專利名稱：廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油gc-ms指紋圖譜的構(gòu)建方法及其指紋圖譜的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于化學(xué)分析領(lǐng)域，特別是涉及一種廣東海風(fēng)藤(Kadsuraheteroclita(Roxb. ) Craib)揮發(fā)油GC-MS指紋圖譜的構(gòu)建方法及其GC-MS指紋圖譜。
背景技術(shù)：
中藥色譜指紋圖譜是指某些中藥材經(jīng)適當(dāng)處理后，采用一定的分析手段，得到的能夠標(biāo)示其化學(xué)特征的色譜圖。中藥指紋圖譜是一種綜合的，可量化的鑒定手段，它是建立在中藥化學(xué)成分系統(tǒng)研究的基礎(chǔ)上，主要用于評價中藥材以及中藥制劑半成品質(zhì)量的真實性、優(yōu)良性和穩(wěn)定性。 廣東海風(fēng)藤藥材為木蘭科南五味子屬植物海風(fēng)藤(異形五味子)Kadsuraheteroclita(Roxb. )Craib的干燥藤莖,是廣東省地方常用藥材。廣東海風(fēng)藤具有祛風(fēng)濕、通經(jīng)絡(luò)、行氣止痛之功效，從中分離得到的化學(xué)成分主要有木脂素、三萜酸類、多糖、揮發(fā)油等化合物。有研究表明其脂溶性成分具有顯著的抗阿爾茨海默病作用，因此廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油的研究越來越引起關(guān)注。但目前尚無廣東海風(fēng)藤藥材揮發(fā)油的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，因此建立廣東海風(fēng)藤藥材揮發(fā)油的質(zhì)量控制方法很有必要。本發(fā)明用GC-MS法構(gòu)建了廣東海風(fēng)藤藥材揮發(fā)油的指紋圖譜，利用GC-MS指紋圖譜可全面控制廣東海風(fēng)藤藥材揮發(fā)油的質(zhì)量。

發(fā)明內(nèi)容
基于此，本發(fā)明的目的是提供廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油GC-MS指紋圖譜的構(gòu)建方法。具體的技術(shù)方案如下一種廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油GC-MS指紋圖譜的構(gòu)建方法，包括如下步驟(I)供試品溶液的制備精密稱取廣東海風(fēng)藤藥材粉末10. 0g，置于燒瓶中，力口8-10倍水量，用揮發(fā)油提取器提取6-8h，脫水后得蘭綠色透明油狀物，將上述蘭綠色透明油狀物用乙酸乙酯稀釋3倍，即得供試品溶液；(2)GC-MS分析精密吸取供試品溶液I. 0 ii L，注入GC-MS色譜儀，色譜條件如下色譜柱DB-5石英毛細(xì)管柱(50mX 0. 32mmX0. 25um);載氣為氦氣；進(jìn)樣口溫度270°C，聯(lián)接口溫度250°C ;升溫程序柱溫60°C，保持2min，5°C /min升溫至200°C，再以15°C /min升溫至250°C，保持Imin ;質(zhì)譜條件電離電壓1500V電子能量70eV，電離方式EI，質(zhì)量掃描范圍40-650amu，進(jìn)樣量I. OuL，分流模式20 1 ；(3)測定10批廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油樣品并進(jìn)行分析比較，得到由其共有特征峰構(gòu)成的廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油樣品的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。在其中一個實施例中，所示指紋圖譜具有的23個共有峰的保留時間tK分別為7. 5min、7. 8min> 10. 2min> 10. 5min> 11. 0min> 17. 0min> 17. 4min> 18. 4min> 19. 4min、19. 6min、20. 7min、21. lmin、21. 4min、21. 6min、21. 7min、21. 8min、22. lmin、23. lmin、23. 3min、24. 4min、24. 9min、25. 2min 和 25. 8min。
在其中一個實施例中，所述步驟(I)中精密稱取廣東海風(fēng)藤藥材粉末lO.Og，置于燒瓶中，加8倍水量，用揮發(fā)油提取器提取6h，脫水后得蘭綠色透明油狀物，將上述蘭綠色透明油狀物用乙酸乙酯稀釋3倍，即得供試品溶液。本發(fā)明的另一目的是提供上述方法構(gòu)建得到的廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油GC-MS指紋圖P曰。具體的技術(shù)方案如下如權(quán)利要求I或2所述的廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油GC-MS指紋圖譜的構(gòu)建方法得到的廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油GC-MS指紋圖譜。本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)和用途通過指紋圖譜中共有峰的有無，能有效地監(jiān)控廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油的質(zhì)量，保證其質(zhì)量的穩(wěn)定、均一、可控。


圖I為本發(fā)明的廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油指紋圖譜，圖中共有模式中標(biāo)示了 23個共有峰的峰號，圖中還包括10批廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油樣品GC-MS圖譜。
具體實施例方式以下通過具體實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的闡述。I儀器、樣品、試藥I. I儀器TRACE-DSQ氣質(zhì)聯(lián)用色譜儀(美國Thermo fisher公司)，色譜柱DB_5石英毛細(xì)管柱(50mX0. 32mmX0. 25um);I. 2樣品10批廣東海風(fēng)藤藥材經(jīng)鑒定為蘭科南五味子屬植物海風(fēng)藤(異形五味子)(Kadsura heteroclita(Roxb. ) Craib)的干燥藤莖;I. 3試藥乙酸乙酯為分析純。2方法與結(jié)果2. I供試品溶液的制備精密稱取廣東海風(fēng)藤藥材粉末(過四號篩)各10. 0g，力口A 2000mL燒瓶中，加8-10倍水量，用揮發(fā)油提取器提取6_8h，以無水硫酸鈉脫水后得揮發(fā)油，揮發(fā)油為蘭綠色透明油狀物，具特異香味，將提取的蘭綠色透明油狀物用乙酸乙酯稀釋3倍，供CC-MS分析；2. 2GC-MS分析條件色譜柱DB_5石英毛細(xì)管柱(50mX0. 32mmX0. 25um);載氣為氦氣；進(jìn)樣口溫度270°C，聯(lián)接口溫度250°C ;升溫程序柱溫601，保持21^11，51 /min升溫至200°C，再以15°C /min升溫至250°C，保持Imin ;質(zhì)譜條件電離電壓1500V電子能量70eV，電離方式EI，質(zhì)量掃描范圍40-650amu，進(jìn)樣量I. OuL，分流模式20 :1 ;2. 3共有峰的確定將上述得到的10批廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油樣品GC-MS指紋圖譜進(jìn)行分析比較(如圖I所示)，找出其共有特征峰(共23個峰)，得到廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，23 個共有峰分別為7. 5min、7. 8min、10. 2min、10. 5min、11. Omin、17. Omin、17. 4min、18. 4min、19. 4min、19.6min、20. 7min、21. lmin、21.4min、21. 6min、21.7min、21. 8min、22. lmin、23. lmin、23. 3min、24. 4min、24. 9min、25. 2min 和 25. 8min，它們構(gòu)成了廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油的指紋特征。以上所述實施例僅表達(dá)了本發(fā)明的幾種實施方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并不能因此而理解為對本發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)， 這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。因此，本發(fā)明專利的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。
權(quán)利要求
1.一種廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油GC-MS指紋圖譜的構(gòu)建方法，其特征在于，包括如下步驟 (1)供試品溶液的制備精密稱取廣東海風(fēng)藤藥材粉末10.0g，置于燒瓶中，加8-10倍水量，用揮發(fā)油提取器提取6-8h，脫水后得蘭綠色透明油狀物，將上述蘭綠色透明油狀物用乙酸乙酯稀釋3倍，即得供試品溶液； (2)GC-MS分析精密吸取供試品溶液LOuL，注入GC-MS色譜儀，色譜條件如下色譜柱DB-5石英毛細(xì)管柱；載氣為氦氣；進(jìn)樣口溫度270°C，聯(lián)接口溫度250°C ;升溫程序柱溫60°C，保持2min，5°C /min升溫至200°C，再以15°C /min升溫至250°C，保持Imin ;質(zhì)譜條件電離電壓1500V電子能量70eV，電離方式EI，質(zhì)量掃描范圍40_650amu，進(jìn)樣量I. OuL,分流模式20:1 ； (3)測定10批廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油樣品并進(jìn)行分析比較，得到由其共有特征峰構(gòu)成的廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油樣品的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油GC-MS指紋圖譜的構(gòu)建方法，其特征在于，所述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜具有的23個共有峰的保留時間tK分別為7. 5min、7. 8min、10. 2min、10.5min>11. 0min>17. 0min>17. 4min>18. 4min>19. 4min>19.6min>20.7min、21. lmin、21.4min、21.6min>21. 7min、21.8min>22. lmin、23. lmin>23.3min>24.4min、24. 9min、25. 2min 和 25. 8min。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油GC-MS指紋圖譜的構(gòu)建方法，其特征在于，所述步驟(I)中精密稱取廣東海風(fēng)藤藥材粉末10. Og,置于燒瓶中，加8倍水量，用揮發(fā)油提取器提取6h，脫水后得蘭綠色透明油狀物，將上述蘭綠色透明油狀物用乙酸乙酯稀釋3倍，即得供試品溶液。
4.如權(quán)利要求I或2所述的廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油GC-MS指紋圖譜的構(gòu)建方法得到的廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油GC-MS指紋圖譜。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種廣東海風(fēng)藤(Kadsura heteroclita(Roxb.)Craib)揮發(fā)油GC-MS指紋圖譜的構(gòu)建方法及其GC-MS指紋圖譜，該指紋圖譜具有23個共有峰。通過指紋圖譜中共有峰的有無，能有效地監(jiān)控廣東海風(fēng)藤揮發(fā)油的質(zhì)量，保證其質(zhì)量的穩(wěn)定、均一、可控。
文檔編號G01N30/02GK102749395SQ20121021976
公開日2012年10月24日 申請日期2012年6月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月28日
發(fā)明者張現(xiàn)濤, 徐哲, 焦豪妍, 王玉生 申請人:廣東省中藥研究所