甄別白酒中是否摻假的檢測(cè)方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及質(zhì)量檢測(cè)領(lǐng)域，特別是涉及白酒的質(zhì)量檢測(cè)領(lǐng)域，更為具體的說(shuō)是涉及甄別白酒中是否摻假的檢測(cè)方法。創(chuàng)造性地提出了一種甄別白酒中是否摻假的檢測(cè)方法，所述檢測(cè)方法為氣相色譜-同位素比值質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)方法，包括如下步驟，1）.建立純正白酒的碳同位素比值數(shù)據(jù)庫(kù)，2）.檢測(cè)待測(cè)樣品中的碳同位素比值，3）.將步驟2）中獲得的碳同位素比值與數(shù)據(jù)庫(kù)中的碳同位素比值進(jìn)行比對(duì)，如果在數(shù)據(jù)庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，則待測(cè)樣品為不摻假白酒，如果不在數(shù)據(jù)庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，則待測(cè)樣品為摻假白酒。本發(fā)明公開的檢測(cè)方法靈敏度更高、可靠性更好。
【專利說(shuō)明】甄別白酒中是否摻假的檢測(cè)方法
[0001]
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002]本發(fā)明涉及質(zhì)量檢測(cè)領(lǐng)域，特別是涉及白酒的質(zhì)量檢測(cè)領(lǐng)域，更為具體的說(shuō)是涉及甄別白酒中是否摻假的檢測(cè)方法。
[0003]
【背景技術(shù)】
[0004]白酒是中國(guó)傳統(tǒng)蒸餾酒，由淀粉或糖質(zhì)原料發(fā)酵蒸餾而得，酒質(zhì)無(wú)色(或微黃)透明，經(jīng)貯存老熟后，具有以酯類、醇類、酸類為主體的復(fù)合香味。我國(guó)的白酒與白蘭地、威士忌、伏特加、朗姆酒、金酒并列為世界6大蒸餾酒。
[0005]白酒的主要成分是乙醇和水，占白酒總量的98 %~99 %，而溶于其中的酯、醇、酸等種類眾多的微量有機(jī)成分(占總量的I %~2 %)作為白酒的香、味呈現(xiàn)物質(zhì)，決定著白酒的風(fēng)格。
[0006]現(xiàn)行的關(guān)于固態(tài)法白酒的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 20822-2007中對(duì)白酒的定義為:以糧谷為原料，采用固態(tài)(或半固態(tài))糖化、發(fā)酵、蒸餾，經(jīng)陳釀、勾兌而成的，未添加食用酒精及非白酒發(fā)酵產(chǎn)生的呈香味物質(zhì)，具有本品固有風(fēng)格特征的白酒。白酒的四大香型(濃香型、醬香型、清香型和米香型)的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)也作了類似的規(guī)定。盡管標(biāo)準(zhǔn)中明確規(guī)定白酒是自然發(fā)酵而成，不允許人為添加非白酒發(fā)酵產(chǎn)生的呈香味物質(zhì)，但是在白酒中摻入其他類香味物質(zhì)的問(wèn)題卻一直都存在，白酒兌入外源性香味物質(zhì)后貼上價(jià)格昂貴白酒的包裝就可仿制價(jià)格昂貴的白酒。
[0007]—直以來(lái)白酒摻假?zèng)]有受到普通消費(fèi)者的高度警惕，一方面，摻假白酒本身對(duì)人體危害程度不及其它一些摻假食品；另外一方面，檢測(cè)方法的滯后，在白酒的相關(guān)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)中未對(duì)白酒摻假鑒定指標(biāo)作出規(guī)定，導(dǎo)致假白酒橫行泛濫。
[0008]在白酒中摻入外源性香味物質(zhì)是白酒行業(yè)中常見的摻假行為，盡管和白酒相關(guān)的國(guó)家、行業(yè)和地方檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)多達(dá)60個(gè)，國(guó)內(nèi)外白酒的相關(guān)檢測(cè)科技文獻(xiàn)數(shù)百篇，但95%的標(biāo)準(zhǔn)和科技文獻(xiàn)均針對(duì)白酒中各種成分含量(如總酸、總酯、固形物)的測(cè)定和甲醇、重金屬含量等衛(wèi)生指標(biāo)的測(cè)定?，F(xiàn)行的白酒分析檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)(GB/T 10345-2007)已經(jīng)無(wú)法準(zhǔn)確和有效鑒別出外源性香味物質(zhì)這種普遍存在的白酒摻假行為，其結(jié)果就是導(dǎo)致現(xiàn)在國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上摻假白酒泛濫成災(zāi)，但是檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)卻無(wú)能無(wú)力。這嚴(yán)重?fù)p害了廣大消費(fèi)者的利益，對(duì)中國(guó)的白酒行業(yè)乃至中國(guó)食品安全產(chǎn)生巨大沖擊和影響。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]本發(fā)明創(chuàng)造性地提出了一種甄別白酒中是否摻假的檢測(cè)方法，所述檢測(cè)方法為氣相色譜-同位素比值質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)方法，包括如下步驟，I).建立純正白酒的碳同位素比值數(shù)據(jù)庫(kù)，2).檢測(cè)待測(cè)樣品中的碳同位素比值，3).將步驟2)中獲得的碳同位素比值與數(shù)據(jù)庫(kù)中的碳同位素比值進(jìn)行比對(duì)，如果在數(shù)據(jù)庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，則待測(cè)樣品為不摻假白酒，如果不在數(shù)據(jù)庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，則待測(cè)樣品為摻假白酒。
[0010]我們以白酒四大香型的19個(gè)品牌37個(gè)純正白酒建立純正白酒的碳同位素比值數(shù)據(jù)庫(kù)。其中濃香型包括五糧液、瀘州老窖、洋河、水井坊、古井貢酒、百年迎駕和蘇州橋7個(gè)品牌12個(gè)樣本，清香型包括汾酒、二鍋頭、河南寶豐酒5個(gè)品牌11個(gè)樣本，醬香型包括茅臺(tái)、郎酒、賴茅、習(xí)酒、珍酒5個(gè)品牌10個(gè)樣本，米香型包括桂林三花酒、冰峪莊園大米原漿酒2個(gè)品牌4個(gè)樣本。
[0011]這里碳同位素比值是指13c/12c，在本發(fā)明中以S13C表示。
[0012]進(jìn)一步地，我們還公開了所述純正白酒的碳同位素比值數(shù)據(jù)庫(kù)的建立方法為:分別測(cè)定乙酸乙酯、己酸乙酯、異戊醇、乳酸乙酯、乙酸和己酸的碳同位素比值，得到乙酸乙酯ethyl acetate， 己酸乙酯5 C ethyl caproate?異戊醇SCisoamyl alcohol ?
乳酸乙酯S C ethyl lactate，
乙酸δ 13C acetic aeid和己酸δ 13Ccaproic aeid，并利用上述六個(gè)數(shù)據(jù)，計(jì)算乙酸乙酯與己酸乙酯的δ 13C值之差Λ δ 13C ethyl a_。、乙酸與己酸δ 13C值之差Λ δ 13Cacid a_。以及各個(gè)組分間的δ 13C差值，并將最大S 13C差值記錄為Λ S13Cmax。
[0013]通過(guò)乙酸乙酯、己酸乙酯、異戊醇、乳酸乙酯、乙酸和己酸這六個(gè)微量組分作為研
究對(duì)象。
[0014]酯類、醇類和酸類這三類物質(zhì)為白酒的重要微量成分，并且這三類物質(zhì)與水共同參與了酯化反應(yīng)這個(gè)動(dòng)態(tài)平可逆反應(yīng)，正是這個(gè)動(dòng)態(tài)可逆反應(yīng)使得這三類物質(zhì)在同位素比值方面有較好的一致性，能夠較好反映樣本的來(lái)源。進(jìn)一步地，我們創(chuàng)造性的發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯、己酸乙酯、異戊醇、乳酸乙酯、乙酸和己酸這六個(gè)微量組分可以很好地表征樣品本身的品質(zhì)，特別是本發(fā)明所公開的這六個(gè)單質(zhì)之間存在的關(guān)聯(lián)性，因此我們利用計(jì)算乙酸乙酯與己酸乙酯的S13C值之差Λ δ 13Cethyl a_。、乙酸與己酸S13C值之差Λ δ 13Cacid a_c以及各個(gè)組分間的最大S 13C差值Λ S13Cmax,,簡(jiǎn)單、高效地得到待測(cè)白酒的品質(zhì)。
[0015]更進(jìn)一步地，我們?yōu)榱撕?jiǎn)化檢測(cè)過(guò)程，從而更加方便這一檢測(cè)方式的推廣，我們還公開了所述步驟3)中碳同位素比值的標(biāo)準(zhǔn)范圍為，Λ S13C％。至1.30 %范圍內(nèi)，Λ δ 13Cacid a_c在-1.35 %。至1.45 %。范圍內(nèi)，各個(gè)組分S13C最大差值Λ S13Cmax
<2.30 %。，從而形成一個(gè)判斷標(biāo)準(zhǔn)，更加方便后續(xù)的推廣。
[0016]最后，我們還公開了所述氣相色譜的檢測(cè)條件為:
(1)色譜柱:HP-1NN0WAX19091N-113 柱，30 mX0.32 mm X 0.25 μ m，或相當(dāng)者；
(2)柱溫箱的柱溫采用程序升溫:起始柱溫40°C保持5 min，以6 °C / min升至52°C，再以 12 °C/ min 升至 130 °C，再以 25 °C / min 升至 230 °C，保持 5 min;
(3)載氣:高純氦氣，純度99.999 % ；
(4)流速:1.0 mL/min ；
(5)氣相進(jìn)樣口溫度:240V ；
(6)進(jìn)樣量:1yL；
(7)分流比:1:20；
(8)氧化反應(yīng)爐溫度:1030°C；
(9)吹掃氣關(guān)閉時(shí)間:480s；
(10)參考?xì)?高純CO2,純度99.999 %。[0017]采用本發(fā)明所公開的甄別白酒中是否摻假的檢測(cè)方法，與傳統(tǒng)的檢測(cè)技術(shù)相比具有以下有益效果:
1、樣品前處理方法簡(jiǎn)單，直接使用氣相色譜-同位素比值質(zhì)譜(GS-1RMS)進(jìn)行測(cè)定。
[0018]2、利用高效強(qiáng)極性氣相色譜分離技術(shù)，將白酒樣品中的主要微量組分進(jìn)行基線分離，分別在線測(cè)定其碳同位素比值(δ 13C值)，可實(shí)現(xiàn)高通量篩選和確證一體化。
[0019]3、通過(guò)使用氣相色譜-同位素比值質(zhì)譜對(duì)不同香型不同品牌的白酒進(jìn)行測(cè)定，確證方法針對(duì)各種白酒的準(zhǔn)確性。
[0020]4、方法最低檢出限達(dá)到0.lmg/kg，可有效鑒別不法商販惡意摻假行為，滿足日常定量分析的需要。
[0021]
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0022]圖1為純正白酒氣相色譜-同位素比值質(zhì)譜圖譜；
圖2為摻入0.lmg/kg外源性乙酸乙酯的白酒氣相色譜-同位素比值質(zhì)譜圖譜；
圖3為摻入0.lmg/kg外源性異戊醇的白酒氣相色譜-同位素比值質(zhì)譜圖譜；
圖4為摻入0.lmg/kg外源性乙酸的白酒氣相色譜-同位素比值質(zhì)譜圖譜。
[0023]【具體實(shí)施方式】
[0024]實(shí)施例1 數(shù)據(jù)庫(kù)的建立
樣本選取:以白酒四大香型的19個(gè)品牌37個(gè)純正白酒建立純正白酒的碳同位素比值數(shù)據(jù)庫(kù)。其中濃香型包括五糧液、瀘州老窖、洋河、水井坊、古井貢酒、百年迎駕和蘇州橋7個(gè)品牌12個(gè)樣本，清香型包括汾酒、二鍋頭、河南寶豐酒5個(gè)品牌11個(gè)樣本，醬香型包括茅臺(tái)、郎酒、賴茅、習(xí)酒、珍酒5個(gè)品牌10個(gè)樣本，米香型包括桂林三花酒、冰峪莊園大米原漿酒2個(gè)品牌4個(gè)樣本。
[0025]樣品制備與前處理:將白酒37個(gè)樣本，于室溫下保存，在操作中，應(yīng)當(dāng)防止樣本受到污染。分別選取適量的樣本白酒，標(biāo)記為廣37號(hào)樣品，無(wú)需前處理，使用時(shí)直接抽取進(jìn)樣。
[0026]分析儀器的調(diào)試:
選用 HP-1NNOWAX 19091N-113 柱，采用 30 mX0.32 mm X0.25 μπι 規(guī)格；設(shè)置柱溫箱的升溫程序?yàn)?起始柱溫40 °C保持5 min,以6 °C / min升至52 °C，再以12 V / min升至130 °C，再以25 0C / min升至230 °C，保持5 min ;以純度為99.999%的高純氦氣為載氣，流速采用1.0mL/min ;設(shè)定氧化反應(yīng)爐，也就是燃燒管的溫度為1030°C ;選用純度為99.999%的CO2為參考?xì)狻?br> [0027]分別將f 37個(gè)樣品白酒進(jìn)樣，進(jìn)樣量I μ L，分流比為1:20 ;通過(guò)氣相色譜分離后，在質(zhì)譜中進(jìn)行檢測(cè)，吹掃氣關(guān)閉時(shí)間480s，得到的質(zhì)譜結(jié)果如圖1所示。我們利用氣相色譜-同位素比值質(zhì)譜法(GC-1RMS)找出4種不同香型白酒樣本的共有微量組分，共有15個(gè)共有峰，選取了響應(yīng)較大的3類6個(gè)微量組分作為研究對(duì)象。通過(guò)分別采集:乙酸乙酯
3 ^ethyl acetate， 己酸乙酯δC ethyl caproate?異戊醇SCisoamyl alcohol ?
乳酸乙酯S C ethyl lactate，可以較好地反映樣本的品質(zhì)。
[0028]實(shí)施例2檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的確立
我們將實(shí)施例1中采集得到的數(shù)據(jù)，計(jì)算乙酸乙酯與己酸乙酯的S 13C值之差Λ 513cethyla_。、乙酸與己酸S13C值之差Λ δ 13Cacid a_c以及各個(gè)組分S13C最大差值Λ S13Cmax。
[0029]并對(duì)前述的統(tǒng)計(jì)結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，獲得Λ δ 13C ethyl a_。在-1.20 %。至1.30 0Z00范圍內(nèi)，Λ δ 13Cacdd a_。在-1.35 %。至1.45 %。范圍內(nèi)，各個(gè)組分S13C最大差值Λ δ 13Cmax
<2.30 %。這一判斷標(biāo)準(zhǔn)。
[0030]為了檢驗(yàn)這一標(biāo)準(zhǔn)，我們將每個(gè)樣本白酒分別提取等量的三分，形成三組實(shí)驗(yàn)組，每一個(gè)實(shí)驗(yàn)組中都包含有37個(gè)白酒樣品。
[0031]然后向第一組實(shí)驗(yàn)組中添加0.lmg/kg的乙酸乙酯，第二組實(shí)驗(yàn)組中添加0.1mg/kg的異戊醇，第三組實(shí)驗(yàn)組中添加0.lmg/kg的乙酸溶液。
[0032]利用實(shí)施例1中的檢測(cè)方法，獲得圖2、圖3、圖4三個(gè)質(zhì)譜圖。
[0033]并且根據(jù)圖2、圖3、圖4中獲得的數(shù)據(jù)，計(jì)算乙酸乙酯與己酸乙酯的δ 13C值之差Δ S13Cethyl a_。、乙酸與己酸S13C值之差Λ δ 13Caeid a_。以及各個(gè)組分S13C最大差值Δ δ 13Cmax，我們發(fā)現(xiàn)雖然僅僅添加了 0.lmg/kg這樣的微小劑量，但是前述的三個(gè)差值已經(jīng)不在我們所公開的 Λ δ 13C ethyl a_。在-1.20 %。至 1.30 %。范圍內(nèi)，Λ δ 13Cacid a_。在-1.35 %0至1.45 %。范圍內(nèi)，因此可以看出利用本發(fā)明公開的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，可以檢測(cè)到0.lmg/kg這樣微量的外源性物質(zhì)的添加。
[0034]因此，我們可以確定檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)為:Λ δ 13C ethyl a_。在-1.20 %。至1.30 %。范圍內(nèi)，Δ δ 13Caeid a_。在-1.35 %。至1.45 %。范圍內(nèi)，各個(gè)組分 S13C最大差值 Λ δ 13Cmax < 2.30 0Z00。若上述三個(gè)條件至少一個(gè)無(wú)法滿足，判定白酒中摻入外源性香味物質(zhì)。
[0035]實(shí)施例3對(duì)白酒樣品的檢驗(yàn)
我們利用實(shí)施例1中的實(shí)驗(yàn)方法，對(duì)國(guó)內(nèi)市場(chǎng)銷售的4種香型的46個(gè)白酒樣本進(jìn)行考察，分別測(cè)定每個(gè)樣本的乙酸乙酯S13Cethyl _tate，己酸乙酯S13C ethyl eapMate，異戊醇
3 Cisoamyl alcohol ? 乙酸乙酯與己酸乙酯的δ 13C值之差Λ δ 13C ethyl a_。、乙酸與己酸δ 13C值之差Λ δ 13Cacid a_c以及各個(gè)組分S 13C最大差值Λ δ 13Cmax。
[0036]根據(jù)建立的純正白酒的碳同位素比值要求:Λ S13C％。至1.30 %0范圍內(nèi)，Λ δ 13Cacdd a_。在-1.35 %。至1.45 %。范圍內(nèi)，各個(gè)組分S13C最大差值Λ δ 13Cmax
<2.30 %。這一判斷標(biāo)準(zhǔn)，判別市場(chǎng)銷售白酒是否摻入外源性香味物質(zhì)。
[0037]結(jié)果表明46個(gè)白酒樣本中有32個(gè)符合要求，14個(gè)不符合上述要求，被鑒定為摻入外源性香味物質(zhì)。
[0038]實(shí)施例4與其他方法的比對(duì)試驗(yàn)
專利
【發(fā)明者】吳斌, 費(fèi)曉慶, 張睿, 丁濤, 沈崇鈺, 沈偉建 申請(qǐng)人:江蘇出入境檢驗(yàn)檢疫局動(dòng)植物與食品檢測(cè)中心