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三唑類殺菌劑廢水中致毒手性單體的識(shí)別方法與流程

文檔序號(hào):11868762閱讀:來源:國知局
三唑類殺菌劑廢水中致毒手性單體的識(shí)別方法與流程

技術(shù)特征:
1.一種三唑類殺菌劑廢水中致毒手性單體的識(shí)別方法,其特征在于,它包括如下步驟:(1)廢水中三唑類殺菌劑的富集濃縮:利用固相萃取柱對水樣中的三唑類殺菌劑進(jìn)行富集,依次用正己烷、二氯甲烷、甲醇將固相萃取柱上不同極性的有機(jī)物洗脫下來并收集洗脫液,將洗脫液旋蒸、氮吹濃縮、定容、保存;(2)廢水中三唑類殺菌劑的定性識(shí)別與分離制備:利用液質(zhì)聯(lián)用對步驟(1)得到的廢水濃縮液中的三唑類殺菌劑進(jìn)行定性識(shí)別,確定具體的三唑類殺菌劑成分,再利用制備色譜對具體的三唑類殺菌劑成分分別進(jìn)行分離純化,濃縮得到純品;(3)三唑類殺菌劑手性單體的分離:基于手性色譜柱利用超臨界流體色譜對步驟(2)得到的具體的三唑類殺菌劑成分進(jìn)行手性分離,濃縮得到手性單體;(4)致毒手性單體的識(shí)別:利用大型溞毒性測試平臺(tái)將步驟(3)得到的手性單體暴露于大型溞,通過24~48小時(shí)觀察受抑制的大型溞數(shù)來計(jì)算半數(shù)抑制濃度EC50值;利用盆栽噴霧法將瓜類炭疽病菌和番茄灰霉病菌接種到黃瓜葉片上,通過觀察葉片上的病斑數(shù)來計(jì)算半數(shù)抑制濃度IC50值,建立毒性-活性比數(shù)據(jù)庫,篩選毒性貢獻(xiàn)最高,活性貢獻(xiàn)最低的單體,以識(shí)別致毒手性單體;步驟(1)中,所述的固相萃取柱為WatersOasisHLB或C18固相萃取小柱;步驟(2)中,所述的定性識(shí)別為采用液質(zhì)聯(lián)用定性檢測,具體參數(shù)如下:高效液相色譜儀HPLC:Agilent1260;色譜柱:WatersXBridgeBEHC18XP分析柱,2.1mm×50mm,2.5μm;柱溫:40°C;流動(dòng)相:A:水,B:甲醇;流速:0.2-0.6mL/min,流動(dòng)相梯度見表1;質(zhì)譜儀:API4000-ABSCIEX;離子源:電噴霧離子化ESI;電離模式:正離子模式;采集模式:多反應(yīng)監(jiān)測模式;多反應(yīng)監(jiān)測模式的離子對:戊菌唑?yàn)?84>159,284>70;腈菌唑?yàn)?89>125,289>70;烯效唑?yàn)?92>125,292>70;多效唑?yàn)?94>125,294>70;硅氟唑?yàn)?94>135,294>70;氧環(huán)唑?yàn)?00>231,300>159;氟硅唑?yàn)?16>247,316>165;滅菌唑?yàn)?18>125,318>70;葉菌唑?yàn)?20>125,320>70;氟環(huán)唑?yàn)?30>121,330>101;種菌唑?yàn)?34>125,334>70;腈苯唑?yàn)?37>125,337>70;丙環(huán)唑?yàn)?42>159,342>69;丙硫菌唑?yàn)?44>326,344>125;氟菌唑?yàn)?46>278,346>73;氟醚唑?yàn)?72>159,372>70;戊唑醇為308>125,308>70;粉唑醇為302>123,302>70;己唑醇為314>159,314>70;步驟(2)中,制備色譜的分離參數(shù)如下:WatersAutoPurificationHPLCSystem;色譜柱:WatersXBridgeC18制備柱,19mm×150mm,5μm;柱溫:35°C;流動(dòng)相:A:水,B:甲醇;流速:3-7mL/min,流動(dòng)相梯度見表4;表1時(shí)間/min水體積百分含量/%甲醇體積百分含量/%0.090100.590102.030704.020808.010908.5901012.09010表4時(shí)間/min水體積百分含量/%甲醇體積百分含量/%0.05050500100800100步驟(3)中,所述的超臨界流體色譜,參數(shù)如下:超臨界流體色譜制備系統(tǒng):WatersSFC80,紫外檢測器,Gilson151;色譜柱:LTA?OJ手性制備柱,25mm×250mm,10μm;流動(dòng)相:A:食品級(jí)二氧化碳,B:甲醇;流速:45-50g/min,流動(dòng)相梯度見表6;檢測波長:220nm;柱溫:40°C;表6A、B相百分含量總和為100%;步驟(4)中,按公式(1)計(jì)算毒性-活性比,毒性-活性比最大的單體即為最主要的致毒手性單體,。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三唑類殺菌劑廢水中致毒手性單體的識(shí)別方法,其特征在于,步驟(1)中,固相萃取柱在使用之前,依次用正己烷、二氯甲烷、甲醇和去離子水活化,流速控制在1~4滴/秒,萃取結(jié)束后,離心除去萃取柱中的水分并將其放在干燥器中備用。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三唑類殺菌劑廢水中致毒手性單體的識(shí)別方法,其特征在于,步驟(2)中,所述的濃縮,方式為在體積百分比5%-20%甘油水溶液保護(hù)的條件下,利用氮吹將組分中的甲醇去除,以保證易揮發(fā)物質(zhì)的回收率,剩下的水溶液利用二氯甲烷液液萃取3次,萃取液經(jīng)旋蒸、氮吹濃縮。
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