對(duì)陽性噬菌體克隆的鑒定方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了對(duì)陽性噬菌體克隆的鑒定方法，其特征在于，步驟如下：首先在纖維膜上涂抹上硝酸鹽類溶液，用PBS提前24小時(shí)浸泡，然后用濾紙將其吸干；對(duì)于目標(biāo)單克隆抗體進(jìn)行稀釋；隨后室溫下進(jìn)行干燥；用不高于百分之十的脫脂奶粉液進(jìn)行浸泡，再用PBS洗滌3-4次；上述步驟反復(fù)兩次；濾紙?jiān)俅挝?；加入質(zhì)量百分比為百分之十的ＤＢＡ，靜置１５分鐘；即可；原始噬菌體使用前最好振蕩輕搖十五分鐘；靜置后可以室溫下過夜后再進(jìn)行鑒定。本發(fā)明的有益效果是：操作簡(jiǎn)單，成本較低，可以準(zhǔn)確進(jìn)行篩選，重復(fù)操作性強(qiáng)，篩選精確。
【專利說明】對(duì)陽性噬菌體克隆的鑒定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生化實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域，具體涉及對(duì)陽性噬菌體克隆的鑒定方法。
【背景技術(shù)】
[0002]當(dāng)近緣的A，B 二種噬菌體感染同一寄主細(xì)胞時(shí)，子代噬菌體中常出現(xiàn)B噬菌體外殼中包著A噬菌體的染色體(即核酸)，或A噬菌體外殼中包著B噬菌體的染色體(即核酸)的情況。這種形成核酸(基因型)與由外殼決定寄主范圍等性質(zhì)(表現(xiàn)型)不同的噬菌體粒子的現(xiàn)象稱為混合噬菌體。含有重組DNA分子的克隆子被稱為重組子，如果重組子中含有外源目的基因則又稱為陽性克隆子或期望重組子。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于，針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)缺陷，提供一種技術(shù)方案:
對(duì)陽性噬菌體克隆的鑒定方法，步驟如下:首先在纖維膜上涂抹上硝酸鹽類溶液，用PBS提前24小時(shí)浸泡，然后用濾紙將其吸干；對(duì)于目標(biāo)單克隆抗體進(jìn)行稀釋；隨后室溫下進(jìn)行干燥；用不高于百分之十的脫脂奶粉液進(jìn)行浸泡，再用PBS洗滌3-4次；上述步驟反復(fù)兩次；濾紙?jiān)俅挝桑患尤胭|(zhì)量百分比為百分之十的D B A，靜置I 5分鐘；即可。
[0004]本發(fā)明中，其特征在于，原始噬菌體使用前最好振蕩輕搖十五分鐘。
[0005]本發(fā)明中，靜置后可以室溫下過夜后再進(jìn)行鑒定。
[0006]本發(fā)明的有益效果是:操作簡(jiǎn)單，成本較低，可以準(zhǔn)確進(jìn)行篩選，重復(fù)操作性強(qiáng)，篩選精確。
【具體實(shí)施方式】
[0007]對(duì)陽性噬菌體克隆的鑒定方法，步驟如下:首先在纖維膜上涂抹上硝酸鹽類溶液，用PBS提前24小時(shí)浸泡，然后用濾紙將其吸干；對(duì)于目標(biāo)單克隆抗體進(jìn)行稀釋；隨后室溫下進(jìn)行干燥；用不高于百分之十的脫脂奶粉液進(jìn)行浸泡，再用PBS洗滌3-4次；上述步驟反復(fù)兩次；濾紙?jiān)俅挝?；加入質(zhì)量百分比為百分之十的D B A，靜置I 5分鐘；即可。
[0008]本發(fā)明中，原始噬菌體使用前最好振蕩輕搖十五分鐘。
[0009]本發(fā)明中，靜置后可以室溫下過夜后再進(jìn)行鑒定。
[0010]以上所述，僅為本發(fā)明較佳的【具體實(shí)施方式】，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本【技術(shù)領(lǐng)域】的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.對(duì)陽性噬菌體克隆的鑒定方法，其特征在于，步驟如下:首先在纖維膜上涂抹上硝酸鹽類溶液，用PBS提前24小時(shí)浸泡，然后用濾紙將其吸干；對(duì)于目標(biāo)單克隆抗體進(jìn)行稀釋；隨后室溫下進(jìn)行干燥；用不高于百分之十的脫脂奶粉液進(jìn)行浸泡，再用PBS洗滌3-4次；上述步驟反復(fù)兩次；濾紙?jiān)俅挝桑患尤胭|(zhì)量百分比為百分之十的D B A，靜置I 5分鐘；即可。
2.如權(quán)利要求1所述的對(duì)陽性噬菌體克隆的鑒定方法，其特征在于，原始噬菌體使用前最好振蕩輕搖十五分鐘。
3.如權(quán)利要求1所述的對(duì)陽性噬菌體克隆的鑒定方法，其特征在于，靜置后可以室溫下過夜后再進(jìn)行鑒定。
【文檔編號(hào)】G01N33/577GK103616512SQ201310539481
【公開日】2014年3月5日 申請(qǐng)日期:2013年11月5日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月5日
【發(fā)明者】辛竹 申請(qǐng)人:辛竹