本申請(qǐng)案主張2014年8月26日申請(qǐng)的第62/041,806號(hào)美國(guó)申請(qǐng)案以及2014年2月28日申請(qǐng)的第61/9469,579號(hào)美國(guó)申請(qǐng)案的優(yōu)先權(quán)，所述申請(qǐng)案的揭示內(nèi)容全文以引用的方式并入本文中。
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明大體上涉及流式細(xì)胞儀中的光學(xué)系統(tǒng)。
背景技術(shù)：
：流式細(xì)胞測(cè)量術(shù)是用于主要在生物科學(xué)研究和醫(yī)學(xué)方面的大量應(yīng)用中粒子和細(xì)胞的分析的強(qiáng)大的工具。所述技術(shù)的分析強(qiáng)度在于其能夠使單一粒子(包含生物粒子，例如細(xì)胞、細(xì)菌和病毒)快速連續(xù)地以高達(dá)數(shù)千粒子/秒的速率游行穿過(guò)通常來(lái)自激光的聚焦光點(diǎn)。此焦點(diǎn)處的高光子通量通過(guò)粒子產(chǎn)生光的散射和/或從粒子或附接到可收集和分析的粒子的標(biāo)簽產(chǎn)生光的發(fā)射。此給予用戶關(guān)于個(gè)別粒子的大量信息，此可快速與關(guān)于粒子或細(xì)胞的群體的統(tǒng)計(jì)信息結(jié)合。在流式細(xì)胞測(cè)量術(shù)中，通常使用多射束多波長(zhǎng)激勵(lì)來(lái)增加可充當(dāng)光學(xué)報(bào)導(dǎo)子的熒光團(tuán)的可用數(shù)目。增加的頻譜空間允許針對(duì)個(gè)別目標(biāo)的較大程度的測(cè)定多路復(fù)用。多射束流式細(xì)胞測(cè)量術(shù)可以若干不同方式實(shí)施。最簡(jiǎn)單的方式是，沿著相同光軸協(xié)同定位射束。在此情況下，多路復(fù)用受到由協(xié)同定位射束的波長(zhǎng)激勵(lì)的熒光團(tuán)的頻譜重疊限制。在大多數(shù)系統(tǒng)中，射束以堆疊方式遞送到流動(dòng)池，射束之間具有小距離。此允許針對(duì)每一激光或其它類型的光的空間上分離的詢問(wèn)區(qū)。在這些系統(tǒng)中，空間分離的量值經(jīng)選擇以減小鄰近激光之間的串?dāng)_，同時(shí)最小化歸因于流體系統(tǒng)的波動(dòng)的粒子位置的不確定性。隨著空間分離增加，串?dāng)_減小，但粒子位置的不確定性增加。歸因于要求高粒子分析速率和高照明強(qiáng)度的系統(tǒng)要求，需要目標(biāo)處的小激光點(diǎn)大小。在大多數(shù)系統(tǒng)中，需要匯聚射束來(lái)實(shí)現(xiàn)目標(biāo)上的此水平的聚焦。匯聚射束通常通過(guò)擴(kuò)展激光(例如準(zhǔn)直或部分準(zhǔn)直)且隨后使其傳播穿過(guò)聚焦透鏡來(lái)產(chǎn)生。對(duì)于具有多個(gè)激光的系統(tǒng)，準(zhǔn)直光束可堆疊，存在幾百微米的位移以產(chǎn)生所述次序中的最終光點(diǎn)分離。準(zhǔn)直射束隨后穿過(guò)單一聚焦透鏡，如圖1中所見(jiàn)，且隨后傳播到詢問(wèn)區(qū)，粒子在詢問(wèn)區(qū)傳遞。單透鏡方法已經(jīng)證實(shí)是有效的且好幾十年一直是主流。它的缺點(diǎn)是，聚焦透鏡同時(shí)耦合到系統(tǒng)中的所有射束。單一聚焦透鏡的調(diào)整或?qū)嵤┢渌哥R操縱來(lái)改進(jìn)一個(gè)射束的聚焦會(huì)使鄰近射束的聚焦降級(jí)。此系統(tǒng)可產(chǎn)生較低質(zhì)量數(shù)據(jù)，需要更多工作來(lái)校準(zhǔn)聚焦，并且還使光源(例如激光)的互換性極其困難。如本文呈現(xiàn)的這些缺點(diǎn)的解決方案是一種系統(tǒng)，在所述系統(tǒng)中匯聚射束可代替準(zhǔn)直射束傳播穿過(guò)光學(xué)鏈，且不引入像差。參看圖2。此系統(tǒng)將允許調(diào)整每一激光束，而不干擾鄰近激光束的光學(xué)路徑，且實(shí)現(xiàn)改進(jìn)的數(shù)據(jù)和結(jié)果。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：在一個(gè)方面中，揭示一種用于流式細(xì)胞儀的光學(xué)系統(tǒng)。所述光學(xué)系統(tǒng)可包含流動(dòng)池，其包含粒子詢問(wèn)區(qū)。所述光學(xué)系統(tǒng)可包含至少兩個(gè)光學(xué)子單元，其包括產(chǎn)生光束的光源和經(jīng)配置以將光束轉(zhuǎn)換為匯聚光束的匯聚元件。在一個(gè)方面中，揭示一種組合流式細(xì)胞儀中的光束的方法。所述方法可包含提供至少兩個(gè)光束。所述方法可包含使所述光束中的每一者以每匯聚元件一個(gè)光束的比率通過(guò)匯聚元件，其中離開(kāi)匯聚元件的光束為匯聚光束。所述方法可包含使匯聚光束中的至少一者通過(guò)至少一個(gè)二向色元件。所述方法可包含在進(jìn)入流動(dòng)池內(nèi)的詢問(wèn)區(qū)后使匯聚光束彼此空間上分離。在一個(gè)方面中，揭示一種流式細(xì)胞儀光學(xué)對(duì)準(zhǔn)方法。所述方法可包含產(chǎn)生至少兩個(gè)匯聚光束，其中所述匯聚光束中的每一者通過(guò)使光源產(chǎn)生的光束通過(guò)匯聚元件而產(chǎn)生，其中光源和匯聚元件附著到光學(xué)-機(jī)械安裝件。所述方法可包含使匯聚光束中的至少一者通過(guò)二向色元件。所述方法可包含使匯聚光束中的每一者在一組空間上相異的第一位置中通過(guò)流動(dòng)池。所述方法可包含調(diào)整光學(xué)-機(jī)械安裝件中的至少一者以再定位至少一個(gè)光源和至少一個(gè)匯聚元件。所述方法可包含使匯聚光束中的每一者在一組空間上相異的第二位置中通過(guò)流動(dòng)池。附圖說(shuō)明為了更加全面地理解本文中所揭示的原理以及其優(yōu)點(diǎn)，現(xiàn)在參考結(jié)合附圖所作的以下描述，附圖中：圖1為根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)的用于流式細(xì)胞儀的光學(xué)系統(tǒng)的說(shuō)明。圖2為根據(jù)各種實(shí)施例中的一者用于流式細(xì)胞儀的光學(xué)系統(tǒng)的說(shuō)明。圖3為根據(jù)各種實(shí)施例中的一者用于流式細(xì)胞儀的光學(xué)系統(tǒng)的一部分的特寫(xiě)視圖的說(shuō)明。圖4說(shuō)明根據(jù)各種實(shí)施例中的一者的流程圖。圖5A為根據(jù)使用準(zhǔn)直射束的現(xiàn)有技術(shù)的用于流式細(xì)胞儀的光學(xué)系統(tǒng)的說(shuō)明。圖5B為根據(jù)使用匯聚射束的各種實(shí)施例中的一者的用于流式細(xì)胞儀的光學(xué)系統(tǒng)的說(shuō)明。雖然結(jié)合各種實(shí)施例來(lái)描述本發(fā)明教示，但是并不打算將本發(fā)明教示限于這類實(shí)施例。相反，如所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)了解，本教示涵蓋各種替代方案、修改和等效物。此外，在描述各種實(shí)施例時(shí)，本說(shuō)明書(shū)可能將方法和/或過(guò)程呈現(xiàn)為特定序列的步驟。然而，在方法或過(guò)程不依賴于本文闡述的步驟的特定次序的程度上，方法或過(guò)程不應(yīng)限于所描述的步驟的特定序列。如所屬領(lǐng)域的一般技術(shù)人員將了解，步驟的其它序列可以是可能的。因此，在說(shuō)明書(shū)中闡述的步驟的特定次序不應(yīng)理解為對(duì)權(quán)利要求書(shū)的限制。另外，針對(duì)方法和/或過(guò)程的權(quán)利要求書(shū)不應(yīng)限于以書(shū)寫(xiě)的次序進(jìn)行其步驟，并且所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員可以易于了解的是所述序列可以變化并且仍保持在各種實(shí)施例的精神和范圍內(nèi)。為了可更容易理解本發(fā)明，首先界定特定術(shù)語(yǔ)。貫穿具體實(shí)施方式陳述額外定義。具體實(shí)施方式隨附描述和圖式(其包含展現(xiàn)1)中描述用于流式細(xì)胞儀中的光學(xué)系統(tǒng)的系統(tǒng)、方法和設(shè)備的實(shí)施例。圖式中，陳述許多特定細(xì)節(jié)以提供對(duì)某些實(shí)施例的徹底理解。熟練的技術(shù)人員將能夠理解，本文中所描述的光學(xué)系統(tǒng)可用于使用光學(xué)鏈的多種工具中，包含(但不限于)流式細(xì)胞儀。另外，熟練的技術(shù)人員將理解，可在沒(méi)有這些特定細(xì)節(jié)的情況下實(shí)踐某些實(shí)施例。此外，所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員可容易理解，方法得以呈現(xiàn)和執(zhí)行的特定序列是說(shuō)明性的，且預(yù)期所述序列可變化且仍保持在某些實(shí)施例的精神和范圍內(nèi)。雖然結(jié)合各種實(shí)施例來(lái)描述本發(fā)明教示，但是并不打算將本發(fā)明教示限于這類實(shí)施例。相反，如所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)了解，本教示涵蓋各種替代方案、修改和等效物。此外，在描述各種實(shí)施例時(shí)，本說(shuō)明書(shū)可能將方法和/或過(guò)程呈現(xiàn)為特定序列的步驟。然而，在方法或過(guò)程不依賴于本文闡述的步驟的特定次序的程度上，方法或過(guò)程不應(yīng)限于所描述的步驟的特定序列。如所屬領(lǐng)域的一般技術(shù)人員將了解，步驟的其它序列可以是可能的。因此，在說(shuō)明書(shū)中闡述的步驟的特定次序不應(yīng)理解為對(duì)權(quán)利要求書(shū)的限制。另外，針對(duì)方法和/或過(guò)程的權(quán)利要求書(shū)不應(yīng)限于以書(shū)寫(xiě)的次序進(jìn)行其步驟，并且所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員可以易于了解的是所述序列可以變化并且仍保持在各種實(shí)施例的精神和范圍內(nèi)。為了可更容易理解本發(fā)明，首先界定特定術(shù)語(yǔ)。貫穿具體實(shí)施方式陳述額外定義。如本文所使用，“約”意味著正或負(fù)20％，更優(yōu)選地正或負(fù)10％，更優(yōu)選地正或負(fù)5％，最優(yōu)選地正或負(fù)2％。如本文所使用，“二向色”意味著波長(zhǎng)選擇性地反射元件。如本文所使用，“流動(dòng)池”意味著具有選自以下形狀的內(nèi)部形狀的通道、腔室或毛細(xì)管：矩形、正方形、橢圓形、扁球形、圓形、八邊形、七邊形、六邊形、五邊形和三角形。如本文所使用，“通道”意味著具有至少一入口和優(yōu)選地一出口的路線、路徑或?qū)Ч?，其可含有一定量的流體且具有選自以下形狀的內(nèi)部形狀：矩形、正方形、橢圓形、扁球形、圓形、八邊形、七邊形、六邊形、五邊形和三角形。如本文所使用，“粒子”意味著小單元的物質(zhì)，包含(但不限于)：生物細(xì)胞，例如真核和原核細(xì)胞、古菌、細(xì)菌、霉菌、植物細(xì)胞、酵母、原蟲(chóng)、阿米巴、原生生物、動(dòng)物細(xì)胞；細(xì)胞器；有機(jī)/無(wú)機(jī)元素或分子；微球體；以及例如水包油等不可混溶的流體的液滴。如本文所使用，“分析物”意味著待分析的物質(zhì)或材料。如本文所使用，“探針”意味著經(jīng)標(biāo)記或以其它方式標(biāo)示且用于檢測(cè)或識(shí)別流體或樣本中的另一物質(zhì)的物質(zhì)。如本文所使用，“目標(biāo)”意味著將與匯聚射束接觸的任何事物如本文所使用，“詢問(wèn)區(qū)”是其中光束(例如激光)與粒子相交的點(diǎn)，或光學(xué)系統(tǒng)檢測(cè)到光散射和熒光的地點(diǎn)。如本文所使用，“最終聚焦透鏡”意味著位于光學(xué)鏈中某處的匯聚元件。如本文所使用，“流體流”意味著攜載和對(duì)準(zhǔn)粒子使得其成一列縱隊(duì)穿過(guò)光束的流。在各種實(shí)施例中，本申請(qǐng)案中所揭示的光學(xué)系統(tǒng)可與關(guān)于流式細(xì)胞測(cè)量術(shù)的各種設(shè)備、系統(tǒng)和方法結(jié)合使用。參看第12/239,390和12/209,084號(hào)美國(guó)專利申請(qǐng)案，其兩者全文以引用的方式并入本文中。在流式細(xì)胞測(cè)量術(shù)中，常常采用多射束激勵(lì)來(lái)增加可用作光學(xué)報(bào)導(dǎo)子的熒光團(tuán)的可用數(shù)目。增加的頻譜空間允許針對(duì)個(gè)別目標(biāo)的較大程度的測(cè)定多路復(fù)用。多射束流式細(xì)胞測(cè)量術(shù)可以若干不同方式實(shí)施。最簡(jiǎn)單的方式是，沿著相同光軸協(xié)同定位射束。然而，所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員將理解，干擾、頻譜重疊和串?dāng)_將限制多路復(fù)用的程度。為緩解此問(wèn)題，射束以堆疊方式遞送到流動(dòng)池。參看圖1，展示流式細(xì)胞測(cè)量術(shù)領(lǐng)域中的現(xiàn)有技術(shù)光學(xué)系統(tǒng)的示意圖。此系統(tǒng)包括產(chǎn)生準(zhǔn)直光束104的至少一個(gè)光源102。現(xiàn)有技術(shù)系統(tǒng)使用板二向色元件106，準(zhǔn)直光束104穿過(guò)所述元件。準(zhǔn)直光束104在其穿過(guò)二向色元件106時(shí)保持準(zhǔn)直以便聚焦在光學(xué)鏈的末端。準(zhǔn)直的一個(gè)效應(yīng)是，其最小化當(dāng)光束穿過(guò)板二向色元件106時(shí)像差的引入。如果使用匯聚射束，那么此些像差將導(dǎo)致較差數(shù)據(jù)質(zhì)量且是例如流式細(xì)胞測(cè)量術(shù)中使用的光學(xué)系統(tǒng)等光學(xué)系統(tǒng)中的重要擔(dān)憂。當(dāng)光束命中詢問(wèn)區(qū)內(nèi)的目標(biāo)或粒子時(shí)，射束剖面具有通常被稱為“光斑尺寸”的區(qū)域。通常，如果光束可配合到較小空間，那么其射束強(qiáng)度增加，這導(dǎo)致相對(duì)于背景噪聲的較高信號(hào)發(fā)射。為了使激光的光斑尺寸具有高信號(hào)與背景噪聲比率，在光學(xué)鏈的末端使用匯聚元件108以減小射束的光斑尺寸且增加目標(biāo)的詢問(wèn)之前的射束強(qiáng)度。正如幾乎所有光學(xué)系統(tǒng)中的情況，像差的降低和恰當(dāng)聚焦是合乎需要的。在流式細(xì)胞測(cè)量術(shù)中常常空間上分離(堆疊)光束使得目標(biāo)可由不同光源102在不同時(shí)間詢問(wèn)，且光源102不會(huì)彼此干擾或形成涉及串?dāng)_的問(wèn)題。如圖1中所展示的系統(tǒng)的最大問(wèn)題是，若干準(zhǔn)直光束104正以堆疊方式進(jìn)入準(zhǔn)直匯聚元件108，且為了恰當(dāng)?shù)鼐劢箓€(gè)別光束，匯聚元件108可需要移動(dòng)。射束經(jīng)由匯聚元件108耦合，且移動(dòng)透鏡以調(diào)整一個(gè)射束可不利地影響鄰近光束的調(diào)整。另外，恰當(dāng)?shù)匦?zhǔn)此光學(xué)系統(tǒng)可涉及若干復(fù)雜透鏡操縱，且盡最大努力也可能仍導(dǎo)致光學(xué)系統(tǒng)的不太完美的校準(zhǔn)。所得數(shù)據(jù)的質(zhì)量可較差，這可導(dǎo)致在背景噪聲上方不可檢測(cè)到重要信息，且導(dǎo)致基本研究中數(shù)據(jù)遺漏或醫(yī)療應(yīng)用中的不當(dāng)診斷。圖1中呈現(xiàn)的問(wèn)題的解決方案的一個(gè)實(shí)施例在圖2、3和5B中說(shuō)明，其中可通過(guò)將最終聚焦元件移動(dòng)到光學(xué)路徑前方使每一光源102的光學(xué)路徑獨(dú)立于另一光源102。此區(qū)別在比較圖1和圖5B中的匯聚元件108的位置時(shí)可看見(jiàn)。此系統(tǒng)可具有與一個(gè)光源102成對(duì)的一個(gè)匯聚元件108。此系統(tǒng)通過(guò)使每一個(gè)別光源路徑內(nèi)進(jìn)行的許多透鏡操縱解耦而使制造過(guò)程中和所屬領(lǐng)域中的光學(xué)對(duì)準(zhǔn)簡(jiǎn)單得多。一種模塊化方法，借助所述模塊化方法，具有產(chǎn)生聚焦到最終光斑尺寸的匯聚光束206所必需的所有光學(xué)硬件的完全組裝的光學(xué)子單元502可安裝到儀器中或被移除和更換。因此，光學(xué)系統(tǒng)的對(duì)準(zhǔn)是光學(xué)子單元502的簡(jiǎn)單操縱，借此，一次僅可調(diào)整一個(gè)光學(xué)路徑。用于以堆疊或共線方式組合匯聚光束206的標(biāo)準(zhǔn)方法(圖1)將利用板二向色元件106來(lái)引導(dǎo)匯聚光束206。但，這對(duì)于上文描述的在光學(xué)路徑開(kāi)始處產(chǎn)生匯聚光束206的光學(xué)設(shè)置將不可能實(shí)現(xiàn)。板二向色元件106將引入像差(散光和慧形像差)，借此使激光強(qiáng)度剖面的最終空間分布降級(jí)，且借此使儀器的性能降級(jí)。由板二向色元件106引入到匯聚光束206的像差在已知技術(shù)中描述。J.Bratt，《針對(duì)傾斜平面平行板的波前像差系數(shù)的分析表達(dá)(Analyticalexpressionsforthewave-frontaberrationcoefficientsofatiltedplane-parallelplate)》，應(yīng)用光學(xué)，第36期，8459-8467(1997)。j.vandenEerenbeemd和S.Stallinga，《針對(duì)包括傾斜平面并行板的系統(tǒng)的緊湊型系統(tǒng)描述(Compactsystemdescriptionforsystemscomprisingatiltedplaneparallelplate)》，應(yīng)用光學(xué)，第46期，319-326(2007)。如圖1中所展示，用于流式細(xì)胞儀的光學(xué)系統(tǒng)可包含流動(dòng)池110和至少兩個(gè)光學(xué)子單元502，如圖5B如中所見(jiàn)。流動(dòng)池110可包含粒子詢問(wèn)區(qū)。大體來(lái)說(shuō)，光束可聚焦到詢問(wèn)區(qū)上，在詢問(wèn)區(qū)中粒子可穿過(guò)聚焦光束。光學(xué)子單元502可包括光源102和匯聚元件108。在各種實(shí)施例中，光源102可產(chǎn)生大體上單色光束。在各種實(shí)施例中，光源102可產(chǎn)生多色光束。匯聚元件108可經(jīng)配置以將單色或多色光轉(zhuǎn)換為匯聚光束206。在各種實(shí)施例中，匯聚光束可聚焦到約10微米的直徑。在各種實(shí)施例中，匯聚光束可聚焦到約一微米與20微米之間的直徑。在各種實(shí)施例中，匯聚光束可聚焦到約五微米與一百微米之間的直徑。在各種實(shí)施例中，進(jìn)入?yún)R聚元件108的光束可擴(kuò)展、匯聚或準(zhǔn)直。在各種實(shí)施例中，光學(xué)子單元502可附著到光學(xué)-機(jī)械安裝件。光學(xué)-機(jī)械安裝件可由操作者操縱以調(diào)整匯聚光束206的空間分離，或可經(jīng)操縱以調(diào)整流動(dòng)池110內(nèi)匯聚光束206的聚焦。此系統(tǒng)將允許調(diào)整每一激光束，而不干擾鄰近激光束的光學(xué)路徑，且實(shí)現(xiàn)改進(jìn)的數(shù)據(jù)和結(jié)果。在各種實(shí)施例中，光學(xué)系統(tǒng)進(jìn)一步包括至少一個(gè)二向色元件204，其經(jīng)配置以將匯聚光束206引導(dǎo)到流動(dòng)池110。二向色元件204可包括兩個(gè)鄰接棱鏡304和位于鄰接棱鏡304之間的波長(zhǎng)選擇性涂層302。在各種實(shí)施例中，可使用三向色或更多向色的元件，且可利用任何數(shù)目的棱鏡304和任何數(shù)目的波長(zhǎng)選擇性涂層302。在各種實(shí)施例中，所使用的二向色元件204可呈立方體的形狀。立方體形狀可允許進(jìn)入面近似垂直于傳入射束，且退出面可近似垂直于所透射的匯聚光束206。在各種實(shí)施例中，立方體結(jié)構(gòu)可減少或幾乎消除像差的引入。在各種實(shí)施例中，立方體可通過(guò)接合兩個(gè)45度棱鏡304來(lái)構(gòu)造。在各種實(shí)施例中，波長(zhǎng)選擇性涂層302可放置在棱鏡304之間的鄰接表面上。因?yàn)閰R聚波前穿過(guò)立方體的傳播允許匯聚光束206中較少和較不明顯的像差，所以不必使準(zhǔn)直光束104傳播穿過(guò)二向色立方體。在各種實(shí)施例中，多激光系統(tǒng)中的最終聚焦透鏡(例如圖5B中的匯聚元件108)可在光學(xué)路徑中較早重定位，其中其可從其它光軸解耦。在此類實(shí)施例中，具有獨(dú)立匯聚元件108的透鏡組合件可安裝在三軸光學(xué)-機(jī)械安裝件上，具有用于瞄準(zhǔn)和聚焦匯聚光束206的獨(dú)立機(jī)械調(diào)整。在各種實(shí)施例中，可針對(duì)每一匯聚光束206個(gè)別地調(diào)整每一射束腰部和位置的定位，而不影響其它匯聚光束206的聚焦。此些配置還消除色度和球面像差所導(dǎo)致的問(wèn)題，所述問(wèn)題在不同波長(zhǎng)的若干射束傳播穿過(guò)相同準(zhǔn)直匯聚元件108且具有聚焦在相同平面中的要求時(shí)復(fù)雜化。在使用二向色立方體(或具有類似特性的其它幾何形狀)的各種實(shí)施例中，可構(gòu)造多個(gè)光源102的匯聚光束206配置，其中每一光束光學(xué)路徑的光學(xué)組件的調(diào)整解耦。另外，此類實(shí)施例允許創(chuàng)建模塊化流式細(xì)胞儀。在解耦光束線路的各種實(shí)施例中，添加額外光束線路并不需要必須調(diào)整耦合的光學(xué)組件。此類實(shí)施例在所屬領(lǐng)域中和制造環(huán)境中特別有利。至少兩個(gè)光學(xué)子單元502與至少一個(gè)二向色元件204的組合之前尚未實(shí)踐過(guò)。一個(gè)原因可為，與含有少得多的材料的板二向色元件204相比，立方體或其它幾何形狀的形式的二向色元件204的成本增加。另外，光學(xué)子單元502的產(chǎn)生更復(fù)雜。在各種實(shí)施例中，波長(zhǎng)選擇性涂層302充當(dāng)長(zhǎng)通濾波器。在其它實(shí)施例中，波長(zhǎng)選擇性涂層302充當(dāng)短通濾波器。在額外實(shí)施例中，鏡面元件112可用于當(dāng)前光學(xué)系統(tǒng)的各種實(shí)施例中。在各種實(shí)施例中，可在x、y和z坐標(biāo)系上調(diào)整光學(xué)-機(jī)械安裝件。在光學(xué)-機(jī)械安裝件上放置光學(xué)子單元502可允許獨(dú)立于用于創(chuàng)建恰當(dāng)聚焦和光斑尺寸的其它光源102調(diào)整每一光源102，同時(shí)具有特定應(yīng)用必需的較少和較不明顯的像差。過(guò)去已經(jīng)使用板二向色元件106，因?yàn)槠鋵?duì)于大部分應(yīng)用以減少的成本運(yùn)作良好。然而，當(dāng)前系統(tǒng)的各種實(shí)施例出于上文所描述原因優(yōu)于透射準(zhǔn)直光束104的板二向色系統(tǒng)的各種實(shí)施例。在各種實(shí)施例中，粒子移動(dòng)穿過(guò)流動(dòng)池110。在此類實(shí)施例中，粒子可由匯聚光束206中的每一者獨(dú)立地詢問(wèn)。在各種實(shí)施例中，匯聚元件108可為凸面透鏡。在各種實(shí)施例中，當(dāng)通過(guò)詢問(wèn)區(qū)時(shí)，空間分離可在約80微米到約200微米之間。在各種實(shí)施例中，空間分離可在約10微米到約100微米之間。在各種實(shí)施例中，空間分離可為約150微米。在各種實(shí)施例中，匯聚光束206可具有平坦頂部強(qiáng)度剖面。在各種實(shí)施例中，匯聚光束206可具有高斯強(qiáng)度剖面。在各種實(shí)施例中，強(qiáng)度剖面可取決于應(yīng)用而更改。圖4為展示根據(jù)各種實(shí)施例用于流式細(xì)胞儀光學(xué)對(duì)準(zhǔn)的方法400的示范性流程圖。在步驟402中，可提供至少兩個(gè)光束。在步驟404中，光束中的每一者可以每匯聚元件一個(gè)光束的比率穿過(guò)匯聚元件，其中離開(kāi)匯聚元件的光束可為匯聚光束206。在步驟406中，匯聚光束206中的至少一者可穿過(guò)至少一個(gè)二向色元件204。在步驟408中，匯聚光束206可在進(jìn)入流動(dòng)池110內(nèi)的詢問(wèn)區(qū)后彼此空間上分離。在所述方法的各種實(shí)施例中，光束可為單色光發(fā)射，且可由光源102產(chǎn)生。在各種實(shí)施例中，光源102和匯聚元件108可附著到光學(xué)-機(jī)械安裝件。在各種實(shí)施例中，光學(xué)-機(jī)械安裝件可在x、y和z坐標(biāo)系上調(diào)整。在各種實(shí)施例中，另一步驟可包含用經(jīng)配置成以第二波長(zhǎng)產(chǎn)生單色發(fā)光的第二光源102更換經(jīng)配置成以第一波長(zhǎng)產(chǎn)生單色發(fā)光的第一光源102。在所述方法的各種實(shí)施例中，二向色元件204可經(jīng)配置以防止向匯聚光束206中引入像差。在各種實(shí)施例中，二向色元件204可呈立方體的形狀。在各種實(shí)施例中，二向色元件204可為長(zhǎng)通濾波器或短通濾波器。在各種實(shí)施例中，另一步驟可包含用經(jīng)配置以通過(guò)第二范圍的波長(zhǎng)的至少一個(gè)第二二向色元件204更換經(jīng)配置以通過(guò)第一范圍的波長(zhǎng)的至少一個(gè)第一二向色元件204。在所述方法的各種實(shí)施例中，光學(xué)-機(jī)械安裝件的調(diào)整可在x、y和z軸上發(fā)生。在所述方法的各種實(shí)施例中，另一步驟可包含詢問(wèn)粒子，其中所述粒子正在流體流中通過(guò)流動(dòng)池110。在各種實(shí)施例中，流體可為液體。在各種實(shí)施例中，另一步驟可包含用檢測(cè)元件檢測(cè)光散射。在各種實(shí)施例中，檢測(cè)元件可包括光電倍增管。在各種實(shí)施例中，可存在當(dāng)匯聚光束206撞擊目標(biāo)時(shí)產(chǎn)生的前向和側(cè)向散射光。在各種實(shí)施例中，側(cè)向散射光可通過(guò)檢測(cè)透鏡，且隨后進(jìn)入針孔收集纖維陣列，其中每一針孔可對(duì)應(yīng)于已以空間上分離的方式進(jìn)入流動(dòng)池110的特定匯聚光束206。在各種實(shí)施例中，空間分離可以在約80微米到約200微米的范圍內(nèi)變化。在各種實(shí)施例中，空間分離可在約10微米到約100微米之間。在各種實(shí)施例中，空間分離可為約150微米。在各種實(shí)施例中，光纜可將來(lái)自每一針孔的光連接到收集塊。在各種實(shí)施例中，收集塊可包含準(zhǔn)直儀、濾波器元件和光電倍增管。在各種實(shí)施例中，信號(hào)可從模擬數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為數(shù)字?jǐn)?shù)據(jù)，所述數(shù)字?jǐn)?shù)據(jù)隨后可在計(jì)算機(jī)上存儲(chǔ)和分析。在各種實(shí)施例中，前向散射光可通過(guò)阻擋桿、聚光透鏡，且從模擬數(shù)據(jù)信號(hào)轉(zhuǎn)換為數(shù)字?jǐn)?shù)據(jù)信號(hào)。在各種實(shí)施例中，數(shù)字?jǐn)?shù)據(jù)信號(hào)可隨后在計(jì)算機(jī)上存儲(chǔ)和分析。在各種實(shí)施例中，另一步驟可包含向粒子應(yīng)用流體動(dòng)力和/或聲學(xué)聚焦。在各種系統(tǒng)、設(shè)備和方法實(shí)施例中，光學(xué)子單元502、二向色元件204和收集塊可與第一波長(zhǎng)的光相關(guān)聯(lián)。在各種實(shí)施例中，上文描述的光學(xué)子單元502、二向色元件204和收集塊可從流式細(xì)胞儀系統(tǒng)的其余部分移除，且隨后用與第二波長(zhǎng)的光相關(guān)聯(lián)的不同的光學(xué)子單元502、二向色元件204和收集塊替換。在各種實(shí)施例中，其中存儲(chǔ)數(shù)字?jǐn)?shù)據(jù)的計(jì)算機(jī)可用光學(xué)組件的此改變編程，且隨后使用新參數(shù)集分析數(shù)據(jù)。在所述方法的各種實(shí)施例中，二向色元件204可經(jīng)配置以防止向匯聚光束206中引入像差。如先前論述，板二向色元件106(如圖3中所見(jiàn))向匯聚光束206而非準(zhǔn)直光束104中引入像差。在各種實(shí)施例中，二向色元件204可呈立方體的形式，這可允許匯聚光束206的所有部分同時(shí)進(jìn)入立方體，這因此可允許匯聚光束206進(jìn)入具有不同折射率的新的媒體，且引入極少像差或不引入像差。在這種配置中，退出的匯聚光束206可進(jìn)入空氣或其源于的另一媒體，也不在后端引入像差。在所述方法的各種實(shí)施例中，匯聚光束206可具有平坦頂部強(qiáng)度剖面。此平坦頂部強(qiáng)度剖面可允許關(guān)于目標(biāo)的均勻詢問(wèn)：所述目標(biāo)為粒子、細(xì)胞、珠粒還是其它?，F(xiàn)參看圖5A和圖5B，說(shuō)明現(xiàn)有技術(shù)與本發(fā)明的另一比較。在圖5A中，可看見(jiàn)光源102產(chǎn)生準(zhǔn)直光束104。在一些光束操縱發(fā)生(未圖示)之后，準(zhǔn)直光束104通過(guò)匯聚元件108，且隨后撞擊目標(biāo)504。在此說(shuō)明中，存在全部通過(guò)單一匯聚元件108的三個(gè)光束。每一光束必須通過(guò)移動(dòng)匯聚元件108來(lái)聚焦。在此說(shuō)明中清楚的是，通過(guò)改變匯聚元件108的位置聚焦一個(gè)光束將影響另外兩個(gè)光束，因?yàn)樗腥齻€(gè)光束通過(guò)相同匯聚元件108。此系統(tǒng)比不上圖5B中所見(jiàn)的系統(tǒng)。圖5B描繪用于流式細(xì)胞儀的光學(xué)系統(tǒng)的一個(gè)實(shí)例實(shí)施例。圖5B中，每一匯聚光束206可產(chǎn)生自含有光源102和匯聚元件108兩者的光學(xué)子單元502。在此系統(tǒng)中，光學(xué)子單元502可安裝到光學(xué)-機(jī)械安裝件(未圖示)以聚焦和調(diào)整匯聚光束206。此系統(tǒng)可允許針對(duì)每一匯聚光束206獨(dú)立于其它匯聚光束206調(diào)整(通常)聚焦或光斑尺寸。此系統(tǒng)提供較高數(shù)據(jù)質(zhì)量、更容易的配置和模塊性，如遍及本說(shuō)明書(shū)詳述。提供以下實(shí)例是為了說(shuō)明但非限制本文中所揭示的實(shí)施例。實(shí)例1通過(guò)設(shè)定在45度角的平板二向色元件時(shí)的平坦頂部匯聚激光束剖面改變0平板二向色元件1平板二向色元件2平板二向色元件3平板二向色元件匯聚激光束在0與3平板二向色元件之間通過(guò)，且所得射束通過(guò)相機(jī)成像。x軸表示射束位置，且y軸表示射束強(qiáng)度。y軸上的強(qiáng)度已正規(guī)化到1(或100％)，其中1為所達(dá)到的最高強(qiáng)度。對(duì)于大多數(shù)應(yīng)用，射束寬度應(yīng)在90％下約跨50微米。在各種實(shí)施例中，射束寬度可約跨40微米或約跨10微米，同時(shí)維持至少約90％的射束強(qiáng)度。在各種實(shí)施例中，射束強(qiáng)度應(yīng)為至少約80％、至少約70％、至少約60％，或至少約50％，同時(shí)維持至少約跨50微米的射束寬度。當(dāng)使用0二向色板時(shí)可看見(jiàn)最佳射束，但當(dāng)即使添加1平板二向色元件時(shí)，也不能滿足粒子的最佳詢問(wèn)的條件。此實(shí)例說(shuō)明將匯聚光束206技術(shù)與板二向色元件106技術(shù)組合并不是最佳的。如上文所論述，匯聚光束206允許產(chǎn)生獨(dú)立的光學(xué)鏈。因此，另一技術(shù)(例如呈棱鏡的形式的二向色元件)必須并入到這些各種實(shí)施例中。實(shí)例2通過(guò)立方體形狀的二向色元件時(shí)的平坦頂部匯聚激光束剖面改變0立方體二向色元件1立方體二向色元件2立方體二向色元件匯聚激光束在0與2立方體二向色元件之間通過(guò)，且所得射束通過(guò)相機(jī)成像。x軸表示射束位置，且y軸表示射束強(qiáng)度。y軸上的強(qiáng)度已正規(guī)化到1(或100％)，其中1為所達(dá)到的最高強(qiáng)度。對(duì)于最佳詢問(wèn)條件，射束寬度應(yīng)約跨50微米，且至少約90％強(qiáng)度電平或更高。選擇50微米是因?yàn)樵搮^(qū)域允許足夠高的射束強(qiáng)度有效，同時(shí)使光斑尺寸最大化。當(dāng)使用0、1或2二向色立方體時(shí)可看見(jiàn)最佳射束。此實(shí)例表明與匯聚光束206兼容的二向色解決方案。不同于實(shí)例1，幾乎不存在可允許產(chǎn)生獨(dú)立光學(xué)路徑的射束剖面中的降級(jí)。實(shí)例3設(shè)定在45度角的二向色板的波前像差系數(shù)值(1/π)像差W400.0431最低階球面像差W600.0004第六階球面像差W222.2018最低階球面像差W42-0.0204第五階散光W31-0.7685第三階線性慧形像差W51-0.0065第五階線性慧形像差W33-0.0443立方慧形像差T＝1mm；n＝1.5145；λ＝637nm；光瞳半徑＝9mm；傾角＝45度；r＝1實(shí)例3呈現(xiàn)眾所周知的計(jì)算，其表明為何在匯聚光(例如激光)系統(tǒng)中使用二向色板產(chǎn)生具有顯著散光和慧形像差的不可接受的射束剖面。此些像差大大降低數(shù)據(jù)的質(zhì)量。T＝所使用的板的厚度；n＝折射率；λ＝光的波長(zhǎng)；光瞳半徑＝其中發(fā)生計(jì)算的玻璃上的光斑尺寸；傾角＝板的角度；且r＝距光軸(光瞳半徑的出口)的距離。實(shí)例4用于二向色立方體的波前像差系數(shù)值(1/π)像差W400.6345最低階球面像差W600.0094第六階球面像差W220.000最低階球面像差W420.000第五階散光W310.000第三階線性慧形像差W510.000第五階線性慧形像差W330.000立方慧形像差T＝20mm；n＝1.5145；l＝637nm；光瞳半徑＝9mm；傾角＝0度；r＝1等式請(qǐng)參看上文實(shí)例4呈現(xiàn)眾所周知的計(jì)算，其表明使用二向色立方體代替二向色板產(chǎn)生零慧形像差或散光。相比于將匯聚光(例如激光)射束并入到二向色板光學(xué)系統(tǒng)中的儀器，這些減少產(chǎn)生高得多的質(zhì)量的數(shù)據(jù)。實(shí)例5-共面聚焦藍(lán)激光束聚焦紫激光束聚焦藍(lán)和紫激光束聚焦實(shí)例5中的數(shù)據(jù)呈現(xiàn)使用各自包括光源和匯聚元件的兩個(gè)光學(xué)子單元，其在不使用最終聚焦透鏡的情況下獨(dú)立聚焦。在此實(shí)例中的子單元包含可空間上調(diào)整的光學(xué)-機(jī)械安裝件。更確切地說(shuō)，在以上實(shí)例中的光源被為藍(lán)激光和紫激光。通過(guò)使用光學(xué)子單元發(fā)生聚焦，其貫穿本發(fā)明更詳細(xì)地論述。標(biāo)題為“藍(lán)激光束聚焦”的圖是兩個(gè)激光系統(tǒng)，其中藍(lán)激光束已獨(dú)立于已被阻擋裝置阻擋的紫激光束而聚焦到相機(jī)中。對(duì)于流式細(xì)胞儀內(nèi)的最佳詢問(wèn)條件，射束寬度為約跨50微米，至少約90％強(qiáng)度電平或更高。高斯聚焦約2微米。激光束剖面和聚焦可取決于應(yīng)用而具有不同最佳配置。標(biāo)題為“紫激光束聚焦”的圖是相同的兩個(gè)激光系統(tǒng)，其中紫激光束已獨(dú)立于已被阻擋裝置阻擋的藍(lán)激光束而聚焦到相機(jī)中。對(duì)于流式細(xì)胞儀內(nèi)的最佳詢問(wèn)條件，射束寬度為約跨50微米，至少約90％強(qiáng)度電平或更高。高斯聚焦約2微米。激光束剖面和聚焦可取決于應(yīng)用而具有不同最佳配置。標(biāo)題為“藍(lán)和紫激光束聚焦”的圖呈現(xiàn)表明激光束及其射束塑形光學(xué)元件兩者已經(jīng)使用包含光學(xué)-機(jī)械安裝件系統(tǒng)的光學(xué)子單元獨(dú)立地聚焦的數(shù)據(jù)。展示平坦頂部激光束剖面的左下部分已正規(guī)化到藍(lán)激光束，這是為何紫激光束展示不跨越曲線的高度的射束強(qiáng)度。然而，展示在已獨(dú)立調(diào)整每一子單元之后，每一激光的強(qiáng)度的約90％在約50微米的射束寬度上發(fā)生。針對(duì)每一激光束的高斯聚焦為約2微米。使用如現(xiàn)有技術(shù)中所使用的最終聚焦透鏡的此些調(diào)整將不允許獨(dú)立調(diào)整來(lái)聚焦每一激光束。對(duì)于最終聚焦透鏡的批評(píng)是，在優(yōu)化一個(gè)激光束剖面的同時(shí)，用戶可能減少另一激光束剖面的優(yōu)化。此問(wèn)題在其中實(shí)現(xiàn)獨(dú)立射束剖面優(yōu)化的系統(tǒng)中不會(huì)發(fā)生。實(shí)例6-減少像差射束堆疊藍(lán)激光束聚焦具有3mm45度窗口的藍(lán)激光束-處于高斯聚焦具有3mm45度窗口的藍(lán)激光束-處于流頂部聚焦藍(lán)激光束以2二向色立方體聚焦實(shí)例6將激光束穿過(guò)具有3mm寬度的45度平坦窗口(例如二向色板)時(shí)引入到光學(xué)系統(tǒng)的像差的量和強(qiáng)度與穿過(guò)二向色立方體元件、兩個(gè)二向色立方體或不穿過(guò)光學(xué)元件時(shí)的情況進(jìn)行比較。標(biāo)題為“藍(lán)激光束聚焦”的圖展示在不使用任何二向色元件的情況下聚焦到相機(jī)中的藍(lán)激光束。來(lái)自平坦頂部射束的數(shù)據(jù)在左下曲線中呈現(xiàn)，其中約90％的射束強(qiáng)度覆蓋約47微米的平坦頂部寬度。聚焦在高斯軸上為約2微米。標(biāo)題為“具有3mm45度窗口的藍(lán)激光束-處于高斯聚焦”的圖呈現(xiàn)來(lái)自相機(jī)處聚焦的藍(lán)激光束的數(shù)據(jù)，其中玻璃窗以約45度入射到激光源與相機(jī)之間的激光束傾斜。玻璃窗約3毫米厚且由玻璃構(gòu)成。聚焦在高斯軸上為約2微米。左下曲線展示不再存在平坦頂部射束剖面，且射束寬度的僅約2.5微米在約90％射束強(qiáng)度之上延伸。此數(shù)據(jù)與來(lái)自第一圖的數(shù)據(jù)之間的差異是歸因于由于使激光束通過(guò)光學(xué)元件而引入像差。此光學(xué)配置并不適于需要特定光學(xué)條件多種儀器，包含流式細(xì)胞測(cè)量術(shù)。當(dāng)射束剖面呈現(xiàn)此圖中展示的特性時(shí)，數(shù)據(jù)內(nèi)產(chǎn)生大量噪聲。標(biāo)題為“具有3mm45度窗口的藍(lán)激光束-處于平坦頂部聚焦”的圖呈現(xiàn)來(lái)自相機(jī)處聚焦的藍(lán)激光束的數(shù)據(jù)，其中玻璃窗以約45度入射到激光束傾斜。玻璃窗約3毫米厚且由玻璃構(gòu)成。通過(guò)最大平坦頂部剖面強(qiáng)度和寬度在何處發(fā)生而確定聚焦。相反情況在此圖中與上一圖一樣發(fā)生。在此情況下，平坦頂部射束處于約90％強(qiáng)度，延伸約48微米。然而，高斯已在約90％射束強(qiáng)度下約2微米上方較好延伸(到約13.7微米)。此數(shù)據(jù)與來(lái)自第一圖的數(shù)據(jù)之間的差異是歸因于由于使激光束通過(guò)光學(xué)元件而引入像差。所獲取數(shù)據(jù)中的噪聲也將隨著此射束剖面增加。標(biāo)題為“藍(lán)激光束以2二向色立方體聚焦”的圖呈現(xiàn)來(lái)自穿過(guò)兩個(gè)光學(xué)元件(二向色立方體)聚焦且聚焦到相機(jī)上的藍(lán)激光的數(shù)據(jù)。在此實(shí)例中相比于第一圖，激光束剖面極其緊密地匹配，其展示所述兩個(gè)二向色立方體已經(jīng)引入極少像差(如果存在的話)。這是因?yàn)楫?dāng)傳播穿過(guò)兩個(gè)二向色立方體時(shí)維持平坦頂部激光束剖面。平坦頂部聚焦具有約51.9微米的射束寬度，高斯聚焦具有約2微米的寬度。不同于由約3毫米玻璃窗口產(chǎn)生的射束剖面(其將很可能產(chǎn)生流式細(xì)胞測(cè)量術(shù)和其它應(yīng)用中不可用的數(shù)據(jù))，此射束剖面將產(chǎn)生高質(zhì)量數(shù)據(jù)。實(shí)例7-變化的百分比系數(shù)在流式細(xì)胞測(cè)量術(shù)中，粒子的復(fù)制測(cè)量值彼此一致的程度可表征為變化系數(shù)(CV)。信號(hào)強(qiáng)度的可變性的量度隨著粒子重復(fù)通過(guò)光源(例如激光束)而產(chǎn)生。可變性表達(dá)為平均信號(hào)強(qiáng)度的百分比。此統(tǒng)計(jì)測(cè)量值在此項(xiàng)技術(shù)中眾所周知，且被界定為100乘以標(biāo)準(zhǔn)偏差除以均值。通常，較低CV意味著復(fù)制測(cè)量值彼此一致。下圖中的每一者呈現(xiàn)兩個(gè)圖形曲線。點(diǎn)線曲線顯示CV，且虛線曲線顯示強(qiáng)度。y軸正規(guī)化到百分比，其中1.0為100百分比。x軸具有微米為單位。激光束在這些數(shù)據(jù)集中的每一者中匯聚。使用數(shù)據(jù)射線束'R2依次收集數(shù)據(jù)。通過(guò)將射束高度聚焦到約10微米來(lái)優(yōu)化激光聚焦。變化系數(shù)(CV)使用約50微米窗口寬度計(jì)算。下方的曲線顯示正規(guī)化強(qiáng)度以及移動(dòng)窗口CV。針對(duì)自由空間中的射束的強(qiáng)度和CV針對(duì)傳播穿過(guò)15mmBK7二向色立方體的射束的強(qiáng)度和CV針對(duì)以45度入射角傳播穿過(guò)3mmBK7板的射束的強(qiáng)度和CV標(biāo)題為“針對(duì)自由空間中的射束的強(qiáng)度和CV”的圖中的數(shù)據(jù)通過(guò)將激光束聚焦到相機(jī)上來(lái)獲取，其中光學(xué)路徑中不具有二向色光學(xué)元件。所述數(shù)據(jù)展示平坦頂部激光束剖面，其中約50微米的激光束在約90％強(qiáng)度電平之上。CV下降到約0.5或約5％。標(biāo)題為“針對(duì)傳播穿過(guò)約15mmBK7二向色立方體的射束的強(qiáng)度和CV”的圖中的數(shù)據(jù)通過(guò)將激光束聚焦到相機(jī)上來(lái)獲取，其中激光束傳播穿過(guò)約15毫米BK7二向色立方體。BK7玻璃因其高透射速率和具有約1.5的折射率(取決于正透射的光的波長(zhǎng))而著名。所述數(shù)據(jù)展示平坦頂部激光束剖面，其中約50微米的激光束在約90％強(qiáng)度電平之上。CV下降到約0.5或約5％。更確切地說(shuō)，激光束剖面不變，引入極少像差或不引入像差。標(biāo)題為“針對(duì)以約45度入射角傳播穿過(guò)約3mmBK7板的射束的強(qiáng)度和CV”的圖中的數(shù)據(jù)通過(guò)將激光束聚焦到相機(jī)上來(lái)獲取，其中激光束以約45度入射角傳播穿過(guò)約3毫米BK7二向色板。所述數(shù)據(jù)展示激光束剖面，其中約明顯小于約50微米的激光束在約90％強(qiáng)度電平之上。CV的質(zhì)量如此差以致于y軸已更改為適應(yīng)高CV。例如此激光束剖面的激光束剖面已引入多個(gè)嚴(yán)重像差。所收集的數(shù)據(jù)將含有大量噪聲且可能不可用。在此實(shí)例中、清楚地展示標(biāo)準(zhǔn)平板二向色板不能夠適應(yīng)此系統(tǒng)中的匯聚激光束。優(yōu)選CV為約10％或更小。更優(yōu)選的CV為約9％或更小。更優(yōu)選的CV為約8％或更小。比8％更優(yōu)選的CV為約7％或更小。比7％更優(yōu)選的CV為約6％或更小。比6％更優(yōu)選的CV為約5％或更小。比5％更優(yōu)選的CV為約4％或更小。比4％更優(yōu)選的CV為約3％或更小。比3％更優(yōu)選的CV為約2％或更小。最優(yōu)選的CV為約1％或更小。當(dāng)前光學(xué)系統(tǒng)可通過(guò)能夠在光學(xué)鏈的開(kāi)始將光源獨(dú)立地聚焦到匯聚光束且隨后使所述匯聚光束穿過(guò)二向色立方體而非二向色板(此項(xiàng)技術(shù)中隨處可見(jiàn)的光學(xué)元件，其常常以45度成角入射到入射光源)而從每一個(gè)別光源(例如激光束)實(shí)現(xiàn)此些CV值。最佳光束剖面具有平坦頂部。最佳光束寬度為約30到約70微米之間。更佳光束寬度在約35到約65微米之間。更佳光束寬度在約40到約60微米之間。更佳光束寬度在約45到約55微米之間。光學(xué)鏈可包括一或多個(gè)二向色立方體、一或多個(gè)二向色板、一或多個(gè)鏡面、一或多個(gè)透鏡、一或多個(gè)自旋盤(pán)、一或多個(gè)濾光輪、一或多個(gè)物鏡、能夠反射或透射的元件，或此項(xiàng)技術(shù)中任何已知的光學(xué)元件。另外，光學(xué)元件可包括塑料、玻璃，或任何其它已知或有用的材料或材料的組合。舉例來(lái)說(shuō)，玻璃表面可涂覆有反射材料，其中所述反射材料可為除玻璃外的材料。雖然結(jié)合各種實(shí)施例來(lái)描述本發(fā)明教示，但是并不打算將本發(fā)明教示限于這類實(shí)施例。相反，如所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)了解，本教示涵蓋各種替代方案、修改和等效物。另外，在描述各種實(shí)施例的過(guò)程中，說(shuō)明書(shū)可能將方法和/或過(guò)程呈現(xiàn)為特定序列的步驟。然而，在方法或過(guò)程不依賴于本文闡述的步驟的特定次序的程度上，方法或過(guò)程不應(yīng)限于所描述的步驟的特定序列。如所屬領(lǐng)域的一般技術(shù)人員將了解，步驟的其它序列可以是可能的。因此，在說(shuō)明書(shū)中闡述的步驟的特定次序不應(yīng)理解為對(duì)權(quán)利要求書(shū)的限制。另外，針對(duì)方法和/或過(guò)程的權(quán)利要求書(shū)不應(yīng)限于以書(shū)寫(xiě)的次序進(jìn)行其步驟，并且所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員可以易于了解的是所述序列可以變化并且仍保持在各種實(shí)施例的精神和范圍內(nèi)。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3