一種強(qiáng)心中藥制劑指紋圖譜的測(cè)定方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種中藥組合物制劑指紋圖譜測(cè)定方法。該中藥組合物是由人參、黃精、蒼術(shù)、苦參、茯苓、麥冬、制何首烏、地黃、山茱萸、黃連、佩蘭等藥味組成，可有效治療糖尿病。該方法采用超高壓液相色譜法，該方法具有良好的精密度、穩(wěn)定性和重復(fù)性，符合藥物制劑質(zhì)量控制的要求，可有效控制該中藥組合物的質(zhì)量。
【專利說(shuō)明】一種強(qiáng)心中藥制劑指紋圖譜的測(cè)定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及到一種中藥組合物制劑指紋圖譜的測(cè)定方法。
【背景技術(shù)】
[0002]ZL 02146570.3公開了一種以補(bǔ)氣通絡(luò)、辛溫通絡(luò)、活血通絡(luò)、利水通絡(luò)的藥物組合物，該藥物組合物具有治療慢性充血性心力衰竭的作用，其組成包括黃芪或白術(shù)、附子、人參或黨參、丹參、葶藶子、香加皮或南五加皮、澤瀉、玉竹、桂枝、紅花、陳皮組成，由于成分較為復(fù)雜，制成制劑以后，控制產(chǎn)品質(zhì)量時(shí)，對(duì)該中藥組合物中盡量多的成分進(jìn)行鑒別，有利于該藥品的安全有效，質(zhì)量穩(wěn)定可靠。
[0003]超高效液相色譜(UPLC)是分離科學(xué)中的一個(gè)全新類別，UPLC借助于HPLC (高效液相色法)的理論及原理，涵蓋了小顆粒填料、非常低系統(tǒng)體積及快速檢測(cè)手段等全新技術(shù)，增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。
[0004]與傳統(tǒng)的HPLC相比，UPLC的速度、靈敏度及分離度分別是HPLC的9倍、3倍及1.7倍，它縮短了分析時(shí)間，同時(shí)減少了溶劑用量降低了分析成本。
[0005]超高效液相色譜儀尤其對(duì)中藥研究領(lǐng)域的發(fā)展是一個(gè)極大的促進(jìn)。中藥的組分復(fù)雜，分離困難等問(wèn)題都可以通過(guò)超高效液相色譜法逐漸解決。在同樣條件下，UPLC能分離的色譜峰比HPLC多出一倍還多。在同樣條件下，UPLC的分辨率能夠認(rèn)出更多的色譜峰。
[0006]中藥指紋圖譜是指中藥經(jīng)適當(dāng)處理后，采用一定的分析手段，得到的能夠標(biāo)示該中藥材特性的共有峰的圖譜。指紋圖譜應(yīng)該具備指紋性，即:(1)專屬性強(qiáng)。指所制訂的指紋圖譜應(yīng)該是該中藥所獨(dú)有的、能與其它中藥相區(qū)別的，其反映的化學(xué)信息是具有高度的選擇性的；(2)穩(wěn)定性好。即中藥的指紋圖譜應(yīng)該是從某中藥的多批次中歸納出的共性，圖譜中的共有峰或特征峰應(yīng)相對(duì)穩(wěn)定；(3)重現(xiàn)性好。所制訂的指紋圖譜在規(guī)定條件下應(yīng)能再現(xiàn)指紋特征(如共有峰數(shù)目、大小、位置等)，其誤差應(yīng)在允許的范圍內(nèi)。只有這樣，所制訂的指紋圖譜才具有實(shí)用價(jià)值，才可以有效控制藥品的質(zhì)量。
[0007]采用UPLC指紋圖譜方法控制藥品質(zhì)量具有靈敏、快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確等特點(diǎn)，通過(guò)優(yōu)選色譜條件測(cè)定藥品制劑的指紋圖譜，可以很好控制藥品質(zhì)量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]本發(fā)明的目的是提供一種中藥組合物制劑的指紋圖譜測(cè)定方法，該中藥組合物由如下重量份的原料藥制成:黃芪150-450、附子40-120、人參或黨參75-225、丹參75-225、葶藶子50-150、香加皮或南五加皮60-180、澤瀉75-225、玉竹25-75、桂枝30-90、紅花30-90、陳皮25-75 ;本發(fā)明指紋圖譜測(cè)定方法采用超高壓液相色譜法，色譜條件及測(cè)定方法如下:
色譜條件:色譜柱為C18柱，柱溫20-50°C，流速0.2-0.8mL.mirT1，檢測(cè)波長(zhǎng)203nm，流動(dòng)相B為乙腈，D為0.15%磷酸；梯度洗脫:0?Imin，1%?1%B, I?2.5min, 1%?5%B, 2.5?IOmin, 5% ?10%B, 10 ?13min, 10% ?12%B, 13 ?29min, 12% ?21%B, 29 ?42min, 21% ?40%B，42 ~55min，40% ~80%B，55 ~56min，80% ~80%B ；
供試品溶液的配制:取所述中藥組合物制劑0.5-2.0g，精密稱定，加入60-85%的甲醇25mL，稱重，超聲15-40min，放置室溫，稱重，用60-85%的甲醇補(bǔ)足重量，混勻后離心，移取上清液10-15mL蒸干，用IOmL去離子水混懸，上樣至裝有25mL大孔吸附樹脂的層析柱，先用200mL去離子水洗脫，再用200mL95%乙醇洗脫，收集95%乙醇洗脫液蒸干，干膏用80%甲醇溶解定容至25mL，0.22um微孔濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；
測(cè)定法:精密吸取供試品溶 液0.5-1.5 μ L，注入超高壓液相色譜儀，記錄色譜圖，即得。
[0009]本發(fā)明指紋圖譜測(cè)定方法色譜條件優(yōu)選如下:色譜柱優(yōu)選為Acquity UPLC BEHC18,規(guī)格優(yōu)選為2.1mmX 100mm, 1.7 μ m ;柱溫優(yōu)選為40 °C ;流速優(yōu)選為0.5mL.mirT1 ;供試品溶液的配制:取所述中藥組合物制劑1.(^，精密稱定，加入80%的甲醇25!^，稱重，超聲30min,放置室溫,稱重,用80%的甲醇補(bǔ)足重量,混勻后在4500rpm離心15分鐘,移取上清液13mL蒸干，用IOmL去離子水混懸，上樣至裝有25mL大孔吸附樹脂XAD7HP的層析柱，先用200mL去離子水洗脫，再用200mL95%乙醇洗脫，收集95%乙醇洗脫液蒸干，干膏用80%甲醇溶解定容至25mL，0.22um微孔濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；
測(cè)定法:精密吸取供試品溶液I μ L，注入超高壓液相色譜儀，記錄色譜圖，即得。
[0010]本發(fā)明中藥組合物制劑的指紋圖譜測(cè)定方法，適用的中藥組合物制劑原料藥的重量比例優(yōu)選為:
黃芪450、附子112.5、人參或黨參225、丹參225、葶藶子150、香加皮或南五加皮180、澤瀉225、玉竹75、桂枝90、紅花90、陳皮75。
[0011]或者優(yōu)選為:
黃芪150、附子40、人參或黨參225、丹參225、葶藶子50、香加皮或南五加皮180、澤瀉75、玉竹75、桂枝30、紅花90、陳皮25。
[0012]或者優(yōu)選為:
黃芪250、附子112.5、人參或黨參200、丹參120、葶藶子135、香加皮或南五加皮150、澤瀉200、玉竹60、桂枝75、紅花75、陳皮60。
[0013]或者優(yōu)選為:
黃芪255、附子115、人參或黨參180、丹參115、葶藶子145、香加皮或南五加皮158、澤瀉190、玉竹68、桂枝80、紅花80、陳皮68。
[0014]本發(fā)明中藥組合物制劑的指紋圖譜測(cè)定方法中，適用該中藥組合物制劑的劑型優(yōu)選為片劑、膠囊劑、口服液或顆粒劑。
[0015]本發(fā)明中藥組合物制劑的指紋圖譜測(cè)定方法，適用的該中藥組合物膠囊劑的制備方法優(yōu)選為:
(I)將黃芪、葶藶子、澤瀉、人參或黨參、香加皮或南五加皮按照比例量稱取加8倍量70%乙醇回流提取2次，第一次3小時(shí)，第二次2小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.25-1.30 (60°C熱測(cè))的清膏，備用；
(2 )桂枝、陳皮按照比例蒸餾提取揮發(fā)油，提油后的水溶液濾過(guò)，備用，殘?jiān)偌?倍量水煎煮I小時(shí)，濾過(guò)，合并水煎液，備用；
(3)附子、丹參、玉竹、紅花加水9倍量煎煮2次，每次2小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，與步驟(2)中桂枝、陳皮水煎液合并，濃縮至相對(duì)密度為1.25-1.30 (60°C熱測(cè))清膏，攪拌中加入乙醇，至醇濃度70%，4°C以下靜置24小時(shí)，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.25-1.30 (60°C熱測(cè))清膏，與步驟(1)的醇提清膏混合，65_70°C烘干；
(4)將步驟(3)所得干膏粉碎成100目粉，加70%乙醇適量制粒，噴入桂枝、陳皮揮發(fā)油，混勻，裝膠囊，即得。
[0016]上述中藥組合物的其他劑型按比例稱取原料藥后，采用常規(guī)的制備方法制備，例如，范碧亭《中藥藥劑學(xué)》(上海科學(xué)出版社1997年12月第I版)記載的制備工藝，制成藥劑學(xué)可接受的常規(guī)劑型。
[0017]為使上述劑型能夠?qū)崿F(xiàn)，需在制備這些劑型時(shí)加入藥學(xué)可接受的輔料，例如:填充劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、防腐劑、基質(zhì)等。填充劑包括:淀粉、預(yù)膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、蔗糖等；崩解劑包括:淀粉、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉等；潤(rùn)滑劑包括:硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、二氧化硅等；助懸劑包括:聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊脂、羥丙基甲基纖維素等；粘合劑包括，淀粉漿、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素等；甜味劑包括:糖精鈉、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矯味劑包括:甜味劑及各種香精；防腐劑包括:尼泊金類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽類、苯扎溴銨、醋酸氯乙定、桉葉油等；基質(zhì)包括:PEG6000，PEG4000，蟲蠟等。為使上述劑型能夠?qū)崿F(xiàn)中藥藥劑學(xué)，需在制備這些劑型時(shí)加入藥學(xué)可接受的其它輔料(范碧亭《中藥藥劑學(xué)》，上海科學(xué)出版社1997年12月第I版中各劑型記載的輔料)。
[0018]本發(fā)明方法測(cè)定該中藥組合物指紋圖譜從多個(gè)方面評(píng)價(jià)該方法的可行性，評(píng)價(jià)方法如下:
1、儀器與試藥
美國(guó)Waters公司，包括四元高壓梯度泵、真空脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、二極管陣列檢測(cè)器、Empower3色譜工作站(ACQUITY UPLC H CLASS) ;KQ5200B超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);分析天平(AG135，METTLER TO- LEDO)；LXJ-1I B低速大容量多管離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠)。
[0019]磷酸(色譜級(jí)，批號(hào)20120104，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司)；甲醇(分析純，批號(hào)20120110，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司)；乙腈(色譜級(jí)，F(xiàn)isher);實(shí)驗(yàn)用水為超純水。
[0020]本發(fā)明中藥組合物膠囊劑由石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司提供(按照實(shí)施例 I 的方法制備)，共十批(批號(hào) S1:10010 2，S2:111201，S3:110803，S4:110303，S5:101002, S6:100106, S7:111103，S8:110301 S 9: 110901, S10:111203);丹參素鈉(110855-200809)、丹參酚酸 B (111562-200605)、人參皂苷 Rbl (110704-201122)、人參皂苷Rd (111818-201001)、人參皂苷Rb2 (111715-200802)均購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品鑒定所，人參皂苷Re (11021-14-0)均購(gòu)于上海源葉生物科技有限公司。
[0021]2方法與結(jié)果
2.1色譜條件
色譜柱為 Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 mmX 100 mm, 1.7 um),柱溫 40 °C ,流速0.5 mL.mirT1，檢測(cè)波長(zhǎng)203 nm，進(jìn)樣I uL，流動(dòng)相B為乙腈，D為0.15%磷酸，梯度洗脫:0~I min，1% ?1%B，I ?2.5 min，1% ?5%B，2.5 ?10 min，5% ?10%B，10 ?13 min，10% ?12%B，13 ?29 min，12% ?21%B，29 ?42 min，21% ?40%B，42 ?55 min，40% ?80%B，55 ?56 min，80% ?80%B。
[0022]2.2對(duì)照品溶液制備
分別取丹參素鈉、丹參酚酸B、人參皂苷Rbl、人參皂苷Re、人參皂苷Rd、人參皂苷Rb2適量，精密稱定，用80%甲醇配制成含丹參素鈉0.12 mg.mL—1，丹參酚酸B 0.09 mg.mL—1，人參皂苷Rbl 0.17 mg.mL'人參皂苷Rd 0.1 mg.ml/1，人參皂苷Re 0.15 mg.ml/1，人參皂苷Rb2 0.18 mg.mL—1的溶液，其中人參皂苷Rbl、人參皂苷Re、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rd為混標(biāo)溶液，其余標(biāo)準(zhǔn)品溶液均為單獨(dú)配制。
[0023]2.3供試品溶液制備
取本發(fā)明藥物膠囊劑內(nèi)容物1.0g，精密稱定，加入80%甲醇25mL，稱重，超聲30min，放置室溫，稱重，用80%甲醇補(bǔ)足重量,混勻后離心4500rpm, 15min,移取上清液13mL蒸干,用IOmL去離子水混懸，上樣至25mL大孔吸附樹脂XAD7HP的層析柱中，先用200mL去離子水洗脫，再用200mL95%乙醇洗脫，收集95%乙醇洗脫液蒸干，干膏用80%甲醇溶解定容至25 mL,
0.22um微孔濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液，備用。
[0024]2.4方法學(xué)考察
2.4.1精密度試驗(yàn)
按2.3要求取110803批樣品制備供試品溶液，在上述色譜條件下重復(fù)進(jìn)樣5次，直觀觀察各指紋圖譜的全貌無(wú)明顯變化，重疊良好，共有峰相對(duì)保留時(shí)間的RSD小于2.8%，相對(duì)峰面積的RSD小于3.0%，表明儀器精密度良好。
[0025]2.4.2穩(wěn)定性試驗(yàn)
按2.3要求取110803批樣品制備供試品溶液，在上述色譜條件下，分別在0，2,4,8,12,16，20，24h進(jìn)樣分析，直觀觀察各指紋圖譜的全貌無(wú)明顯變化，重疊良好，共有峰相對(duì)保留時(shí)間的RSD小于2.7%，相對(duì)峰面積的RSD小于2.9%，表明樣品在24h內(nèi)穩(wěn)定。
[0026]2.4.3重復(fù)性試驗(yàn)
取110803批樣品5份，按2.3要求分別制備供試品溶液，在上述色譜條件下進(jìn)樣分析，直觀觀察各指紋圖譜的全貌無(wú)明顯變化，重疊良好，共有峰相對(duì)保留時(shí)間的RSD小于1.6%，相對(duì)峰面積的RSD小于2.7%，表明方法重現(xiàn)性良好。
[0027]2.5指紋圖譜的建立及相似度分析
2.5.1指紋圖譜的建立
取10批芪藶強(qiáng)心膠囊樣品，按2.3要求制備供試品溶液，在上述色譜條件下進(jìn)樣分析，得到10批芪藶強(qiáng)心膠囊的指紋圖譜，見(jiàn)圖1，并采用國(guó)家藥典委員會(huì)開發(fā)的“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)2004A版”軟件對(duì)10批樣品的指紋圖譜進(jìn)行分析，以S5為參照指紋圖譜，見(jiàn)圖2，采用平均數(shù)相關(guān)系數(shù)法對(duì)各指紋圖譜色譜峰進(jìn)行了多點(diǎn)校正和自動(dòng)匹配，其中共有色譜峰43個(gè)，用標(biāo)準(zhǔn)品指認(rèn)了其中6個(gè)共有峰，分別為丹參素鈉(2號(hào)峰)、丹參酚酸B(25號(hào)峰)、人參皂苷Rbl (32號(hào)峰)、人參皂苷Re (33號(hào)峰)、人參皂苷Rb2 (34號(hào)峰)、人參皂苷Rd (35號(hào)峰)，以出峰穩(wěn)定，峰面積較大的25號(hào)色譜峰-丹參酚酸B為參照峰。
[0028]2.5.2指紋圖譜相似度分析
采用國(guó)家藥典委員會(huì)開發(fā)的“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)2004A版”軟件對(duì)10批芪藶強(qiáng)心膠囊的指紋圖譜進(jìn)行分析，以S5為參照指紋圖譜，見(jiàn)圖2，采用平均數(shù)相關(guān)系數(shù)法對(duì)各指紋圖譜色譜峰進(jìn)行了多點(diǎn)校正和自動(dòng)匹配，生成芪藶強(qiáng)心膠囊共有模式的對(duì)照指紋圖譜(R)，然后進(jìn)行了相似度計(jì)算，10批芪藶強(qiáng)心膠囊與對(duì)照指紋圖譜的相似度見(jiàn)表1。
[0029]表1十批芪藶強(qiáng)心膠囊指紋圖譜相似度表
【權(quán)利要求】
1.一種中藥組合物制劑指紋圖譜測(cè)定方法，該中藥組合物制劑是由如下重量份的原料藥制成:黃芪150-450、附子40-120、人參或黨參75-225、丹參75-225、葶藶子50-150、香加皮或南五加皮60-180、澤瀉75-225、玉竹25-75、桂枝30-90、紅花30-90、陳皮25-75 ； 其特征在于該方法采用超高壓液相色譜法，色譜條件及測(cè)定方法如下: 色譜條件:色譜柱為C18柱，柱溫20-50°C，流速0.2-0.8mL.mirT1，檢測(cè)波長(zhǎng)203nm，流動(dòng)相B為乙腈，D為0.15%磷酸；梯度洗脫:0~Imin，1%~1%B, I~2.5min, 1%~5%B, 2.5~IOmin, 5% ~10%B, 10 ~13min, 10% ~12%B, 13 ~29min, 12% ~21%B, 29 ~42min, 21% ~40%B, 42 ~55min, 40% ~80%B, 55 ~56min, 80% ~80%B ； 供試品溶液的配制:取所述中藥組合物制劑0.5-2.0g，精密稱定，加入60-85%的甲醇25mL，稱重，超聲15-40min，放置室溫，稱重，用60-85%的甲醇補(bǔ)足重量，混勻后離心，移取上清液10-15mL蒸干，用IOmL去離子水混懸，上樣至裝有25mL大孔吸附樹脂的層析柱，先用200mL去離子水洗脫，再用200mL95%乙醇洗脫，收集95%乙醇洗脫液蒸干，干膏用80%甲醇溶解定容至25mL，0.22um微孔濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液，作為供試品溶液； 測(cè)定法:精密吸取供試品溶液0.5-1.5 μ 1，注入超高壓液相色譜儀，記錄色譜圖，即得。
2.如權(quán)利要求1所述的指紋圖譜測(cè)定方法，其特征在于所述色譜柱為AcquityUPLCBEH C18,規(guī)格為 2.1mmX 100mm, 1.7 μ m ;柱溫為 40°C ;流速為 0.5 mL.mirT1 ； 供試品溶液的配制:取所述中藥組合物制劑1.0g，精密稱定，加入80%的甲醇25mL，稱重，超聲30min，放置室溫，稱重，用80%的甲醇補(bǔ)足重量，混勻后在4500rpm離心15分鐘，移取上清液13mL蒸干，用IOmL去離子水混懸，上樣至裝有25mL大孔吸附樹脂XAD7HP的層析柱,先用200mL去離子水洗脫，再用200mL95%乙醇洗脫，收集95%乙醇洗脫液蒸干，干膏用80%甲醇溶解定容至25mL，0.22um微孔濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液，作為供試品溶液； 測(cè)定法:精密吸取供試品溶液I μ 1，注入超高壓液相色譜儀，記錄色譜圖，即得。
3.如權(quán)利要求1或2所述的指紋圖譜測(cè)定方法，所述中藥組合物制劑是由如下重量的原料藥制成: 黃芪450、附子112.5、人參或黨參225、丹參225、葶藶子150、香加皮或南五加皮180、澤瀉225、玉竹75、桂枝90、紅花90、陳皮75。
4.如權(quán)利要求1或2所述的指紋圖譜測(cè)定方法，所述中藥組合物制劑由下列重量的原料藥制成: 黃芪150、附子40、人參或黨參225、丹參225、葶藶子50、香加皮或南五加皮180、澤瀉75、玉竹75、桂枝30、紅花90、陳皮25。
5.如權(quán)利要求1或2所述的指紋圖譜測(cè)定方法，所述中藥組合物制劑由下列重量的原料藥制成: 黃芪250、附子112.5、人參或黨參200、丹參120、葶藶子135、香加皮或南五加皮150、澤瀉200、玉竹60、桂枝75、紅花75、陳皮60。
6.如權(quán)利要求1或2所述的指紋圖譜測(cè)定方法，所述中藥組合物制劑由下列重量的原料藥制成: 黃芪255、附子115、人參或黨參180、丹參115、葶藶子145、香加皮或南五加皮158、澤瀉190、玉竹68、桂枝80、紅花80、陳皮68。
7.如權(quán)利要求1或2所述的指紋圖譜測(cè)定方法，所述中藥組合物制劑的劑型為片劑、膠囊劑、口服液或顆粒劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的指紋圖譜測(cè)定方法，其特征在于所述膠囊劑由以下步驟組成: (I)將黃芪、葶藶子、澤瀉、人參或黨參、香加皮或南五加皮按照比例量稱取加8倍量.70%乙醇回流提取2次，第一次3小時(shí)，第二次2小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度在60°C測(cè)定為1.25-1.30的清膏，備用； (2 )桂枝、陳皮按照比例蒸餾提取揮發(fā)油，提油后的水溶液濾過(guò)，備用，殘?jiān)偌?倍量水煎煮I小時(shí)，濾過(guò)，合并水煎液，備用； (3)附子、丹參、玉竹、紅花加水9倍量煎煮2次，每次2小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，與步驟(2)中桂枝、陳皮水煎液合并，濃縮至相對(duì)密度在60°C測(cè)定為1.25-1.30清膏，攪拌中加入乙醇，至醇濃度70%，4°C以下靜置24小時(shí)，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度在.60°C測(cè)定為1.25-1.30清膏，與步驟(1)的醇提清膏混合，65_70°C烘干； (4)將步驟(3)所得干膏粉碎成100目粉，加70%乙醇適量制粒，噴入桂枝、陳皮揮發(fā)油，混勻，裝膠囊，即得。
【文檔編號(hào)】G01N30/36GK103575819SQ201210271430
【公開日】2014年2月12日 申請(qǐng)日期:2012年8月2日 優(yōu)先權(quán)日:2012年8月2日
【發(fā)明者】姜新剛, 李葉雙, 賈繼明, 喬莉 申請(qǐng)人:河北以嶺醫(yī)藥研究院有限公司