本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域，具體為半枝蓮定性定量中藥飲片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、操作規(guī)程與制造工藝。
背景技術(shù)：
半枝蓮(學(xué)名：Scutellaria barbata D.Don)，別名趕山鞭、瘦黃芩、牙刷草、田基草、水黃芩、狹葉韓信草，是唇形科黃芩屬多年生草本植物。半枝蓮作為常用中藥，具有強(qiáng)大的開發(fā)潛力。半枝蓮含紅花素、異紅花素、高山黃芩素、高山黃鈐甙、β-谷甾醇、硬脂酸、生物堿多糖、漢黃芩素、半枝蓮素、半枝蓮種素、柚皮素、芹菜素、粗毛豚草素、圣草素、木犀草素、對(duì)-香豆酸、原兒茶酸、能果酸、植物甾醇、植物甾醇β-D-葡萄糖甙等等有效成分，其功能與主治為清熱解毒、化瘀利尿，用于疔瘡腫毒、咽喉腫痛、跌撲傷痛、水腫、黃疸、蛇蟲咬傷、跌撲腫痛及水腫/黃疸等。王萍的碩士學(xué)位論文《半枝蓮抗癌成分的研究》指出“半枝蓮是近幾年國內(nèi)外抗腫瘤藥的研究熱點(diǎn)之一?，F(xiàn)代藥理研究表明，半枝蓮水提物和醇提物抗腫瘤的作用機(jī)制主要包括：直接抑制腫瘤生長與增殖作用、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡作用、抗氧化抗自由基作用等?！?，并通過實(shí)驗(yàn)確定半枝蓮乙酸乙酯層提取物中的異鼠李素和槲皮素具有抑制血管生成活性。耿顯瑜等的《中藥半枝蓮抗腫瘤作用的探索與發(fā)現(xiàn)》就半枝蓮抗腫瘤研究進(jìn)行了綜述。
中藥飲片是中國中藥產(chǎn)業(yè)不可缺失的部分，是中醫(yī)臨床辯證施治必需的傳統(tǒng)武器，其品質(zhì)直接影響中醫(yī)臨床防病、治病的療效，另外針對(duì)現(xiàn)代人快速的生活節(jié)奏，本發(fā)明提供的高品質(zhì)、可沖泡服用改變傳統(tǒng)煎煮服用方法的中藥飲片有較大的市場需求。
本發(fā)明所要解決的是目前市場上的普遍存在中藥飲片療效不明顯的問題。中藥炮制和劑型，中藥的配伍、劑量、給藥途徑，中藥的調(diào)配、煎服方法、飲食等因素對(duì)中藥療效均有明顯影響(劉紅星，丁樹棟.淺析影響中藥療效的因素【J】.中醫(yī)中藥，2014)。中藥材因環(huán)境污染等問題引起的重金屬超標(biāo)；半枝蓮在生產(chǎn)中農(nóng)藥的大量使用帶來農(nóng)藥殘留問題，而有機(jī)氯農(nóng)藥更因其降解速度很慢，在環(huán)境中廣泛存在，并在食物鏈中蓄積，影響人們的健康(俞敏倩等.半枝蓮中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量檢測【J】.中藥材，2002)造成農(nóng)藥殘留超標(biāo)等質(zhì)量問題。
附圖說明
附圖1是半枝蓮定性定量中藥飲片生產(chǎn)工藝流程圖。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
為了解決上述問題，本發(fā)明提供的半枝蓮定性定量中藥飲片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與制造工藝，增加對(duì)藥屑雜質(zhì)、重金屬及有害元素、有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量、黃曲霉毒素B1、二氧化硫 殘留量的檢測，并將含量測定中的總黃酮含總黃酮(以野黃芩苷C21H18O12計(jì))的標(biāo)準(zhǔn)限度從1.50％提高至1.65％，野黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)限度從0.20％提高至0.22％。并通過特定的工序生產(chǎn)出半枝蓮中藥飲片，確保中藥飲片符合高標(biāo)準(zhǔn)高品質(zhì)的要求。
本發(fā)明提供的半枝蓮定性定量中藥飲片的制造工藝，包括以下步驟：
A10、凈制：清除混在半枝蓮中的雜質(zhì)及霉變品等，以便達(dá)到潔凈或進(jìn)一步加工處理。注意：半枝蓮經(jīng)凈選后不得直接接觸地面。
A20、清洗：凈制后半枝蓮放置在洗藥池中，清洗干凈至無泥沙，清洗時(shí)要快速清洗，減少半枝蓮在水中浸泡時(shí)間，清洗完成后堆潤6-8h，至半枝蓮徹底潤透。
A30、切制：按全自動(dòng)高速切片機(jī)操作規(guī)程操作，調(diào)好刀距0.4mm，進(jìn)行切藥。
A40、干燥：采用熱風(fēng)循環(huán)烘箱進(jìn)行干燥，將半枝蓮鋪于烘箱架子上，攤鋪厚度均勻，厚度在3cm以下。打開開關(guān)，開啟加熱開關(guān)、風(fēng)機(jī)，在溫度60±2℃進(jìn)行干燥，在溫度達(dá)到設(shè)定溫度后干燥5-7h，干燥完畢，關(guān)閉加熱開關(guān)，繼續(xù)吹風(fēng)，待箱內(nèi)溫度降下至35～40℃，關(guān)閉風(fēng)機(jī)。干燥后崗位人員需填寫中間產(chǎn)品請(qǐng)檢單，交質(zhì)量部由QA取樣進(jìn)行水分檢查。
A50、包裝：根據(jù)本品包裝規(guī)格要求進(jìn)行包裝。包裝前需對(duì)包裝間進(jìn)行檢查，確認(rèn)包裝生產(chǎn)線的清場已經(jīng)完成，并核對(duì)包裝材料是否符合要求。內(nèi)包裝：在設(shè)備上調(diào)整好需要印制的生產(chǎn)日期、批號(hào)，QA監(jiān)控，稱取規(guī)定重量的半枝蓮放入料斗中，用封口機(jī)封口，要求做到封口嚴(yán)密、平整、美觀。外包裝：在設(shè)備上調(diào)整好需印制的生產(chǎn)日期及批號(hào)，QA監(jiān)控，在外包裝盒子上打印批號(hào)、生產(chǎn)日期，打印過程中需注意批號(hào)及生產(chǎn)日期是否清晰。將內(nèi)包裝完成后的飲片及檢驗(yàn)報(bào)告書放入外包盒中，4袋/盒。將每10盒飲片，套入1個(gè)熱縮膜中，進(jìn)行熱收縮；熱收縮后裝入大紙箱中，240盒/箱。操作過程中，QA隨時(shí)抽檢。包裝后崗位人員需填寫成品請(qǐng)檢單，交質(zhì)量部由QA取樣進(jìn)行產(chǎn)品檢查。
A60、成品：包裝后崗位人員需填寫成品請(qǐng)檢單，交質(zhì)量部由QA取樣進(jìn)行產(chǎn)品檢查。
增加對(duì)藥屑雜質(zhì)、重金屬及有害元素、有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量、黃曲霉毒素B1、二氧化硫殘留量的檢測，并將含量測定中的總黃酮含總黃酮(以野黃芩苷C21H18O12計(jì))的標(biāo)準(zhǔn)限度從1.50％提高至1.65％，野黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)限度從0.20％提高至0.22％。修訂后的半枝蓮定性定量中藥飲片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)如下所示：
半枝蓮飲片
拼音名稱：Banzhilian Yinpian
包裝：純鋁復(fù)合膜包裝。
【性狀】取本品適量，在日光下觀察，本品呈不規(guī)則的段。嗅之，氣微，嘗之，味 微苦。
檢查
藥屑、雜質(zhì)
儀器及用具：中藥粉碎機(jī)、分析天平、藥典篩
測定及結(jié)果判定：照雜質(zhì)檢查法(通則2301)測定。
取供試品約100g(精確到0.1g)，攤開，揀出雜質(zhì)，用藥篩篩出藥屑，合并，稱重，計(jì)算其在供試品中的量(％)
結(jié)果判定：本品雜質(zhì)不得過3％。
水分
儀器及用具：中藥粉碎機(jī)、分析天平、藥典篩、電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、稱量瓶
測定及結(jié)果判定：照水分測定法(通則0832第二法)測定。
取供試品2～5g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過5mm，疏松供試品不超過10mm，精密稱定，開啟瓶蓋在100～105℃干燥5小時(shí)，將瓶蓋蓋好，移置干燥器中，放冷30分鐘，精密稱定，再在上述溫度干燥1小時(shí)，放冷，稱重，至連續(xù)兩次稱重的差異不超過5mg為止。根據(jù)減失的重量，計(jì)算供試品中含水量(％)。
結(jié)果判定：本品水分不得過12.0％。
重金屬及有害元素
儀器及用具：中藥粉碎機(jī)、分析天平、藥典篩、微波消解儀、原子吸收分光光度計(jì)
試劑及試液：硝酸、磷酸二氫銨、硝酸鎂、碘化鉀、抗壞血酸、鹽酸、硼氫化鈉、氫氧化鈉、硫酸、高錳酸鉀、鹽酸羥胺(其中硝酸、磷酸二氫銨、硝酸鎂為優(yōu)級(jí)純，其他試劑均使用分析純，實(shí)驗(yàn)用水為純化水)
標(biāo)準(zhǔn)樣品：鉛單元素標(biāo)準(zhǔn)樣品、鎘單元素標(biāo)準(zhǔn)樣品、砷單元素標(biāo)準(zhǔn)樣品、汞單元素標(biāo)準(zhǔn)樣品、銅單元素標(biāo)準(zhǔn)樣品
方法：照鉛、鎘、砷、汞、銅測定法(通則2321)測定
鉛的測定(石墨爐法)
測定條件參考條件：波長283.3nm，干燥溫度100～120℃，持續(xù)20秒；灰化溫度400～750℃，持續(xù)20～25秒；原子化溫度1700～2100℃，持續(xù)4～5秒。
鉛標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備精密量取鉛單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用2％硝酸溶液稀釋，制成每1ml含鉛(Pb)1μg的溶液，即得(0～5℃貯存)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別精密量取鉛標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用2％硝酸溶液制成每1ml分別含鉛0ng、5ng、20ng、40ng、60ng、80ng的溶液。分別精密量取1ml，精密加含1％磷酸 二氫銨和0.2％硝酸鎂的溶液0.5ml，混勻，精密吸取20μl注入石墨爐原子化器，測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
供試品溶液的制備A法取供試品粗粉0.5g，精密稱定，置聚四氯乙烯消解罐內(nèi)，加硝酸3～5ml，混勻，浸泡過夜，蓋好內(nèi)蓋，旋緊外套，置適宜的微波消解爐內(nèi)，進(jìn)行消解(按儀器規(guī)定的消解程序操作)。消解完全后，取消解內(nèi)罐置電熱板上緩緩加熱至紅棕色蒸氣揮盡，并繼續(xù)緩緩濃縮至2～3ml，放冷，用水轉(zhuǎn)入25ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，即得。同法同時(shí)制備試劑空白溶液。
測定法精密量取空白溶液與供試品溶液各1ml，精密加含1％磷酸二氫銨和0.2％硝酸鎂的溶液0.5ml，混勻，精密吸取10～20μl，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下方法測定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中鉛(Pb)的含量，計(jì)算，即得。
鎘的測定(石墨爐法)
測定條件參考條件：波長228.8nm，干燥溫度100～120℃，持續(xù)20秒；灰化溫度300～500℃，持續(xù)20～25秒；原子化溫度1500～1900℃，持續(xù)4～5秒。
鎘標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備精密量取鎘單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用2％硝酸溶液稀釋，制成每1ml含鎘(Cd)1μg的溶液，即得(0～5℃貯存)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別精密量取鎘標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用2％硝酸溶液稀釋制成每1ml分別含鎘0ng、0.8ng、2.0ng、4.0ng、6.0ng、8.0ng的溶液。分別精密吸取10μl，注入石墨爐原子化器，測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
供試品溶液的制備同鉛測定項(xiàng)下供試品溶液的制備。
測定法精密吸取空白溶液與供試品溶液各10～20μl，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下方法測定吸光度(若供試品有干擾，可分別精密量取標(biāo)準(zhǔn)溶液、空白溶液和供試品溶液各1ml，精密加含1％磷酸二氫銨和0.2％硝酸鎂的溶液0.5ml，混勻，依法測定)，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中鎘(Cd)的含量，計(jì)算，即得。
砷的測定(氫化物法)
測定條件采用適宜的氫化物發(fā)生裝置，以含硼氫化鈉和0.3％氫氧化鈉溶液(臨用前配制)作為還原劑，鹽酸溶液(1→100)為載液，氮?dú)鉃檩d氣，檢測波長為193.7nm。
砷標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備精密量取砷單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用2％硝酸溶液稀釋，制成每1ml含砷(As)1μg的溶液，即得(0～5℃貯存)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別精密量取砷標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用2％硝酸溶液稀釋制成每1ml分別含砷0ng、5ng、10ng、20ng、30ng、40ng的溶液。分別精密量取10ml，置25ml量瓶中，加25％碘化鉀溶液(臨用前配制)1ml，搖勻，加10％抗壞血酸溶液(臨用前配制)1ml，搖勻，用鹽酸溶液(20→100)稀釋至刻度，搖勻，密塞，置80℃水浴中加熱3分 鐘，取出，放冷。取適量，吸入氫化物發(fā)生裝置，測定吸收值，以峰面積(或吸光度)為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
供試品溶液的制備同鉛測定項(xiàng)下供試品溶液的制備中的A法制備。
測定法精密吸取空白溶液與供試品溶液各10ml，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下，自“加25％碘化鉀溶液(臨用前配制)1ml”起，依法測定。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中砷(As)的含量，計(jì)算，即得。
汞的測定(冷蒸氣吸收法)
測定條件采用適宜的氫化物發(fā)生裝置，以含0.5％硼氫化鈉和0.1％氫氧化鈉的溶液(臨用前配制)作為還原劑，鹽酸溶液(1→100)為載液，氮?dú)鉃檩d氣，檢測波長為253.6nm。
汞標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備精密量取汞單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用2％硝酸溶液稀釋，制成每1ml含汞(Hg)1μg的溶液，即得(0～5℃貯存)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別精密量取汞標(biāo)準(zhǔn)貯備液0ml、0.1ml、0.3ml、0.5ml、0.7ml、0.9ml，置50ml量瓶中，加20％硫酸溶液10ml、5％高錳酸鉀溶液0.5ml，搖勻，滴加5％鹽酸羥胺溶液至紫紅色恰消失，用水稀釋至刻度，搖勻。取適量，吸入氫化物發(fā)生裝置，測定吸收值，以峰面積(或吸光度)為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
供試品溶液的制備A法取供試品粗粉0.5g，精密稱定，置聚四氟乙烯消解罐內(nèi)，加硝酸3～5ml，混勻，浸泡過夜，蓋好內(nèi)蓋，旋緊外套，置適宜的微波消解爐內(nèi)進(jìn)行消解(按儀器規(guī)定的消解程序操作)。消解完全后，取消解內(nèi)罐置電熱板上，于120℃緩緩加熱至紅棕色蒸氣揮盡，并繼續(xù)濃縮至2～3ml，放冷，加20％硫酸溶液2ml、5％高錳酸鉀溶液0.5ml，搖勻，滴加5％鹽酸羥胺溶液至紫紅色恰消失，轉(zhuǎn)入10ml量瓶中，用水洗滌容器，洗液合并于量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，必要時(shí)離心，取上清液，即得。同法同時(shí)制備試劑空白溶液。
測定法精密吸取空白溶液與供試品溶液適量，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法測定從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中汞(Hg)的含量，計(jì)算，即得。
銅的測定(火焰法)
測定條件檢測波長為324.7nm，采用空氣-乙炔火焰，必要時(shí)進(jìn)行背景校正。
銅標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備精密量取銅單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用2％硝酸溶液稀釋，制成每1ml含銅(Cu)10μg的溶液，即得(0～5℃貯存)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別精密量取銅標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用2％硝酸溶液制成每1ml分別含銅0μg、0.05μg、0.2μg、4μg、0.6μg、0.8μg的溶液。依次噴入火焰，測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
供試品溶液的制備同鉛測定項(xiàng)下供試品溶液的制備。
測定法精密吸取空白溶液與供試品溶液適量，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下的方法測定。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中銅(Cu)的含量，計(jì)算，即得。
結(jié)果判定：本品含鉛不得過8mg/kg、鎘不得過0.8mg/kg、砷不得過4mg/kg、汞不得過0.8mg/kg、銅不得過20mg/kg。
有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量
儀器及用具：中藥粉碎機(jī)、分析天平、藥典篩、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、超聲波清洗機(jī)、氣相色譜儀
試劑及試液：石油醚(60～90℃)、丙酮、氯化鈉、二氯甲烷、無水硫酸鈉(其中石油醚(60～90℃)為色譜純，其他試劑均使用分析純，實(shí)驗(yàn)用水為純化水)
對(duì)照品：α-BHC，β-BHC，γ-BHC，δ-BHC、pp′-DDE，pp′-DDD，op′-DDT，pp′-DDT、PCNB農(nóng)藥對(duì)照品
方法：照農(nóng)藥殘留量測定法(通則0512第一法)測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以(14％-氰丙基-苯基)甲基聚硅氧烷或(5％苯基)甲基聚硅氧烷為固定液的彈性石英毛細(xì)管柱(30m×0.32mm×0.25μm)，63Ni-ECD電子捕獲檢測器。進(jìn)樣口溫度230℃，檢測器溫度300℃，不分流進(jìn)樣。程序升溫：初始100℃，每分鐘10℃升至220℃，每分鐘8℃升至250℃，保持10分鐘。理論板數(shù)按α-BHC峰計(jì)算應(yīng)不低于1×106，兩個(gè)相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5。
對(duì)照品貯備溶液的制備精密稱取六六六(BHC)(α-BHC，β-BHC，γ-BHC，δ-BHC)、滴滴涕(DDT)(pp′-DDE，pp′-DDD，op′-DDT，pp′-DDT)及五氯硝基苯(PCNB)農(nóng)藥對(duì)照品適量，用石油醚(60～90℃)分別制成每1ml約含4～5μg的溶液，即得。
混合對(duì)照品貯備溶液的制備精密量取上述各對(duì)照品貯備液0.5ml，置10ml量瓶中，用石油醚(60～90℃)稀釋至刻度，搖勻，即得。
混合對(duì)照品溶液的制備精密量取上述混合對(duì)照品貯備液，用石油醚(60～90℃)制成每1L分別含0μg、1μg、5μg、10μg、50μμg、100μg、250μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取供試品，粉碎成粉末(過三號(hào)篩)，取約2g，精密稱定，置100ml具塞錐形瓶中，加水20ml浸泡過夜，精密加丙酮40ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用丙酮補(bǔ)足減失的重量，再加氯化鈉約6g，精密加二氯甲烷30ml，稱定重量，超聲15分鐘，再稱定重量，用二氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，靜置(使分層)，將有機(jī)相迅速移入裝有適量無水硫酸鈉的100ml具塞錐形瓶中，放置4小時(shí)。精密量取35ml，于40℃水浴上減壓濃縮至近干，加少量石油醚(60～90℃)如前反復(fù)操作至二氯 甲烷及丙酮除凈，用石油醚(60～90℃)溶解并轉(zhuǎn)移至10ml具塞刻度離心管中，加石油醚(60～90℃)精密稀釋至5ml，小心加入硫酸1ml，振搖1分鐘，離心(3000轉(zhuǎn)/分鐘)10分鐘，精密量取上清液2ml，置具刻度的濃縮瓶中，連接旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，40℃下(或用氮?dú)?將溶液濃縮至適量，精密稀釋至1ml，即得。
測定法分別精密吸取供試品溶液和與之相對(duì)應(yīng)濃度的混合對(duì)照品溶液各1μl，注入氣相色譜儀，按外標(biāo)法計(jì)算供試品中9種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量。
結(jié)果判定：本品含總六六六(α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC之和)不得過0.2mg/kg；總滴滴涕(pp′-DDE、pp′-DDD、op′-DDT、pp′-DDT之和)不得過0.2mg/kg；五氯硝基苯不得過0.1mg/kg。
黃曲霉毒素B1
儀器及用具：中藥粉碎機(jī)、分析天平、藥典篩、均質(zhì)瓶、離心機(jī)、高效液相色譜儀(配置熒光檢測器及衍生化泵、衍生化保溫箱)
試劑及試液：甲醇、乙腈、碘、氯化鈉、免疫親合柱(其中乙腈為色譜純，其他試劑為分析純，實(shí)驗(yàn)用水為純化水)
對(duì)照品：黃曲霉毒素B]對(duì)照品
方法：照黃曲霉毒素測定法(通則2351)測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-水(40∶18∶42)為流動(dòng)相；采用柱后衍生法檢測，碘衍生法：衍生溶液為0.05％的碘溶液(取碘0.5g，加入甲醇100ml使溶解，用水稀釋至1000ml制成)，衍生化泵流速每分鐘0.3ml，衍生化溫度70℃以熒光檢測器檢測，激發(fā)波長λex＝360nm(或365nm)，發(fā)射波長λex＝450nm。兩個(gè)相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5。
混合對(duì)照品溶液的制備精密量取黃曲霉毒素B1對(duì)照品溶液(標(biāo)示濃度為1.0μg/ml)0.5ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，作為貯備溶液。精密量取貯備溶液1ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，即得。
供試品溶液的制備取供試品粉末約15g(過二號(hào)篩)，精密稱定，置于均質(zhì)瓶中，加入氯化鈉3g，精密加入70％甲醇溶液75ml，高速攪拌2分鐘(攪拌速度大于11000轉(zhuǎn)/分鐘)，離心5分鐘(離心速度2500轉(zhuǎn)/分鐘)，精密量取上清液15ml，置50ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，量取續(xù)濾液20.0ml，通過免疫親合柱，流速每分鐘3ml，用水20ml洗脫，洗脫液棄去，使空氣進(jìn)入柱子，將水?dāng)D出柱子，再用適量甲醇洗脫，收集洗脫液，置2ml量瓶中，并用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
測定法分別精密吸取上述混合對(duì)照品溶液5μl、10μl、15μl、20μl、25μl，注入液相色譜儀，測定峰面積，以峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。另精密 吸取上述供試品溶液20～25μl，注入液相色譜儀，測定峰面積，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品中相當(dāng)于黃曲霉毒素B1的量，計(jì)算，即得。
結(jié)果判定：本品每1000g含黃曲霉毒素B1不得過5μg。
二氧化硫殘留量
儀器及用具：中藥粉碎機(jī)、分析天平、藥典篩、電熱套
試劑及試液：過氧化氫、甲基紅乙醇溶液、0.01mol/L氫氧化鈉滴定液、鹽酸溶液(6mol/L)(試劑均使用分析純，實(shí)驗(yàn)用水為純化水)
方法：照二氧化硫殘留量測定法(通則2331)測定。取藥材或飲片細(xì)粉約10g，精密稱定，置兩頸圓底燒瓶中，加水300～400ml。打開回流冷凝管開關(guān)給水，將冷凝管的上端E口處連接一橡膠導(dǎo)氣管置于100ml錐形瓶底部。錐形瓶內(nèi)加入3％過氧化氫溶液50ml作為吸收液(橡膠導(dǎo)氣管的末端應(yīng)在吸收液液面以下)。使用前，在吸收液中加入3滴甲基紅乙醇溶液指示劑(2.5mg/ml)，并用0.01mol/L氫氧化鈉滴定液滴定至黃色(即終點(diǎn)；如果超過終點(diǎn)，則應(yīng)舍棄該吸收溶液)。開通氮?dú)?，使用流量?jì)調(diào)節(jié)氣體流量至約0.2L/min；打開分液漏斗C的活塞，使鹽酸溶液(6mol/L)10ml流入蒸餾瓶，立即加熱兩頸燒瓶內(nèi)的溶液至沸，并保持微沸；燒瓶內(nèi)的水沸騰1.5小時(shí)后，停止加熱。吸收液放冷后，置于磁力攪拌器上不斷攪拌，用氫氧化鈉滴定液(0.01mol/L)滴定，至黃色持續(xù)時(shí)間20秒不褪，并將滴定的結(jié)果用空白實(shí)驗(yàn)校正。
結(jié)果判定：本品二氧化硫殘留量不得過150mg/kg。
總黃酮
儀器及用具：中藥粉碎機(jī)、分析天平、藥典篩、恒溫水浴鍋、紫外可見分光光度計(jì)
試劑及試液：甲醇(試劑均使用分析純，實(shí)驗(yàn)用水為二級(jí)水)
對(duì)照品：野黃芩苷對(duì)照品
測定及結(jié)果判定：照紫外-可見分光光度法(通則0401)
對(duì)照品溶液的制備取野黃芩苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密量取對(duì)照品溶液0.4ml、0.8ml、1.2ml、1.6ml、2.0ml分別置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。以甲醇為空白，照紫外-可見分光光度法(通則0401)，在335nm的波長處分別測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
測定法精密量取[含量測定]項(xiàng)野黃芩苷項(xiàng)下經(jīng)索氏提取并稀釋至100ml的甲醇溶液1ml，置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下方法，自“以甲醇為空白”起，依法測定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中野黃芩苷的重量(mg)，計(jì) 算，即得。
本品按干燥品計(jì)算，含總黃酮以野黃芩苷(C21H18O12)計(jì)，不得少于1.65％。
野黃芩苷
儀器及用具：中藥粉碎機(jī)、分析天平、藥典篩、恒溫水浴鍋、高效液相色譜儀
試劑及試液：醋酸、甲醇、純化水(其中甲醇為色譜純，其他試劑均使用分析純，實(shí)驗(yàn)用水為二級(jí)水)
對(duì)照品：野黃芩苷對(duì)照品
測定及結(jié)果判定：照高效液相色譜法(通則0512)測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-醋酸(35∶61∶4)為流動(dòng)相；檢測波長為335nm。理論板數(shù)按野黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低于1500。
對(duì)照品溶液的制備取野黃芩苷對(duì)照品適量，精密稱定，加流動(dòng)相制成每1ml含80μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本品粉末(過三號(hào)篩)約1g，精密稱定，置索氏提取器中，加石油醚(60～90℃)提取至無色，棄去醚液，藥渣揮去石油醚，加甲醇繼續(xù)提取至無色，轉(zhuǎn)移至100ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，精密量取25ml，蒸干，殘?jiān)?0％甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品按干燥品計(jì)算，含野黃芩苷(C21H18O12)不得少于0.22％。
微生物限度
沙門菌取本品10g，以無菌接種至適宜體積(經(jīng)方法適用性實(shí)驗(yàn)確定)的胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，混勻，按非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：控制菌檢查法檢查。
結(jié)果判定：沙門菌不得檢出(10g)。
耐膽鹽革蘭陰性菌取本品，以無菌胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基為稀釋劑，制成1∶10的供試液，混勻，按非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：控制菌檢查法檢查。
結(jié)果判定：耐膽鹽革蘭陰性菌應(yīng)小于104cfu(1g)。