專利名稱：微乳液試劑盒的制備方法
微乳液試劑盒的制備方法本發(fā)明涉及一種試劑，具體涉及ー種穩(wěn)定微乳液試劑盒制備的方法，可用于底物比色法測(cè)定血清脂肪酶試劑的配置。血清脂肪酶作為一項(xiàng) 胰腺功能檢測(cè)的指標(biāo)，其特異性很好，1,2- 二月桂-rac-甘油基-3-戊ニ酸-6-甲基試鹵靈酯底物比色法已在臨床診斷中得到了認(rèn)可，然而市場(chǎng)上采用的底物比色法的試劑開封穩(wěn)定性差，開封的時(shí)間越長(zhǎng)，結(jié)果越偏低，開封不到半個(gè)月質(zhì)控就下降到范圍之外，冷藏穩(wěn)定性比較差，冷藏幾個(gè)月后會(huì)有底物沉淀，另外批間差也比較大，因此在使用上給檢驗(yàn)人員帶來(lái)許多不便，結(jié)果的可信度也有所下降。本發(fā)明為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了ー種微乳液試劑盒的制備方法。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明設(shè)計(jì)了ー種微乳液試劑盒的制備方法，包括試劑Rl的制備，以及試劑R2的制備，具體步驟如下，其中試劑Rl的制備取TAPS 緩沖液 100mM/L ；ColipaseO. 8mg/L ;脫氧膽酸鈉 I. 6mM/L ;氯化鈉 0. 5g/L ；氯化鈣4mM/L ;牛黃脫氧膽酸I. 5mM/L ;疊氮鈉0. lg/L ;試劑Rl的PH值為8. 0 ；試劑R2的制備A)取酒石酸緩沖液6mM/L ;膽酸鈉4mM/L ;牛黃脫氧膽酸7mM/L ;防腐剤0. lg/L ;氯化鈉0. 5g/L ;穩(wěn)定劑，占試劑R2的OH ;試劑R2的PH值為3. 5 ；B)取有機(jī)溶劑a，600 iil，加入溴化十二烷基三甲基銨0. 0086g，再加表面活性劑b，0. 0086g，將IOmg底物加入溶解在此溶劑中；C)待步驟B中的溶液完全溶解后緩慢的加入到50ml步驟A中的溶液中，調(diào)節(jié)PH至3. 5，并在一定溫度下下攪拌26分鐘，攪拌后用超聲儀20千赫茲的功率超聲8分鐘，可得澄清透明的橘黃色試劑。所述試劑R2的制備中，有機(jī)溶劑a為こ醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇或異丁醇中的ー種。所述試劑R2的制備中，表面活性劑b為吐溫系列、曲拉通系列、Brij系列、司盤系列、3- [ (3-膽固醇氨丙基)ニ甲基氨基]- I-丙磺酸或AEO系列中的ー種。所述試劑R2的制備中，穩(wěn)定劑為山梨糖醇、絲氨酸或牛血清白蛋白中的ー種。所述試劑R2的制備中，攪拌溫度最佳選擇是在35-45°C之間。所述試劑R2的制備中，底物為I，2-二月桂-rac-甘油基-3-戊ニ酸-6-甲基試鹵靈酷。所述試劑R2的制備中，酒石酸緩沖液的PH值為3. 0-4. O。本發(fā)明同現(xiàn)有技術(shù)相比，改良的乳化方法后，在不影響試劑其他性能的基礎(chǔ)上，改善了試劑的穩(wěn)定性和批間差大的問題。圖I為本發(fā)明試劑盒線性的趨勢(shì)圖。圖2為本發(fā)明試劑盒與免疫濁度法比較的相關(guān)性趨勢(shì)圖。圖3為本發(fā)明試劑盒與底物比色法比較的相關(guān)性趨勢(shì)圖。下面結(jié)合附圖
對(duì)本發(fā)明作進(jìn)ー步描述。實(shí)施例I :本發(fā)明的試劑盒，包括試劑Rl的制備，以及試劑R2的制備，具體步驟如下，其中試劑Rl的制備取TAPS 緩沖液 100mM/L ；ColipaseO. 8mg/L ;脫氧膽酸鈉 I. 6mM/L ;氯化鈉 0. 5g/L ；氯化鈣4mM/L ;牛黃脫氧膽酸I. 5mM/L ;疊氮鈉0. lg/L ;試劑Rl的PH值為8. O。試劑R2的制備A)取酒石酸緩沖液6mM/L ;膽酸鈉4mM/L ;牛黃脫氧膽酸7mM/L ;防腐剤0. lg/L ;氯化鈉0. 5g/L ;牛血清白蛋白，占試劑R2的0. 1% -3% ;試劑R2的PH值為3. 5。B)取有機(jī)溶劑a正丁醇600 iil，加入溴化十二烷基三甲基銨0. 0086g，再加表面活性劑b，3-[(3-膽固醇氨丙基)ニ甲基氨基]-1-丙磺酸0.0086g，將IOmg底物1，2_ 二月桂-rac-甘油基-3-戊ニ酸-6-甲基試鹵靈酯加入溶解在此溶劑中。C)待步驟B中的溶液完全溶解后緩慢的加入到50ml步驟A中的溶液中，調(diào)節(jié)PH至3. 5，并在40°C下攪拌26分鐘，攪拌后用超聲儀20千赫茲的功率超聲8分鐘，可得澄清透明的橘黃色試劑。實(shí)施例2 將實(shí)施例I中的有機(jī)溶劑a 換成異丁醇，其他配置步驟和實(shí)施例I相同。實(shí)施例3 將實(shí)施例I中的表面活性劑b換成司盤40，其他配置步驟和實(shí)施例I相同。實(shí)施例4 將實(shí)施例I中穩(wěn)定劑換成山梨糖醇，其他配置步驟和實(shí)施例I相同。用配置出的試劑Rl，200 illポ2，100111，血清樣本，3111。主波長(zhǎng)，570nm ;副波長(zhǎng)，700nm，速率法，讀點(diǎn)19-29。在日立7170生化儀上檢測(cè)，用羅氏校準(zhǔn)品和質(zhì)控品來(lái)定標(biāo)和做
質(zhì)控，放在試劑倉(cāng)內(nèi)做開封穩(wěn)定性。一個(gè)月開封數(shù)據(jù)見下表
權(quán)利要求
1.ー種微乳液試劑盒的制備方法，包括試劑Rl的制備，以及試劑R2的制備，具體步驟如下，其中 試劑Rl的制備 取 TAPS 緩沖液 100mM/L ；ColipaseO. 8mg/L ;脫氧膽酸鈉 I. 6mM/L ;氯化鈉 0. 5g/L ;氯化鈣4mM/L ;牛黃脫氧膽酸I. 5mM/L ;疊氮鈉0. lg/L ;試劑Rl的PH值為8. 0 ； 試劑R2的制備 A)取酒石酸緩沖液6mM/L;膽酸鈉4mM/L ;牛黃脫氧膽酸7mM/L ;防腐劑0. lg/L ;氯化鈉0. 5g/L ;穩(wěn)定劑，占試劑R2的OH ;試劑R2的PH值為3. 5 ； B)取有機(jī)溶劑a，600iU，加入溴化十二烷基三甲基銨0.0086g，再加表面活性劑b，0. 0086g，將IOmg底物加入溶解在此溶劑中； C)待步驟B中的溶液完全溶解后緩慢的加入到50ml步驟A中的溶液中，調(diào)節(jié)PH至3. 5，并在一定溫度下攪拌26分鐘，攪拌后用超聲儀20千赫茲的功率超聲8分鐘，可得澄清透明的橘黃色試劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的微乳液試劑盒的制備方法，其特征在于所述試劑R2的制備中，有機(jī)溶劑a為こ醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇或異丁醇中的ー種。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的微乳液試劑盒的制備方法，其特征在于所述試劑R2的制備中，表面活性劑b為吐溫系列、曲拉通系列、Brij系列、司盤系列、3-[(3_膽固醇氨丙基)ニ甲基氨基]-1-丙磺酸或AEO系列中的ー種。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的微乳液試劑盒的制備方法，其特征在于所述試劑R2的制備中，穩(wěn)定劑為山梨糖醇、絲氨酸或牛血清白蛋白中的ー種。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的微乳液試劑盒的制備方法，其特征在于所述試劑R2的制備中，攪拌溫度最佳是在35-45°C之間。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的微乳液試劑盒的制備方法，其特征在于所述試劑R2的制備中，底物為I，2-二月桂-rac-甘油基-3-戊ニ酸-6-甲基試鹵靈酷。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的微乳液試劑盒的制備方法，其特征在于所述試劑R2的制備中，酒石酸緩沖液的PH值為3. 0-4. O。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種試劑，具體涉及一種穩(wěn)定微乳液試劑盒制備的方法，包括試劑R1，以及試劑R2，其中試劑R1，包括TAPS緩沖液；Colipase；脫氧膽酸鈉；氯化鈉；氯化鈣；牛黃脫氧膽酸；疊氮鈉；試劑R1的pH值為8.0。試劑R2包括酒石酸緩沖液；膽酸鈉；牛黃脫氧膽酸；防腐劑；氯化鈉；穩(wěn)定劑，試劑R2的pH值為3.5。本發(fā)明同現(xiàn)有技術(shù)相比，改良的乳化方法使試劑在不影響其他性能的基礎(chǔ)上，改善了試劑的穩(wěn)定性和批間差大的問題。
文檔編號(hào)G01N21/78GK102621138SQ20121009958
公開日2012年8月1日 申請(qǐng)日期2012年4月6日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月6日
發(fā)明者張祥洪, 李子樵 申請(qǐng)人:上海藍(lán)怡科技有限公司