專利名稱：：巴菲蛤濃縮液酸解產(chǎn)物的梅拉德反應(yīng)化學(xué)成分的測定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于化學(xué)分析領(lǐng)域，特別是一種巴菲蛤濃縮液酸解產(chǎn)物的梅拉德反應(yīng)化學(xué)成分的測定方法。
背景技術(shù)：
：梅拉德反應(yīng)是氨基化合物與還原糖之間發(fā)生的復(fù)雜反應(yīng)，是食品香味產(chǎn)生的主要來源之一。法國化學(xué)家梅德拉曾發(fā)現(xiàn)甘氨酸與葡萄糖的混合物加熱時，形成褐色變化反應(yīng)的類黑精。以后人們發(fā)現(xiàn)這類反應(yīng)不僅影響其顏色，而且對香味也有重要作用。所以將此反應(yīng)稱為梅拉德反應(yīng)，也叫非酶褐變反應(yīng)。梅拉德反應(yīng)產(chǎn)生大量致香成分，已被用于制備各類香精香料、增香劑。當(dāng)使用氨基酸的種類、配比和反應(yīng)條件不同時，會產(chǎn)生不同風(fēng)格香型的香精基，由于梅拉德反應(yīng)無論從反應(yīng)as是產(chǎn)物，均可視作天然，這些香精基被國際權(quán)威機(jī)構(gòu)認(rèn)定為"天然的"，因而其應(yīng)用已廣受各國關(guān)注。在有機(jī)化學(xué)、食品化學(xué)、香料化學(xué)、食品工業(yè)、煙草工業(yè)等領(lǐng)域的研究方興未艾。巴菲蛤?qū)儆?巴菲屬"，它的外殼有形似水波的紋路，稱為"波紋巴菲蛤"，因它的紋路像花一樣美麗，也稱它為"花蚶"等。它是一種屬亞熱帶暖水性品種，潮下帶淺海生活的雙殼類，分布于水深8.0以內(nèi)的淺水區(qū)，營埋棲生活在泥沙底質(zhì)或軟泥底質(zhì)中有時稱"泥蚶"。巴菲蛤體態(tài)呈長卵圓形、殼面呈淡棕褐色水波狀紋路的貝類，我國主要在福建、廣東、廣西等地的海域里生長，是一種經(jīng)濟(jì)價值較高的雙殼類軟體動物，也是深受國內(nèi)外客戶所喜愛的海鮮品。蛤肉內(nèi)富含豐富的人體需要的維生素和氨基酸，其中特有的營養(yǎng)成分包括血紅蛋白和維生素B12等，對人體有補(bǔ)血、溫中、健胃的功效。早在三國時期《臨海異物志》中曾載有"益血色"之功效，清朝《食療本草》載蚶"潤五臟，治消渴，開關(guān)節(jié)"?！端穆暠静荨?溫中消食，起陽"?！夺t(yī)林纂要》也說"補(bǔ)心血，散瘀血，除煩醒酒，破結(jié)消痰"。人們在加工巴菲蛤時取肉將其蒸煮熟后產(chǎn)生汁液，汁液中含有豐富的營養(yǎng)成分，但多數(shù)情況都作為廢物棄掉。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種巴菲蛤濃縮液酸解產(chǎn)物的梅拉德反應(yīng)化學(xué)成分的測定方法，是以廢棄的巴菲蛤濃縮液為原料從中提取有價值的物質(zhì)，為巴菲蛤濃縮液的綜合利用提供一種可行的的方法，對環(huán)境的保護(hù)和廢棄物的利用有現(xiàn)實(shí)的意義。本發(fā)明包括鮮活巴菲蛤?qū)⑼鈿に?，用自來水沖洗，去殼取其貝肉或全臟器，即整個軟體部，用去離子水沖洗后，于篩絹網(wǎng)上瀝盡水分，制得濕樣，沸水回流蒸煮l.52.5小時，得蒸煮液，將濃縮汁于50'C恒溫烘干至固體狀，磨碎，準(zhǔn)確稱取干燥粉末3545g置于250ml三口燒瓶中，加入80150ml的HC1(6mol/L)，105115'C回流加熱水解1215h;水解完后減壓蒸發(fā)趕酸，蒸發(fā)至干后，加入原來體積的水再蒸發(fā)，如此反復(fù)幾次直至趕酸完畢，加入適量活性炭粉末置于8590'C水浴中脫色，當(dāng)溶液顏色澄清時，趁熱過濾，濾液減壓濃縮后烘干得固狀物，然后稱取水解所得固狀物l.52.5g，稱取6.08.Og葡萄糖或蔗糖，加6080ml水溶解，并用氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液的pH至7左右，將上述溶液倒入250ml三口燒瓶中，在裝有回流冷凝管的水浴中加熱，在95100'C溫度攪拌當(dāng)回流，反應(yīng)半小時后溶液由淺黃色變深黃色，隨著時間的轉(zhuǎn)移，顏色由黃到淺棕色再到棕色，在反應(yīng)3.55.0h后，顏色變?yōu)樯钭丶t色，停止加熱，并使反應(yīng)液冷卻，該反應(yīng)液初聞有香甜味再聞則略帶有焦味，取50ml反應(yīng)液加入NaCl使其飽和，然后分別以40、30、20、lOmL的乙醚進(jìn)行4次萃取，每次l0—15^>鐘，將各次萃取液合并濃縮至l.52.OmL。'本發(fā)明提取工藝簡單實(shí)用。巴菲蛤濃縮液酸解產(chǎn)物與還原糖進(jìn)行梅拉德反應(yīng)對其醚溶性成分氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)分析測定方法快捷迅速，4-羰基正戊酸是其中的主要產(chǎn)物。4-羰基正戊酸是應(yīng)用范圍很廣附加值較高的有機(jī)物，對其進(jìn)行回收和市場開發(fā)前景好。具體實(shí)施例方式巴菲蛤濃縮汁液的酸解產(chǎn)物與葡萄糖的梅拉德反應(yīng)中醚性物質(zhì)的氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)測定方法，圖譜檢測出9個峰。巴菲蛤濃縮汁液的酸解產(chǎn)物與蔗糖的梅拉德反應(yīng)中醚性物質(zhì)的氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)測定方法，圖譜檢測出6個峰。采用色譜峰面積歸一化法確定巴菲蛤濃縮汁液的酸解產(chǎn)物中脂溶性物質(zhì)的各組成及含量結(jié)果見表l和表2。巴菲蛤濃縮汁液的酸解產(chǎn)物與葡萄糖的梅拉德反應(yīng)中的醚溶性能被確定成分有八種烷類2種2-乙氧基丙烷和3，5-二異丁基-4-羥基甲苯；酯類兩種乙酰丙酸乙酯和乙酸戊酯；羧酸類2種4-羰基正戊酸和丁二酸；另外還含有呋喃醛、吡喃酮各一個5-羥甲基2-呋喃醛和2,6-二甲基-4-H-吡喃-4-酮；巴菲蛤濃縮汁液的酸解產(chǎn)物與蔗糖'的梅拉德反應(yīng)中的醚溶性能被確定成分有5種:酯類兩種2-羥基丙酸乙酯和鄰苯二酸異丙酯；羧酸類1種4-羰基正戊酸；另外還含有酰胺N-酰氧基-N-乙?；阴０贰１韑巴菲蛤濃縮汁液的酸解產(chǎn)物與葡萄糖的梅拉德反應(yīng)中的醚溶性成分<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>表2<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>實(shí)施例l巴菲蛤濃縮汁液酸解方法鮮活巴菲蛤?qū)⑼鈿に?，用自來水沖洗，去殼取其貝肉或全臟器，即整個軟體部，用去離子水沖洗后，于篩絹網(wǎng)上瀝盡水分，制得濕樣。沸水回流蒸煮1.52.5小時，得蒸煮液。將濃縮汁于50'C恒溫烘干至固體狀，磨碎，準(zhǔn)確稱取干燥粉末3545g置于250ml三口燒瓶中，加入80150ml的HCl(6mol/L),105115'C回流加熱水解1215h;水解完后減壓蒸發(fā)趕酸，蒸發(fā)至干后，加入原來體積的水再蒸發(fā)，如此反復(fù)幾次直至趕酸完畢。加入適量活性炭粉末置于859(TC水浴中脫色，當(dāng)溶液顏色澄清時，趁熱過濾，濾液減壓濃縮后烘干得固狀物。實(shí)施例2巴菲蛤濃縮汁液的酸解產(chǎn)物與還原糖的梅拉德反應(yīng)稱取水解所得固狀物1.52.5g，稱取6.08.0g葡萄糖或蔗糖，加6080ml水溶解，并用氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液的pH至7左右，將上述溶液倒入250ml三口燒瓶中，在裝有回流冷凝管的水浴中加熱，在95100'C溫度攪拌當(dāng)回流。反應(yīng)半小時后溶液由淺黃色變深黃色，隨著時間的轉(zhuǎn)移，顏色由黃到淺棕色再到棕色，在反應(yīng)3.55.0h后，顏色變?yōu)樯钭丶t色，停止加熱，并使反應(yīng)液冷卻，該反應(yīng)液初聞有香甜味再聞則略帶有焦味，取50ml反應(yīng)液加入NaCl使其飽和，然后分別以40、30、20、10mL的乙醚進(jìn)行4次萃取，每次十到十五分鐘，將各次萃取液合并濃縮至1.52.0mL。實(shí)施例3氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)測試條件GC條件2010型氣相色譜儀，毛細(xì)管柱，載氣為氦氣，柱溫60'C，進(jìn)樣溫度250'C，柱壓7L5kPa，載氣流量3ral/min。MS條件EI離子源，電子能量70eV，電離溫度20(TC，界面溫度230'C，掃描時間2-40min，掃描質(zhì)量范圍20-500amu。權(quán)利要求1、一種巴菲蛤濃縮液酸解產(chǎn)物的梅拉德反應(yīng)化學(xué)成分的測定方法，其特征是包括鮮活巴菲蛤?qū)⑼鈿に?，用自來水沖洗，去殼取其貝肉或全臟器，即整個軟體部，用去離子水沖洗后，于篩絹網(wǎng)上瀝盡水分，制得濕樣，沸水回流蒸煮1.5～2.5小時，得蒸煮液，將濃縮汁于50℃恒溫烘干至固體狀，磨碎，準(zhǔn)確稱取干燥粉末35～45g置于250ml三口燒瓶中，加入80～150ml的HCl(6mol/L)，105～115℃回流加熱水解12～15h；水解完后減壓蒸發(fā)趕酸，蒸發(fā)至干后，加入原來體積的水再蒸發(fā)，如此反復(fù)幾次直至趕酸完畢，加入適量活性炭粉末置于85～90℃水浴中脫色，當(dāng)溶液顏色澄清時，趁熱過濾，濾液減壓濃縮后烘干得固狀物，然后稱取水解所得固狀物1.5～2.5g，稱取6.0～8.0g葡萄糖或蔗糖，加60～80ml水溶解，并用氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液的pH至7左右，將上述溶液倒入250ml三口燒瓶中，在裝有回流冷凝管的水浴中加熱，在95～100℃溫度攪拌當(dāng)回流，反應(yīng)半小時后溶液由淺黃色變深黃色，隨著時間的轉(zhuǎn)移，顏色由黃到淺棕色再到棕色，在反應(yīng)3.5～5.0h后，顏色變?yōu)樯钭丶t色，停止加熱，并使反應(yīng)液冷卻，該反應(yīng)液初聞有香甜味再聞則略帶有焦味，取50ml反應(yīng)液加入NaCl使其飽和，然后分別以40、30、20、10mL的乙醚進(jìn)行4次萃取，每次10-15分鐘，將各次萃取液合并濃縮至1.5～2.0mL，采用氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)測定方法，圖譜采用色譜峰面積歸一化法確定巴菲蛤濃縮汁液的酸解產(chǎn)物中脂溶性物質(zhì)的各組成及含量，巴菲蛤濃縮汁液的酸解產(chǎn)物與葡萄糖的梅拉德反應(yīng)中的醚溶性能被確定成分有八種烷類2種2-乙氧基丙烷和3，5-二異丁基-4-羥基甲苯；酯類兩種乙酰丙酸乙酯和乙酸戊酯；羧酸類2種4-羰基正戊酸和丁二酸；另外還含有呋喃醛、吡喃酮各一個5-羥甲基2-呋喃醛和2，6-二甲基-4-H-吡喃-4-酮；巴菲蛤濃縮汁液的酸解產(chǎn)物與蔗糖的梅拉德反應(yīng)中的醚溶性能被確定成分有5種酯類兩種2-羥基丙酸乙酯和鄰苯二酸異丙酯；羧酸類1種4-羰基正戊酸；另外還含有酰胺N-酰氧基-N-乙?；阴０贰Ｈ恼环N巴菲蛤濃縮液酸解產(chǎn)物的梅拉德反應(yīng)化學(xué)成分的測定方法，以巴菲蛤濃縮液為原料，用稀鹽酸為溶劑回流得水解產(chǎn)物，其水解產(chǎn)物分別與葡萄糖、蔗糖進(jìn)行梅拉德反應(yīng)得棕色產(chǎn)物，兩種棕色產(chǎn)物有較濃的香味，對其醚溶性成分采用GC-MS分析，總共鑒定出十三種物質(zhì)其中水解產(chǎn)物與葡萄糖反應(yīng)有8種，與蔗糖反應(yīng)得5種。本項(xiàng)發(fā)明的創(chuàng)新性在于巴菲蛤濃縮液酸解氨基酸提取工藝簡單實(shí)用。巴菲蛤濃縮液酸解產(chǎn)物與還原糖進(jìn)行梅拉德反應(yīng)對其醚溶性成分氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)分析測定方法快捷迅速，4-羰基正戊酸是其中的主要產(chǎn)物。4-羰基正戊酸是應(yīng)用范圍很廣附加值較高的有機(jī)物，對其進(jìn)行回收和市場開發(fā)前景好。文檔編號G01N30/88GK101614714SQ200810029068公開日2009年12月30日申請日期2008年6月23日優(yōu)先權(quán)日2008年6月23日發(fā)明者宋文東,谷長生,郝曉敏,陳濟(jì)銘,顏建斌申請人:廣東海洋大學(xué)