測(cè)量氨基酸-N-甲酸酐中氯離子含量的方法技術(shù)領(lǐng)域本發(fā)明涉及制備可用于測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的溶液，以及測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的方法。本發(fā)明還涉及制備具有高純度N-羧基酸酐的方法，以及制備得到的具有高純度N-羧基酸酐。此外，本發(fā)明還涉及制備具有高純度多肽混合物的方法，以及由此制備得到的多肽混合物，尤其地，多肽混合物是醋酸格拉替雷。

背景技術(shù)：
氨基酸N-羧基酸酐（即，下文中表示為“N-羧基酸酐”或“氨基酸NCA”）是3-取代噁唑啉-2,5-二酮，如下所示：由于從α-、β-、γ-氨基酸中得到的N-羧基酸酐（縮寫為NCA）的酸性功能基團(tuán)的活化可使得其成為具有反應(yīng)性的化合物。這是因?yàn)镹-羧基酸酐使得該酸性功能性基團(tuán)與任何親核本體的反應(yīng)成為可能。因此，使得通過與胺功能基團(tuán)反應(yīng)進(jìn)行酰胺功能基團(tuán)制備得到簡(jiǎn)化。由此，N-羧基酸酐通常用于合成多肽。此外，N-羧基酸酐與醇反應(yīng)液容易形成酯鍵。有幾個(gè)已知方法可用于制備N-羧基酸酐，例如US6656458，US4267344和US6479665。最普通和最直接的方法是將氨基酸或其鹽酸鹽與光氣、雙光氣或三光氣在溶劑介質(zhì)中反應(yīng)。與光氣的反應(yīng)如下圖所示：其中，R表示α-、β-、γ-氨基酸的主要游離基，R’表示氫原子或氨基酸的仲氨基的游離基，R’可以與R形成環(huán)。已知，在合成N-羧基酸酐過程中除了N-羧基酸酐外，還形成了大量鹽酸氣，也就是說每摩爾的N-羧基酸酐生產(chǎn)2mol鹽酸氣。鹽酸氣是具有高反應(yīng)性的，在介質(zhì)中，鹽酸氣的存在將可能導(dǎo)致副反應(yīng)和氯化副產(chǎn)物的出現(xiàn)。從質(zhì)量和產(chǎn)量方面，殘留在N-羧基酸酐中的氯化雜質(zhì)是絕對(duì)不希望的。由于殘留在N-羧基酸酐中鹽酸氣的存在，會(huì)嚴(yán)重干擾N-羧基酸酐的聚合反應(yīng)。為了聚合能順利進(jìn)行，需要在N-羧基酸酐單體中存在的氯離子含量足夠低。因此，可游離氯的含量通常需要小于0.05wt%。很多類型的多肽混合物，例如醋酸格拉替雷，是通過氨基酸的N-羧基酸酐進(jìn)行聚合而制備得到。例如，醋酸格拉替雷(GA，也稱為共聚物-1，Cop-1或，CASNo.147245-92-9)，它通過四種氨基酸（L-丙氨酸、L-酪氨酸、L-谷氨酸-γ-芐酯、L-ε-三氟乙?；?賴氨酸）的N-羧基酸酐（NCA）進(jìn)行隨機(jī)聚合而制備的多肽混合物，具有如下結(jié)構(gòu)式：(Glu,Ala,Lys,Tyr)xXCH3COOH(C5H9NO4·C3H7MO2·C6H14N202·C9H11NO3)x'XC2H4O2醋酸格拉替雷是一種用于治療多發(fā)性硬化癥的人工合成多肽混合物（M.M.Mouradain,Pharmacology&Therapeutics,98,245-255,2003）。具體請(qǐng)參見physician′sDeskReference,ThomsonPDR,Montvale,NewJersey,第3297頁(yè)(2007)。醋酸格拉替雷的氨基酸摩爾比大約是0.392-0.462:0.129-0.153:0.300-0.374:0.086-0.100，平均分子量大約5000-9000道爾頓。本發(fā)明發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，由N-羧基酸酐制備多肽混合物（如，醋酸格拉替雷）時(shí)，N-羧基酸酐的品質(zhì)，尤其是游離氯離子含量，對(duì)于聚合反應(yīng)和產(chǎn)物的品質(zhì)影響很大。特別地，如果N-羧基酸酐不能達(dá)到應(yīng)有規(guī)格，醋酸格拉替雷的平均分子量和氨基酸組成都會(huì)達(dá)不到應(yīng)有的范圍：醋酸格拉替雷的氨基酸摩爾比大約是0.392-0.462:0.129-0.153:0.300-0.374:0.086-0.100，平均分子量大約5000-9000道爾頓。為了使制備的多肽混合物（如，醋酸格拉替雷）可以達(dá)到產(chǎn)品相應(yīng)的要求，本發(fā)明發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，N-羧基酸酐優(yōu)選純度≥99.5%，氯離子<0.01%，游離氨基酸含量<0.01%。由于N-羧基酸酐中的氯離子含量是一種重要因素，其影響氨基酸N-羧基酸酐質(zhì)量，進(jìn)而影響多肽混合物品質(zhì)。但是，N-羧基酸酐對(duì)水和醇類非常不穩(wěn)定，會(huì)聚合成不溶于水的聚合物。而由于聚合物的水溶性非常差，直接影響了對(duì)氯離子定量檢測(cè)的準(zhǔn)確性。本領(lǐng)域需要獲得關(guān)于N-羧基酸酐的氯離子含量的有效且精確的檢測(cè)方法以及可用于測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的溶液。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明一個(gè)目的是，提供可用于測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的溶液，以及測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的方法。本發(fā)明另一目的是，提供制備具有高純度N-羧基酸酐的方法，以及制備得到的具有高純度N-羧基酸酐。此外，本發(fā)明還有另一目的是，提供涉及制備具有高純度多肽混合物的方法，以及由此制備得到的多肽混合物，尤其地，多肽混合物是醋酸格拉替雷。本發(fā)明可用于測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的溶液，其由包括下述步驟的方法制備：1.將N-羧基酸酐溶于一種或多種溶劑中，其中該溶劑為基本無水溶劑，2.使用水解試劑水解溶于溶劑中的N-羧基酸酐，得到可用于測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的溶液。本發(fā)明測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的方法，其包括下述步驟：1.制備可用于測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的溶液，其包括：（a）將N-羧基酸酐溶于一種或多種溶劑中，其中該溶劑為基本無水溶劑，（b）使用水解試劑水解溶于溶劑中的N-羧基酸酐，得到可用于測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的溶液。2.測(cè)量上述得到的N-羧基酸酐中氯離子含量。本發(fā)明制備具有高純度N-羧基酸酐的方法，其包括常規(guī)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知使用的制備具有高純度N-羧基酸酐的方法，其進(jìn)一步包括下述步驟：-如下檢測(cè)得到的N-羧基酸酐中氯離子含量；(1).制備可用于測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的溶液，其包括：（a）將N-羧基酸酐溶于一種或多種溶劑中，（b）使用水解試劑水解溶于溶劑中的N-羧基酸酐，得到可用于測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的溶液。(2).測(cè)量上述得到的N-羧基酸酐中氯離子含量；當(dāng)氯離子含量大于0.05wt%，優(yōu)選大于0.01wt%時(shí)，則進(jìn)行下一步純化步驟。上述方法中溶劑為基本無水溶劑，而且不包含醇，例如：-與水混溶的溶劑，尤其是選自二甲基亞砜(DMSO)、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、N，N-二甲基乙酰胺(DMA)、N-甲基-2吡咯烷酮(NMP)、二甲基亞砜(DMSO)、甲酰胺和環(huán)丁砜、二氧六環(huán)、四氫呋喃(THF)、丙酮、乙腈以及羧酸如甲酸、乙酸等；-離子液體，例如烷基化咪唑的液體鹽。由上述制備得到的具有高純度N-羧基酸酐也屬于本發(fā)明的發(fā)明范圍。此外，本發(fā)明提供制備具有高純度多肽混合物的方法，其包括常規(guī)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知使用的制備多肽混合物的方法，其進(jìn)一步包括下述步驟：-如下檢測(cè)原料N-羧基酸酐中氯離子含量，當(dāng)氯離子含量大于0.05wt%，優(yōu)選大于0.01wt%時(shí)，則進(jìn)行下一步純化步驟；(1).制備可用于測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的溶液，其包括：（a）將N-羧基酸酐溶于一種或多種溶劑中，（b）使用水解試劑水解溶于溶劑中的N-羧基酸酐，得到可用于測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的溶液。（2）檢測(cè)原料N-羧基酸酐中氯離子含量。在上述方法中溶劑為基本無水溶劑，而且不包含醇，例如：-與水混溶的溶劑，尤其是選自二甲基亞砜(DMSO)、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、N，N-二甲基乙酰胺(DMA)、N-甲基-2吡咯烷酮(NMP)、二甲基亞砜(DMSO)、甲酰胺和環(huán)丁砜、二氧六環(huán)、四氫呋喃(THF)、丙酮、乙腈以及羧酸如甲酸、乙酸等；-離子液體，例如烷基化咪唑的液體鹽。(2).測(cè)量上述得到的N-羧基酸酐中氯離子含量。本發(fā)明還涉及由此制備得到的多肽混合物，尤其地，醋酸格拉替雷也屬于本發(fā)明的發(fā)明范圍。為了使制備的多肽混合物（如，醋酸格拉替雷）可以達(dá)到產(chǎn)品相應(yīng)的要求，本發(fā)明發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，原料N-羧基酸酐優(yōu)選純度≥99.5%，氯離子<0.01%，游離氨基酸含量<0.01%。本發(fā)明中所使用的純化步驟可以使用本領(lǐng)域公知的常規(guī)方法，如重結(jié)晶、活性炭吸附、通過填充柱等提純方法。可用于本發(fā)明的測(cè)量氯離子含量的方法很多，本領(lǐng)域技術(shù)人員所知的方法均可以在本發(fā)明中使用，例如色譜法例如柱色譜法、紙色譜法、薄層色譜法等等；硝酸銀比濁法；分光光度法；摩爾法-鉻酸鉀作指示劑；法揚(yáng)司法-熒光黃作指示劑；佛爾加德法-間接滴定；電位滴定法等等。在上述方法中，優(yōu)選，在惰性氣體保護(hù)下，將N-羧基酸酐溶于一種或多種溶劑中。惰性氣體可以是氮、氬、氦、氖、氬、氪、氙、氡等。在本發(fā)明中，基本無水溶劑是指溶劑中含的水量小于10wt%，特別地小于5wt%，優(yōu)選小于3%，優(yōu)選小于1%。在本發(fā)明中，使用可以使得N-羧基酸酐水解的物質(zhì)進(jìn)行水解。例如使用水解試劑如水或堿水溶液進(jìn)行水解，優(yōu)選水或氫氧化鈉水溶液。其中，水不包含影響氯離子測(cè)量的水，即不含氯離子的水，優(yōu)選去離子水。在本發(fā)明中，水解溶于溶劑中的N-羧基酸酐的過程中，水解試劑如水或堿水溶液的使用量是：0.1-50mL/mgN-羧基酸酐，優(yōu)選1-30mL/mgN-羧基酸酐，尤其1-20mL/mgN-羧基酸酐，更優(yōu)選1-10mL/mgN-羧基酸酐。根據(jù)本發(fā)明方法，可以將N-羧基酸酐破壞成水溶性好的水溶液，然后利用各種技術(shù)精確地測(cè)量N-羧基酸酐的氯離子含量。本發(fā)明精確檢測(cè)N-羧基酸酐的氯離子含量的方法不會(huì)因?yàn)楫a(chǎn)生聚合物包裹問題造成氯離子檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)。為了本發(fā)明的目的，表述“氨基酸”應(yīng)理解為是指包含至少一個(gè)NR1R2基團(tuán)以及至少一個(gè)羧基基團(tuán)的任何化合物，其中R1和R2是任何可以形成氨基酸的基團(tuán)，例如氫、烷基、芳基，或R1和R2形成環(huán)狀基團(tuán)。本發(fā)明的氨基酸可以是天然或合成來源的。除甘氨酸外，天然氨基酸都含有手性碳原子。使用天然或非天然的氨基酸都是有可能的。氨基酸可以具有D或L構(gòu)型。本發(fā)明中，N-羧基酸酐例如為，肌氨酸N-羧基酸酐、蘇氨酸N-羧基酸酐、絲氨酸N-羧基酸酐、纈氨酸N-羧基酸酐、正纈氨酸N-羧基酸酐、異亮氨酸N-羧基酸酐、亮氨酸N-羧基酸酐、正亮氨酸N-羧基酸酐、賴氨酸N-羧基酸酐、苯丙氨酸N-羧基酸酐、酪氨酸N-羧基酸酐、丙氨酸N-羧基酸酐、脯氨酸N-羧基酸酐、色氨酸N-羧基酸酐、蛋氨酸N-羧基酸酐、甘氨酸N-羧基酸酐、絲氨酸N-羧基酸酐、半胱氨酸N-羧基酸酐、精氨酸N-羧基酸酐、組氨酸N-羧基酸酐、色氨酸N-羧基酸酐、甲硫氨酸N-羧基酸酐、天冬氨酸N-羧基酸酐和谷氨酸N-羧基酸酐、谷氨酸-γ-芐酯N-羧基酸酐、ε-三氟乙?；?賴氨酸N-羧基酸酐等等。可以使用的氨基酸的殘基根據(jù)以下3個(gè)字母的代碼縮寫：丙氨酸(Ala)、精氨酸(Arg)、天冬氨酸(Asp)、天冬酰胺(Asn)、半胱氨酸(Cys)、谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺(Gln)、甘氨酸(Gly)、組氨酸(His)、異亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、賴氨酸(Lys)、甲硫氨酸(Met)、苯丙氨酸(Phe)、絲氨酸(Ser)、蘇氨酸(Thr)、色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)和纈氨酸(Val)，具有親核側(cè)鏈的氨基酸有利的是在根據(jù)本發(fā)明的方法中使用它們之前在側(cè)鏈上加以保護(hù)。表述“保護(hù)基”應(yīng)理解為是指任何類型的基團(tuán)，它阻止與其相連的原子或基團(tuán)(例如氧原子或氮原子)在合成過程中參與所不希望的反應(yīng)。這些保護(hù)基包括側(cè)鏈保護(hù)基以及保護(hù)C-或N-末端的基團(tuán)，統(tǒng)稱為胺保護(hù)基和酸保護(hù)基。作為胺保護(hù)基的非窮盡的例子，可以提及特別是苯甲酰基(Bz)、乙?；?Ac)、三氟乙?；?Tfa)、芐氧羰基(Z)、對(duì)氯芐氧羰基(2ClZ)、對(duì)溴芐氧羰基(2BrZ)、對(duì)硝基芐氧羰基、二苯甲氧基芐氧羰基、二苯甲氧羰基、9-芴甲氧羰基(Fmoc)、叔丁氧羰基(Boc)、苯磺?；?duì)甲苯磺?；?-硝基苯磺酰基。作為酸保護(hù)基的非窮盡的例子，可以提及烷基、芳基、芳烷基、甲硅烷基類型，如甲氧基甲基、甲基硫代甲基、2，2，2-三氯乙基、2-鹵代乙基、2-(三甲基硅烷基)-乙基、叔丁基、芳基、烷基、芳烷基、烯丙基、苯基、三苯甲基(trityl)、二苯甲基、對(duì)硝基芐基、對(duì)甲氧芐基以及三烷基甲硅烷基的基團(tuán)，如三甲基硅醚類、三乙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、或異丙基二甲基甲硅烷基。為了本發(fā)明的目的，術(shù)語“肽”指一種聚合物，在該聚合物中的單體是通過酰胺類型的共價(jià)鍵連接在一起的氨基酸。肽包含至少兩個(gè)氨基酸。優(yōu)選地，肽鏈中的氨基酸的數(shù)目大于或等于3。肽鏈經(jīng)常包含最多100個(gè)氨基酸。優(yōu)選地，肽鏈中氨基酸的數(shù)目少于或等于20。特別優(yōu)選地，肽鏈中氨基酸的數(shù)目少于或等于15。為了本發(fā)明的目的，術(shù)語“多肽”指α－氨基酸以肽鏈連接在一起而形成的化合物，它也是蛋白質(zhì)水解的中間產(chǎn)物。由兩個(gè)氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫做二肽，同理類推還有三肽、四肽、五肽等。通常由10-100氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽。為了本發(fā)明的目的，術(shù)語“高純度N-羧基酸酐”是指N-羧基酸酐純度≥99.5%，氯離子<0.01%，游離氨基酸含量<0.01%。為了本發(fā)明的目的，術(shù)語“高純度多肽混合物”是指由原料高純度N-羧基酸酐（純度≥99.5%，氯離子<0.01%，游離氨基酸含量<0.01%）制備得到的多肽混合物。在本發(fā)明中，縮寫“NCA”表示氨基酸N-羧酸酐。本發(fā)明還涉及下述技術(shù)方案：1.測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的方法，其包括下述步驟：（1）.制備可用于測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的溶液，其包括：（a）將N-羧基酸酐溶于一種或多種基本無水溶劑中，（b）使用水解試劑水解溶于溶劑中的N-羧基酸酐，（c）得到可用于測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的溶液，（2）.測(cè)量上述得到的N-羧基酸酐中氯離子含量。2.根據(jù)技術(shù)方案1的方法，其中基本無水溶劑選自如下：-與水混溶的溶劑，其中，溶劑優(yōu)選選自二甲基亞砜(DMSO)、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、N，N-二甲基乙酰胺(DMA)、N-甲基-2吡咯烷酮(NMP)、二甲基亞砜(DMSO)、甲酰胺和環(huán)丁砜、二氧六環(huán)、四氫呋喃(THF)、丙酮、乙腈以及羧酸如甲酸、乙酸；和/或-離子液體，例如烷基化咪唑的液體鹽。3.根據(jù)上述技術(shù)方案任一項(xiàng)的方法，其中,在惰性氣體保護(hù)下，將N-羧基酸酐溶于一種或多種基本無水溶劑中。4.根據(jù)上述技術(shù)方案任一項(xiàng)的方法，其中,使用水解試劑如水或堿水溶液進(jìn)行水解，優(yōu)選水或氫氧化鈉水溶液，尤其地，去離子水。5.根據(jù)上述技術(shù)方案任一項(xiàng)的方法，其中，水解溶于溶劑中的N-羧基酸酐的過程中，水解試劑如水或堿水溶液的使用量是0.1-10mL/mgN-羧基酸酐。6.可用于測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的溶液，其由包括下述步驟的方法制備：（a）將N-羧基酸酐溶于一種或多種基本無水溶劑中，（b）使用水解試劑水解溶于溶劑中的N-羧基酸酐。7.根據(jù)技術(shù)方案6的方法，其中基本無水溶劑選自如下：-與水混溶的溶劑，其中，溶劑優(yōu)選選自二甲基亞砜(DMSO)、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、N，N-二甲基乙酰胺(DMA)、N-甲基-2吡咯烷酮(NMP)、二甲基亞砜(DMSO)、甲酰胺和環(huán)丁砜、二氧六環(huán)、四氫呋喃(THF)、丙酮、乙腈以及羧酸如甲酸、乙酸；和/或-離子液體，例如烷基化咪唑的液體鹽。8.根據(jù)上述技術(shù)方案6-7任一項(xiàng)的方法，其中,在惰性氣體保護(hù)下，將N-羧基酸酐溶于一種或多種基本無水溶劑中。9.根據(jù)上述技術(shù)方案6-8任一項(xiàng)的方法，其中,使用水解試劑如水或堿水溶液進(jìn)行水解，優(yōu)選水或氫氧化鈉水溶液，尤其地，去離子水。10.根據(jù)上述技術(shù)方案6-9任一項(xiàng)的方法，其中,水解溶于溶劑中的N-羧基酸酐的過程中，水解試劑如水或堿水溶液的使用量是0.1-10mL/mgN-羧基酸酐。11.制備N-羧基酸酐的方法，其包括下述步驟：A.如下選擇N-羧基酸酐，其中氯離子含量大于0.05wt%，優(yōu)選大于0.01wt%：-檢測(cè)得到的N-羧基酸酐中氯離子含量；(1).制備可用于測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的溶液，其包括：（a）將N-羧基酸酐溶于一種或多種溶劑中，（b）使用水解試劑水解溶于溶劑中的N-羧基酸酐，得到可用于測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的溶液；(2).測(cè)量上述得到的N-羧基酸酐中氯離子含量；當(dāng)氯離子含量大于0.05wt%，優(yōu)選大于0.01wt%時(shí)，則進(jìn)行純化步驟使得其氯離子含量小于0.05wt%，優(yōu)選小于0.01wt%。12.根據(jù)技術(shù)方案11的方法，其中基本無水溶劑選自如下：-與水混溶的溶劑，其中，溶劑優(yōu)選選自二甲基亞砜(DMSO)、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、N，N-二甲基乙酰胺(DMA)、N-甲基-2吡咯烷酮(NMP)、二甲基亞砜(DMSO)、甲酰胺和環(huán)丁砜、二氧六環(huán)、四氫呋喃(THF)、丙酮、乙腈以及羧酸如甲酸、乙酸；和/或-離子液體，例如烷基化咪唑的液體鹽。13.根據(jù)上述技術(shù)方案11-12任一項(xiàng)的方法，其中,在惰性氣體保護(hù)下，將N-羧基酸酐溶于一種或多種基本無水溶劑中。14.根據(jù)上述技術(shù)方案11-13任一項(xiàng)的方法，其中,使用水解試劑如水或堿水溶液進(jìn)行水解，優(yōu)選水或氫氧化鈉水溶液，尤其地，去離子水。15.根據(jù)上述技術(shù)方案11-14任一項(xiàng)的方法，其中，水解溶于溶劑中的N-羧基酸酐的過程中，所述水解試劑如水或堿水溶液的使用量是：0.1-50mL/mgN-羧基酸酐，優(yōu)選1-30mL/mgN-羧基酸酐，尤其1-20mL/mgN-羧基酸酐，更優(yōu)選1-10mL/mgN-羧基酸酐。16.制備多肽的方法，其包括下述步驟：A.如下選擇N-羧基酸酐，其中氯離子含量大于0.05wt%，優(yōu)選大于0.01wt%：-檢測(cè)得到的N-羧基酸酐中氯離子含量；(1).制備可用于測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的溶液，其包括：（a）將N-羧基酸酐溶于一種或多種溶劑中，（b）使用水解試劑水解溶于溶劑中的N-羧基酸酐，得到可用于測(cè)量N-羧基酸酐中氯離子含量的溶液；(2).測(cè)量上述得到的N-羧基酸酐中氯離子含量；當(dāng)氯離子含量大于0.05wt%，優(yōu)選大于0.01wt%時(shí)，則進(jìn)行純化步驟使得其氯離子含量小于0.05wt%，優(yōu)選小于0.01wt%。17.根據(jù)技術(shù)方案16的方法，其中多肽是醋酸格拉替雷。18.根據(jù)技術(shù)方案16-17任一項(xiàng)的方法，其中基本無水溶劑選自如下：-與水混溶的溶劑，其中，溶劑優(yōu)選選自二甲基亞砜(DMSO)、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、N，N-二甲基乙酰胺(DMA)、N-甲基-2吡咯烷酮(NMP)、二甲基亞砜(DMSO)、甲酰胺和環(huán)丁砜、二氧六環(huán)、四氫呋喃(THF)、丙酮、乙腈以及羧酸如甲酸、乙酸；和/或-離子液體，例如烷基化咪唑的液體鹽。19.根據(jù)上述技術(shù)方案16-18任一項(xiàng)的方法，其中,在惰性氣體保護(hù)下，將N-羧基酸酐溶于一種或多種基本無水溶劑中。20.根據(jù)上述技術(shù)方案16-19任一項(xiàng)的方法，其中,使用水解試劑如水或堿水溶液進(jìn)行水解，優(yōu)選水或氫氧化鈉水溶液，尤其地，去離子水。21.根據(jù)上述技術(shù)方案16-20任一項(xiàng)的方法，其中，水解溶于溶劑中的N-羧基酸酐的過程中，所述水解試劑如水或堿水溶液的使用量是：0.1-50mL/mgN-羧基酸酐，優(yōu)選1-30mL/mgN-羧基酸酐，尤其1-20mL/mgN-羧基酸酐，更優(yōu)選1-10mL/mgN-羧基酸酐。以下實(shí)例旨在說明本發(fā)明而非限制本發(fā)明。具體實(shí)施方式實(shí)施例1.測(cè)試L-丙氨酸-NCA樣品溶液的配制氮?dú)獗Ｗo(hù)下精確稱取大約20mgL-丙氨酸-NCA待檢樣品，用1毫升無水1,4-二氧六環(huán)（含水量≤0.04%）溶解。將該溶液滴加到攪拌中的10毫升去離子水中，將該混合物用去離子水完全轉(zhuǎn)移到20毫升容量瓶中，用去離子水定容。實(shí)施例2.測(cè)試L-酪氨酸-NCA樣品溶液的配制氮?dú)獗Ｗo(hù)下精確稱取大約20mgL-酪氨酸-NCA待檢樣品，用1毫升無水1,4-二氧六環(huán)（含水量≤0.04%）溶解。將該溶液滴加到攪拌中的10毫升0.01M氫氧化鈉水溶液中，將該混合物用去離子水完全轉(zhuǎn)移到20毫升容量瓶中，用去離子水定容。實(shí)施例3.測(cè)試L-谷氨酸-γ-芐酯-NCA樣品溶液的配制氮?dú)獗Ｗo(hù)下精確稱取大約20mgL-谷氨酸-γ-芐酯-NCA待檢樣品，用1毫升無水1,4-二氧六環(huán)（含水量≤0.04%）溶解。將該溶液滴加到攪拌中的10毫升去離子水中，將該混合物用去離子水完全轉(zhuǎn)移到20毫升容量瓶中，用去離子水定容。實(shí)施例4.測(cè)試L-ε-三氟乙?；?賴氨酸-NCA樣品溶液的配制氮?dú)獗Ｗo(hù)下精確稱取大約20mgL-ε-三氟乙?；?賴氨酸-NCA待檢樣品，用1毫升無水1,4-二氧六環(huán)（含水量≤0.04%）溶解。將該溶液滴加到攪拌中的10毫升去離子水中，將該混合物用去離子水完全轉(zhuǎn)移到20毫升容量瓶中，用去離子水定容。實(shí)施例5.空白溶液的配制將1毫升無水1,4-二氧六環(huán)（含水量≤0.04%）滴加到攪拌中的10毫升去離子水中，將該混合物用去離子水完全轉(zhuǎn)移到20毫升容量瓶中，用去離子水定容。實(shí)施例6.樣品檢測(cè)將上述配制好的四個(gè)溶液用離子色譜進(jìn)行檢測(cè)，色譜柱為DionexIonPacTMAS19,4.0×250mm，流速1.0ml/min，10mM的KOH進(jìn)行洗脫，采用電導(dǎo)檢測(cè)器檢測(cè)信號(hào)，氯離子出峰時(shí)間約為10.6min處。同時(shí)用氯化鈉配制對(duì)照品，用外標(biāo)法進(jìn)行檢測(cè)。氯離子檢測(cè)結(jié)果如表1。表1：氯離子檢測(cè)結(jié)果實(shí)施例7.制備共聚物-1（即，醋酸格拉替雷）三口瓶中加入經(jīng)金屬鈉處理過的1,4-二氧六環(huán)200mL，室溫下加入L-丙氨酸NCA2.590克，L-酪氨酸NCA1.036克，L-谷氨酸-γ-芐酯NCA1.974克，L-ε-三氟乙?；?賴氨酸NCA4.693克。攪拌30分鐘，至體系澄清，加入二乙胺33毫克。20-25攝氏度下機(jī)械攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)液緩慢倒入400mL水中，產(chǎn)生大量白色固體，抽濾后，真空干燥得7.424克，收率92.8%。三口瓶中加入上述受保護(hù)的格拉替雷7.0克，31%溴化氫/乙酸混合液140mL，在22-24攝氏度下攪拌22小時(shí)。將紅棕色反應(yīng)液倒入400mL水中，產(chǎn)生大量白色固體，抽濾，真空干燥得三氟乙?；窭胬?.76克。三口瓶中加入上述三氟乙?；窭胬?.76克，1M哌啶水溶液38mL，室溫下攪拌24小時(shí)。用1KDa的濾膜進(jìn)行透析，得到的溶液加冰乙酸至pH為5.5-5.8，攪拌1小時(shí)。凍干得白色粉末，平均分子量為7803。