一種檢測長春西汀化合物含量的方法
【專利摘要】一種應(yīng)用于藥物分析領(lǐng)域中的檢測長春西汀化合物含量的方法，采用HPLC法檢測，色譜條件為色譜柱：C-18柱，250mm×4.6mm；柱溫：30℃；流速：1.0ml/min；紫外檢測器波長：274nm；進(jìn)樣量：20μl；流動相：0.2mol/L乙酸銨-甲醇。該方法不僅檢驗(yàn)專屬性強(qiáng)，準(zhǔn)確度高，更重要的是該方法與制劑檢測方法匹配，均采用HPLC法，可消除由于檢驗(yàn)方法不同而帶來的誤差，檢測誤差小，能更加準(zhǔn)確的指導(dǎo)制劑產(chǎn)品的投料生產(chǎn)。
【專利說明】一種檢測長春西汀化合物含量的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藥物分析領(lǐng)域，具體涉及一種檢測長春西汀化合物含量的方法。
技術(shù)背景
[0002]長春西汀為腦血管擴(kuò)張藥，能抑制磷酸二酯酶活性，增加血管平滑肌松弛的信使c-GMP的作用，選擇性地增加腦血流量，此外還能抑制血小板凝集，降低人體血液粘度，增強(qiáng)紅細(xì)胞變形力，改善血液流動性和微循環(huán)，促進(jìn)腦組織攝取葡萄糖，增加腦耗氧量，改善腦代謝。
[0003]臨床上用于治療由于大腦血液循環(huán)障礙而引起的精神性或神經(jīng)性癥狀如記憶力障礙、失語癥、行動障礙、頭昏、頭痛等，高血壓性腦病、大腦血管痙攣、大腦動脈內(nèi)膜炎、進(jìn)行性腦血管硬化。在眼科方面，用于因視網(wǎng)膜和脈絡(luò)膜血管硬化及血管痙攣引起的斑點(diǎn)退化。在耳科方面，用于治療老年性耳聾、眩暈等。
[0004]目前，在國家標(biāo)準(zhǔn)中，檢測長春西汀制劑采用HPLC方法，是因?yàn)橥ǔＰ柙谥苿┲刑砑虞o料，其成分較復(fù)雜，利用HPLC方法，易于檢出其中的有關(guān)物質(zhì)。而檢測長春西汀化合物的含量采用滴定法，采用化學(xué)滴定法檢測含量是比較經(jīng)典的方法，其優(yōu)點(diǎn)是操作簡單、快速，并且檢測成本低；缺點(diǎn)是專屬性不強(qiáng)，和主成分官能團(tuán)相同或相似的成分均能參與反應(yīng)，通常會使結(jié)果偏高，使檢驗(yàn)結(jié)果誤差較大。為保證藥品的安全性，需建立專屬性強(qiáng)的含量檢測方法對長春西汀化合物的質(zhì)量進(jìn)行控制。


【發(fā)明內(nèi)容】

:
[0005]本發(fā)明在于提供一種檢測長春西汀化合物含量的方法，本發(fā)明的要點(diǎn)是:采用HPLC法對長春西汀化合物的含量進(jìn)行檢測，重現(xiàn)性、靈敏度、準(zhǔn)確度均能符合要求。
[0006]本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的:一種檢測長春西汀化合物含量的方法，其特征在于所述方法包括如下步驟
[0007]1、一種檢測長春西汀化合物含量的方法，其特征在于所述方法包括如下步驟
[0008](I):色譜條件
[0009]色譜柱:C-18柱，250mmX4.6mm ;柱溫:30°C ;流速:1.0ml/min ;紫外檢測器波長:274nm ;進(jìn)樣量:20μ I ；
[0010]流動相:0.2mol/L乙酸銨-甲醇
[0011](2)0.2mol/L乙酸銨制備:用水溶解15.4g的乙酸銨，用水稀釋至1000ml，用0.45 μ m濾膜過濾
[0012](3)空白液為無水乙醇
[0013](4)供試液制備:溶解0.025g長春西汀供試品于25ml容量瓶中，加無水乙醇
[0014]溶解，并稀釋至刻度，搖勻；
[0015](5)標(biāo)準(zhǔn)液制備:溶解0.025g經(jīng)105°C干燥2小時(shí)的長春西汀標(biāo)準(zhǔn)品(中國生物制品檢定所，含量99.4% )于25ml容量瓶中，加無水乙醇溶解，并稀釋至刻度，搖勻；
[0016](6)測定方法
[0017]取標(biāo)準(zhǔn)液，平行進(jìn)樣5針，進(jìn)樣量20 μ 1，記錄譜圖，計(jì)算長春西汀峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD ^ 2.0% ;取供試液，進(jìn)樣量20 μ 1，記錄譜圖；
[0018](7)供試液中長春西汀含量的計(jì)算公式:
[0019]

WXPXA
含量=^^TXW 供-X 100%
[0020]Al:為標(biāo)準(zhǔn)液中長春西汀的峰面積；
[0021]A:為供試液中長春西汀的峰面積；
[0022]W:長春西汀標(biāo)準(zhǔn)品的重量，g ;
[0023]W供:供試品的重量，g ；
[0024]P:長春西汀標(biāo)準(zhǔn)品的純度。
[0025]所述0.2mol/L乙酸銨溶液的配制方法為:用水溶解15.4g的乙酸銨，用水稀釋至1000ml，用0.45 μ m濾膜過濾；所述的流動相中0.2mol/L乙酸銨與甲醇的體積比為20: 80。
[0026]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于采用HPLC法檢測長春西汀化合物的含量，不僅檢驗(yàn)專屬性強(qiáng)，準(zhǔn)確度高，更重要的是該方法與制劑檢測方法匹配，均采用HPLC法，可消除由于檢驗(yàn)方法不同而帶來的誤差，檢測誤差小，能更加準(zhǔn)確的指導(dǎo)制劑產(chǎn)品的投料生產(chǎn)。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0027]圖1為標(biāo)準(zhǔn)液HPLC圖譜
[0028]圖2為供試品溶液HPLC圖譜

【具體實(shí)施方式】
[0029]實(shí)施例一
[0030]1.色譜條件
[0031](I):色譜條件
[0032]色譜柱:C-18柱，250mmX4.6mm ;柱溫:30°C ;流速:1.0ml/min ;紫外檢測器波長:274nm ;進(jìn)樣量:20μ I ；
[0033]2.溶液制備
[0034]2.1 流動相:0.2mol/L 乙酸銨:甲醇=20: 80
[0035]2.2 0.2mol/L乙酸銨:用水溶解15.4g的乙酸銨，用水稀釋至1000ml，用0.45 μ m
濾膜過濾。
[0036]2.3空白液:無水乙醇
[0037]2.4試液:溶解0.025g長春西汀供試品于25ml容量瓶中，加無水乙醇溶解，并稀釋至刻度，搖勻
[0038]2.5標(biāo)準(zhǔn)液:溶解0.025g經(jīng)105°C干燥2小時(shí)的長春西汀標(biāo)準(zhǔn)品(中國生物制品檢定所，含量99.4% )于25ml容量瓶中，加無水乙醇溶解，并稀釋至刻度，搖勻
[0039]3.試驗(yàn)
[0040]3.1按標(biāo)準(zhǔn)液制備的要求進(jìn)行制備，平行進(jìn)樣5針，進(jìn)樣量20 μ I。記錄譜圖，計(jì)算長春西汀峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD ^ 2.0%
[0041]Al = 37411164 Α2 = 37533703 A3 = 37529204 Α4 = 37586711
[0042]Α5 = 37612662 A 平均=37534689 RSD = 0.21%
[0043]3.2樣品測定按試液的制備的要求進(jìn)行制備，進(jìn)試液進(jìn)樣量20 μ 1，記錄譜圖。
[0044]4.結(jié)果計(jì)算
[0045]按下式計(jì)算:
[0046]
WXPXA
含量:-X 100%
Ai X W 供
[0047]Al:為標(biāo)準(zhǔn)液中長春西汀的峰面積；
[0048]A:為供試液中長春西汀的峰面積；
[0049]W:長春西汀標(biāo)準(zhǔn)品的重量，g ;
[0050]W供:供試品的重量，g ；
[0051]P:長春西汀標(biāo)準(zhǔn)品的純度。
[0052]供試品1:
[0053]

0.02445X99.4X39498015
含量=--X 100%二99.8%

37534689X0.02563
[0054]供試品2:
[0055]

0.02445X99.4X39294424
含量二 - X 100%=99.6%

37534689X0.02555
[0056]供試品:
[0057]

0.02445X99.4X39175393
含量=-X 100%=99.5%

37534689X0.02550
[0058]實(shí)施例二檢測波長的選擇
[0059]1、色譜條件其他條件同實(shí)施例一，僅紫外檢測器波長為281、228和314nm實(shí)驗(yàn)結(jié)果為:
[0060](I)當(dāng)檢測波長為281nm時(shí)
[0061]Al = 14689929 A2 = 15235103 A3 = 14365213 A4 = 15318905
[0062]A5 = 14648024 A平均=14851435 RSD = 2.76%其重現(xiàn)性> 2%，不符合要求。
[0063](2)當(dāng)檢測波長為228時(shí)
[0064]Al = 47615882 A2 = 47310024 A3 = 47529614 A4 = 47085756
[0065]A5 = 48102882 A 平均=47528832 RSD = 0.81%
[0066]色譜圖在7min處有倒鋒
[0067](3)當(dāng)檢測波長為314時(shí)，吸收值過小，不符合要求。
[0068]實(shí)施例三供試液濃度的選擇
[0069]其他條件同實(shí)施例一，供試品或標(biāo)準(zhǔn)液溶解0.01Og溶解于25ml.
[0070]實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
[0071]Al = 6111097 A2 = 6133703 A3 = 6089456 A4 = 6072547
[0072]A5 = 6144204 A 平均=6110201 RSD = 0.49%
[0073]計(jì)算結(jié)果如下
[0074]

【權(quán)利要求】
1.一種檢測長春西汀化合物含量的方法，其特征在于所述方法包括如下步驟 (1):色譜條件 色譜柱:c-18柱,250mmX4.6mm ；柱溫:30 V ；流速:1.0ml/min ;紫外檢測器波長:274nm ;進(jìn)樣量:20μ I ； 流動相:0.2mol/L乙酸銨-甲醇 (2)0.2mol/L乙酸銨制備:用水溶解15.4g的乙酸銨，用水稀釋至1000ml，用0.45 μ m濾膜過濾 (3)空白液為無水乙醇 (4)供試液制備:溶解0.025g長春西汀供試品于25ml容量瓶中，加無水乙醇溶解，并稀釋至刻度，搖勻； (5)標(biāo)準(zhǔn)液制備:溶解0.025g經(jīng)105°C干燥2小時(shí)的長春西汀標(biāo)準(zhǔn)品(中國生物制品檢定所，含量99.4% )于25ml容量瓶中，加無水乙醇溶解，并稀釋至刻度，搖勻； (6)測定方法 取標(biāo)準(zhǔn)液，平行進(jìn)樣5針，進(jìn)樣量20 μ 1，記錄譜圖，計(jì)算長春西汀峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSDS 2.0% ;取供試液，進(jìn)樣量20 μ 1，記錄譜圖； (7)供試液中長春西汀含量的計(jì)算公式:
WXPXA含量:一.STXTT1- X100% Al:為標(biāo)準(zhǔn)液中長春西汀的峰面積； A:為供試液中長春西汀的峰面積； W:長春西汀標(biāo)準(zhǔn)品的重量，g ； W供:供試品的重量，g ； P:長春西汀標(biāo)準(zhǔn)品的純度。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述檢測長春西汀化合物含量的方法，其特征在于所述0.2mol/L乙酸銨溶液的配制方法為:用水溶解15.4g的乙酸銨,用水稀釋至100ml,用0.45 μ m濾膜過濾。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述檢測長春西汀化合物含量的方法，其特征在于所述的流動相中.0.2mol/L乙酸銨與甲醇的體積比為20: 80。
【文檔編號】G01N30/02GK104165942SQ201410381249
【公開日】2014年11月26日 申請日期:2014年7月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月30日
【發(fā)明者】唐奎山, 馮文宇, 張芳, 孟濤, 婁玉濤, 胡振坤, 謝丹, 尤楠, 孫利麗, 金玉坤, 赫暢, 張迪 申請人:東北制藥集團(tuán)股份有限公司