專利名稱：用于檢測抗原的裝置及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明部分涉及用于檢測一種或多種抗原的裝置和分析(測定，assay)以及使用其的方法。
背景技術(shù)：
抗原的檢測對于科學(xué)研究、診斷應(yīng)用和治療應(yīng)用的許多領(lǐng)域是重要的。存在抗原可以被檢測的許多方式。多種方法被描述在美國專利5, 160，701、美國專利5, 141，850、 PCT公開WO 91/12336、美國專利5，451，504、美國專利5，559，041、歐洲專利申請?zhí)?0505636A1、PCT公開號=WO 88/08534、歐洲專利申請?zhí)?284 232A1、美國專利申請公開號 20070020768和美國專利號RE39664中，將其每個(gè)的全部內(nèi)容由此以引用方式并入本文中。 在本發(fā)明之前可獲得的方法和裝置可能仍然需要在靈敏度或結(jié)果可以被獲得的速度方面的改進(jìn)。這些因素在試圖確定抗原的存在或缺乏時(shí)在時(shí)間極重要時(shí)可以是重要的。一個(gè)這樣的領(lǐng)域是檢測食物攜帶的致病污染物的領(lǐng)域。近似地，在美國， 七千六百萬人受到食物攜帶的疾病折磨。在這些七千六百萬人中，近似地，325，000人將變得極端惡化，需要住院，并且約5，000人將死亡。食物攜帶的疾病的大部分由沙門氏菌屬， 大腸桿菌，和彎曲桿菌屬造成，耗費(fèi)約$350億美元。在確保安全的食物供給方面，目前的措施涉及地方、州和聯(lián)邦當(dāng)局的組合以及檢查員和監(jiān)督網(wǎng)絡(luò)的復(fù)雜系統(tǒng)。食物生產(chǎn)商遵守由法律強(qiáng)制實(shí)施的一些美國農(nóng)業(yè)部、美國食品和藥品管理部門、和國家海上漁業(yè)服務(wù)規(guī)章。USDA已經(jīng)創(chuàng)建了健康檢查員系統(tǒng)，其負(fù)責(zé)進(jìn)行在制造和加工設(shè)備中制備或加工的日常肉類、農(nóng)產(chǎn)品、和其他消耗品檢查。這些檢查被創(chuàng)建以涉及詳細(xì)的統(tǒng)計(jì)分析以最好地確保食物在到達(dá)消費(fèi)者之前的安全性和無菌性。此外， 肉類工業(yè)的大多數(shù)已經(jīng)采用輻射技術(shù)以進(jìn)一步證實(shí)產(chǎn)品的無菌性。在較低的水平上，當(dāng)?shù)睾褪姓】挡块T工作以確保當(dāng)?shù)嘏l(fā)商、飯店、和零售商遵守嚴(yán)格的指導(dǎo)方針以確保安全的食物供給。然而，盡管有該精細(xì)復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)，但是食物攜帶的感染仍是常見的?！┍l(fā)被強(qiáng)烈地懷疑，調(diào)查開始。對于可能已經(jīng)被暴露的人中的更多病例進(jìn)行研究。確定可能的病例的癥狀以及發(fā)作時(shí)間和位置，并且開發(fā)描述這些典型病例的“病例定義”。暴發(fā)通過時(shí)間、位置、和人被系統(tǒng)地描述。繪制在每個(gè)連續(xù)的天生病的人的數(shù)量的圖， 以形象化地顯示其發(fā)生時(shí)間。按年齡和性別計(jì)算病例的分布顯示受影響的人。通常致病微生物是未知的，因此糞或血液的樣品必須從患病人群收集并送往公共健康實(shí)驗(yàn)室以進(jìn)行診斷。每個(gè)收集和采樣可以耗費(fèi)超過$500/測試，并且通?；ㄙM(fèi)2-4天用于分析(⑶C “食物攜帶的感染”)。在本發(fā)明之前，為了鑒定暴發(fā)的食物或其他來源，調(diào)查者首先采訪具有最典型的情況的一些人，調(diào)查是關(guān)于他們在生病前幾天中可能經(jīng)受的暴露。這樣，一些潛在的暴露可能被排除，而被重復(fù)提及的其他作為來源可能性顯現(xiàn)。與其他信息結(jié)合，如對于涉及的特定微生物的可能來源，可以隨后在正式的流行病學(xué)調(diào)查中測試假設(shè)。調(diào)查者關(guān)于一列可能的暴露于病人，以及未生病的相當(dāng)人群進(jìn)行系統(tǒng)地會(huì)見。通過比較暴露被病人和健康人報(bào)告的頻率，調(diào)查者可以估量暴露與疾病的關(guān)聯(lián)。利用概率統(tǒng)計(jì)，不相關(guān)的概率被直接計(jì)算。隨著新的食物攜帶的問題出現(xiàn)，對于用于檢測食物攜帶的病原體的新型裝置和方法存在需求。本發(fā)明提供了用于檢測抗原，如來自食物攜帶的細(xì)菌的抗原的裝置，并滿足了擁有具有檢測的增加的靈敏度和/或速度的裝置和分析的需求。本發(fā)明滿足了其他需求， 并且將在這里論述。

發(fā)明內(nèi)容
在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了用于檢測抗原的裝置。在一些實(shí)施方式中，所述裝置包括殼體，所述殼體包括第一殼體構(gòu)件和第二殼體構(gòu)件，其中所述殼體包括所述第二殼體構(gòu)件中的入口開口(進(jìn)入開口，進(jìn)口，inlet opening)；連接到所述第一殼體構(gòu)件的加力構(gòu)件(force member)；接觸所述第一殼體構(gòu)件并接觸所述加力構(gòu)件的可滑動(dòng)的鎖定構(gòu)件；包括以下順序的抗原檢測膜系統(tǒng)結(jié)合物墊(conjugate pad)；可滲透膜(可透膜， 滲透膜)；測試膜；和吸收構(gòu)件；以及連接到所述鎖定構(gòu)件和所述結(jié)合物墊的柔性連接構(gòu)件 (attachment member)；其中所述結(jié)合物墊、可滲透膜、測試膜、和吸收構(gòu)件的每個(gè)的至少一部分基本上彼此平行；其中所述結(jié)合物墊能夠壓靠在所述第二殼體構(gòu)件中的入口開口的周邊(周界，perimeter)；并且其中所述加力構(gòu)件接觸所述吸收構(gòu)件，并且能夠基本上垂直于所述抗原檢測膜系統(tǒng)施加壓力。在所述裝置的一些實(shí)施方式中，所述裝置進(jìn)一步包括位于所述測試膜和所述吸收構(gòu)件之間的疏水膜。在一些實(shí)施方式中，所述第一殼體構(gòu)件進(jìn)一步包括突出所述第一殼體構(gòu)件的外表面的滑動(dòng)按鈕(sliding button)，其中所述滑動(dòng)按鈕被連接至所述鎖定構(gòu)件， 其中所述滑動(dòng)按鈕的移動(dòng)移動(dòng)所述鎖定構(gòu)件。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊包括第一抗原-特異性抗體。在一些實(shí)施方式中，由第一抗原-特異性抗體識別的抗原是食物-攜帶的病原體抗原。在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了包括如這里描述的裝置和緩沖液容器(緩沖容器，buffer container)或樣品收集器的系統(tǒng)。本發(fā)明還提供了檢測抗原的方法。


圖1 描繪了根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方式的代表性裝置的透視圖。圖2 描繪了根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方式的代表性裝置的一些部件。圖3 描繪了根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方式的代表性裝置的一些部件。圖4 描繪了根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方式的代表性裝置的一些部件。圖5 描繪了根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方式的在不同位置的代表性裝置的一些部件。
圖6 描繪了根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方式的代表性裝置的一些部件的側(cè)視圖。圖7 描繪了根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方式的代表性裝置的一些部件的側(cè)視圖。圖8 描繪了根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方式的代表性裝置的一些部件的側(cè)視圖。圖9 描繪了連接至結(jié)合物墊的柔性連接構(gòu)件。圖10 描繪了代表性的殼體構(gòu)件中的膜。
具體實(shí)施例方式如這里使用的，并且除非另外說明，否則術(shù)語“約”用于指它修飾的值的士5%。因此，約100意味著95到105。本發(fā)明提供了用于檢測抗原或其他分子的裝置和方法。在一些實(shí)施方式中，裝置使用色譜分析。在一些實(shí)施方式中，所述分析(測定)使用指定結(jié)合分析以表明抗原的存在或缺乏。術(shù)語“捕獲試劑”指的是這樣的試劑，例如抗體或抗原結(jié)合蛋白，其能夠結(jié)合生物樣品中待檢測的靶分子(目標(biāo)分子)或分析物。捕獲試劑也可以為，例如，寡核苷酸或類肽。術(shù)語“檢測”或“探測”在最廣泛的意義上使用以包括靶分析物(目標(biāo)分析物)的
定性和/或定量測量。術(shù)語“連接(結(jié)合)”或“附著”可以包括直接連接或間接連接。相互直接連接的兩個(gè)部件也彼此物理接觸。相互間接連接的兩個(gè)部件通過中間部件而連接。例如，如果部件A可以直接連接中部件C，并且部件C直接連接至部件B，那么部件A可以間接連接至部件B。因此，在這樣的實(shí)例中，部件A將被稱為間接連接至部件B。術(shù)語“分離的”指的是基本上與其天然環(huán)境分開的分子。例如，分離的蛋白質(zhì)是基本上與其起源的細(xì)胞或組織來源分開的蛋白質(zhì)。術(shù)語“純化的”指的是基本上沒有與其天然環(huán)境中的分子相關(guān)的其他物質(zhì)。例如， 純化的蛋白質(zhì)基本上沒有細(xì)胞物質(zhì)或來自其起源的細(xì)胞或組織的其他蛋白質(zhì)。所述術(shù)語涉及制備，其中所述分離的蛋白質(zhì)足夠純以被分析，或者為至少70%到80% (w/w)純，至少 80% -90% (w/w)純，90-95%純；以及，至少95%、96%、97%、98%、99%、或100% (w/w) 純。術(shù)語“特異性結(jié)合”、“特異性地結(jié)合”等是指兩個(gè)或多個(gè)分子形成在生理或分析條件下可測量并且是選擇性的復(fù)合物。如果在適當(dāng)選擇的條件下，這樣的結(jié)合基本上未被抑制，而同時(shí)非特異性結(jié)合被抑制，則抗體或抗原結(jié)合蛋白或其他分子被稱為“特異性地結(jié)合”到蛋白質(zhì)、抗原、或表位。特異性結(jié)合的特征為高親和力，并且對于化合物、蛋白質(zhì)、表位、或抗原是選擇性的。非特異性結(jié)合通常具有低親和力。例如IgG抗體中的結(jié)合通常特征為至少約1(ΓΜ或更高的親和力，如至少約或更高，或至少約10_1或更高，或至少約10_1(1或更高，或至少約10_"Μ或更高，或至少約或更高。所述術(shù)語還適用于例如抗原-結(jié)合結(jié)構(gòu)域?qū)τ谖幢辉S多抗原攜帶的特定表位特異性的情況，在這種情況中攜帶所述抗原-結(jié)合結(jié)構(gòu)域的抗體或抗原結(jié)合蛋白將通常不結(jié)合其他抗原。在一些實(shí)施方式中，所述捕獲試劑對于其結(jié)合伙伴(如抗原)具有等于或小于10_9Μ、10_1(ΙΜ、或IO-11M的Kd。在一些實(shí)施方式中，所述捕獲試劑對于其結(jié)合伙伴具有大于或等于IO9M4的Ka。捕獲試劑也可以涉及例如抗體。完整抗體，也稱為免疫球蛋白，通常為由每個(gè)約25kDa的兩條輕(L)鏈和每個(gè)約50kDa的兩條重(H)鏈組成的四聚糖基化蛋白質(zhì)。輕鏈的兩種類型，稱為λ和κ，存在于抗體中。取決于重鏈的恒定結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列，免疫球蛋白被分為五大主要類A、D、E、G、和Μ，并且這些中的幾個(gè)可以被進(jìn)一步分為亞類(同型)，如， IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgAl、和IgA2。每個(gè)輕鏈由N-末端可變(V)結(jié)構(gòu)域(VL)和恒定(C) 結(jié)構(gòu)域(CL)組成。每個(gè)重鏈由N-末端V結(jié)構(gòu)域(VH)、三或四個(gè)C結(jié)構(gòu)域(CH)、和鉸鏈區(qū)組成。最接近于VH的CH結(jié)構(gòu)域被稱為CHl。VH和VL結(jié)構(gòu)域由稱為框架區(qū)(FR1、FR2、FR3、 和FR4)的相對保守的序列的四個(gè)區(qū)組成，其形成高變序列的三個(gè)區(qū)(互補(bǔ)決定區(qū)，CDR)的支架。CDR包含負(fù)責(zé)抗體或抗原結(jié)合蛋白與抗原的特異性相互作用的大多數(shù)殘基。CDR被稱為⑶R1、⑶R2、和⑶R3。因此，重鏈上的⑶R成分被稱為HI、H2、和H3，而輕鏈上的⑶R 成分被稱為L1、L2、和L3。CDR3是抗體或抗原結(jié)合蛋白_結(jié)合位點(diǎn)內(nèi)的分子多樣性的最大來源。H3，例如，可以短至兩個(gè)氨基酸殘基或大于沈個(gè)氨基酸。免疫球蛋白的不同類別的亞單位結(jié)構(gòu)和三維構(gòu)造在本領(lǐng)域是眾所周知的。對于抗體結(jié)構(gòu)的綜述，參見Antibodies =A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Laboratory,Eds. Harlow et al. , 1988。本令頁域技術(shù)人員將認(rèn)識到每個(gè)亞單位結(jié)構(gòu)，如CH、VH、CL、VL、⑶R、和/或FR結(jié)構(gòu)，包括活性片段。 例如，活性片段可以由以下組成結(jié)合抗原的VH、VL、或CDR亞單位的部分，即，抗原-結(jié)合片段，或結(jié)合到和/或活化Fc受體和/或補(bǔ)體的CH亞單位的部分。包括在這里使用的術(shù)語“抗原-特異性抗體”內(nèi)的結(jié)合片段的非限制性實(shí)例包括 (i)Fab片段，由VL、VH、CL和CHl結(jié)構(gòu)域組成的單價(jià)片段；(ii)F(ab' )2片段，二價(jià)片段，包括在鉸鏈區(qū)通過二硫化物橋鏈接的兩個(gè)Fab片段；(iii) Fd片段，由VH和CHl結(jié)構(gòu)域組成； (iv) Fv片段，由抗體的單一臂的VL和VH結(jié)構(gòu)域組成；(ν) dAb片段，其由VH結(jié)構(gòu)域組成；以及(vi)分離的CDR。此外，雖然Fv片段的兩個(gè)結(jié)構(gòu)域，VL和VH，由分開的基因編碼，但是它們可以通過合成連接劑(連接物)被重組地連接，形成單一蛋白質(zhì)鏈，其中VL和VH結(jié)構(gòu)域配對以形成單價(jià)分子(稱為單鏈Fv(ScFv))。最常使用的連接劑為15-殘基(Gly4Ser)3 肽，但是其他連接劑在本領(lǐng)域也是已知的。單鏈抗體也旨在包括在術(shù)語“抗體或抗原結(jié)合蛋白”，或抗體的“抗原-結(jié)合片段”內(nèi)?？贵w也可以為多克隆抗體、單克隆抗體、嵌合抗體、抗原-結(jié)合片段、Fc片段、單鏈抗體、或它們的任何衍生物。這些抗體是利用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的常規(guī)技術(shù)獲得的，并且所述片段以與完整抗體相同的方式篩查效用?？贵w多樣性是通過編碼可變結(jié)構(gòu)域的多個(gè)種系基因和多種體細(xì)胞事件形成的。體細(xì)胞事件包括具有多樣性(D)的可變基因區(qū)段與連接(J)基因區(qū)段的重組以形成完全的VH結(jié)構(gòu)域，以及可變和連接基因區(qū)段的重組以形成完全的VL結(jié)構(gòu)域。重組過程本身是不精確的，導(dǎo)致在V(D) J連接處氨基酸的缺失或加入。這些多樣性機(jī)制在抗原暴露前在發(fā)育中的B細(xì)胞中發(fā)生。在抗原刺激后，在B細(xì)胞中表達(dá)的抗體基因經(jīng)歷體細(xì)胞突變?；诜N系基因區(qū)段的估計(jì)的數(shù)量，這些區(qū)段的隨機(jī)重組，以及隨機(jī)VH-VL配對，可以產(chǎn)生可達(dá) 1.6X IO7個(gè)不同的抗體(Fundamental Immunology, 3rd ed. (1993) ,ed. Paul, Raven Press, New York, N. Y.)。當(dāng)考慮有助于抗體多樣性的其他過程(如體細(xì)胞突變)時(shí)，認(rèn)為超過 IX IO1 個(gè)不同的抗體可以產(chǎn)生(Immunoglobulin Genes, 2nd ed. (1995)，eds. Jonio et al.，Academic Press, San Diego, Calif.)。因?yàn)樯婕爱a(chǎn)生抗體多樣性的許多過程，所以具有相同的抗原特異性的獨(dú)立來源的單克隆抗體將具有相同的氨基酸序列是不可能的。能夠與抗原、表位、或這里描述的其他分子特異性相互作用的抗體或抗原結(jié)合蛋白分子可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法產(chǎn)生。例如，單克隆抗體可以按照已知方法通過產(chǎn)生雜交瘤而產(chǎn)生。以這個(gè)方式形成的雜交瘤可以隨后利用標(biāo)準(zhǔn)方法篩查，如酶聯(lián)免疫吸附分析(ELISA)和Biacore分析，以鑒定產(chǎn)生與感興趣的分子或化合物特異性相互作用的抗體的一個(gè)或多個(gè)雜交瘤。作為制備單克隆抗體分泌型雜交瘤的備選方案，本發(fā)明的多肽的單克隆抗體可以通過用本發(fā)明的多肽篩查重組組合免疫球蛋白庫(如抗體噬菌體展示庫)來鑒定和分離， 由此分離結(jié)合到所述多肽的免疫球蛋白庫成員。用于產(chǎn)生和篩查噬菌體展示庫的技術(shù)和商業(yè)上可獲得的試劑盒對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是眾所周知的。此外，特別適用于產(chǎn)生和篩查抗體或抗原結(jié)合蛋白展示庫的方法和試劑的實(shí)例可以在文獻(xiàn)中找到。術(shù)語“捕獲試劑”還包括嵌合抗體，如人化抗體，以及完全人化抗體。在一些實(shí)施方式中，捕獲試劑為山羊抗-大腸桿菌0157 :H7抗體Cat# :70-XG13 (Fitzgerald Industries)；大腸桿菌 0157 :H7mono Cat# 10-E13A(Fitzgerald Industries)；大腸桿菌 0157 :H7Cat# :10C-CR1295M3 (Fitzgerald Industries)；大腸桿菌 0157 :H7mono Cat# : 10-E12A(Fitzgerald Industries)；或者山羊抗-小鼠 IgG Cat# :ABSE_020 (DCN)。在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明的裝置包括殼體，所述殼體包括第一殼體構(gòu)件和第二殼體構(gòu)件。在一些實(shí)施方式中，第一和第二殼體構(gòu)件可以作為單個(gè)單元構(gòu)建。所述殼體可以包括入口開口。所述入口開口允許樣品引入到色譜分析上。在一些實(shí)施方式中，所述第一殼體構(gòu)件包括入口開口。所述入口開口可以為足夠的大小以處理被加入到所述裝置中的溶液的合適的體積量。在一些實(shí)施方式中，所述入口開口的大小足夠大以處理約0. 1到:3ml， 約 0. 1 到 2. 5ml，約 0. 5 到 2. 0ml，約 0. 1 到 1. 0ml，約 0. 5 到 1. 5ml, 0. 5 到 1. 0ml，和 1. 0 到 2. Oml0在一些實(shí)施方式中，所述殼體包括結(jié)合物墊、可滲透膜、測試膜、和/或吸收構(gòu)件。 在一些實(shí)施方式中，所述殼體包括抗原檢測膜系統(tǒng)。在一些實(shí)施方式中，所述抗原檢測膜系統(tǒng)包括結(jié)合物墊、可滲透膜、測試膜、和吸收構(gòu)件。在一些實(shí)施方式中，所述抗原檢測膜系統(tǒng)沒有可滲透膜。在一些實(shí)施方式中，所述抗原檢測膜系統(tǒng)以以下順序包括結(jié)合物墊、可滲透膜、測試膜、和吸收構(gòu)件。如這里使用的，術(shù)語“結(jié)合物墊”指的是可以包含捕獲試劑的膜或其他類型的材料。所述結(jié)合物墊可以為乙酸纖維素、硝酸纖維素、聚酰胺、聚碳酸酯、玻璃纖維、膜、聚醚砜、再生纖維素(RC)、聚四氟乙烯(PTFE)、聚酯(如聚對苯二甲酸乙二醇酯)、聚碳酸酯(如 4，4-羥基-二苯基-2，2’ -丙烷)、氧化鋁、混合的纖維素酯(如乙酸纖維素和硝酸纖維素的混合物)、尼龍(如聚酰胺、己撐二胺(六亞甲基二胺)、和尼龍66)、聚丙烯、PVDF、高密度聚乙烯(HDPE) + 成核劑“ 二苯甲酸鋁” (DBS)(如 80u 0. 024HDPE DBS (Porex))、和 HDPE。 結(jié)合物墊的實(shí)例還包括Cyclopore (聚對苯二甲酸乙二醇酯)、Nucleopore (聚對苯二甲酸乙二醇酯)、Membra-Fil (乙酸纖維素和硝酸纖維素)、Whatman (乙酸纖維素和硝酸纖維素)、Whatman#12-S (人造絲))、Anopore (氧化鋁)、Anodisc (氧化鋁)、 Sartorius (乙酸纖維素，如 5 μ m)、禾Π Whatman Standard 17 (粘合玻璃)。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊或測試膜包含捕獲試劑。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊或測試膜與捕獲試劑接觸隨后允許干燥。所述結(jié)合物墊或測試膜還可以包含其他組合物以保存所述捕獲試劑以便它可以在室溫下或者在冷凍或凍結(jié)溫度下穩(wěn)定地存儲。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊或測試膜在捕獲試劑應(yīng)用前被緩沖液浸濕。在一些實(shí)施方式中，所述緩沖液為用于防止非特異性結(jié)合的封閉緩沖液。在一些實(shí)施方式中，所述緩沖液包含硼酸鹽、BSA、PVP40和/或吐溫-100。在一些實(shí)施方式中，所述緩沖液為IOmM硼酸鹽、3% BSA、1% PVP40、和0. 25%吐溫-100。在一些實(shí)施方式中，所述捕獲試劑被應(yīng)用于在包含海藻糖和蔗糖的溶液中的墊或膜。在一些實(shí)施方式中，所述捕獲試劑被應(yīng)用于包含海藻糖、蔗糖和磷酸鹽和/或BSA的溶液中的結(jié)合物墊或測試膜。在一些實(shí)施方式中，所述捕獲試劑用于作為5%海藻糖、20%蔗糖、IOmM磷酸鹽、和BSA的溶液中。在一些實(shí)施方式中，所述墊或膜(如結(jié)合物墊或測試膜)包含約0.5到約5. Oyg 的捕獲試劑，約1到約3 μ g的捕獲試劑，約1到約2 μ g的捕獲試劑，約2到約3 μ g的捕獲試劑，約1. 5 μ g的捕獲試劑，2. 5 μ g的捕獲試劑，或約2. 7 μ g的捕獲試劑。在一些實(shí)施方式中，所述可滲透膜被連接或粘附到測試膜。在一些實(shí)施方式中，所述可滲透膜被層壓到測試膜上。所述可滲透膜可以為允許樣品，如流體樣品，流過測試膜的任何材料的膜。測試膜的實(shí)例包括，但不限于，硝化纖維、纖維素、玻璃纖維、聚酯、聚丙烯、 尼龍等。在一些實(shí)施方式中，所述可滲透膜包括開口。所述開口可以存在以允許測試膜的顯現(xiàn)或檢測。在一些實(shí)施方式中，可滲透膜中的開口基本上與殼體中的入口開口大小相同。 可滲透膜的實(shí)例包括，但不限于，Protran BA83、Whatman等。如這里使用的，所述“測試膜”指的是其中結(jié)合伙伴到捕獲試劑的檢測發(fā)生的膜。 測試膜包括，但不限于硝化纖維膜、尼龍膜、聚偏氟乙烯膜、聚醚砜膜等。所述測試膜可以為可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員使用以檢測捕獲試劑的結(jié)合伙伴(如抗原或表位)的存在的任何材料。所述測試膜還可以包含捕獲試劑。在一些實(shí)施方式中，所述測試膜與捕獲試劑接觸， 并且所述捕獲試劑允許干燥并粘附到所述測試膜。測試膜的實(shí)例包括，但不限于Protran BA83、Whatman、Opitran BA—SA83、禾口 0. 22 μ m 白色平紋布(white plain) (Millipore Product No. SA3J036107)。所述測試膜可以包含多種捕獲試劑。在一些實(shí)施方式中，所述測試膜包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、或10種捕獲試劑。在一些實(shí)施方式中，所述測試膜包含多個(gè)區(qū)域，每個(gè)區(qū)域具有不同的捕獲試劑。在一些實(shí)施方式中，所述多個(gè)區(qū)域不完全重疊或相互重合。通過使用多種捕獲試劑，可以檢測多種結(jié)合伙伴(如表位或抗原)。在一些實(shí)施方式中，所述殼體還包括吸收構(gòu)件。所述吸收構(gòu)件還可以被稱為“吸水墊”或“吸收墊”。所述吸收構(gòu)件在所述樣品被施加于所述裝置時(shí)吸收流過所述裝置的流體并在所述樣品被施加于所述裝置時(shí)提供輔助樣品的流動(dòng)的吸收力。所述吸收構(gòu)件可以為可以促進(jìn)樣品通過結(jié)合物墊并到達(dá)測試膜的流動(dòng)的任何材料。吸收構(gòu)件的實(shí)例包括，但不限于纖維素、超吸收聚合物、玻璃纖維墊(如 C083 (MiIlipore))等。在一些實(shí)施方式中，所述殼體包括多個(gè)(如2個(gè)或更多個(gè))吸收構(gòu)件。在一些實(shí)施方式中，所述殼體包括2、3、4、或5個(gè)吸收構(gòu)件。在一些實(shí)施方式中，所述吸收構(gòu)件包括一個(gè)或多個(gè)膜，可達(dá)10個(gè)單獨(dú)的膜，并且每個(gè)膜可以為相同的材料或不同的材料。在一些實(shí)施方式中，所述裝置包括加力構(gòu)件。所述加力構(gòu)件可以用于施加壓力或向著彼此壓縮抗原檢測膜系統(tǒng)的其他部件。在一些實(shí)施方式中，所述加力構(gòu)件可以包括軸和頭。所述加力構(gòu)件可以具有蘑菇型形狀，其中頭寬于軸。在一些實(shí)施方式中，頭窄于軸。 包括頭和軸的加力構(gòu)件可以為單一單元或可以由相互接觸以形成加力構(gòu)件的多個(gè)部分制成。例如，所述頭可以為可以與軸分開的一個(gè)單元。在裝配后，頭和軸相互接觸以形成加力構(gòu)件。在另一實(shí)例中，頭和軸是一個(gè)粘著單元(附著單元)，并一起制造，而不是作為隨后被裝配以形成加力構(gòu)件的分開的部分制造。所述加力構(gòu)件允許所述裝置伴隨垂直流動(dòng)工作， 與依賴于側(cè)向流動(dòng)相反。這里描述的裝置可以用在分析中以檢測捕獲試劑的結(jié)合伙伴的存在。例如，抗原可以利用本發(fā)明的裝置通過抗體來檢測。本發(fā)明的裝置采用垂直流動(dòng)?！按怪绷鲃?dòng)”是指樣品流動(dòng)通過所述裝置中存在的不同膜和構(gòu)件的方向。垂直流動(dòng)是指與側(cè)向流動(dòng)相反的流動(dòng)通過膜(如頂部到底部)的樣品，其涉及流動(dòng)通過(如側(cè)面到側(cè)面)膜、墊或吸收構(gòu)件的樣品。在側(cè)向流動(dòng)裝置中，所述膜和墊的位置水平地相互鄰近，基本上在同一平面上。在垂直流動(dòng)裝置中，每個(gè)膜或墊基本上相互平行或完全相互平行并基本上占據(jù)裝置中不同的空間平面。所述膜和墊在它們被壓縮或被置于壓力下時(shí)可以占據(jù)類似的平面。。在一些實(shí)施方式中，每個(gè)膜或墊的至少一部分在彼此的頂部分層。在一些實(shí)施方式中，膜或墊的每層的至少一部分基本上彼此平行。在一些實(shí)施方式中，每層的至少一部分在與其它層不同的空間平面內(nèi)。為了允許垂直流動(dòng)有效發(fā)生，在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊、可滲透膜、測試膜和吸收構(gòu)件基本上彼此平行。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊、可滲透膜、測試膜和吸收構(gòu)件在不同的空間平面中存在。在一些實(shí)施方式中，所述殼體還包括疏水膜，其可以減慢或停止樣品的垂直流動(dòng)。所述疏水膜可以與測試膜接觸，其將允許樣品暫?；蛲Ａ粼跍y試膜上。所述暫?？梢栽试S提高的靈敏度和檢測。垂直流動(dòng)由施加于膜的壓力調(diào)節(jié)。在一些實(shí)施方式中，所述壓力垂直于測試膜和/或結(jié)合物墊施加?？梢允┘铀鰤毫κ沟盟鼋Y(jié)合物墊壓向殼體。向著殼體的壓縮可以是這樣的使得結(jié)合物墊與殼體、0-環(huán)、或凸緣直接接觸或通過中間物接觸，以便結(jié)合物墊和測試膜向著彼此壓縮。所述加力構(gòu)件可以施加基本上垂直于測試膜的壓力。所述壓力促進(jìn)垂直流動(dòng)。所述壓力允許膜堆的每層與另一層接觸。所述壓力還可以解除以停止流動(dòng)，使得測試樣品可以暫?；蛲Ａ粼跍y試膜上，其可以允許更大的靈敏度。所述壓力可以隨后被再施加以通過允許樣品流入一個(gè)或多個(gè)吸收構(gòu)件而允許垂直流動(dòng)繼續(xù)。所述加力構(gòu)件可以施加壓力以便結(jié)合物墊與殼體的一部分接觸。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊在它不在加力構(gòu)件施加的壓力下時(shí)與殼體接觸，但是在加力構(gòu)件施加壓力后，結(jié)合物墊被壓向殼體的一部分。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊與入口開口的周邊接觸。所述入口開口還可以包括凸緣(collar)或其他類似的特征，如0-環(huán)。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊與凸緣和/或0-環(huán)的周邊接觸。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊能夠向著入口開口的周邊被壓縮，在一些實(shí)施方式中，所述入口開口可以包括凸緣和/或0-環(huán)?！澳軌蛳蛑鋈肟陂_口的周邊被壓縮”指的是膜或墊(如結(jié)合物墊)與所述入口開口的周邊直接接觸而被壓縮，或者對著與所述入口開口的周邊接觸的另一層或材料(如膜)被壓縮。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊不與所述殼體直接物理接觸，但是與所述殼體流體接觸。“流體接觸”是指如果樣品通過入口開口或其他開口被施加于所述裝置，則所述流體將接觸所述結(jié)合物墊。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊可以通過另一膜如可滲透膜與所述殼體分開，其中所述其他膜與所述殼體直接物理接觸或與所述凸緣或0-環(huán)直接物理接觸。當(dāng)所述樣品被施加于所述裝置時(shí)，所述流體可以首先接觸另外的膜，隨后接觸所述結(jié)合物墊。這僅是與所述殼體流體接觸的結(jié)合物墊的一個(gè)實(shí)例。存在許多另外的實(shí)施方式，其中所述結(jié)合物墊與所述殼體、所述凸緣、或所述0-環(huán)不直接物理接觸，但是與所述殼體流體接觸。所述加力構(gòu)件可以施加足以促進(jìn)穿過不同膜層的垂直流動(dòng)的任何壓力。在一些實(shí)施方式中，所述裝置的層(如結(jié)合物墊、可滲透膜、測試膜、和吸收構(gòu)件)在選自約51bf (磅力)到 IOOlbf，約 51bf 到 501bf，約 IOlbf 到 401bf，約 151bf 到 401bf，約 151bf 到 251bf, 或約301bf到401bf的力下被壓縮。所述力還可以壓縮疏水或不滲透膜(如果一個(gè)存在于所述裝置中)。在一些實(shí)施方式中，所述加力構(gòu)件與吸收構(gòu)件的第一表面接觸。在一些實(shí)施方式中，結(jié)合物墊與測試膜接觸。在一些實(shí)施方式中，測試膜的第一表面與可滲透膜接觸。在一些實(shí)施方式中，測試膜的第二表面與吸收墊的第二表面接觸。在一些實(shí)施方式中，所述裝置包括疏水膜，并且，例如，所述疏水膜與測試膜的第二表面接觸。在一些實(shí)施方式中，所述疏水膜與所述吸收墊的第一表面接觸。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊的第一表面與殼體接觸，并且所述結(jié)合物墊的第二表面與可滲透膜的第一表面接觸，其中，所述可滲透膜的第二表面與測試膜的第一表面接觸，其中所述測試膜的第二表面與吸收墊的第一表面接觸，其中所述吸收墊的第二表面與加力構(gòu)件接觸。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊的第一表面與所述殼體的入口開口的周邊接觸。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊的第一表面與凸緣或0-環(huán)的周邊接觸。所述裝置還可以包括連接構(gòu)件。在一些實(shí)施方式中，所述連接構(gòu)件是柔性的或由柔性材料制備。所述柔性材料可以為，例如，彈性材料或彈性體材料。連接構(gòu)件可以例如連接至結(jié)合物墊和/或疏水膜。所述連接構(gòu)件還可以被連接至所述裝置的任何膜或構(gòu)件。連接構(gòu)件的實(shí)例包括，但不限于，彈性體帶、橡膠帶、彈簧等。在一些實(shí)施方式中，所述連接構(gòu)件可以由形狀記憶材料制成。所述連接構(gòu)件使得可以形成移動(dòng)鎖定構(gòu)件和移動(dòng)連接構(gòu)件被連接到其上的結(jié)合物墊或任何其他類型的膜或墊之間的延遲。所述墊或膜的移動(dòng)不與滑動(dòng)按鈕或鎖定構(gòu)件被移動(dòng)同時(shí)發(fā)生。不限于任何特定理論，當(dāng)所述滑動(dòng)按鈕或鎖定構(gòu)件被移動(dòng)時(shí)，能量累積在連接構(gòu)件中，并且在壓力被釋放后，該能量被用于牽拉連接至連接構(gòu)件的墊或膜。在一些實(shí)施方式中，所述鎖定構(gòu)件在結(jié)合物墊被移動(dòng)或移除前從加力構(gòu)件被移開 (即，加力構(gòu)件不再接觸鎖定構(gòu)件)。在一些實(shí)施方式中，一旦由加力構(gòu)件施加的壓縮或壓力被完全移開，結(jié)合物墊移動(dòng)。所述連接構(gòu)件還可以被連接到滑動(dòng)按鈕或鎖定構(gòu)件。所述連接構(gòu)件可以通過任何方式被連接到其他部件，如粘合劑、U形釘、捆扎等。在一些實(shí)施方式中，所述膜或墊在膜或墊中具有允許連接構(gòu)件連接到膜或墊的凹口。非限制性實(shí)例可以在圖9中看到。在一些實(shí)施方式中，所述殼體包括鎖定構(gòu)件。所述鎖定構(gòu)件可以為可以在所述裝置內(nèi)移動(dòng)的可滑動(dòng)的鎖定構(gòu)件。所述鎖定構(gòu)件可以用于將加力構(gòu)件鎖定在一定位置，使得由加力構(gòu)件在不同層上造成的力被維持。鎖定構(gòu)件例如，將加力構(gòu)件鎖定在合適位置，使得除非鎖定構(gòu)件被移動(dòng)成允許加力構(gòu)件改變位置(即，降低)，壓力不能被解除。所述鎖定構(gòu)件，可以例如，安裝在加力構(gòu)件的頭下，其將使加力構(gòu)件保持在升高的位置。所述鎖定構(gòu)件還可以被定位，使得它使加力構(gòu)件保持在特定位置(如升高或降低)。所述鎖定構(gòu)件可以由任何材料制成，包括，但不限于，塑料等。所述鎖定構(gòu)件可以，例如直接接觸加力構(gòu)件，或者通過防止加力構(gòu)件釋放壓力的另一部件間接接觸加力構(gòu)件。在一些實(shí)施方式中，所述鎖定構(gòu)件接觸加力構(gòu)件以壓縮結(jié)合物墊。所述鎖定構(gòu)件還可以接觸連接構(gòu)件，使得鎖定構(gòu)件的移動(dòng)將移動(dòng)連接構(gòu)件，連接至連接構(gòu)件的任何其他膜(如結(jié)合物墊、疏水膜、測試膜、或吸收構(gòu)件)或其他部件。例如， 如果所述鎖定構(gòu)件被移動(dòng)以解除加力構(gòu)件的壓力，由此允許加力構(gòu)件改變位置(如，從升高到降低的位置)，鎖定構(gòu)件的移動(dòng)也將使連接構(gòu)件變形/將能量積聚到連接構(gòu)件中，以便一旦壓力被充分地減小，它可以移動(dòng)膜或墊。當(dāng)所述結(jié)合物墊被連接至連接構(gòu)件，并且鎖定構(gòu)件被移動(dòng)時(shí)，一旦壓力被充分地減小，這也將移動(dòng)結(jié)合物墊。在一些實(shí)施方式中，所述壓力被完全去除。所述結(jié)合物墊可以，例如，被移動(dòng)，以致它從裝置被移開。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊被移動(dòng)以通過入口開口展現(xiàn)測試膜。展現(xiàn)的所述測試膜的量將依賴于使用的檢測的類型。對于目視檢測，較多的所述測試膜可能需要在入口開口中展示。對于非目視檢測，如熒光、紅外線、放射性或化學(xué)發(fā)光檢測，較少的所述測試膜可能需要展示。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊被移動(dòng)，使得它不再可以通過入口開口看到或檢測到。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊的移動(dòng)可以形成除了入口開口之外的另一開口，以顯現(xiàn)或檢測所述測試膜。在一些實(shí)施方式中，所述連接構(gòu)件還連接至不滲透膜或疏水膜。當(dāng)移動(dòng)所述連接構(gòu)件時(shí)，所述移動(dòng)還將移動(dòng)或移開所述不滲透膜或疏水膜。如這里討論的，所述不滲透膜或疏水膜的存在可以通過減慢或停止垂直流動(dòng)而允許測試樣品暫?；蛲Ａ粼跍y試膜上。當(dāng)移動(dòng)或移開所述不滲透膜或疏水膜時(shí)，通過其到連接構(gòu)件的連接或通過其他方式，垂直流動(dòng)不再被阻止或抑制。在一些實(shí)施方式中，所述殼體包括滑動(dòng)按鈕?；瑒?dòng)按鈕也可以稱為滑動(dòng)構(gòu)件。所述滑動(dòng)按鈕可以穿過所述殼體的內(nèi)表面和外表面。在一些實(shí)施方式中，所述滑動(dòng)按鈕或滑動(dòng)構(gòu)件突出到所述殼體的外表面。在一些實(shí)施方式中，所述滑動(dòng)按鈕直接或間接連接至鎖定構(gòu)件。當(dāng)所述滑動(dòng)按鈕連接(直接或間接)至鎖定構(gòu)件時(shí)，所述滑動(dòng)按鈕的移動(dòng)也移動(dòng)鎖定構(gòu)件。所述連接構(gòu)件在一些實(shí)施方式中可以連接至滑動(dòng)按鈕。在一些實(shí)施方式中，所述連接構(gòu)件連接至滑動(dòng)按鈕和鎖定構(gòu)件。所述滑動(dòng)按鈕和鎖定構(gòu)件也可以構(gòu)造成單個(gè)單元。在一些實(shí)施方式中，所述入口開口包括選自約0.2-20cm2的范圍的開口。在一些實(shí)施方式中，所述入口開口的直徑為約1到約2cm。在一些實(shí)施方式中，所述入口開口的直徑為約Icm或約1. 5cm。在一些實(shí)施方式中，所述入口開口的直徑為約1cm、約2cm、約3cm、 約4cm、或約5cm。如這里討論的，所述結(jié)合物墊可以包括抗原特異性捕獲試劑。在一些實(shí)施方式中， 所述結(jié)合物墊包含多種抗原特異性捕獲試劑。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊包含1、2、 3、4、或5種抗原特異性捕獲試劑。所述抗原可以為可以被捕獲試劑特異性識別的任何分子。抗原的實(shí)例包括多核苷酸分子(如DNA、RNA、siRNA、反義寡核苷酸)肽、蛋白質(zhì)、糖類、 多糖、碳水化合物等。所述抗原也可以指在同樣的蛋白質(zhì)或多肽上存在的不同的表位。所述捕獲試劑也可以為，例如，蛋白質(zhì)A、蛋白質(zhì)G等。在一些實(shí)施方式中，所述蛋白質(zhì)為病原體蛋白質(zhì)。病原體蛋白質(zhì)指的是來自病原體的蛋白質(zhì)。病原體的實(shí)例包括，但不限于，病毒、原核生物和致病真核生物，如單細(xì)胞致病生物和多細(xì)胞寄生蟲。病原體還可以包括原生動(dòng)物病原體，其包括生命周期中它們是細(xì)胞內(nèi)病原體的階段。如這里使用的，術(shù)語“細(xì)胞內(nèi)病原體”是指病毒或致病生物，其生殖或生命周期的至少部分存在于宿主細(xì)胞內(nèi)，并且在那里產(chǎn)生或造成產(chǎn)生病原體蛋白質(zhì)。細(xì)菌性病原體包括，但不限于，如細(xì)菌性致病革蘭氏陽性球菌，其包括但不限于 肺炎球菌；葡萄球菌；以及鏈球菌。致病革蘭氏陰性球菌包括腦膜炎球菌；和淋球菌。致病腸道革蘭氏陰性桿菌包括腸內(nèi)菌；假單胞菌、放線菌和?？暇鷮?；類鼻疽；沙門氏菌屬； 志賀氏菌；嗜血桿菌；軟性下疳；馬爾他熱病；野兔熱；耶爾森氏菌屬(巴斯德菌)；念珠狀鏈桿菌和螺旋菌；單核增生性李斯特菌；豬紅斑丹毒絲菌；白喉；霍亂；炭疽；性病性肉芽腫(腹股溝肉芽腫)；和巴爾通體病。致病厭氧細(xì)菌包括破傷風(fēng)；肉毒桿菌中毒；其他梭狀芽孢桿菌；肺結(jié)核；麻風(fēng)；和其他分支桿菌。致病螺旋體疾病包括梅毒；密螺旋體病雅司病、品他病和地方性梅毒；以及鉤端螺旋體病。由更高病原體細(xì)菌和致病真菌造成的其他感染包括放線菌??；諾卡菌病；隱球菌病，芽生菌病，組織胞漿菌病和球孢子菌??；念珠菌病，曲霉病，以及毛霉菌??；孢子絲菌??；南美芽生菌病，波氏霉菌病，球擬酵母菌病，足分支菌病和廣色霉菌??；以及皮膚真菌病。立克次氏體感染包括立克次體和普氏立克次氏體。支原體和衣原體感染的實(shí)例包括肺炎支原體；性病性淋巴肉芽腫；鸚鵡熱；和圍產(chǎn)期衣原體感染。致病原生動(dòng)物和蠕蟲和感染真核生物由此包括阿米巴?。化懠?；利什曼病；錐蟲??；弓形體??；卡氏肺孢子菌；巴貝蟲??；賈第鞭毛蟲病；旋毛蟲病；絲蟲?。谎x??；線蟲類；吸蟲類或吸蟲；以及絳蟲(絳蟲)感染。細(xì)菌還包括大腸桿菌和彎曲桿菌屬 (Campylobacter),禾口沙門氏菌屬(Salmonella)。在一些實(shí)施方式中，大腸桿菌是大腸桿菌0157。病毒的實(shí)例包括，但不限于，HIV,肝炎A、B、和C、FIV,慢病毒，瘟病毒，西尼羅河病毒，麻疹，天花，牛痘，埃博拉病毒，冠狀病毒等。其他病原體還披露在美國專利申請公開號 20080139494中，將其以引用方式并入。在一些實(shí)施方式中，所述病原體為食物攜帶的病原體。所述抗原可以存在于食物攜帶的病原體上。食物攜帶的病原體是在食用污染的食物后造成疾病的病原體(如病毒或細(xì)菌)。食物本身不直接造成疾病，但是存在于食物上的食物攜帶的病原體的消費(fèi)造成疾病。在一些實(shí)施方式中，所述食物攜帶的病原體是大腸桿菌、彎曲桿菌屬、或沙門氏菌。在一些實(shí)施方式中，所述抗原是選自食物攜帶的病原體抗原的抗原。例如，所述食物攜帶的病原體抗原可以選自，但是不限于，大腸桿菌抗原、彎曲桿菌屬抗原、或沙門氏菌抗原。在一些實(shí)施方式中，所述抗原是種特異性0-抗原。在一些實(shí)施方式中，所述0-抗原是大腸桿菌和 /或沙門氏菌0-抗原，并且可以被用于大腸桿菌和沙門氏菌檢測。在一些實(shí)施方式中，所述抗原是鞭毛蛋白抗原。在一些實(shí)施方式中，所述抗原是彎曲桿菌屬鞭毛蛋白抗原。在一些實(shí)施方式中，所述捕獲試劑包含檢測試劑。所述檢測試劑可以為可用于檢測結(jié)合到其特異性結(jié)合伙伴的捕獲試劑的存在的任何試劑。所述捕獲試劑可以直接包含檢測試劑，或者所述捕獲試劑可以包含包括檢測試劑的顆粒。在一些實(shí)施方式中，所述捕獲試劑和/或顆粒包含染料、膠態(tài)金(膠體金)、放射性標(biāo)簽、熒光標(biāo)簽、或化學(xué)發(fā)光底物。所述顆?？梢詾?，例如病毒顆粒、膠乳顆粒、脂質(zhì)顆粒、或熒光顆粒。在一些實(shí)施方式中，所述膠態(tài)金具有約 20nm、約 30nm、或約 40nm 或在約 20_30nm、約 20_40nm、約 30_40nm、或約!35-40nm 的范圍內(nèi)的直徑大小。
在一些實(shí)施方式中，所述測試膜還包含一種或多種捕獲試劑。本發(fā)明的捕獲試劑還可以包括抗-抗體，即，識別另一抗體但是對于抗原不是特異性的抗體，如，但是不限于，抗-IgG、抗-IgM、或抗-IgE抗體。當(dāng)所述測試膜包含抗-抗體(如抗-IgG、抗-IgM、或抗-IgE抗體)時(shí)，這種非特異性抗體可以用作陽性對照以檢測共軛物是否已經(jīng)從結(jié)合物墊被釋放。當(dāng)將所述樣品施加于所述裝置時(shí)，它允許第一捕獲試劑從所述結(jié)合物墊被釋放。當(dāng)所述捕獲試劑被釋放并流過所述裝置時(shí)，連接至抗原或沒有連接至抗原，它可以接觸抗-抗體，如抗-IgG或抗-IgM抗體，其可以隨后被檢測。這種檢測可以用于顯示所述裝置正確地工作。在一些實(shí)施方式中，所述測試膜包括第二抗原特異性捕獲試劑。在一些實(shí)施方式中，所述測試膜包括第一區(qū)域，所述第一區(qū)域包含含有抗-IgG捕獲試劑的第一捕獲試劑； 以及第二區(qū)域，所述第二區(qū)域包含第二抗原特異性捕獲試劑，其中所述第一和第二區(qū)域并不完全相互重疊或重合。該非限制性實(shí)施方式可以用于展示所述裝置正確工作并用于檢測感興趣的抗原的存在。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊包括第一抗原特異性捕獲試劑，并且所述測試膜包括第二抗原特異性捕獲試劑，其中所述第一和第二抗原特異性捕獲試劑結(jié)合到抗原上存在的非競爭性表位。所述裝置可以采用，例如，夾層型分析，其發(fā)生在兩步中。第一步驟是抗原結(jié)合到結(jié)合物墊上存在的捕獲試劑。在結(jié)合到第一抗原特異性捕獲試劑后，所述抗原可以流過測試膜或與測試膜接觸，其中在測試膜處存在第二抗原特異性捕獲試劑。在與測試膜相互作用后，如果測試抗原可以結(jié)合到第二抗原-特異性捕獲試劑，它將能夠通過顯現(xiàn)或通過使用另一檢測裝置如，但是不限于，熒光閱讀器被檢測。所述測試膜和結(jié)合物墊可以包括識別不同的抗原或不同的表位的另外的抗原-特異性捕獲試劑。在一些實(shí)施方式中，所述測試膜或結(jié)合物墊包括1、2、3、4、5、6、7、8、9、10種抗原-特異性捕獲試劑。在一些實(shí)施方式中，所述測試膜或結(jié)合物墊包括多種抗原-特異性捕獲試劑。在一些實(shí)施方式中， 每種抗原-特異性捕獲試劑識別不同的抗原或相同抗原上的不同表位?！安煌目乖币部梢灾赶嗤牡鞍踪|(zhì)，但是來自相同有機(jī)體的不同菌株的蛋白質(zhì)。不同的抗原也可以指來自不同有機(jī)體的抗原。例如，存在大腸桿菌的任何許多菌株。 不是所有的大腸桿菌菌株造成食物攜帶的疾病。本發(fā)明可以用于，例如，檢測來自致病大腸桿菌菌株的抗原，與檢測來自非-致病大腸桿菌菌株的抗原相反。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊和/或測試膜包括第一和第二抗原-特異性捕獲試劑，其中所述第一和所述第二捕獲試劑識別不同的抗原。在一些實(shí)施方式中，所述測試膜和/或結(jié)合物墊包括包含多種抗原-特異性捕獲試劑的多個(gè)區(qū)域，其中所述多種抗原-特異性捕獲試劑識別不同的抗原。 在一些實(shí)施方式中，所述多個(gè)區(qū)域不完全彼此重疊或重合。在一些實(shí)施方式中，所述多個(gè)抗原各自獨(dú)立地選自大腸桿菌抗原、彎曲桿菌屬抗原、和沙門氏菌抗原。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，所述多個(gè)抗原為2、3、4、5、6、7、8、9、10，或超過10個(gè)抗原。所述裝置可以單獨(dú)、成對、或以多個(gè)構(gòu)型被容納。所述殼體可以為水密的，以防止泄露，并且可以由多種惰性材料制造，如聚合物材料。在一些實(shí)施方式中，所述入口開口，可以為足夠體積，以包含與本發(fā)明一起使用的樣品或試劑的任何需要的量。因?yàn)樗鲅b置的膜或墊優(yōu)選是化學(xué)惰性的，它可以在任何反應(yīng)位置必須被活化， 在所述位置它被希望相對于溶劑運(yùn)輸而固定特定結(jié)合試劑?？梢孕枰喾N方法來根據(jù)試劑的特定化學(xué)性質(zhì)使試劑固定。通常，當(dāng)所述介質(zhì)是硝化纖維或混合的硝化纖維酯時(shí)，對于試劑的固定，不需要特定的化學(xué)連接(化學(xué)鍵)。多種技術(shù)可以用于其他材料和試劑，其包括用材料如羰基二咪唑、戊二醛或琥珀酸功能化，或用材料如溴化氰處理。其他合適的反應(yīng)包括為了醛、羰基和氨基基團(tuán)的還原，用錫夫堿和硼氫化物處理。DNA、RNA和一些抗原可以通過烘焙到色譜材料上針對溶劑運(yùn)輸而被固定。烘焙可以在范圍從約60°C到約120°C的溫度下進(jìn)行，時(shí)間在從約5分鐘到約12小時(shí)變化，并且在一些實(shí)施方式中，烘焙在約80°C下實(shí)施約2小時(shí)。本發(fā)明還提供了包括這里描述的裝置和緩沖液容器的系統(tǒng)。所述緩沖液容器可以為所述被測試樣品可以與其混合并隨后施加于所述裝置的任何緩沖液。例如，所述樣品可以取自一定來源，并且所述樣品可以與緩沖液混合。所述緩沖液可以為將溶解細(xì)胞的溶胞緩沖液或維持樣品的PH以便分析可以被正確進(jìn)行的緩沖液。所述緩沖液容器可以為任何形狀并且可以包括在所述裝置的殼體外或殼體內(nèi)。在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了包括樣品收集器的系統(tǒng)。所述樣品收集器可以為可以從來源取樣并允許樣品被測試的任何材料。例如，所述樣品收集器可以為拭子，如棉花-拭子。在一些實(shí)施方式中，所述樣品收集器為接種器。在一些實(shí)施方式中，所述殼體包括樣品收集器，并且所述樣品收集器的一部分在所述殼體的內(nèi)部。在一些實(shí)施方式中，所述樣品收集器部分在所述殼體的外部且部分在所述殼體的內(nèi)部。在一些實(shí)施方式中，所述樣品收集器完全在所述殼體的外部。本發(fā)明還提供了包括這里描述的裝置的試劑盒。所述試劑盒可以包括如這里描述的裝置、樣品收集器、緩沖液容器、指導(dǎo)手冊、陽性對照、陰性對照、或它們的任何組合。關(guān)于試劑盒，陽性對照是已知包含可以用試劑盒中存在的裝置檢測的抗原的樣品。相反，陰性對照，將不包含可以被試劑盒檢測的抗原。所述陰性對照在與抗-抗體結(jié)合使用時(shí)，將能夠顯示所述裝置在正確地工作。緩沖液也可以包括在本發(fā)明中。緩沖液的實(shí)例包括，但不限于，lXPBSdOmM磷酸鹽，137mM氯化鈉，2.7mM氯化鉀)、沖洗緩沖液(如IOmM磷酸鈉，150mM NaCl, 0. 5% 吐溫-20，0.05%疊氮化鈉)、膜緩沖液(如IOmM磷酸鈉，0. 蔗糖，0. BSA，0. 2% PVP-40pH 7. 21，用0. 2μπι過濾器過濾)、多克隆共軛封閉緩沖液(如50mM硼酸鹽，10 % BSA, pH 8.93)；多克隆共軛稀釋劑(如50mM硼酸鹽，1 % BSA，pH 9. 09)、或封閉緩沖液 (如IOmM磷酸鈉，0. 蔗糖，0.025% Silwet pH 7. 42 ；IOmM磷酸鈉，1 %蔗糖，1 %海藻糖， 0. 01% BSA, 0. 025%吐溫-20 ；0. 05%疊氮化鈉，0. 025% Silwet pH7. 4 ；IOmM磷酸鈉，0. 1% 蔗糖，0. 1%BSA,0. 2% PVP-40pH 7. 21)。所述緩沖液還可以為，但不限于，封閉緩沖液(如去離子水中的10% BSA，pH 7. 4或去離子水中的BSA，pH 7.4) ；IOmM硼酸鹽，3% BSA， 1% PVP40，和 0. 25%吐溫-100 ；等。所述結(jié)合物墊和測試膜可以在捕獲試劑的存在或缺乏的情況下與這里描述的緩沖液的任何一種接觸，并且在一些實(shí)施方式中，允許干燥。作為溶胞緩沖液的緩沖液的實(shí)例包括，例如，但不限于，2%吐溫(ν/ν)和0. Triton (ν/ν) ；2% 吐溫(ν/ν)禾口 0. 1 % SDS (w/v) ；2% 吐溫(ν/ν)禾口 0. 1 % BSA (w/v) ；2% 吐溫(ν/ν)和1 % BSA (w/v) ,0.1% SDS (w/v), 1 % BSA (w/v)，或它們的任何組合。所述溶胞緩沖液還可以為，例如，5%吐溫/PBS ；2%吐溫/PBS+0. 1% SDS ；2%吐溫/PBS+1 % BSA。溶胞緩沖液的其他實(shí)例包括，但不限于，5%吐溫-80(v/v) ；5% Triton Χ-100 (ν/ν) ；5% ΝΡ40 (ν/ν) ；2% 吐溫-80 (ν/ν) ；2% Triton Χ-100 (ν/ν) ；2% ΝΡ40 (ν/ν) ；吐溫-80 (ν/ ν) ；1% TritonX-IOO (ν/ν)；和1 % ΝΡ40 (ν/ν)。洗滌劑和所述緩沖液的其他成分可以用適合于蛋白質(zhì)的任何合適的緩沖液制成，并且包括，但不限于，水和磷酸緩沖鹽水。所述溶胞緩沖液可以在樣品與這里描述的裝置接觸前用于制備樣品。在一些實(shí)施方式中，沒有溶胞緩沖液。當(dāng)希望檢測到表面蛋白質(zhì)或表面抗原時(shí)，不在樣品上使用溶胞緩沖液。因此，在一些實(shí)施方式中，所述樣品沒有受到溶胞或?qū)⒃斐杉?xì)胞被溶解的條件。本發(fā)明還提供了用于檢測抗原的方法，包括將樣品與如這里描述的裝置接觸，其中所述樣品接觸結(jié)合物墊和測試膜，其中與所述測試膜的陽性反應(yīng)表明抗原的存在，其中所述結(jié)合物墊包括第一抗原-特異性捕獲試劑，并且所述測試膜包括第二抗原-特異性捕獲試劑。陽性反應(yīng)是通過所述測試膜中存在的捕獲試劑結(jié)合到測試樣品中的抗原顯示的。 所述測試膜中的捕獲試劑將施加于測試膜，以便它在結(jié)合到其特異性抗原時(shí)將顯示陽性反應(yīng)。所述特異性捕獲試劑可以以任何方式施加，以便當(dāng)它被檢測時(shí)，它可以形成線、圓、力口號、虛線、“X”或任何其它圖案。在一些實(shí)施方式中，表明所述裝置在正確工作的對照線將穿過抗原特異性線，并且當(dāng)所述抗原特異性捕獲試劑結(jié)合到抗原時(shí)，所述可檢測的標(biāo)簽將形成加號。在一些實(shí)施方式中，樣品接觸所述裝置，在所述樣品已經(jīng)接觸所述裝置后，隨后將緩沖液施加于所述裝置。例如，包括抗原的樣品可以與所述結(jié)合物墊接觸，以便將所述樣品轉(zhuǎn)移到結(jié)合物墊。在與所述結(jié)合物墊接觸后，單獨(dú)的溶液可以施加于所述裝置以促進(jìn)或開始通過這里描述的所述裝置的垂直流動(dòng)。在如這里描述的一些實(shí)施方式中，所述捕獲試劑為抗體。在一些實(shí)施方式中，被測試的所述樣品為溶液，但是也可以為溶液或緩沖液與可以施加于所述裝置的固體材料的混合物。隨后所述溶液將溶解抗原，并允許所述結(jié)合物墊的捕獲試劑與樣品中存在的抗原接觸。在一些實(shí)施方式中，所述樣品包括細(xì)胞溶解產(chǎn)物。在一些實(shí)施方式中，所述細(xì)胞溶解產(chǎn)物已經(jīng)通過離心或其他方式被澄清以去除不溶解的物質(zhì)。在一些實(shí)施方式中，所述方法包括使測試樣品與樣品收集器接觸以及使所述樣品收集器與所述裝置接觸。在一些實(shí)施方式中，所述方法包括使所述樣品收集器與溶液或緩沖液接觸，其中所述溶液或緩沖液施加于所述裝置。在一些實(shí)施方式中，在所述樣品與所述測試膜接觸前，使所述樣品與所述結(jié)合物墊接觸。在一些實(shí)施方式中，使所述樣品與所述結(jié)合物墊和所述測試膜同時(shí)接觸。在一些實(shí)施方式中，所述方法包括移動(dòng)這里描述的所述裝置的結(jié)合物墊，其中所述裝置的移動(dòng)暴露用于檢測的測試膜。在一些實(shí)施方式中，所述鎖定構(gòu)件移動(dòng)所述結(jié)合物墊。在一些實(shí)施方式中，所述結(jié)合物墊連接至所述鎖定構(gòu)件和/或所述滑動(dòng)按鈕構(gòu)件。所述方法可以被用于檢測的所述抗原可以為任何抗原。所述抗原可以為這里討論的那些或可以利用這里描述的方法和裝置監(jiān)測的任何其他抗原。在一些實(shí)施方式中，所述方法包括將所述樣品施加于所述裝置，并允許所述樣品經(jīng)由垂直流動(dòng)流過所述裝置。在一些實(shí)施方式中，抗原的存在或缺乏的檢測或指示在少于60秒內(nèi)發(fā)生。在一些實(shí)施方式中，抗原的存在或缺乏的檢測或指示在約30到約60秒內(nèi)發(fā)生。在一些實(shí)施方式中，抗原的存在或缺乏的檢測或指示在少于2分鐘內(nèi)發(fā)生。在一些實(shí)施方式中，抗原的存在或缺乏的檢測或指示在約30秒內(nèi)發(fā)生。參照附圖，在一些實(shí)施方式中，圖1到10描繪了代表性的裝置、裝置的部件、和裝置的多個(gè)視圖。圖1描繪了這樣的裝置，所述裝置包括第一殼體構(gòu)件(10)、緩沖液容器 (15)、第二殼體構(gòu)件(20)、用于滑動(dòng)按鈕的槽(25)、滑動(dòng)按鈕(30)、入口開口(35)、凸緣 (40)、和測試膜05)。圖1描繪了包括兩種捕獲試劑的測試膜05)。第一殼體構(gòu)件(10) 和第二殼體構(gòu)件00)也可以被分別稱為下殼體構(gòu)件和上殼體構(gòu)件。在圖1中，所述樣品將通過入口開口(3 來施加并可以允許通過測試膜0 垂直流動(dòng)。在圖1中，槽0 允許滑動(dòng)按鈕移動(dòng)，其在連接至所述鎖定構(gòu)件時(shí)移動(dòng)所述鎖定構(gòu)件，并且在一些實(shí)施方式中，可以移動(dòng)所述結(jié)合物墊并改變所述加力構(gòu)件的位置。圖2描繪了這樣的裝置，其包括第一殼體構(gòu)件(10)、第二殼體構(gòu)件(20)、用于滑動(dòng)按鈕的槽(25)、滑動(dòng)按鈕(30)、入口開口(35)、凸緣(40)、測試膜(45)、結(jié)合物墊(50)、多個(gè)吸收構(gòu)件(如墊)(55)、連接構(gòu)件(60)、鎖定構(gòu)件(65)、以及加力構(gòu)件(70)。圖2描繪了基本上相互平行排列的結(jié)合物墊(50)、測試膜05)和吸收墊(55)。所述加力構(gòu)件(70)在與所述吸收構(gòu)件接觸時(shí)將施加基本上垂直于所述結(jié)合物墊的壓力。如圖2中可以看到的， 通過入口開口(3 與所述裝置接觸的樣品將通過所述結(jié)合物墊(50)垂直流動(dòng)到所述測試膜0 。雖然沒有在圖2中明確示出，但是在一些實(shí)施方式中，所述可滲透膜也基本上平行于所述結(jié)合物墊(50)和所述測試膜(45)，其中所述可滲透膜的第一表面與所述結(jié)合物墊 (50)的表面接觸，所述可滲透膜的第二表面與所述測試膜0 的表面接觸。圖3描繪了結(jié)合物墊G5)、可滲透膜(75)、測試膜05)、和多個(gè)吸收構(gòu)件(55)。圖 3描繪了基本上相互平行的部件。圖3描繪了包括開口的可滲透膜(7 。這個(gè)開口可以用于允許所述測試膜的結(jié)果的顯現(xiàn)和檢測。圖4描繪了包括第一殼體構(gòu)件(10)、緩沖液容器(1 、第二殼體構(gòu)件00)、滑動(dòng)按鈕(30)、測試膜05)、結(jié)合物墊(50)、可滲透膜(75)、多個(gè)吸收構(gòu)件(如墊)(55)、連接構(gòu)件 (60)、鎖定構(gòu)件(65)、以及加力構(gòu)件(70)的裝置。圖4還描繪了包括軸(72)和頭(71)的加力構(gòu)件(70)，其中所述頭(71)寬于所述軸(72)。圖5描繪了包括第一殼體構(gòu)件(10)、鎖定構(gòu)件(65)、滑動(dòng)按鈕(30)、和加力構(gòu)件 (70)的裝置的局部視圖。圖5描繪了所述鎖定構(gòu)件(65)與所述加力構(gòu)件(70)接觸，使得所述加力構(gòu)件(70)在升高的方法中。圖5還描繪了所述鎖定構(gòu)件(6 和所述滑動(dòng)按鈕 (30)遠(yuǎn)離所述加力構(gòu)件(70)的移動(dòng)，允許所述加力構(gòu)件改變位置。在一些實(shí)施方式中，所述位置的改變是所述加力構(gòu)件被降低。圖6描繪了包括第一殼體構(gòu)件(10)、第二殼體構(gòu)件00)、滑動(dòng)按鈕(30)、鎖定構(gòu)件 (65)、凸緣(40)、0-環(huán)(41)、加力構(gòu)件(70)、以及用于所述加力構(gòu)件的支持物(73)的裝置的側(cè)切視圖。用于所述軸的支持物可以為，例如，所述第一殼體構(gòu)件(10)的部分，并且例如僅為了目的被不同地陰影化。圖6描繪了所述按鈕(30)與鎖定構(gòu)件(65)以這樣的方式接觸，使得所述按鈕(30)的移動(dòng)將移動(dòng)鎖定構(gòu)件(6 。鎖定構(gòu)件(6 的移動(dòng)將帶走來自加力構(gòu)件(70)的支持，其將允許加力構(gòu)件(70)改變位置。圖6還描繪了所述加力構(gòu)件的軸 (72)和頭(71)。頭(71)形成唇部，其中鎖定構(gòu)件(65)可以在此處下方滑動(dòng)并支持加力構(gòu)件(70)。圖7描繪了包括第一殼體構(gòu)件(10)、第二殼體構(gòu)件(20)、入口開口(35)、測試膜(45)、結(jié)合物墊(50)、多個(gè)吸收構(gòu)件(55)、連接構(gòu)件(60)、鎖定構(gòu)件(65)、以及加力構(gòu)件 (70)的裝置的局部視圖。圖8描繪了連接到結(jié)合物墊(50)和鎖定構(gòu)件(65)的連接構(gòu)件 (60)。圖8還描繪了被壓靠在第二殼體構(gòu)件00)和入口開口(35)的周邊的結(jié)合物墊。圖 7描繪了通過接觸多個(gè)吸收構(gòu)件(55)來施加壓力的加力構(gòu)件(71)的頭。在圖9中，樣品可以通過入口開口(35)而施加于所述裝置，以便所述樣品接觸所述結(jié)合物墊(50)，并且因?yàn)樗鰤毫?，所述樣品通過垂直流動(dòng)接觸所述測試膜G5)。圖8描繪了包括第一殼體構(gòu)件(10)、第二殼體構(gòu)件00)、入口開口(35)、測試膜 (45)、結(jié)合物墊(50)、多個(gè)吸收構(gòu)件(55)、連接構(gòu)件(60)、鎖定構(gòu)件(65)、以及加力構(gòu)件 (70)的裝置的局部視圖。圖8描繪了鎖定構(gòu)件(65)的移動(dòng)，其被連接到連接構(gòu)件(60)。被連接至結(jié)合物墊(50)的所述連接構(gòu)件(60)的移動(dòng)使所述結(jié)合物墊移動(dòng)。圖8描繪了測試加力構(gòu)件(70)改變位置以及測試膜G5)的壓力和/或壓縮的減小或消除。圖9還描繪了結(jié)合物墊(50)遠(yuǎn)離入口開口(35)的移動(dòng)，顯示測試膜(45)，用于可視化和/或檢測。圖9描繪了連接到結(jié)合物墊(50)的連接構(gòu)件(60)。圖9描繪了結(jié)合物墊(50)中作為用于連接構(gòu)件(60)連接的位置的凹口(缺口)(51)。所述連接構(gòu)件還可以通過其他方式如通過粘合劑、U形釘、和其他連接形式而連接。圖10描繪了包括第二殼體構(gòu)件00)、多個(gè)墊或膜(80)的裝置的局部視圖，其中所述多個(gè)墊包括測試膜、可滲透膜、以及一個(gè)或多個(gè)吸收構(gòu)件，以及可以保持所述多個(gè)墊或膜 (80)的鎖緊構(gòu)件(85)。圖10描繪了這樣的結(jié)構(gòu)，當(dāng)移動(dòng)所述結(jié)合物墊時(shí)，所述多個(gè)墊維持在適當(dāng)?shù)奈恢?。任何方式或其他結(jié)構(gòu)可以用于保持所述多個(gè)墊在適當(dāng)?shù)奈恢谩，F(xiàn)在將參照下面的實(shí)施例來描述本發(fā)明。這些實(shí)施例僅為了說明目的而提供，并且本發(fā)明決不應(yīng)當(dāng)被解釋為限于這些實(shí)施例，但是應(yīng)當(dāng)被解釋為包括由于這里提供的教導(dǎo)而變得顯而易見的任何和所有變化。本領(lǐng)域技術(shù)人員將容易地識別可以被改變或修改從而產(chǎn)生本質(zhì)上類似的結(jié)果的多個(gè)非臨界參數(shù)。實(shí)施例將對于共軛連接到膠態(tài)金的大腸桿菌0157:H7特異性的抗體烘焙并干燥到結(jié)合物墊上。將對于大腸桿菌0157:H7特異性的第二抗體和抗-抗體條紋化到測試膜上并裝配到抗原檢測裝置內(nèi)。將包含LPS大腸桿菌0157的樣品在PBS中系列稀釋到100 μ g/ml、50 μ g/ml、 25μ g/ml、12. 5μ g/ml、6. 25 μ g/ml>3. 125 μ g/mlU. 56 μ g/ml、禾口 0. 78 μ g/ml 的濃度。將所述樣品施加于所述裝置以檢測LPS大腸桿菌0157的存在。所述實(shí)驗(yàn)基于信號強(qiáng)度進(jìn)行分級，并且結(jié)果在下面示出。將PBS用作陰性對照。TL指的是測試線(抗原特異性的)，而 CL指的是對照線(非抗原特異性的)。所述檢測在所述樣品施加到所述結(jié)合物墊上的30 到60秒內(nèi)發(fā)生。所述裝置可以檢測食物攜帶的抗原的存在。
權(quán)利要求
1.一種用于檢測抗原的裝置，包括殼體，所述殼體包括第一殼體構(gòu)件和第二殼體構(gòu)件，其中所述殼體包括在所述第二殼體構(gòu)件中的入口開口；連接至所述第一殼體構(gòu)件的加力構(gòu)件；接觸所述第一殼體構(gòu)件并接觸所述加力構(gòu)件的可滑動(dòng)的鎖定構(gòu)件； 包括以下順序的抗原檢測膜系統(tǒng) 結(jié)合物墊； 可滲透膜； 測試膜；和吸收構(gòu)件；以及連接至所述鎖定構(gòu)件和所述結(jié)合物墊的柔性連接構(gòu)件；其中所述結(jié)合物墊、可滲透膜、測試膜、和吸收構(gòu)件中的每一個(gè)的至少一部分基本上彼此平行；其中所述結(jié)合物墊能夠被壓靠在所述第二殼體構(gòu)件中的所述入口開口的周邊；并且其中所述加力構(gòu)件接觸所述吸收構(gòu)件并且能夠施加基本上垂直于所述抗原檢測膜系統(tǒng)的壓力。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其中，所述結(jié)合物墊、可滲透膜、測試膜、和吸收構(gòu)件通過所述加力構(gòu)件在約51bf至約IOOlbf的力下被壓縮。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，還包括位于所述測試膜與所述吸收構(gòu)件之間的疏水膜。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其中，所述第一殼體構(gòu)件還包括突出所述第一殼體構(gòu)件的外表面的滑動(dòng)按鈕，其中所述滑動(dòng)按鈕被連接至所述鎖定構(gòu)件，其中所述滑動(dòng)按鈕的移動(dòng)移動(dòng)所述鎖定構(gòu)件。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其中，所述柔性連接構(gòu)件為彈簧、彈性體帶、或橡膠帶。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其中，所述結(jié)合物墊包括第一抗原-特異性抗體。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的裝置，其中，由所述第一抗原-特異性抗體識別的所述抗原是多核苷酸、肽、蛋白質(zhì)、糖類、或碳水化合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的裝置，其中，由所述第一抗原-特異性抗體識別的所述抗原為病原體蛋白質(zhì)或其抗原片段。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的裝置，其中，所述第一抗原-特異性抗體為多克隆抗體、單克隆抗體、嵌合抗體、Fc片段、或單鏈抗體。
10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的裝置，其中，由所述第一抗原-特異性抗體識別的所述抗原為食物-攜帶的病原體抗原。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的裝置，其中，所述食物-攜帶的病原體抗原為來自大腸桿菌、彎曲桿菌屬種、或沙門氏菌種的抗原。
12.根據(jù)權(quán)利要求6所述的裝置，其中，所述第一抗原-特異性抗體被結(jié)合至膠態(tài)金、熒光分子、放射性標(biāo)簽、或化學(xué)發(fā)光底物。
13.根據(jù)權(quán)利要求6所述的裝置，其中，所述測試膜包括第二抗原-特異性抗體，其中所述第二抗原-特異性抗體和所述第一抗原-特異性抗體結(jié)合至相同抗原上的非競爭性表位。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的裝置，其中，所述測試膜包括第一區(qū)域，包括抗-第一抗原-特異性抗體；以及第二區(qū)域，包括所述第二抗原-特異性抗體；其中所述第一區(qū)域和第二區(qū)域不完全重疊。
15.根據(jù)權(quán)利要求13所述的裝置，其中，所述結(jié)合物墊還包括第三抗原-特異性抗體， 其中所述第一抗原-特異性抗體和所述第三抗原-特異性抗體識別不同的抗原。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的裝置，其中，所述測試膜還包括第四抗原-特異性抗體，其中所述第四抗原-特異性抗體和所述第三抗原-特異性抗體結(jié)合至相同抗原上的非競爭性表位。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的裝置，其中，由所述第一抗原-特異性抗體和第三抗原-特異性抗體識別的所述抗原彼此獨(dú)立地選自大腸桿菌抗原、彎曲桿菌屬抗原、以及沙門氏菌抗原。
18.—種系統(tǒng)，包括權(quán)利要求1所述的裝置和緩沖液容器或樣品收集器。
19.一種試劑盒，包括權(quán)利要求1所述的裝置以及陽性對照、陰性對照、使用手冊、緩沖液容器、和樣品收集器中的一個(gè)或多個(gè)，或它們的任何組合。
20.一種檢測抗原的方法，包括使樣品與權(quán)利要求13所述的裝置的所述結(jié)合物墊接觸；通過接合所述加力構(gòu)件，將所述結(jié)合物墊壓靠在所述第二殼體構(gòu)件中的所述入口開口的周邊；以及鑒定對于所述抗原的陽性或陰性反應(yīng)；其中所述樣品從所述結(jié)合物墊垂直地流動(dòng)至所述測試膜。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中，在通過接合所述加力構(gòu)件，將所述結(jié)合物墊壓靠在所述第二殼體構(gòu)件中的所述入口開口的周邊之前，使所述樣品與所述結(jié)合物墊接觸。
22.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，還包括在使所述樣品的一部分接觸并流過所述結(jié)合物墊之后，移動(dòng)所述結(jié)合物墊，由此暴露所述入口開口內(nèi)的所述測試膜以用于檢測。
全文摘要
公開了用于抗原的檢測的裝置和方法。公開了用于檢測食物攜帶的病原體的裝置和方法。
文檔編號G01N33/558GK102576021SQ201080040333
公開日2012年7月11日 申請日期2010年7月30日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月31日
發(fā)明者尼古拉斯·A·西斯利亞諾, 馬丁·約瑟夫·布利亞內(nèi) 申請人:因威瑟堡善迪諾有限公司