專利名稱：用于連續(xù)檢測樣本中葡萄糖濃度的方法、試劑盒和使用生物傳感器的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種葡萄糖檢測方法，且特別是關于一種連續(xù)檢測待測樣本的葡萄糖 濃度的方法。
背景技術：
目前血糖檢測大多以酶反應為主，然而酶的使用在連續(xù)檢測上穩(wěn)定性不佳。有 鑒于此，利用葡萄糖接受蛋白或其它專一性受體(例如螯合物)檢測葡萄糖的方法也陸 續(xù)被開發(fā)出來，以解決酶活性不易維持的問題。其中，已有研究證實利用多糖-凝集素 (polysaccharide-lectin)系統對葡萄糖進行檢測的可行性。目前多糖-凝集素檢測系 統是用葡萄糖、多糖類、以及凝集素三者間的競爭(competition)與凝集(aggregation) 特性作為檢測手段，特別是結合熒光共振能量轉移(fluorescence resonance energy transfer, FRET)效應的檢測方式。然而，有研究指出隨著凝集程度與時間的增加，會造成 檢測時逆向(reversible)反應時的難度提升并增加花費時間，進而影響檢測準確度，因此 傳統的多糖_凝集素系統并不適用于長時間連續(xù)檢測上。

發(fā)明內容
本發(fā)明提供一種連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度的方法，包括(a)提供生物傳感 器，其中該生物傳感器包括轉換器與覆蓋于該轉換器的表面上的多糖(polysaccharide)； (b)提供特定濃度的糖類結合蛋白溶液，其中該糖類結合蛋白具有至少一受體，且該受體具 有與該多糖及葡萄糖結合的能力；(c)將待測樣本與該特定濃度的糖類結合蛋白溶液混合 成混合物；(d)將該混合物與生物傳感器接觸；(e)以該生物傳感器檢測與該多糖結合的糖 類結合蛋白的量，其中該待測樣本的葡萄糖濃度與該多糖結合的糖類結合蛋白的量成反比 關系；以及(f)以一高濃度葡萄糖溶液恢復該生物傳感器的表面。本發(fā)明也提供一種試劑盒，其用于前述的連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度的方 法，包括生物傳感器，其中該生物傳感器包括轉換器與覆蓋于該轉換器的表面上的多糖； 反應液，用以與該待測樣本反應，其包括該特定濃度的糖類結合蛋白溶液；以及清洗液，用 以恢復該生物傳感器的表面，其包括高濃度葡萄糖溶液。本發(fā)明還提供一種使用生物傳感器的方法，包括(a)提供生物傳感器，其中該生 物傳感器包括轉換器與覆蓋于該轉換器的表面上的多糖；(b)將包括特定濃度的糖類結合 蛋白溶液的反應液及待測樣本的混合物與該生物傳感器接觸，其中該糖類結合蛋白具有 與該多糖及葡萄糖結合的能力；(c)以該生物傳感器檢測與該多糖結合的糖類結合蛋白的 量，以獲得該待測樣本的葡萄糖濃度；以及(d)以清洗液恢復該生物傳感器的表面，其中該 清洗液包括高濃度葡萄糖溶液。為了讓本發(fā)明的上述和其它目的、特征、和優(yōu)點能更明顯易懂，下文特舉較佳實施 例，并配合所附圖示，作詳細說明如下


圖式簡單說明第1A-1C圖顯示本發(fā)明連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度的方法的示意圖。第2圖顯示本發(fā)明實施例中所使用的流體裝置的示意圖。第3圖顯示修飾有葡聚糖的石英晶體微天平進行伴刀豆球蛋白A-葡萄糖復合物 實時連續(xù)測量的頻率變化情形。第4圖顯示不同濃度葡萄糖與伴刀豆球蛋白A混合后造成石英晶體微天平頻率變 化的測量曲線。主要組件符號說明100 生物傳感器(transducer)101 轉換器103 多糖105 結合蛋白溶液107 糖類結合蛋白107a 全部受體為葡萄糖所占據的糖類結合蛋白107b 部分受體為葡萄糖所占據的糖類結合蛋白107c 未受葡萄糖占據的糖類結合蛋白109 待測樣本111 葡萄糖113 混合物115 高濃度葡萄糖溶液200 流體裝置201 注入樣本203 移動相205 流體反應槽205-1 生物傳感器207 振蕩電路209 計頻器211 電源供應器213 計算機215 泵217 廢液
具體實施例方式本發(fā)明為利用糖類結合蛋白可與葡萄糖或多糖相互結合的特性與其對葡萄糖與 多糖的親和力(affinity)差異，并結合生物感測技術來檢測樣本中的葡萄糖濃度。此方 式可以解決以往利用競爭特性作為連續(xù)檢測手段時，隨著糖類結合蛋白與多糖聚集時間增 長，而造成于葡萄糖檢測時無法輕易逆向的問題。
在本發(fā)明一實施方式中，提供連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度的方法。第1A-1C 圖顯示本發(fā)明連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度的方法的示意圖。參見第IA圖，首先提供 生物傳感器100，而生物傳感器100可包括轉換器101與覆蓋于轉換器101的表面上的 多糖103。轉換器101可包括重量、光學、電學、電化學或聲學傳感器等。在一實施例中， 轉換器101可包括石英晶體微天平(quartzcrystal microbalance, QCM)、表面等離子共 振轉換器(surfaceplasmon resonance transducer, SPR transducer)或表面聲波組件 (surface acoustic wave element, SAW element)。多糖 103 可包括葡聚糖(dextran)或 糊精(dextrin)。參見第IB圖。接著，提供具有特定濃度的糖類結合蛋白溶液105，其中糖類結合蛋 白107具有至少一受體，且受體具有與多糖及葡萄糖結合的能力。根據檢測情況，可視需要 來調整糖類結合蛋白溶液的特定濃度。在一實施例中，糖類結合蛋白溶液的特定濃度為約 0.12-0.24%。又糖類結合蛋白107的受體對于葡萄糖的親和力大于對多糖的親和力。糖 類結合蛋白107可包括凝集素，例如伴刀豆球蛋白Akoncanavaline A, Con A)、麥芽凝集 素、花生凝集素或大豆凝集素等。此外，混合一待測樣本109與上述具有特定濃度的糖類結合蛋白溶液105以形成 一混合物113。在混合過程中，待測樣本中的葡萄糖111會與糖類結合蛋白107的受體結 合，而使該混合物113具有全部受體為葡萄糖所占據的糖類結合蛋白107a、部分受體為葡 萄糖所占據的糖類結合蛋白107b與未受葡萄糖占據的糖類結合蛋白107c。然后，將上述混合物113與生物傳感器100進行接觸，而于混合物中113中的部分 受體為葡萄糖所占據的糖類結合蛋白107b及未受葡萄糖占據的糖類結合蛋白107c會與生 物傳感器100的多糖103結合。在一優(yōu)選實施例中，可進一步利用一流體裝置，而使上述接 觸步驟為在流體通道中進行。又部分受體為葡萄糖所占據的糖類結合蛋白107b與未受葡 萄糖占據的糖類結合蛋白107c與多糖103結合時會產生物理或化學變化。在一實施例中， 物理或化學變化包括重量變化。又糖類結合蛋白107可進一步包含偶聯物(conjugate)，用 以作為物理或化學變化的來源或用以增強該物理或化學變化。偶聯物可包括熒光染劑、酶、 電活性物質或納米粒子等具可檢測性的物質。之后，生物傳感器100會檢測與生物傳感器100的多糖103結合的糖類結合蛋白 的量，且藉此獲得待測樣本的葡萄糖濃度。其中待測樣本的葡萄糖濃度與生物傳感器100 的多糖103結合的糖類結合蛋白的量成反比關系。在一實施例中，生物傳感器100藉由轉 換器101來測定上述的物理或化學變化以檢測與多糖結合的糖類結合蛋白的量。參見第IC圖。最后，以高濃度葡萄糖溶液115清洗生物傳感器100的表面。由于 糖類結合蛋白107的受體對于葡萄糖的親和力大于對多糖的親和力且所加入的葡萄糖溶 液為高濃度，所以葡萄糖會取代已與糖類結合蛋白受體結合的多糖，而與糖類結合蛋白結 合。因此高濃度葡萄糖溶液恢復生物傳感器100的表面，使生物傳感器可重復使用，而可重 復進行上述的步驟，以達成連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度。高濃度葡萄糖溶液115的濃 度可大于約200mg/dl，在一實施例中，則可為約400-2000mg/dl。此外，本發(fā)明也提供試劑盒，其可用于上述的本發(fā)明連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖 濃度的方法。試劑盒可包括上述的生物傳感器100、反應液以及清洗液。生物傳感器100可 包括轉換器101與覆蓋于轉換器101的表面上的多糖103。轉換器101可包括重量、光學、
6電學、電化學或聲學傳感器等。在一實施例中，轉換器101可包括石英晶體微天平、表面等 離子共振轉換器或表面聲波組件。多糖103可包括葡聚糖或糊精。反應液用以與待測樣本反應，其可包括上述具有特定濃度的糖類結合蛋白溶液 105。其中糖類結合蛋白107至少具有一受體，且受體具有與多糖及葡萄糖結合的能力。根 據檢測情況，可視需要來調整糖類結合蛋白溶液的特定濃度。在一實施例中，糖類結合蛋白 溶液的特定濃度為約0. 12-0. 24%。又糖類結合蛋白107的受體對于葡萄糖的親和力大于 對多糖的親和力。糖類結合蛋白107可包括凝集素，例如伴刀豆球蛋白A(Con Α)、麥芽凝集 素、花生凝集素或大豆凝集素等。清洗液用以恢復生物傳感器100的表面，其包括上述高濃度葡萄糖溶液115。由于 糖類結合蛋白107的受體對于葡萄糖的親和力大于對多糖的親和力且所加入的葡萄糖溶 液為高濃度，所以葡萄糖會取代已與糖類結合蛋白受體結合的多糖，而與糖類結合蛋白結 合。因此高濃度葡萄糖溶液恢復生物傳感器100的表面，使生物傳感器可重復使用，而可重 復進行上述的步驟，以達成連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度。高濃度葡萄糖溶液115的濃 度可大于約200mg/dl，在一實施例中，則可為約400-2000mg/dl。更進一步而言，藉由使用本發(fā)明試劑盒結合本發(fā)明連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃 度的方法，可以獲得連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度的系統。另外，本發(fā)明也可為使用生物傳感器的方法。同樣參見第1A-1C圖。于第IA圖中， 首先提供生物傳感器100，而生物傳感器100可包括轉換器101與覆蓋于轉換器101的表面 上的多糖103。轉換器101可包括重量、光學、電學、電化學或聲學傳感器等。在一實施例 中，轉換器101可包括石英晶體微天平、表面等離子共振轉換器或表面聲波組件。多糖103 可包括葡聚糖或糊精。接著，在第IB圖中，將包括特定濃度的糖類結合蛋白溶液105的反應液及待測樣 本109的混合物113與生物傳感器100接觸。糖類結合蛋白107具有與多糖及葡萄糖結合 的能力。根據檢測情況，可視需要來調整糖類結合蛋白溶液的特定濃度。在一實施例中，糖 類結合蛋白溶液的特定濃度為約0. 12-0. 24%。在混合物113中，待測樣本中的葡萄糖會與 糖類結合蛋白結合。糖類結合蛋白107的受體對于葡萄糖的親和力大于對多糖的親和力。 糖類結合蛋白107可包括凝集素，例如伴刀豆球蛋白A(Con Α)、麥芽凝集素、花生凝集素或 大豆凝集素等。在混合物113與生物傳感器100接觸后，部分受體為葡萄糖所占據的糖類結合蛋 白107b及未受葡萄糖占據的糖類結合蛋白107c會與生物傳感器100的多糖103結合。部 分受體為葡萄糖所占據的糖類結合蛋白107b與未受葡萄糖占據的糖類結合蛋白107c與多 糖103結合時會產生物理或化學變化。在一實施例中，物理或化學變化包括重量變化，而上 述糖類結合蛋白可進一步包含偶聯物，用以作為物理或化學變化的來源或用以增強該物理 或化學變化。偶聯物可包括熒光染劑、酶、電活性物質或納米粒子等具可檢測性的物質。然后，生物傳感器100會檢測與生物傳感器100的多糖103結合的糖類結合蛋白 的量，以獲得待測樣本109的葡萄糖濃度。在一實施例中，生物傳感器100藉由轉換器101 來測定上述的物理或化學變化以檢測與多糖結合的糖類結合蛋白的量。最后參見第IC圖。將生物傳感器100的表面以清洗液恢復，其中清洗液包括高濃 度葡萄糖溶液115。由于糖類結合蛋白107的受體對于葡萄糖的親和力大于對多糖的親和力，又所加入清洗液含有的葡萄糖溶液為高濃度，所以葡萄糖會取代與糖類結合蛋白的受 體結合的多糖，而與糖類結合蛋白結合。因此清洗液可恢復生物傳感器100的表面，使生物 傳感器可重復使用，而可重復進行上述的步驟，而達成連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度。高 濃度葡萄糖溶液115的濃度可大于約200mg/dl，在一實施例中，則可為約400_2000mg/dl。實施例本實施例中利用以葡聚糖修飾(覆蓋)的石英晶體微天平做為生物傳感器，并配 以流體裝置200 (如第2圖所示)，將具有0. 12-0. 24 %伴刀豆球蛋白A及不同濃度葡萄糖溶 液的混合物，藉由本發(fā)明的檢測方法，達成動態(tài)測量葡萄糖的目的。流體裝置200包括注入 樣本 201、移動相 203、流體反應槽(flow cell) 205、振蕩電路(oscillating circuit) 207、 計頻器(frequency counter) 209、電源供應器211、計算機213、泵215與廢液217。移動 相203主要提供流體通道與流體反應槽205 —液相環(huán)境，并負責將注入樣本201攜帶至置 于流體反應槽205中的生物傳感器205-1的表面以進行反應，其中注入樣本201與移動相 203間的切換可由一流體切換開關控制，以避免氣泡于流體通道中形成。而流體通道內液體 的流動則由泵215帶動的。在訊號量取部分，主要將生物傳感器205-1電性連接至振蕩電 路207，此時將可使石英晶體微天平穩(wěn)定振蕩于特定基頻(本實施例采用的傳感器所提供 的基頻為IOMHz)，并可由計頻器209紀錄其頻率值；根據石英晶體微天平的質量加載效應 (mass-loading effect)，糖類結合蛋白與多糖結合時所產生的微小物理或化學變化，將可 反應于振蕩頻率的變化量上，并由計頻器209實時紀錄其變化量。最后，再將訊號傳輸到計 算機213顯示輸出，實時并連續(xù)監(jiān)控頻率變化情形。多糖修飾(覆蓋)轉換器的方法以葡聚糖修飾石英晶體微天平表面的方法如下(1)首先，將帶有酸基的硫醇類有機化合物(0. 5mM, 16-Mercaptohexadecanoic acid)與石英晶體微天平上的金電極反應，使石英晶體微天平表面帶酸基；(2)以50mM EDC/200mM NHS活化酸基后，再與帶醇基的一級胺類有機化合物 (2%, 2- (2-aminoethoxy) ethanol)反應，使石英晶體微天平表面帶醇基；(3)再用環(huán)氧氯丙烷(0.6M，epicholorohydrin)與醇基反應，使石英晶體微天平 表面帶環(huán)氧基；(4)最后將5%分子量400KD-40MD的葡聚糖與環(huán)氧基反應，便可以用共價鍵結的 方式將葡聚糖修飾石英晶體微天平表面。連續(xù)檢測方法首先，將0. 24%伴刀豆球蛋白A與等體積待測物葡萄糖混合，并注入流體通道內， 并透過移動相將樣本帶至位于流體反應槽205內修飾有葡聚糖的石英晶體微天平，此時， 沒有被葡萄糖占據到的伴刀豆球蛋白A上的受體，將與石英晶體微天平上的葡聚糖結合， 因伴刀豆球蛋白A與葡聚糖結合后重量增加，會改變石英晶體微天平的振蕩頻率，最后以 計頻器測量頻率的變化，即可對應出葡萄糖的濃度，因此葡萄糖濃度越低，所測得的訊號越 大。且于反應流程結束后，再將高濃度葡萄糖(1200mg/dl)注入流體通道，可使伴刀豆球蛋 白A-葡聚糖復合物的伴刀豆球蛋白A脫附，即可重復進行伴刀豆球蛋白A-葡萄糖復合物 的測量(參見第IA-C圖)。伴刀豆球蛋白A-葡萄糖復合物測量
第3圖顯示修飾有葡聚糖的石英晶體微天平進行伴刀豆球蛋白A-葡萄糖復合物 測量的原始數據。其中，加入伴刀豆球蛋白A或伴刀豆球蛋白A-葡萄糖復合物后，因伴刀豆 球蛋白A與葡聚糖(分子量5-40MD)結合后重量增加，會使石英晶體微天平振蕩頻率下降； 再加入高濃度葡萄糖(1200mg/dl)后，因葡萄糖-伴刀豆球蛋白A的親和力比伴刀豆球蛋 白A-葡聚糖強，葡聚糖會被取代下來，使重量減少，會使石英晶體微天平振蕩頻率上升。第 3圖中前兩個波峰(peak)為0. 12%純伴刀豆球蛋白A的反應，之后六個波峰依序為等體積 葡萄糖濃度200、400、600、800、1000及1200mg/dl與0. 24%伴刀豆球蛋白A混合溶液(最 后濃度葡萄糖依序為100、200、300、400、500及600mg/dl，伴刀豆球蛋白A固定為0. 12%). 第3圖中，波峰頻率下降區(qū)段為伴刀豆球蛋白A與石英晶體微天平上葡聚糖結合后所產生 重量增加的變化；波峰上升區(qū)段為，注入高濃度葡萄糖后石英晶體微天平上伴刀豆球蛋白 A-葡聚糖復合物中的伴刀豆球蛋白A脫附所產生重量下降的變化。檢量特性將不同濃度葡萄糖與伴刀豆球蛋白A混合后造成石英晶體微天平頻率變化的檢 量曲線如第4圖所示。隨待測樣本中葡萄糖濃度的升高，其訊號變化量逐漸下降。雖然本發(fā)明已以優(yōu)選實施例公開如上，然其并非用以限定本發(fā)明，任何熟習此技 藝者，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內，當可作一些的變動與潤飾，因此本發(fā)明的保護范圍 當視后附的申請專利權利要求書的范圍所界定者為準。
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權利要求
一種連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度的方法，包括(a)提供生物傳感器，其中該生物傳感器包括轉換器與覆蓋于該轉換器的表面上的多糖；(b)提供特定濃度的糖類結合蛋白溶液，其中該糖類結合蛋白至少具有一受體，且該受體具有與該多糖及葡萄糖結合的能力；(c)將待測樣本與該特定濃度的糖類結合蛋白溶液混合成混合物；(d)將該混合物與該生物傳感器接觸；(e)以該生物傳感器檢測與該多糖結合的糖類結合蛋白的量，其中該待測樣本的葡萄糖濃度與多糖結合的糖類結合蛋白的量成反比關系；以及(f)以高濃度葡萄糖溶液恢復該生物傳感器的表面。
2.權利要求1中所述的連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度的方法，還包括在步驟(f)后 的步驟(g)重復步驟(b)至⑴。
3.權利要求1中所述的連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度的方法，其中于步驟(c)中，在 該混合物中的部分受體為葡萄糖所占據的糖類結合蛋白及未受葡萄糖占據的糖類結合蛋 白與多糖結合時產生物理或化學變化。
4.權利要求3中所述的連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度的方法，該物理或化學變化是 通過該轉換器測定以檢測與多糖結合的糖類結合蛋白的量。
5.權利要求3中所述的連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度的方法，其中該物理或化學變 化為重量變化。
6.權利要求3中所述的連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度的方法，其中該糖類結合蛋白 包含偶聯物用以作為該物理或化學變化的來源或用以增強該物理或化學變化。
7.權利要求1中所述的連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度的方法，其中該轉換器包括重 量、光學、電學、電化學或聲學傳感器。
8.權利要求1中所述的連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度的方法，其中該轉換器包括石 英晶體微天平、表面等離子共振轉換器或表面聲波組件。
9.權利要求1中所述的連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度的方法，其中該多糖包括葡聚 糖或糊精。
10.權利要求1中所述的連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度的方法，其中該糖類結合蛋 白包括凝集素。
11.權利要求1中所述的連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度的方法，其中該糖類結合蛋 白包括伴刀豆球蛋白A、麥芽凝集素、花生凝集素或大豆凝集素。
12.權利要求1中所述的連續(xù)檢測待測樣本中葡萄糖濃度的方法，其中該高濃度葡萄 糖溶液的濃度為約400-2000mg/dl。
13.—種檢測待測樣本中葡萄糖濃度的試劑盒，包括生物傳感器，其中該生物傳感器包括轉換器與覆蓋于該轉換器的表面上的多糖；反應液，用以與該待測樣本反應，其包括該特定濃度的糖類結合蛋白溶液；以及清洗液，用以恢復該生物傳感器的表面，其包括該高濃度葡萄糖溶液。
14.權利要求13中所述的試劑盒，其中該轉換器包括重量、光學、電學、電化學或聲學 傳感器。
15.權利要求13中所述的試劑盒，其中該轉換器包括石英晶體微天平、表面等離子共 振轉換器或表面聲波組件。
16.權利要求13中所述的試劑盒，其中該多糖包括葡聚糖或糊精。
17.權利要求13中所述的試劑盒，其中該糖類結合蛋白包括凝集素。
18.權利要求13中所述的試劑盒，其中該糖類結合蛋白包括伴刀豆球蛋白A、麥芽凝集 素、花生凝集素或大豆凝集素。
19.權利要求13中所述的試劑盒，其中該高濃度葡萄糖溶液的濃度為約400-2000mg/dl。
20.一種使用生物傳感器的方法，包括(a)提供生物傳感器，其中該生物傳感器包括轉換器與覆蓋于該轉換器的表面上的多糖；(b)將包括特定濃度的糖類結合蛋白溶液的反應液及待測樣本的混合物與該生物傳感 器接觸，其中糖類結合蛋白具有與多糖及葡萄糖結合的能力；(c)以生物傳感器檢測與多糖結合的糖類結合蛋白的量，以獲得該待測樣本的葡萄糖 濃度；以及(d)以清洗液恢復該生物傳感器的表面，其中清洗液包括高濃度葡萄糖溶液。
21.權利要求20中所述的使用生物傳感器的方法，還包括在步驟(d)之后的步驟(e) 重復步驟(a)至(d)。
22.權利要求20中所述的使用生物傳感器的方法，其中于步驟(b)中，在該混合物中的 部分受體為葡萄糖所占據的糖類結合蛋白及未受葡萄糖占據的糖類結合蛋白與多糖結合 時產生物理或化學變化。
23.權利要求22中所述的使用生物傳感器的方法，該物理或化學變化是通過由該轉換 器測定以檢測與多糖結合的糖類結合蛋白的量。
24.權利要求22中所述的使用生物傳感器的方法，其中該糖類結合蛋白包含偶聯物用 以作為物理或化學變化的來源或用以增強物理或化學變化。
25.權利要求20中所述的使用生物傳感器的方法，其中該轉換器包括重量、光學、電 學、電化學或聲學傳感器。
26.權利要求20中所述的使用生物傳感器的方法，其中該轉換器包括石英晶體微天 平、表面等離子共振轉換器或表面聲波組件。
27.權利要求20中所述的使用生物傳感器的方法，其中該多糖包括葡聚糖或糊精。
28.權利要求20中所述的使用生物傳感器的方法，其中該糖類結合蛋白包括凝集素。
29.權利要求20中所述的使用生物傳感器的方法，其中該糖類結合蛋白包括伴刀豆球 蛋白A、麥芽凝集素、花生凝集素或大豆凝集素。
30.權利要求20中所述的使用生物傳感器的方法，其中該高濃度葡萄糖溶液的濃度為 約 400-2000mg/dl。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于連續(xù)檢測樣本中葡萄糖濃度的方法、試劑盒和使用生物傳感器的方法。本發(fā)明連續(xù)檢測樣本中葡萄糖濃度的方法，包括(a)提供生物傳感器，其中該生物傳感器包括轉換器與覆蓋于該轉換器的表面上的多糖；(b)提供特定濃度的糖類結合蛋白溶液，其中該糖類結合蛋白至少具有一受體，且該受體具有與多糖及葡萄糖結合的能力；(c)將待測樣本與該特定濃度的糖類結合蛋白溶液混合成一混合物；(d)將該混合物與生物傳感器接觸；(e)以該生物傳感器檢測與多糖結合的糖類結合蛋白的量，其中該待測樣本的葡萄糖濃度與多糖結合的糖類結合蛋白的量成反比關系；以及(f)以高濃度葡萄糖溶液恢復該生物傳感器的表面。
文檔編號G01N33/50GK101936980SQ20091015126
公開日2011年1月5日 申請日期2009年7月1日 優(yōu)先權日2009年7月1日
發(fā)明者張鴻文, 李昆峰, 林玉娟, 陳建安 申請人:財團法人工業(yè)技術研究院