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一種快速測定雨生紅球藻孢子破壁率的方法與流程

文檔序號:12548662閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種快速測定雨生紅球藻孢子破壁率的方法,其步驟是:

A、丙酮提取、測定已知樣品的蝦青素吸光度:

精確稱取定量雨生紅球藻樣品置于100ml容量瓶中,加入丙酮100ml定容至刻度,在室溫(20-25℃)下萃取5-15分鐘,充分振蕩使蝦青素充分析出,將上述溶液轉移至離心管,用3500-5000rpm離心2-5分鐘,使溶液和藻渣分離,取離心后上清液5ml轉移至100ml容量品,丙酮定容至100ml(即稀釋20倍),用紫外分光光度計(1cm光徑比色杯,以丙酮為空白對照溶液)測量475nm波長光吸光度A1;

B、對已知樣品研磨、勻漿使其破壁率達到100%后用丙酮提取、測定100%破壁樣品的蝦青素吸光度:

精確稱取定量雨生紅球藻樣品(上述相同樣品)置于試管分散機中,加入少量丙酮(2-5ml),5000-10000rpm研磨5分鐘(或組織勻漿機10000-15000轉勻漿5分鐘或充分研磨),將分散試管內的混合樣品轉移至100ml容量瓶中,用丙酮將附著的色素完全洗脫直至無色,并將全部液體轉移到容量瓶中,加入丙酮100ml定容至刻度,在室溫(20-25℃)下萃取5-15分鐘,充分振蕩使蝦青素充分析出,將上述溶液轉移至離心管,用3500-5000rpm鐘離心2-5分鐘,使溶液和藻渣分離,取離心后上清5ml轉移至100ml容量品,丙酮定容至100ml(稀釋20倍),用紫外分光光度計(1cm光徑比色杯,以丙酮為空白對照溶液)測量475nm波長光吸光度A2;

C、計算孢子破壁率

丙酮提取、測定已知樣品的蝦青素吸光度(吸光度值A1)和對已知樣品研磨、勻漿使其破壁率達到100%后用丙酮提取、測定100%破壁樣品的蝦青素吸光度(吸光度值A2)的比例,即孢子破壁率;

用公式計算孢子破壁率(A):A = A1/A2×100%。

2.根據權利要求1所述快速測定雨生紅球藻孢子破壁率的方法,其特征在于:所述的雨生紅球藻樣品包括鮮藻、藻漿、藻粉及含藻漿或藻粉的紅球藻制品(包括藻片或膠囊)。

3.根據權利要求1所述快速測定雨生紅球藻孢子破壁率的方法,其特征在于:所述的丙酮為分析純≥99.5%。

4.根據權利要求1所述快速測定雨生紅球藻孢子破壁率的方法,其特征在于:所述的丙酮試劑可替換為紫外吸收光譜分析常用的有機溶劑,為甲醇、乙醇、己烷、四氯化碳、石油醚、二硫化碳、氯仿、二甲基亞砜中的一種或幾種。

5.根據權利要求1所述快速測定雨生紅球藻孢子破壁率的方法,其特征在于:所述的對已知樣品研磨、勻漿使其破壁率達到100%是指:將已知樣品研磨后隨機取出一份在顯微鏡下觀察是否達到100%破壁效果,如果未達到,繼續(xù)研磨,直至100%完全破壁為止。

6.根據權利要求1所述快速測定雨生紅球藻孢子破壁率的方法,其特征在于:使所述的已知樣品破壁率達到100%的方法為包括研磨、組織勻漿、高壓均質、球磨、試管分散在內的物理方法。

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