加完銀種子的紙芯片放在3 W的藍(lán)燈下曝光10 h。
3.根據(jù)權(quán)利要求書1所述的比率型三維金屬增強(qiáng)熒光Pb2+生物傳感器的構(gòu)建,其特征在于,步驟1.4中所述DNA1特定的堿基序列以及其5’端修飾上巰基,其3’端修飾上石墨烯量子點(diǎn)。
4.根據(jù)權(quán)利要求 1 所述的比率型三維金屬增強(qiáng)熒光Pb2+生物傳感器的構(gòu)建,其特征在于,步驟1.5中所述17DS特定的堿基序列以及其5’端修飾上二氧化鈰,其3’端修飾上染料。
5.根據(jù)權(quán)利要求 1 所述的比率型三維金屬增強(qiáng)熒光Pb2+生物傳感器的構(gòu)建,其特征在于,步驟1.5中所述的染料為:羥基香豆素,藻紅蛋白,酞菁熒光探針Cy3,酞菁熒光探針Cy5,酞菁熒光探針Cy7,羅丹明,異硫氰酸酯,羅紅霉素,羧基熒光素。
6.根據(jù)權(quán)利要求書1所述比率型三維金屬增強(qiáng)熒光Pb2+生物傳感器的構(gòu)建,其特征在于,比率型Pb2+熒光測定步驟,將紙芯片放入熒光皿中,分別測定在不同濃度的Pb2+下石墨烯量子點(diǎn)和染料的熒光強(qiáng)度,繪制兩種熒光強(qiáng)度比率的變化與Pb2+濃度關(guān)系曲線,實(shí)現(xiàn)Pb2+的精確測定。