專利名稱：兩步側(cè)向流測(cè)定方法和設(shè)備的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于檢測(cè)樣本內(nèi)特定結(jié)合對(duì)的第一成員的兩步側(cè)向流測(cè)定方法和設(shè)備。方法和設(shè)備特別地有利于檢測(cè)樣本內(nèi)的特定結(jié)合對(duì)的第一成員，該樣本包含了多個(gè)非特定結(jié)合對(duì)成員。在特定的實(shí)施例中，方法和設(shè)備有利于識(shí)別樣本內(nèi)特定的IgE抗體。

背景技術(shù)：
在本領(lǐng)域中已知許多側(cè)向流測(cè)定設(shè)備和方法。典型地，設(shè)備和方法允許將樣本施加到側(cè)向流基質(zhì)。樣本沿側(cè)向流基質(zhì)流動(dòng)且樣本內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)待檢測(cè)的分析物成分與至少一個(gè)提供在或添加到側(cè)向流基質(zhì)內(nèi)的試劑反應(yīng)。至少一個(gè)試劑典型地固定在設(shè)備內(nèi)以與待檢測(cè)的分析物成分或其試劑反應(yīng)，且典型地使用標(biāo)記以測(cè)量與固定試劑的反應(yīng)程度。
例如，Dafforn等人的美國專利No 4,981,786披露了用于捕獲在區(qū)內(nèi)的特定結(jié)合對(duì)的第一成員，且允許由毛細(xì)作用將液體從區(qū)移開的測(cè)定設(shè)備。添加了例如包括特定的結(jié)合對(duì)成員、信號(hào)產(chǎn)生系統(tǒng)的成員、附屬試劑等的用于進(jìn)行測(cè)定的液體試劑。Dafforn等人披露了他們的測(cè)定設(shè)備和方法的特定的使用，以用于檢測(cè)人類絨毛膜促性素(HCG)的存在。
為便于由實(shí)驗(yàn)室人員和非實(shí)驗(yàn)室醫(yī)療人員和消費(fèi)者使用側(cè)向流測(cè)定設(shè)備，例如在“護(hù)理點(diǎn)”應(yīng)用中使用，且為獲得更快的檢測(cè)技術(shù)，已很關(guān)注于改進(jìn)單步測(cè)定設(shè)備和方法。例如，May等人的美國專利No5,602,040、No 5,622,871、No 5,656,503、No 6,187,598和No 6,228,660披露了設(shè)備、套件和方法，它們便于單步側(cè)向流測(cè)定方法。測(cè)試條提供有干燥的標(biāo)記試劑，該標(biāo)記試劑通過液體生物樣本釋放為移動(dòng)形式。標(biāo)記試劑特別地與待檢測(cè)的分析物結(jié)合以形成絡(luò)合物，且液體樣本沿側(cè)向流基質(zhì)的遷移將絡(luò)合物通過毛細(xì)作用運(yùn)送到檢測(cè)區(qū)。
Hubscher等人的美國專利No 6,528,325披露了更特定的設(shè)備和方法以通過使用便于單步技術(shù)的側(cè)向流測(cè)定來檢測(cè)人體血清中的抗體。從體液獲得的測(cè)試樣本與金標(biāo)記抗原反應(yīng)，且作為結(jié)果的絡(luò)合物越過膜且沿側(cè)向流條行進(jìn)。形成在沿測(cè)試條的特定位置處的紅線指示了測(cè)試樣本中類型特定的抗體的存在。在由Hubscher等人披露的更特定的實(shí)施例中，側(cè)向流測(cè)定用作免疫色譜篩選測(cè)試，以檢測(cè)人血清內(nèi)的過敏原特異性IgE抗體。測(cè)試樣本與金標(biāo)記抗IgE抗體反應(yīng)，且作為結(jié)果的絡(luò)合物越過膜行進(jìn)，在膜處固定的過敏原捕獲過敏原特定IgE絡(luò)合物。在測(cè)試區(qū)內(nèi)形成彩色線以指示過敏原特定IgE抗體的存在。
檢測(cè)個(gè)體內(nèi)特定的過敏原是重要的，以允許醫(yī)療人員進(jìn)行安全和有效的過敏治療。通常的用于過敏檢測(cè)的技術(shù)典型地涉及皮膚刺測(cè)試，以將個(gè)體暴露于多種過敏原和/或涉及復(fù)雜和昂貴的實(shí)驗(yàn)室測(cè)試。由于通常使用的技術(shù)的損傷、成本和/或不便性，許多醫(yī)療人員僅基于個(gè)體的癥狀進(jìn)行過敏治療而不進(jìn)行測(cè)試以確定個(gè)體可能具有何種特定的過敏原。這樣的處置明顯地可能是危險(xiǎn)的、浪費(fèi)的和/或無效的，因?yàn)榭赡転閭€(gè)體進(jìn)行了對(duì)其過敏情況不合適的治療藥品。因此，使用側(cè)向流測(cè)定技術(shù)來檢測(cè)個(gè)體的IgE抗體用于準(zhǔn)確診斷個(gè)體的過敏可能是有利的。然而，特定的IgE抗體的檢測(cè)經(jīng)常是困難的。即例如血液的生物樣本包含多個(gè)干擾為精確標(biāo)記和檢測(cè)特定的IgE抗體所需的反應(yīng)的非特定性結(jié)合成員。
更特定地，特定的過敏確定要求識(shí)別具有可變的結(jié)合到特定的過敏原的抗原決定基的區(qū)域的IgE抗體。體液典型地包含數(shù)千個(gè)具有不同的IgE可變區(qū)域特異性的抗體，且因此通過測(cè)定確定特定的過敏要求從數(shù)千個(gè)IgE抗體特異性的單個(gè)抗體類型的選擇性反應(yīng)。檢測(cè)共軛物容易地結(jié)合到這樣的IgE抗體的恒定區(qū)域，即檢測(cè)共軛物典型地不區(qū)分不同的IgE特異性，且使用常規(guī)的測(cè)定和標(biāo)記技術(shù)則特定的IgE抗體的識(shí)別是困難的。實(shí)際上，已難于使用如在現(xiàn)有技術(shù)中披露的技術(shù)進(jìn)行側(cè)向測(cè)定來容易地為診斷過敏識(shí)別個(gè)體的IgE。典型地，使用在測(cè)定中結(jié)合到IgE抗體的非可變區(qū)域的檢測(cè)共軛物而基于限制在固相上的過敏原的免疫測(cè)定將對(duì)于測(cè)定中的IgE非特定結(jié)合敏感。因此，存在對(duì)于改進(jìn)的測(cè)定設(shè)備和方法的需要，特別是對(duì)于便于特定的IgE抗體的檢測(cè)的需要。


發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明的目的是提供改進(jìn)的側(cè)向流測(cè)定設(shè)備和方法。相關(guān)的目的是提供有利地用于對(duì)于檢測(cè)特定的IgE抗體且因此可以幫助診斷個(gè)體內(nèi)的過敏的側(cè)向流測(cè)定設(shè)備和方法。
這些和附加的目的由本發(fā)明提供。在一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明涉及用于識(shí)別樣本內(nèi)的IgE抗體的兩步側(cè)向流測(cè)定方法。方法包括將例如全血或血清的樣本施加到設(shè)備的樣本口，設(shè)備適合于將樣本輸送到具有多個(gè)在第一地點(diǎn)處固定在各位置的IgE抗原種類的側(cè)向流基質(zhì)。設(shè)備選擇地適合于過濾樣本以輸送例如大體上無紅血球的過濾的樣本到流基質(zhì)。方法進(jìn)一步包括允許樣本沿側(cè)向流基質(zhì)行進(jìn)通過固定的多個(gè)IgE抗原種類到第一地點(diǎn)下游的第二地點(diǎn)，施加液體緩沖劑到側(cè)向流基質(zhì)以移動(dòng)適合于結(jié)合IgE抗體的標(biāo)記試劑，且該試劑在側(cè)向流基質(zhì)上在將樣本輸送到側(cè)向流基質(zhì)的上游位置被干燥，且允許被液體緩沖劑移動(dòng)的標(biāo)記試劑沿側(cè)向流基質(zhì)通過固定的多個(gè)IgE抗原種類行進(jìn)到第一地點(diǎn)下游的位置。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及用于識(shí)別樣本內(nèi)的IgE抗體的側(cè)向流免疫測(cè)定設(shè)備。設(shè)備包括殼體，提供有樣本口、樣本口上游的緩沖劑口、樣本口下游的結(jié)果窗和可選地結(jié)果窗下游的控制窗。設(shè)備進(jìn)一步包括樣本口上游且適合于接收通過緩沖劑口施加的一定量的液體緩沖劑的緩沖劑井，殼體內(nèi)的從緩沖劑井延伸到例如控制窗(如果包括)的下游位置且包括側(cè)向流基質(zhì)的側(cè)向流路徑，適合于結(jié)合IgE抗體的布置在緩沖劑井下游且樣本口上游的側(cè)向流基質(zhì)上的干燥的標(biāo)記試劑，其中標(biāo)記試劑適合于通過從緩沖劑井沿側(cè)向流基質(zhì)通過的液體緩沖劑在側(cè)向流基質(zhì)內(nèi)移動(dòng)，和多個(gè)在通過結(jié)果窗可見的第一地點(diǎn)處固定在側(cè)向流基質(zhì)上的各位置處的IgE抗原種類。設(shè)備可以選擇地進(jìn)一步包括在第一地點(diǎn)下游處且通過控制窗(如果包括在殼體內(nèi))可見的分開的第二地點(diǎn)處固定在側(cè)向流基質(zhì)上的未標(biāo)記IgE或抗小鼠抗體。
在替代的實(shí)施例中，設(shè)備包括殼體，提供有至少一個(gè)樣本口、樣本口上游的至少一個(gè)緩沖劑口、樣本口下游的至少一個(gè)結(jié)果窗和選擇地結(jié)果窗下游的至少一個(gè)控制窗、樣本口上游的且適合于接收通過緩沖劑口施加的一定量的液體緩沖劑的緩沖劑井、和殼體內(nèi)的至少兩個(gè)側(cè)向流路徑，每個(gè)路徑從緩沖劑井延伸到下游地點(diǎn)，例如延伸到控制窗(如果包括)的至少一個(gè)，且包括側(cè)向流基質(zhì)。設(shè)備進(jìn)一步包括適合于與IgE抗體結(jié)合的在緩沖劑井下游且在樣本口上游布置在每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)上的干燥的標(biāo)記試劑，其中標(biāo)記試劑適合于通過從緩沖劑井沿側(cè)向流基質(zhì)通過的液體緩沖劑在側(cè)向流基質(zhì)內(nèi)移動(dòng)，和在通過結(jié)果窗的至少一個(gè)可見的第一地點(diǎn)處在每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)上固定在各位置處的多個(gè)IgE抗原種類。設(shè)備可以選擇地包括在第一地點(diǎn)下游處且通過控制窗(如果包括在殼體內(nèi))的至少一個(gè)可見的分開的第二地點(diǎn)處固定在每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)上的未標(biāo)記IgE抗體或抗小鼠抗體。
在再另一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明涉及用于檢測(cè)包括多個(gè)非特定結(jié)合對(duì)成員的樣本內(nèi)的特定結(jié)合對(duì)的第一成員的側(cè)向流測(cè)定設(shè)備和方法。設(shè)備包括殼體，殼體提供有一個(gè)樣本口、樣本口上游的一個(gè)緩沖劑口、樣本口下游的至少一個(gè)結(jié)果窗和選擇地結(jié)果窗下游的至少一個(gè)控制窗、樣本口上游且適合于接收通過緩沖劑口施加的一定量的液體緩沖劑的緩沖劑井、和殼體內(nèi)的至少兩個(gè)側(cè)向流路徑，每個(gè)路徑從緩沖劑井延伸到例如控制窗的至少一個(gè)的下游位置，且包括側(cè)向流基質(zhì)。設(shè)備進(jìn)一步包括能與特定結(jié)合對(duì)的第一成員結(jié)合的干燥的標(biāo)記試劑，標(biāo)記試劑在緩沖劑井下游且在樣本口上游布置在每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)上，其中標(biāo)記試劑適合于通過從緩沖劑井沿側(cè)向流基質(zhì)通過的液體緩沖劑在側(cè)向流基質(zhì)內(nèi)移動(dòng)，和在通過結(jié)果窗的至少一個(gè)可見的第一地點(diǎn)處固定在每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)上的特定結(jié)合對(duì)的第二成員。設(shè)備可以選擇地包括一定量的特定結(jié)合對(duì)的第一成員，特定結(jié)合對(duì)的第一成員未標(biāo)記且在第一地點(diǎn)下游處且通過控制窗的至少一個(gè)可見的分開的第二地點(diǎn)處固定在每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)上。
在另一個(gè)實(shí)施例中，根據(jù)本發(fā)明的用于檢測(cè)包括多個(gè)非特定結(jié)合對(duì)成員的樣本內(nèi)的特定結(jié)合對(duì)的第一成員的兩步側(cè)向流測(cè)定方法包括將樣本施加到具有固定在第一地點(diǎn)的特定結(jié)合對(duì)的第二成員的側(cè)向流基質(zhì)，允許樣本沿側(cè)向流基質(zhì)行進(jìn)通過固定的特定結(jié)合對(duì)的第二成員到第一地點(diǎn)下游的第二地點(diǎn)，施加液體緩沖劑到側(cè)向流基質(zhì)以移動(dòng)側(cè)向流基質(zhì)上處于將樣本輸送到側(cè)向流基質(zhì)的上游的位置的干燥標(biāo)記試劑，標(biāo)記試劑能與特定結(jié)合對(duì)的第一成員結(jié)合且允許標(biāo)記試劑由液體緩沖劑移動(dòng)以沿側(cè)向流基質(zhì)行進(jìn)通過特定結(jié)合對(duì)的固定的第二成員到第一地點(diǎn)下游的位置。本發(fā)明也涉及用于進(jìn)行這樣的方法的側(cè)向流測(cè)定設(shè)備。
本發(fā)明的設(shè)備和方法在許多方面是有利的。例如，因?yàn)闃颖驹谂c標(biāo)記試劑接觸前與固定試劑接觸，標(biāo)記試劑不干擾樣本分析物和固定試劑之間的反應(yīng)。令人驚奇的是，當(dāng)樣本分析物包括多個(gè)非特定結(jié)合對(duì)成員時(shí)，例如當(dāng)樣本包括IgE抗體且希望檢測(cè)單獨(dú)的IgE抗體類型時(shí)，這被發(fā)現(xiàn)是特別地重要的。本發(fā)明的方法和設(shè)備出乎意料地提供了顯著地改進(jìn)的IgE檢測(cè)。另外，設(shè)備和方法允許使用單個(gè)的設(shè)備方便和有效地檢測(cè)樣本內(nèi)的多個(gè)分析物，且本發(fā)明的設(shè)備和方法可以容易地且精確地由醫(yī)療人員使用以允許護(hù)理點(diǎn)測(cè)試。
這些和附加的目的和優(yōu)點(diǎn)將根據(jù)如下詳細(xì)描述更完全地顯見。



如下詳細(xì)描述將更完全地根據(jù)附圖而被理解，各圖為 圖1是根據(jù)本發(fā)明的設(shè)備的一個(gè)實(shí)施例中的包含兩個(gè)側(cè)向流基質(zhì)的殼體的示意性頂視圖； 圖2是根據(jù)圖1的設(shè)備的側(cè)向流基質(zhì)與根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施例中的血液分離系統(tǒng)結(jié)合的示意性頂視圖； 圖3是沿圖2中的線3-3截取的截面視圖； 圖4是根據(jù)本發(fā)明的設(shè)備的示意性分解側(cè)視圖； 圖5是根據(jù)本發(fā)明的具有組裝形式的設(shè)備的沿圖4的線5-5截取的截面視圖； 圖6根據(jù)本發(fā)明的設(shè)備的另一個(gè)實(shí)施例的包含一個(gè)側(cè)向流基質(zhì)的殼體的示意性頂視圖； 圖7是圖6中的根據(jù)本發(fā)明的包含一個(gè)側(cè)向流基質(zhì)的設(shè)備的側(cè)向流基質(zhì)的示意性頂視圖；和 圖8是圖7的設(shè)備的側(cè)向流基質(zhì)的示意性側(cè)視圖。
在附圖中闡明的實(shí)施例在本質(zhì)上是示例性的且不意圖于限制由權(quán)利要求書限定的本發(fā)明。此外，附圖和本發(fā)明的單獨(dú)的特征將根據(jù)詳細(xì)描述更完全地顯見和被理解。

具體實(shí)施例方式 本發(fā)明涉及兩步側(cè)向流測(cè)定設(shè)備和方法。方法和設(shè)備特別地適合于進(jìn)行免疫測(cè)定以定性或定量地確定樣本是否包含特定結(jié)合對(duì)的第一成員。雖然在此描述的特定設(shè)備和方法顯示為對(duì)于識(shí)別例如全血或血液成分的樣本中的IgE抗體是有用和有利的，但將設(shè)備和方法使用于檢測(cè)包括血漿、血清、尿、唾液等的多種生物流體樣本內(nèi)的其他分析物也同等地在本發(fā)明的范圍內(nèi)。根據(jù)本發(fā)明的設(shè)備和方法可以檢測(cè)的其他分析物的例子包括但不限制于多種蛋白質(zhì)，包括但不限制于具有特定的生物功能的蛋白質(zhì)，例如抗體和其他在人血漿內(nèi)的蛋白質(zhì)、涉及特定的微生物特別是致病微生物的蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)激素等。
在一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明的設(shè)備包括殼體，殼體提供由樣本口、樣本口上游的緩沖劑口、樣本口下游的結(jié)果窗、可選地結(jié)果窗下游的控制窗、樣本口上游的且適合于接收一定量通過緩沖劑口施加的液體緩沖劑的緩沖劑井和殼體內(nèi)的從緩沖劑井延伸到例如控制窗的下游位置且包括側(cè)向流基質(zhì)的側(cè)向流路徑。設(shè)備進(jìn)一步包括能與例如IgE抗體的特定結(jié)合對(duì)的第一成員結(jié)合的干燥的標(biāo)記試劑，例如標(biāo)記抗IgE抗體，標(biāo)記試劑布置在緩沖劑井下游且樣本口上游的側(cè)向流基質(zhì)上，其中標(biāo)記試劑適合于由從緩沖劑井沿側(cè)向流基質(zhì)通過的液體緩沖劑在側(cè)向流基質(zhì)中移動(dòng)，以及在通過結(jié)果窗可見的第一地點(diǎn)處固定在側(cè)向流基質(zhì)上的例如多個(gè)IgE抗原的特定結(jié)合對(duì)的第二成員。設(shè)備可以選擇地包括在與第一地點(diǎn)分離的且在第一地點(diǎn)下游的且如果包括控制窗則通過控制窗可見的第二地點(diǎn)處固定在側(cè)向流基質(zhì)上的能與標(biāo)記試劑結(jié)合的一定量未標(biāo)記的試劑，方便地為特定結(jié)合對(duì)的未標(biāo)記第一成員，例如未標(biāo)記IgE抗體。
在特定的實(shí)施例中，設(shè)備包括多個(gè)在第一地點(diǎn)上固定在側(cè)向流基質(zhì)上的各位置處的IgE抗原種類，且提供了護(hù)理點(diǎn)測(cè)試用于檢測(cè)來自血液樣本的對(duì)抗?jié)撛贗gE過敏原范圍的IgE抗體。血液樣本可以包括全血或分離的血液成分，例如血清或血漿。
圖1示出了根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例的設(shè)備10的殼體的示意性頂視圖。殼體可以由任何合適的材料形成，材料的例子包括模制塑料，且殼體優(yōu)選地足夠堅(jiān)硬以提供對(duì)殼體內(nèi)容納的側(cè)向流路徑或多個(gè)側(cè)向流路徑的支承和穩(wěn)定。單個(gè)的卵形樣本口12提供在殼體頂部13內(nèi)，一起提供了在樣本口12上游的單個(gè)的卵形緩沖劑口14。雖然可以提供另外的樣本口和/或緩沖劑口，但優(yōu)選的是，殼體僅包括一個(gè)樣本口和一個(gè)緩沖劑口，以便于容易和方便地使用設(shè)備。在圖1的實(shí)施例中，兩個(gè)結(jié)果窗16、18提供在殼體頂部13內(nèi)樣本口12下游，且在各側(cè)向流路徑內(nèi)的各檢測(cè)區(qū)20、22上方，且兩個(gè)控制窗24和26提供在殼體頂部13內(nèi)結(jié)果窗16、18下游，且在各側(cè)向流路徑內(nèi)的各控制區(qū)28、30的上方。結(jié)果窗16和18和控制窗24和26可以包括僅在殼體頂部內(nèi)的開口，或替代地透明的覆蓋件可以提供在開口的一個(gè)或多個(gè)內(nèi)。雖然在圖1中示出的設(shè)備包括兩個(gè)結(jié)果窗和兩個(gè)控制窗，但應(yīng)理解的是，可以使用單個(gè)的結(jié)果窗和/或單個(gè)的控制窗，或替代地可以如希望地提供附加的結(jié)果窗和/或控制窗。在圖1的實(shí)施例中，側(cè)向流路徑與一個(gè)結(jié)果窗和一個(gè)控制窗相關(guān)，但這樣的一個(gè)到一個(gè)的對(duì)應(yīng)不是要求的。如果不希望在設(shè)備內(nèi)提供視覺控制信號(hào)，則從殼體省略控制窗24和26和從各側(cè)向流路徑省略控制區(qū)28和30，這也等同地在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
殼體頂部13如所描述與殼體底部配合在一起，以在其內(nèi)封閉兩個(gè)側(cè)向流路徑。如以上所闡明，設(shè)備可以替代地包括一個(gè)流動(dòng)路徑或如希望則包括三個(gè)或更多的側(cè)向流路徑。圖2闡明了包含在設(shè)備的殼體內(nèi)的兩個(gè)側(cè)向流路徑與血液分離系統(tǒng)組合的頂視圖。圖3是沿圖2的線3-3截取的圖且進(jìn)一步詳細(xì)地示出了組合。參考圖2和圖3，平行的側(cè)向流路徑32和34包括在血液分離系統(tǒng)36上游的上游部分32a和34a和在血液分離系統(tǒng)36下游的下游部分32b和34b。
血液分離系統(tǒng)36適合于位于殼體頂部內(nèi)的樣本口12下方且在樣本口和側(cè)向流路徑之間延伸。血液分離系統(tǒng)可以包括至少一個(gè)適合于在其內(nèi)聚集紅血球材料層，使得通到側(cè)向流路徑的樣本將大體上無紅血球。血液分離系統(tǒng)36包括頂部玻璃纖維濾紙層、中間玻璃纖維濾紙層40和底部玻璃纖維濾紙層42。頂部和中間濾紙層38和40的至少一個(gè)且優(yōu)選地兩個(gè)在其內(nèi)包含聚集劑。多個(gè)聚集劑在本領(lǐng)域中已知且適合于在此使用。例如，聚集劑可以包括但不限制于例如甘露醇、山梨醇或肌醇的糖，一個(gè)或多個(gè)紅血球結(jié)合抗體，外源凝集素等。在組裝的側(cè)向流測(cè)定設(shè)備中，層38和40布置在樣本口12下方且足夠大以接收來自樣本口的樣本，但不側(cè)向地延伸到側(cè)向流路徑32和34。底部層42布置在層40下方且側(cè)向延伸以接觸兩個(gè)側(cè)向流條的每個(gè)。如果希望，則底部濾紙層42也可以包括紅血球聚集劑。此層也可以包含一個(gè)或多個(gè)添加劑，以便于從層38和40接收的經(jīng)過濾的樣本流動(dòng)到側(cè)向流路徑32和34。例如，在一個(gè)實(shí)施例中，層42包括結(jié)合到玻璃纖維的聚乙烯醇。為便于沿側(cè)向流基質(zhì)在下游方向的流動(dòng)，底部層42和側(cè)向流路徑之間的接觸通過在層42和側(cè)向流路徑32和34之間分別布置薄的液體不可通過的層44和46而限制在上游側(cè)處。例如，層44和46可以由層壓帶等形成。層44和46的每個(gè)的下游邊緣在圖2中由虛線48示出，從而圖示了層42接觸了側(cè)向流路徑32和34的邊緣48的下游區(qū)。
當(dāng)希望使用希望地經(jīng)過濾以去除可能干擾可見的信號(hào)的成分的樣本即其中紅血球被希望地去除的全血樣本時(shí)，血液分離系統(tǒng)36可以包括在本發(fā)明的設(shè)備內(nèi)。另一方面，如果想要的樣本不要求從中過濾任何成分，即血清樣本，則血液分離系統(tǒng)可以省略。替代地，其他血液或樣本分離系統(tǒng)可以如希望地包括在本發(fā)明的設(shè)備內(nèi)。
圖4示出了根據(jù)本發(fā)明的設(shè)備的分解側(cè)視圖，而圖5示出了一旦設(shè)備已組裝在設(shè)備殼體內(nèi)時(shí)沿線5-5截取的設(shè)備的截面視圖。參考圖4，圖中描述了側(cè)向流路徑32。然而，側(cè)向流路徑34包括如相對(duì)于側(cè)向流路徑32所描述的類似的特征，但側(cè)向流路徑34在圖4的側(cè)視圖中未示出。圖示的實(shí)施例的設(shè)備的每個(gè)側(cè)向流路徑包括側(cè)向流基質(zhì)50，基質(zhì)50是多孔的或是吸水的，且促進(jìn)了由毛細(xì)作用施加到其上的液體的側(cè)向流動(dòng)。在圖4中示出的側(cè)向流基質(zhì)50包括從樣本口12和血液分離系統(tǒng)36的上游位置延伸到相應(yīng)的結(jié)果窗16、18的下游位置的主條52。主條52可以由任何希望的流材料形成，包括但不限制于纖維素材料和從纖維素衍生的材料，例如濾紙、硝化纖維素和醋酸纖維素或聚合物，包括但不限于尼龍、硅樹脂等。材料的孔必須足夠大，以允許將在下文中進(jìn)一步詳細(xì)描述的樣本和標(biāo)記試劑流過它們。合適的孔尺寸典型地在從大約0.4至大約1000微米之間的范圍內(nèi)，在許多情形中孔尺寸在從大約0.4至大約100微米的范圍內(nèi)是合適的。在特定的實(shí)施例中，主條52由硝化纖維素形成。每個(gè)主條52通過底部玻璃纖維過濾器層42的部分與血液分離系統(tǒng)36流體連通，但它們之間的接觸例如由層壓帶層44限制。
側(cè)向流路徑32和34的每個(gè)主條52在第一地點(diǎn)上包括各檢測(cè)區(qū)20和22，檢測(cè)區(qū)20和22通過相應(yīng)的結(jié)果窗16和18可見。每個(gè)檢測(cè)區(qū)具有固定在其上的至少一個(gè)特定結(jié)合對(duì)的第二成員，以與樣本內(nèi)包含的第一成員反應(yīng)且將第一成員固定。在特定的實(shí)施例中，如在此所披露，每個(gè)主條的檢測(cè)區(qū)包含對(duì)于一系列為檢測(cè)所希望的IgE抗體特定的一系列IgE過敏原。施加抗原使得每個(gè)類型的抗原在檢測(cè)區(qū)內(nèi)的分離位置處固定。多種IgE抗原的組合可以如希望地應(yīng)用。例如，適合于固定在檢測(cè)區(qū)內(nèi)的IgE抗原包括但不限制于花粉，例如貓尾草、栽培的黑麥、樺木、榿木、榛實(shí)、艾蒿、英國車前草、豚草，和/或蕁麻，灰塵過敏原，例如粉塵螨、屋塵螨和/或屋內(nèi)灰塵，霉菌，例如交鏈孢菌、曲霉菌、枝孢菌和/或青霉菌，動(dòng)物上皮細(xì)胞，例如貓皮屑、狗皮屑、馬皮屑和/或鵝羽毛，食品，例如乳制品、谷類、堅(jiān)果、海產(chǎn)品和/或豆類，吸入劑混合物，例如花粉I(草)、花粉II(野草/樹)，動(dòng)物混合物，灰塵混合物，和/或霉菌混合物等。IgE過敏原或其他第二特定結(jié)合對(duì)成員(多個(gè)成員)在檢測(cè)區(qū)處以任何在本領(lǐng)域中已知的方式接附到主測(cè)試條，主測(cè)試條足以將成員(多個(gè)成員)固定在流基質(zhì)中且維持在測(cè)定條件下的固定。
在一個(gè)實(shí)施例中，通過將各過敏原接附到微粒上，又將微粒固定在流基質(zhì)的孔內(nèi)，將IgE過敏原固定在流基質(zhì)內(nèi)。這樣的固定微粒在本領(lǐng)域中是已知的，且例如包括二氧化硅微粒和有機(jī)聚合物微粒，例如合成加聚物、合成縮聚物和選擇地合成地交聯(lián)的生物聚合物。微粒的合適的尺寸是能接收且維持在流基質(zhì)的孔內(nèi)的尺寸。在一個(gè)實(shí)施例中，固定微粒的直徑在檢測(cè)區(qū)的第一地點(diǎn)處小于側(cè)向流基質(zhì)的流動(dòng)通道的最小內(nèi)部尺寸。合適的微粒的例子包括在公布的Pharmacia Diagnostics AB的PCT申請(qǐng)WO 99/36780中教示的例子，在此通過參考將其合并。在一個(gè)實(shí)施例中，固定微粒由合成聚合物乳膠形成，例如由聚苯乙烯均聚物或共聚物乳膠微粒形成，且以例如醇式羥基基團(tuán)的親水基團(tuán)處理，以改進(jìn)抗原或其他第二特定結(jié)合對(duì)成員的固定和反應(yīng)，如在前述的公布的Pharmacia Diagnostics AB的PCT申請(qǐng)WO 99/36780中教示。
如在圖1中示出，殼體頂部13的外表面可以提供有鄰近每個(gè)結(jié)果窗的標(biāo)識(shí)15，以區(qū)分固定在各檢測(cè)區(qū)的各IgE抗原種類的位置。標(biāo)識(shí)可以包括文字、圖形、圖標(biāo)或任何它們的組合。標(biāo)識(shí)可以然后輔助醫(yī)療人員讀取一旦設(shè)備用于進(jìn)行測(cè)定所提供的任何確定結(jié)果。
每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)50進(jìn)一步包括與主條52的上游端流體流動(dòng)地連通的上游下部芯體54和與主條52的下游端流體流動(dòng)地連通的下游上部芯體56。當(dāng)殼體提供有控制窗(多個(gè)控制窗)時(shí)，上部芯體可以布置在各控制窗下方。因此，如在圖4中示出，每個(gè)上部芯體56布置在各控制窗24、26下方。上部芯體54和下部芯體56由任何希望的流材料形成，包括但不限制于纖維素材料和從纖維素衍生的材料，例如濾紙、硝化纖維素和醋酸纖維素、尼龍等。在一個(gè)實(shí)施例中，芯體由玻璃纖維濾紙形成。
在每個(gè)下部芯體54與主條52的接觸點(diǎn)的上游位置處，芯體54包括干燥的標(biāo)記試劑58。標(biāo)記試劑適合于是可移動(dòng)的，以一旦液體緩沖劑施加到設(shè)備時(shí)，流動(dòng)通過側(cè)向流基質(zhì)，如將在下文中更詳細(xì)地描述。標(biāo)記試劑必須能與特定結(jié)合對(duì)的第一成員在與第一特定結(jié)合對(duì)成員和固定的第二特定結(jié)合對(duì)成員反應(yīng)的結(jié)合位置不同的結(jié)合位置處反應(yīng)。另外，標(biāo)記試劑包括可見地可檢測(cè)標(biāo)記或可與可見地可檢測(cè)的標(biāo)記反應(yīng)。在特定實(shí)施例中，標(biāo)記試劑包括可見地可檢測(cè)標(biāo)記。這樣的標(biāo)記在本領(lǐng)域中已熟知，包括但不限制于發(fā)色團(tuán)、熒光團(tuán)、放射化合物、酶等，且在標(biāo)記試劑上可以使用任何這樣的標(biāo)記。標(biāo)記試劑可以包括便于其根據(jù)在本領(lǐng)域中已知的技術(shù)使用的微粒，包括但不限制于金屬溶膠微粒。在一個(gè)實(shí)施例中，標(biāo)記試劑適合于與IgE抗體結(jié)合。在更特定的實(shí)施例中，標(biāo)記試劑包括標(biāo)記抗IgE抗體。在更特定的實(shí)施例中，標(biāo)記試劑包括金溶膠標(biāo)記抗IgE抗體，且例如通過將其上具有抗IgE抗體的金溶膠微粒的溶液噴射在玻璃纖維濾紙上且允許噴射的溶液干燥而提供在下部芯體上。
每個(gè)上部芯體56可以選擇地包括在各控制窗24、26下方的控制區(qū)28、30。每個(gè)控制區(qū)提供有干燥的控制試劑，控制試劑包括一定量的能與標(biāo)記試劑結(jié)合的未標(biāo)記試劑。在一個(gè)實(shí)施例中，未標(biāo)記試劑包括特定結(jié)合對(duì)的第一成員。干燥的控制試劑在控制區(qū)內(nèi)的第二地點(diǎn)處固定在側(cè)向流路徑內(nèi)，該第二地點(diǎn)在檢測(cè)區(qū)內(nèi)的第一地點(diǎn)下游且通過至少一個(gè)控制窗可見。此固定的第一成員是未標(biāo)記的，如將在下文中論述，它可以用于確認(rèn)測(cè)定設(shè)備已正確運(yùn)行。例如，在一個(gè)實(shí)施例中，每個(gè)控制區(qū)包括未標(biāo)記的固定IgE或抗小鼠抗體。
在進(jìn)一步的實(shí)施例中，每個(gè)控制區(qū)最初提供有至少一個(gè)可見的水溶性染料標(biāo)志，該標(biāo)志通過控制窗可見?？梢姷乃苄匀玖蠘?biāo)志可以具有任何形式，例如在圖1中示出的線17。如將在下文中描述，此標(biāo)志可以用于確認(rèn)在使用期間樣本已經(jīng)正確地施加到測(cè)定設(shè)備，且用作信號(hào)以通過施加液體緩沖劑完成測(cè)定過程。在一個(gè)實(shí)施例中，水溶性染料標(biāo)志是與標(biāo)記試劑標(biāo)記的任何可見的顏色不同的顏色，和/或水溶性染料標(biāo)志具有與施加在控制區(qū)內(nèi)的控制試劑的形狀或圖案不同的形狀。作為結(jié)果，使用者將可以容易地區(qū)分水溶性染料標(biāo)志和任何在控制區(qū)內(nèi)作為標(biāo)記試劑結(jié)合到其內(nèi)的結(jié)果而隨后出現(xiàn)的標(biāo)志。
上部芯體56的下游端可以選擇地與用于收集來自側(cè)向流基質(zhì)的過多液體的接收器接觸。這樣的接收器可以進(jìn)一步有助于促進(jìn)沿每個(gè)基質(zhì)的側(cè)向流。
如在圖4和圖5中示出，設(shè)備進(jìn)一步包括底部殼體60，底部殼體60提供有緩沖劑井62。緩沖劑井62布置在緩沖劑口14下方，用于接收通過緩沖劑口14而施加到設(shè)備的液體緩沖劑。此緩沖劑口的尺寸足夠大，以保持一定量的緩沖劑液體，即鹽水，該緩沖劑液體有效地使干燥的標(biāo)記試劑在每個(gè)下部芯體54上可移動(dòng)，且將可移動(dòng)的標(biāo)記試劑沿每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)運(yùn)輸?shù)礁魃喜啃倔w56上的各控制區(qū)28、30。緩沖劑井側(cè)向越過設(shè)備延伸，使得一旦緩沖劑施加到設(shè)備，則每個(gè)側(cè)向流路徑的每個(gè)下部芯體54的上游端將流體流動(dòng)地與井內(nèi)的液體緩沖劑接觸。因此，緩沖劑液體的單次施加將激活每個(gè)側(cè)向流路徑內(nèi)的側(cè)向流。為便于緩沖劑液體從緩沖劑井62且沿每個(gè)下部芯體54的側(cè)向流動(dòng)，緩沖劑井的下游壁可以如所示出在64處具有斜坡。
另外，液體不可通過的層或支承件可以提供為位于側(cè)向流基質(zhì)下方。如在圖4中示出，液體不可通過的層59提供在從緩沖劑井62延伸的下部芯體54的部分、主條52和上部芯體56的下方。在特定的實(shí)施例中，層由粘合劑涂覆的塑料膜形成，該膜組裝為粘合劑面向側(cè)向流基質(zhì)，以幫助將側(cè)向流基質(zhì)在側(cè)向流路徑上保持到位。
圖4和圖5也示出了殼體可以包括一個(gè)或多個(gè)壓力棒，支承件和/或定位銷，以將多種層和條布置在殼體內(nèi)且將它們?cè)谝呀M裝的設(shè)備內(nèi)維持到位。例如，殼體頂部13提供有壓力棒66，以將下部芯體54的上游部分在緩沖劑井處維持到位，且提供有壓力棒68，以維持下部芯體54的下游端與主條52的上游端相互接觸且將它們?cè)谝呀M裝的設(shè)備內(nèi)維持到位。在血液分離系統(tǒng)36區(qū)內(nèi)，殼體頂部13提供有壓力棒70，以將層38和40在樣本口12下方維持到位，且在壓力棒70的每側(cè)上提供有壓力棒72，以維持層42和薄層44與側(cè)向流路徑32和34的主條52接觸。進(jìn)一步地，殼體頂部包括壓力棒73，以維持主條52的下游端和上部芯體56的上游端相互接觸且將它們?cè)谝呀M裝的設(shè)備內(nèi)維持到位。在一個(gè)實(shí)施例中，這些壓力棒可以與殼體頂部13整體地形成，例如當(dāng)殼體頂部由模制塑料形成時(shí)。替代地，壓力棒的一個(gè)或多個(gè)可以作為分開的部件提供。在特定的實(shí)施例中，殼體頂部在結(jié)果窗區(qū)內(nèi)無任何壓力棒，以防止在檢測(cè)區(qū)的區(qū)域內(nèi)施加任何壓力。
殼體底部60可以提供有一個(gè)或多個(gè)支承或定位結(jié)構(gòu)。在所示出的實(shí)施例中，殼體底部60包括支承床74，支承床74幫助將血液分離系統(tǒng)36在樣本口12下方維持到位且與主條52對(duì)齊。在鄰近層38和40的區(qū)域中，支承床74包括上游凸緣76和下游凸緣78，以便于樣本流到位于下方的層42和主條52，和/或便于進(jìn)一步幫助將血液分離系統(tǒng)維持到位。進(jìn)一步地，殼體底部60包括上游定位銷80，以幫助下部芯體54的上游端在緩沖劑井處的定位，還包括下游定位銷82，以幫助上部芯體54的下游端在控制區(qū)的區(qū)域內(nèi)定位。每個(gè)芯體和/或條選擇地可以提供有一個(gè)或多個(gè)凹口、穿孔或孔，以接收定位銷或定位銷的部分來進(jìn)一步幫助將條維持到位。
圖6至圖8涉及根據(jù)本發(fā)明的設(shè)備的另一個(gè)實(shí)施例，該設(shè)備包括單個(gè)的側(cè)向流基質(zhì)。更特定地，殼體在構(gòu)造上類似于結(jié)合圖1進(jìn)一步詳細(xì)描述的構(gòu)造，且包括殼體頂部113，殼體頂部113提供有單個(gè)的卵形樣本口112和在樣本口112上游的單個(gè)的卵形緩沖劑口114?？梢蕴峁┝硗獾臉颖究诤?或緩沖劑口，但優(yōu)選的是殼體僅包括一個(gè)樣本口和一個(gè)緩沖劑口，以便于容易和方便地使用設(shè)備。殼體頂部113進(jìn)一步在樣本口112下游處提供有結(jié)果窗116，且結(jié)果窗116布置在包含在側(cè)向流路徑內(nèi)的檢測(cè)區(qū)120上方。殼體113可以進(jìn)一步在結(jié)果窗116下游處提供有控制窗124，且控制窗124布置在控制區(qū)128上方。如上所述，控制區(qū)128選擇地包括在設(shè)備內(nèi)，且又可以選擇地提供有至少一個(gè)可見的標(biāo)志，例如水溶性染料，如在圖6中117處所示，該標(biāo)志通過控制窗可見。標(biāo)志117可以用于確定在使用期間樣本已合適地施加到測(cè)定設(shè)備，且用作信號(hào)以通過施加液體緩沖劑來完成測(cè)定過程。結(jié)果窗116和控制窗124可以包括僅在殼體頂部的開口，或替代地透明覆蓋件可提供在開口的一個(gè)或兩個(gè)內(nèi)。殼體頂部113也可以提供有鄰近結(jié)果窗的標(biāo)識(shí)115，以區(qū)分固定在檢測(cè)區(qū)內(nèi)的各特定結(jié)合對(duì)成員的位置，例如區(qū)分固定在檢測(cè)區(qū)120內(nèi)的各IgE抗原種類的位置。
圖7示出了適合于使用在圖6的設(shè)備內(nèi)的側(cè)向流基質(zhì)的示意性頂視圖，而圖8示出了圖7的側(cè)向流基質(zhì)的示意性側(cè)視圖。參考圖7，側(cè)向流路徑132包括在血液分離系統(tǒng)136上游的上游部分132a和在血液分離系統(tǒng)136下游的下游部分132b。如在以上所述的實(shí)施例中，血液分離系統(tǒng)136適合于位于殼體頂部內(nèi)的樣本口112下方。血液分離系統(tǒng)可以包括任何先前關(guān)于血液分離系統(tǒng)36論述的實(shí)施例，或如果希望可以省略。在圖8中示出的實(shí)施例中，系統(tǒng)136包括頂部玻璃纖維濾紙層138、中間玻璃纖維濾紙層140和底部玻璃纖維濾紙層142。玻璃纖維濾紙層的一個(gè)或多個(gè)可以包括聚集劑，以從樣本中去除紅血球，和/或可以包括添加劑，以便于過濾后的樣本流動(dòng)到側(cè)向流路徑132。為便于沿側(cè)向流基質(zhì)在下游方向流動(dòng)，底部層142和側(cè)向流路徑之間的接觸通過在層142的上游部分和側(cè)向流路徑132之間布置液體不可通過的薄層144而限制在層142的上游側(cè)處。層144可以由層壓帶等形成，且層144的下游邊緣在圖7中通過虛線148示出。
側(cè)向流路徑包括側(cè)向流基質(zhì)150，基質(zhì)150是多孔的或吸水的且通過毛細(xì)作用促進(jìn)了施加到其上的液體的側(cè)向流動(dòng)。如在圖8中示出，側(cè)向流基質(zhì)包括主條152，主條從樣本口112和血液分離系統(tǒng)136上游的位置延伸到結(jié)果窗116下游的位置。主條152可以由任何希望的流材料形成，包括那些以上關(guān)于主條52所述的材料。主條152包括具有固定在其上的至少一個(gè)特定結(jié)合對(duì)的第二成員以與在樣本內(nèi)包含的固定的第一成員反應(yīng)的檢測(cè)區(qū)120。在特定的實(shí)施例中，主條152的檢測(cè)區(qū)包含多個(gè)對(duì)于一系列希望檢測(cè)的IgE抗體特定的IgE過敏原。
側(cè)向流基質(zhì)150進(jìn)一步包括與主條152的上游端流體流動(dòng)連通的上游下部芯體154，和與主條152的下游端流體流動(dòng)地連通的下游上部芯體156。在圖7中，主流條152的上游邊緣由虛線153示出，而主流152的下游邊緣由虛線155示出。在上游下部芯體154與主條152接觸點(diǎn)上游的位置處，上游下部芯體154包括干燥的標(biāo)記試劑158，試劑158適合于被移動(dòng)，以一旦液體緩沖劑以先前所述的方式施加到設(shè)備時(shí)，通過側(cè)向流基質(zhì)流動(dòng)。因此，上部芯體154的上游端優(yōu)選地以圖4中示出的方式延伸到包含在設(shè)備的底部殼體內(nèi)的緩沖劑井內(nèi)。下游上部芯體156布置在控制窗124下方，使得固定的未標(biāo)記試劑128處于通過控制窗124顯示出的位置處，如在圖6中示出。
側(cè)向流基質(zhì)可以以在本領(lǐng)域中已知的任何方式布置且維持在設(shè)備殼體內(nèi)，包括以上參考圖4和圖5論述的方式。在一個(gè)實(shí)施例中，液體不可通過的層或支承件159提供為位于側(cè)向基質(zhì)下方。
在根據(jù)本發(fā)明的設(shè)備的運(yùn)行中，收集了樣本。例如，當(dāng)希望識(shí)別IgE抗體時(shí)，收集全血樣本，但可以使用分離的血液成分或其他樣本。樣本收集優(yōu)選地在尺寸足以提供適合于沿側(cè)向流基質(zhì)行進(jìn)到設(shè)備內(nèi)的側(cè)向流路徑(多個(gè)側(cè)向流路徑)的控制區(qū)內(nèi)的樣本體積的毛細(xì)管設(shè)備內(nèi)進(jìn)行。施加測(cè)量的量的樣本，如從毛細(xì)管施加，將幫助防止施加超過對(duì)于設(shè)備的正確使用所需量的樣本量。毛細(xì)管可以選擇地包含抗凝結(jié)劑，例如肝素。全血樣本從毛細(xì)管設(shè)備供給到樣本口。當(dāng)血液樣本從樣本口通過頂部、中間和底部玻璃纖維濾紙層向下行進(jìn)時(shí)，紅血球聚集且保持在濾紙層內(nèi)。即，包含在頂部和中間濾紙層內(nèi)的例如甘露醇的聚集劑用作對(duì)于紅血球的聚集劑，以防止紅血球通過濾紙層。作為結(jié)果，無紅血球的血漿樣本從底部玻璃纖維濾紙層輸送到側(cè)向流路徑(多個(gè)路徑)的主條。
一旦血漿樣本接觸主條(多個(gè)主條)，則樣本側(cè)向向位于結(jié)果窗下方的各檢測(cè)區(qū)流動(dòng)，在檢測(cè)區(qū)處，樣本內(nèi)的特定的IgE抗體分析物結(jié)合到各固定的特定IgE過敏原微粒。樣本血漿繼續(xù)沿條流動(dòng)到上部芯體，在此血漿沖走來自控制窗的水溶性染料標(biāo)志，以提供對(duì)測(cè)試過程的樣本添加步驟已完成的視覺確認(rèn)。在所使用的設(shè)備不包括選擇的控制窗的情況中，使用者可以僅允許過去預(yù)先確定的時(shí)間期間，例如5分鐘，以保證測(cè)試過程的樣本添加步驟已完成。
優(yōu)選地為鹽水的緩沖劑液體然后通過緩沖劑口添加到緩沖劑井。緩沖劑液體被延伸到井內(nèi)的下部芯體(多個(gè)下部芯體)的上游部分從井吸收，且當(dāng)緩沖劑液體側(cè)向沿下部芯體的長度流動(dòng)時(shí)，它使干燥的標(biāo)記試劑移動(dòng)且將移動(dòng)的標(biāo)記試劑沿主條的長度運(yùn)載且運(yùn)載到上部芯體。當(dāng)標(biāo)記試劑通過主條上的檢測(cè)區(qū)時(shí)，它與任何結(jié)合到固定的IgE過敏原微粒的IgE抗體分析物結(jié)合，因此導(dǎo)致可見地可檢測(cè)標(biāo)志。在殼體頂部上的標(biāo)識(shí)允許將結(jié)果窗內(nèi)的任何可見地可檢測(cè)標(biāo)志與抗體/過敏原信息相關(guān)聯(lián)，以確定結(jié)合在檢測(cè)區(qū)(多個(gè)檢測(cè)區(qū))內(nèi)的IgE抗體的特性。
當(dāng)緩沖劑液體運(yùn)載過多的標(biāo)記試劑到上部芯體(多個(gè)上部芯體)和控制區(qū)(多個(gè)控制區(qū))時(shí)，標(biāo)記試劑與固定在控制區(qū)內(nèi)的IgE抗體結(jié)合以產(chǎn)生附加的可見地可檢測(cè)標(biāo)志。標(biāo)志在每個(gè)控制區(qū)內(nèi)的出現(xiàn)提供了對(duì)標(biāo)記試劑已成功地通過檢測(cè)區(qū)且測(cè)試完成的可見確定。
因此，本發(fā)明的測(cè)定設(shè)備適合于進(jìn)行兩步測(cè)定。為便于使用本發(fā)明的測(cè)定設(shè)備，設(shè)備可以與毛細(xì)管設(shè)備結(jié)合提供在套件內(nèi)，毛細(xì)管設(shè)備的尺寸對(duì)于提供在設(shè)備內(nèi)使用的適當(dāng)?shù)臉颖玖渴怯行У模缫陨纤?。套件可以選擇地進(jìn)一步包括一定量的緩沖劑液體，即鹽水，其對(duì)于使標(biāo)記試劑移動(dòng)且將標(biāo)記試劑沿側(cè)向流基質(zhì)運(yùn)輸?shù)娇刂茀^(qū)是有效的。在進(jìn)一步的實(shí)施例中，根據(jù)本發(fā)明的套件可以包括多個(gè)如所描述的測(cè)定設(shè)備、相應(yīng)的多個(gè)毛細(xì)管以收集用于施加到設(shè)備的樣本和足以正確使用設(shè)備的鹽水的供給源。鹽水可以在單個(gè)的包裝內(nèi)供給或可以在對(duì)應(yīng)于多個(gè)測(cè)定設(shè)備的多個(gè)單獨(dú)的包裝中供給。
雖然根據(jù)本發(fā)明的測(cè)定方法和設(shè)備涉及兩步，即樣本施加和隨后的緩沖劑液體施加，但方法和設(shè)備可以容易地、方便地使用，使用中無錯(cuò)誤且具有對(duì)方法已經(jīng)正確地進(jìn)行的確定。即，因?yàn)閱蝹€(gè)的樣本口可以將樣本輸送到一個(gè)、兩個(gè)或多個(gè)每個(gè)具有固定在檢測(cè)區(qū)內(nèi)的多個(gè)結(jié)合成員，即不同特異性的IgE抗體的側(cè)向流路徑，所以僅要求單次的樣本施加以測(cè)試多個(gè)分析物，例如多個(gè)IgE抗體。此外，因?yàn)榫彌_劑井將緩沖劑液體分配到所有側(cè)向流路徑，所以僅要求施加單次的緩沖劑液體，即使當(dāng)測(cè)試對(duì)于例如多個(gè)IgE抗體的多個(gè)分析物進(jìn)行。此外，因?yàn)榭刂茀^(qū)可以最初提供有水溶性染料標(biāo)志而不干擾檢測(cè)反應(yīng)，所以容易地可檢測(cè)的信號(hào)，即水溶性染料標(biāo)志的消失指示了何時(shí)樣本已完全地穿過檢測(cè)區(qū)到控制區(qū)，且然后可以正確地施加緩沖劑液體。最后，當(dāng)標(biāo)記試劑已成功地穿過檢測(cè)區(qū)到控制區(qū)時(shí)，通過標(biāo)記試劑與控制區(qū)內(nèi)的固定的IgE抗體的反應(yīng)，出現(xiàn)容易地可檢測(cè)的信號(hào)，因此清晰地通知了測(cè)定方法完成的時(shí)間。以此，兩步方法和設(shè)備是方便和可靠的。
此外，因?yàn)闇y(cè)定方法在兩個(gè)步驟中進(jìn)行，且包含分析物的樣本在與標(biāo)記試劑接觸前與固定的特定結(jié)合對(duì)成員接觸，所以實(shí)現(xiàn)了更精確的分析物檢測(cè)方法，特別是對(duì)于包含多個(gè)非特定結(jié)合對(duì)成員的樣本，例如當(dāng)希望檢測(cè)IgE抗體時(shí)的全血樣本。IgE抗體被允許與各抗原在檢測(cè)區(qū)內(nèi)反應(yīng)，且一旦反應(yīng)已發(fā)生，則通過隨后施加緩沖劑液體將標(biāo)記試劑運(yùn)輸?shù)綑z測(cè)區(qū)。令人驚奇的是，當(dāng)標(biāo)記試劑不干擾抗體-抗原在檢測(cè)區(qū)內(nèi)的反應(yīng)時(shí)，測(cè)定方法和設(shè)備顯示了改進(jìn)的靈敏性，且獲得了對(duì)IgE抗體更精確的識(shí)別。
本發(fā)明的方法和設(shè)備的優(yōu)點(diǎn)在如下的例子中展示。
例子 進(jìn)行了多種測(cè)定以檢測(cè)血清樣本混合物內(nèi)的IgE抗體。樣本混合物包含許多不同的IgE抗體，帶有已知的量的四種IgE抗體(e1、t3和d1)，如在如下的表中闡明。每個(gè)樣本的總IgE抗體含量被測(cè)量且也在如下的表中闡明。對(duì)于每個(gè)樣本混合物，進(jìn)行了根據(jù)本發(fā)明的兩步測(cè)定方法，其中樣本與固定的IgE抗原在側(cè)向流測(cè)定的檢測(cè)區(qū)內(nèi)接觸，然后標(biāo)記抗IgE抗體(在金溶膠微粒上)被運(yùn)輸?shù)綑z測(cè)區(qū)。作為結(jié)果的在檢測(cè)區(qū)內(nèi)的可見的顏色改變?cè)?(無顏色改變)至5(指示了最大顏色改變)的等級(jí)上評(píng)估，其結(jié)果在表中闡明。為比較目的，樣本也接受使用如在本領(lǐng)域中通常使用的單步法的分析，其中樣本在沿由在本發(fā)明的背景技術(shù)中論述的現(xiàn)有技術(shù)所教示的方法的線到達(dá)檢測(cè)區(qū)內(nèi)前與標(biāo)記抗IgE抗體(在金溶膠微粒上)接觸。作為結(jié)果在檢測(cè)區(qū)內(nèi)的可見的顏色改變?cè)谇笆龅燃?jí)上評(píng)估，且結(jié)果也在下表中闡明。
表 ＜指示溶度低于0.35kU/l 在表中闡明的結(jié)果令人驚奇地展示了根據(jù)本發(fā)明的兩步方法與通常在現(xiàn)有技術(shù)中教示的單步方法相比具有關(guān)于IgE抗體檢測(cè)的改進(jìn)的靈敏性，特別是在較高的抗體濃度中具有改進(jìn)的靈敏性。因此，本方法和設(shè)備不僅提供了用于IgE抗體測(cè)試的方便的護(hù)理點(diǎn)技術(shù)，而且也提供了用于改進(jìn)的過敏診斷的檢測(cè)特定的IgE抗體的改進(jìn)的靈敏性。
在此描述的特定的圖示和實(shí)施例本質(zhì)上僅是示例性的，且不意圖于限制由權(quán)利要求書所限定的本發(fā)明。進(jìn)一步的實(shí)施例和例子根據(jù)此說明書對(duì)于本領(lǐng)域一般技術(shù)人員將是顯見的，且在所要求的本發(fā)明的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種用于識(shí)別樣本內(nèi)的IgE抗體的兩步側(cè)向流測(cè)定方法，其包括
將樣本施加到設(shè)備的樣本口，其中設(shè)備適合于將樣本輸送到具有在第一地點(diǎn)處固定在各自的位置的多個(gè)IgE抗原種類的側(cè)向流基質(zhì)；
允許樣本沿側(cè)向流基質(zhì)行進(jìn)通過固定的多個(gè)IgE抗原種類到第一地點(diǎn)下游的第二地點(diǎn)；
將液體緩沖劑施加到側(cè)向流基質(zhì)以移動(dòng)標(biāo)記試劑，標(biāo)記試劑適合于結(jié)合IgE抗體且在將樣本輸送到側(cè)向流基質(zhì)的上游的地點(diǎn)處干燥在側(cè)向流基質(zhì)上，和
允許通過液體緩沖劑移動(dòng)的標(biāo)記試劑沿側(cè)向流基質(zhì)行進(jìn)通過固定的多個(gè)IgE抗原種類到第一地點(diǎn)下游的地點(diǎn)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的兩步方法，其中液體緩沖劑通過干燥的標(biāo)記試劑上游的緩沖劑口施加。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的兩步方法，其中液體緩沖劑從緩沖劑口輸送到與側(cè)向流基質(zhì)流體連通的緩沖劑井。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的兩步方法，其中樣本是全血樣本且設(shè)備適合于過濾樣本且將經(jīng)過濾的大體上無紅血球的樣本輸送到側(cè)向流基質(zhì)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的兩步方法，其中通過使樣本經(jīng)過至少一層適合于將紅血球聚集在其內(nèi)的材料來過濾樣本。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的兩步方法，其中該至少一層材料包括聚集劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的兩步方法，其中經(jīng)過濾的樣本行進(jìn)到第二地點(diǎn)由第二地點(diǎn)處的可見的改變檢測(cè)到，且液體緩沖劑在檢測(cè)到可見的改變后施加。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的兩步方法，其中通過液體緩沖劑移動(dòng)的標(biāo)記試劑行進(jìn)到第二地點(diǎn)。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的兩步方法，其中標(biāo)記試劑行進(jìn)到第二地點(diǎn)由第二地點(diǎn)處的可見的改變檢測(cè)到。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的兩步方法，其中標(biāo)記試劑包括抗IgE抗體。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的兩步方法，其中樣本是全血。
12.一種用于識(shí)別樣本內(nèi)的IgE抗體的側(cè)向流免疫測(cè)定設(shè)備，其包括
提供有樣本口、樣本口上游的緩沖劑口和樣本口下游的結(jié)果窗的殼體；
樣本口上游的且適合于接收通過緩沖劑口施加的一定量的液體緩沖劑的緩沖劑井；
殼體內(nèi)的從緩沖劑井延伸到下游地點(diǎn)且包括側(cè)向流基質(zhì)的側(cè)向流路徑；
適合于結(jié)合IgE抗體的在緩沖劑井下游且在樣本口上游布置在側(cè)向流基質(zhì)上的干燥的標(biāo)記試劑，其中標(biāo)記試劑適合于通過從緩沖劑井沿側(cè)向流基質(zhì)通過的液體緩沖劑在側(cè)向流基質(zhì)內(nèi)移動(dòng)；和
在通過結(jié)果窗可見的第一地點(diǎn)在側(cè)向流基質(zhì)上在各自的位置處固定的多個(gè)IgE抗原種類。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的設(shè)備，其中側(cè)向流基質(zhì)在其上游端包括適合于將液體緩沖劑從緩沖劑井輸送到側(cè)向流基質(zhì)的上游芯體。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的設(shè)備，其中標(biāo)記試劑提供在側(cè)向流基質(zhì)的上游芯體上。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的設(shè)備，其中殼體提供有結(jié)果窗下游的控制窗，且側(cè)向流基質(zhì)在其下游端包括下游芯體，未標(biāo)記IgE抗體或抗小鼠抗體在從第一地點(diǎn)分開且在第一地點(diǎn)下游且通過控制窗可見的地點(diǎn)處固定在下游芯體上。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的設(shè)備，其中下游芯體包括在任何將液體添加到設(shè)備前通過控制窗可見的水溶性標(biāo)志。
17.根據(jù)權(quán)利要求14所述的設(shè)備，其中側(cè)向流基質(zhì)在上游芯體和下游芯體之間包括硝化纖維素基質(zhì)或聚合物基質(zhì)。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的設(shè)備，其中硝化纖維素基質(zhì)延伸到樣本口上游。
19.根據(jù)權(quán)利要求12所述的設(shè)備，其中殼體提供有一個(gè)樣本口和一個(gè)緩沖劑口，其中設(shè)備包括兩個(gè)側(cè)向流路徑、兩個(gè)結(jié)果窗和兩個(gè)控制窗，且其中每個(gè)側(cè)向流路徑與各自的結(jié)果窗和各自的控制窗相關(guān)。
20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的設(shè)備，其中兩個(gè)側(cè)向流路徑大體上平行。
21.根據(jù)權(quán)利要求12所述的設(shè)備，進(jìn)一步包括在樣本口和側(cè)向流基質(zhì)之間的血液分離系統(tǒng)。
22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的設(shè)備，其中血液分離系統(tǒng)包括至少一層適合于在其內(nèi)聚集紅血球的材料。
23.根據(jù)權(quán)利要求22所述的設(shè)備，其中血液分離系統(tǒng)包括至少一層包括聚集劑的玻璃纖維濾紙。
24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的設(shè)備，其中聚集劑包括甘露醇。
25.根據(jù)權(quán)利要求21所述的設(shè)備，其中血液分離系統(tǒng)包括從樣本口下方的位置延伸到側(cè)向流基質(zhì)的下部層，且下部層適合于提供血液分離系統(tǒng)和側(cè)向流基質(zhì)之間的流體連通。
26.根據(jù)權(quán)利要求12所述的設(shè)備，其中多個(gè)IgE抗原種類接附到固定的微粒，微粒在其表面上具有親水性基團(tuán)且其直徑小于側(cè)向流基質(zhì)的流動(dòng)通道在第一地點(diǎn)的最小內(nèi)部尺寸，微粒在第一地點(diǎn)處固定在側(cè)向流基質(zhì)上。
27.根據(jù)權(quán)利要求12所述的設(shè)備，其中殼體包括鄰近結(jié)果窗的區(qū)分了IgE抗原的各種類的地點(diǎn)的標(biāo)識(shí)。
28.根據(jù)權(quán)利要求12所述的設(shè)備，其中標(biāo)記試劑包括以金屬溶膠標(biāo)記的抗IgE抗體。
29.根據(jù)權(quán)利要求28所述的設(shè)備，其中標(biāo)記抗IgE抗體以金溶膠標(biāo)記。
30.一種用于識(shí)別樣本內(nèi)IgE抗體的套件，其包括用于收集一定量全血的毛細(xì)管和根據(jù)權(quán)利要求12所述的設(shè)備，其中設(shè)備適合于從毛細(xì)管接收一定量的全血。
31.根據(jù)權(quán)利要求30所述的設(shè)備，進(jìn)一步包括量足以移動(dòng)標(biāo)記抗體且將標(biāo)記抗體沿側(cè)向流基質(zhì)運(yùn)輸?shù)降诙攸c(diǎn)的液體緩沖劑。
32.一種用于識(shí)別樣本內(nèi)IgE抗體的兩步側(cè)向流測(cè)定方法，其包括將血液樣本施加到根據(jù)權(quán)利要求12所述的設(shè)備的樣本口，和在已經(jīng)過預(yù)先確定的時(shí)間期間后將液體緩沖劑施加到緩沖劑口。
33.一種用于識(shí)別樣本內(nèi)IgE抗體的側(cè)向流免疫測(cè)定設(shè)備，其包括
提供有至少一個(gè)樣本口、樣本口上游的至少一個(gè)緩沖劑口和樣本口下游的至少一個(gè)結(jié)果窗的殼體；
樣本口上游的且適合于接收通過緩沖劑口施加的一定量的液體緩沖劑的緩沖劑井；
殼體內(nèi)的至少兩個(gè)側(cè)向流路徑，每個(gè)側(cè)向流路徑從緩沖劑井延伸到下游地點(diǎn)且包括側(cè)向流基質(zhì)；
適合于結(jié)合IgE抗體的在緩沖劑井下游且在樣本口上游布置在每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)上的干燥的標(biāo)記試劑，其中標(biāo)記試劑適合于通過從緩沖劑井沿側(cè)向流基質(zhì)通過的液體緩沖劑在側(cè)向流基質(zhì)內(nèi)移動(dòng)；和
在通過結(jié)果窗的至少一個(gè)可見的第一地點(diǎn)在每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)上在各自的位置處固定的多個(gè)IgE抗原種類。
34.根據(jù)權(quán)利要求33所述的設(shè)備，其中殼體在結(jié)果窗下游提供有至少一個(gè)控制窗，且設(shè)備進(jìn)一步包括在從第一地點(diǎn)分開且在第一地點(diǎn)下游且通過控制窗的至少一個(gè)可見的第二地點(diǎn)處固定在每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)上的未標(biāo)記IgE抗體。
35.根據(jù)權(quán)利要求33所述的設(shè)備，其中每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)在其上游端包括適合于將液體緩沖劑從緩沖劑井運(yùn)送到側(cè)向流基質(zhì)的上游芯體。
36.根據(jù)權(quán)利要求35所述的設(shè)備，其中標(biāo)記試劑提供在每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)的上游芯體上。
37.根據(jù)權(quán)利要求34所述的設(shè)備，其中每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)在其下游端包括其上固定了未標(biāo)記IgE抗體或抗小鼠抗體的下游芯體。
38.根據(jù)權(quán)利要求37所述的設(shè)備，其中每個(gè)下游芯體包括在任何將液體添加到設(shè)備之前通過控制窗可見的水溶性標(biāo)志。
39.根據(jù)權(quán)利要求37所述的設(shè)備，其中每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)包括在上游芯體和下游芯體之間的硝化纖維素基質(zhì)，且其中固定了多個(gè)IgE抗原種類的第一地點(diǎn)在硝化纖維素基質(zhì)上。
40.根據(jù)權(quán)利要求39所述的設(shè)備，其中每個(gè)硝化纖維素基質(zhì)延伸到樣本口上游。
41.根據(jù)權(quán)利要求33所述的設(shè)備，其中殼體提供有一個(gè)樣本口和一個(gè)緩沖劑口，其中設(shè)備包括兩個(gè)側(cè)向流路徑、兩個(gè)結(jié)果窗和兩個(gè)控制窗，且其中每個(gè)側(cè)向流路徑與各自的結(jié)果窗和各自的控制窗相關(guān)。
42.根據(jù)權(quán)利要求33所述的設(shè)備，進(jìn)一步包括在樣本口和側(cè)向流基質(zhì)之間的血液分離系統(tǒng)。
43.根據(jù)權(quán)利要求42所述的設(shè)備，其中血液分離系統(tǒng)包括從樣本口下方的位置延伸到每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)的下部層，且下部層適合于提供血液分離系統(tǒng)和每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)之間的流體連通。
44.根據(jù)權(quán)利要求33所述的設(shè)備，其中多個(gè)IgE抗原種類接附到固定的微粒，微粒在其表面上具有親水性基團(tuán)且其直徑小于側(cè)向流基質(zhì)的流動(dòng)通道在第一地點(diǎn)的最小內(nèi)部尺寸，微粒在第一地點(diǎn)處固定在側(cè)向流基質(zhì)上。
45.根據(jù)權(quán)利要求33所述的設(shè)備，其中殼體包括鄰近結(jié)果窗的區(qū)分了IgE抗原的各種類的地點(diǎn)的標(biāo)識(shí)。
46.根據(jù)權(quán)利要求33所述的設(shè)備，其中標(biāo)記試劑包括以金屬溶膠標(biāo)記的抗IgE抗體。
47.根據(jù)權(quán)利要求46所述的設(shè)備，其中標(biāo)記抗IgE抗體以金溶膠標(biāo)記。
48.一種用于識(shí)別樣本內(nèi)IgE抗體的套件，其包括用于收集一定量全血的毛細(xì)管和根據(jù)權(quán)利要求33所述的設(shè)備，其中設(shè)備適合于從毛細(xì)管接收一定量的全血。
49.根據(jù)權(quán)利要求48所述的套件，進(jìn)一步包括量足以移動(dòng)標(biāo)記抗體且將標(biāo)記抗體沿側(cè)向流基質(zhì)運(yùn)輸?shù)降诙攸c(diǎn)的液體緩沖劑。
50.一種用于識(shí)別樣本內(nèi)IgE抗體的兩步側(cè)向流測(cè)定方法，其包括將血液樣本施加到根據(jù)權(quán)利要求33所述的設(shè)備的樣本口，和在已經(jīng)過預(yù)先確定的時(shí)間期間后將液體緩沖劑施加到緩沖劑口。
51.一種用于檢測(cè)包括多個(gè)非特定結(jié)合對(duì)成員的樣本內(nèi)的特定結(jié)合對(duì)的第一成員的側(cè)向流測(cè)定設(shè)備，該設(shè)備包括
提供有一個(gè)樣本口、樣本口上游的一個(gè)緩沖劑口、樣本口下游的至少一個(gè)結(jié)果窗、和選擇地在結(jié)果窗下游的至少一個(gè)控制窗的殼體；
樣本口上游的且適合于接收通過緩沖劑口施加的一定量的液體緩沖劑的緩沖劑井；
殼體內(nèi)的至少兩個(gè)側(cè)向流路徑，每個(gè)側(cè)向流路徑從緩沖劑井延伸到下游地點(diǎn)且包括側(cè)向流基質(zhì)；
能與特定結(jié)合對(duì)的第一成員結(jié)合的干燥的標(biāo)記試劑，標(biāo)記試劑在緩沖劑井下游且在樣本口上游布置在每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)上，其中標(biāo)記試劑適合于通過從緩沖劑井沿側(cè)向流基質(zhì)通過的液體緩沖劑在側(cè)向流基質(zhì)內(nèi)移動(dòng)；和
在通過結(jié)果窗可見的第一地點(diǎn)處在每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)上固定的特定結(jié)合對(duì)的第二成員。
52.根據(jù)權(quán)利要求51所述的設(shè)備，進(jìn)一步包括一定量的特定結(jié)合對(duì)的第一成員，其未標(biāo)記且在第一地點(diǎn)下游且從第一地點(diǎn)分開且通過控制窗的至少一個(gè)可見的第二地點(diǎn)處固定在每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)上。
53.根據(jù)權(quán)利要求51所述的設(shè)備，進(jìn)一步包括在樣本口和側(cè)向流基質(zhì)之間的血液分離系統(tǒng)，其中血液分離系統(tǒng)包括至少一層適合于在其內(nèi)聚集紅血球的材料。
54.根據(jù)權(quán)利要求53所述的設(shè)備，其中血液分離系統(tǒng)包括從樣本口下方的位置延伸到每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)的下部層，且下部層適合于提供血液分離系統(tǒng)和每個(gè)側(cè)向流基質(zhì)之間的流體連通。
55.一種用于檢測(cè)包括多個(gè)非特定結(jié)合對(duì)成員的樣本內(nèi)的特定結(jié)合對(duì)的第一成員的側(cè)向流測(cè)定設(shè)備，其包括
提供有樣本口、樣本口上游的緩沖劑口、樣本口下游的結(jié)果窗和結(jié)果窗下游的控制窗的殼體；
樣本口上游的且適合于接收通過緩沖劑口施加的一定量的液體緩沖劑的緩沖劑井；
殼體內(nèi)的側(cè)向流路徑，側(cè)向流路徑從緩沖劑井延伸到控制窗且包括側(cè)向流基質(zhì)；
在緩沖劑井下游且在樣本口上游布置在側(cè)向流基質(zhì)上的干燥的標(biāo)記試劑，其中標(biāo)記試劑適合于通過從緩沖劑井沿側(cè)向流基質(zhì)通過的液體緩沖劑在側(cè)向流基質(zhì)內(nèi)移動(dòng)，標(biāo)記試劑能與特定結(jié)合對(duì)的第一成員結(jié)合；
在通過結(jié)果窗可見的第一地點(diǎn)處在側(cè)向流基質(zhì)上固定的特定結(jié)合對(duì)的第二成員；和
能與標(biāo)記試劑結(jié)合的未標(biāo)記試劑，未標(biāo)記試劑在第一地點(diǎn)下游且從第一地點(diǎn)分開且通過控制窗可見的第二地點(diǎn)處固定在側(cè)向流基質(zhì)上。
56.一種用于檢測(cè)包括多個(gè)非特定結(jié)合對(duì)成員的樣本內(nèi)的特定結(jié)合對(duì)的第一成員的兩步側(cè)向流測(cè)定方法，該方法包括
將樣本施加到具有在第一地點(diǎn)處固定的特定結(jié)合對(duì)的第二成員的側(cè)向流基質(zhì)；
允許樣本沿側(cè)向流基質(zhì)行進(jìn)通過固定的特定結(jié)合對(duì)的第二成員到第一地點(diǎn)下游的第二地點(diǎn)；
將液體緩沖劑施加到側(cè)向流基質(zhì)以移動(dòng)在將樣本輸送到側(cè)向流基質(zhì)的上游地點(diǎn)處在側(cè)向流基質(zhì)上干燥的標(biāo)記試劑，標(biāo)記試劑能與特定結(jié)合對(duì)的第一成員結(jié)合；和
允許通過液體緩沖劑移動(dòng)的標(biāo)記試劑沿側(cè)向流基質(zhì)行進(jìn)通過固定的特定結(jié)合對(duì)的第二成員到第一地點(diǎn)下游的地點(diǎn)。
全文摘要
用于檢測(cè)包括多個(gè)非特定結(jié)合對(duì)成員的樣本內(nèi)的特定結(jié)合對(duì)的第一成員的側(cè)向流測(cè)定設(shè)備和方法適合于兩步確定。在第一個(gè)實(shí)施例中，用于識(shí)別樣本內(nèi)的IgE抗體的兩步側(cè)向流測(cè)定方法包括將樣本施加到設(shè)備的樣本口，其中設(shè)備適合于將樣本輸送到在第一地點(diǎn)處具有多個(gè)固定在各位置的IgE抗原種類的側(cè)向流基質(zhì)。兩步方法進(jìn)一步包括允許樣本沿側(cè)向流基質(zhì)行進(jìn)通過固定的多個(gè)IgE抗原種類到第一地點(diǎn)下游的第二地點(diǎn)，將液體緩沖劑施加到側(cè)向流基質(zhì)以移動(dòng)標(biāo)記試劑，標(biāo)記試劑適合于結(jié)合抗IgE抗體且在將經(jīng)過濾的樣本輸送到側(cè)向流基質(zhì)的上游地點(diǎn)處干燥在側(cè)向流基質(zhì)上，和允許通過液體緩沖劑移動(dòng)的標(biāo)記試劑沿側(cè)向流基質(zhì)行進(jìn)通過固定的多個(gè)IgE抗原種類到第一地點(diǎn)下游的地點(diǎn)。進(jìn)一步的實(shí)施例包括附加的側(cè)向流免疫測(cè)定設(shè)備和用于識(shí)別樣本內(nèi)的IgE抗體的方法。
文檔編號(hào)G01N33/68GK101184999SQ200680017931
公開日2008年5月21日 申請(qǐng)日期2006年5月23日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月23日
發(fā)明者G·倫德斯特龍, P·馬特森, P·克里斯托弗 申請(qǐng)人:法迪亞股份有限公司