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一種具有蛋白質(zhì)分子印記的超順磁性復(fù)合納米球及其制備方法與應(yīng)用與流程

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一種具有蛋白質(zhì)分子印記的超順磁性復(fù)合納米球及其制備方法與應(yīng)用與流程

技術(shù)特征:
1.一種具有蛋白質(zhì)分子印記的超順磁性復(fù)合納米球的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:(1)制備聚甲基丙烯酸甲酯磁性復(fù)合納米球;(2)將步驟(1)中制備的聚甲基丙烯酸甲酯磁性復(fù)合納米球均勻分散于緩沖溶液中,加入蛋白質(zhì)作為模板分子,在冰浴下探頭超聲5~15min,然后再室溫下磁力攪拌0.5-3h;(3)加入多巴胺,在冰浴下探頭超聲5~15min,然后再室溫下磁力攪拌1-12h,多巴胺在聚甲基丙烯酸甲酯磁性復(fù)合納米球表面自聚合并包裹蛋白質(zhì)模板分子,形成外殼層,得到包裹蛋白質(zhì)模板分子的超順磁性復(fù)合納米球;(4)在外加磁場(chǎng)下,利用復(fù)合納米球的超順磁性進(jìn)行磁分離,棄去未復(fù)合成功的聚多巴胺和緩沖溶液,再用蛋白洗脫液充分洗滌上述分離步驟中得到的復(fù)合納米球,除去蛋白質(zhì)模板分子,在外殼層中形成與所述蛋白質(zhì)模板分子尺寸相對(duì)應(yīng)的空腔,即蛋白分子印記,然后用去離子水充分洗滌即制得所述具有蛋白分子印記的超順磁性復(fù)合納米球;所得具有蛋白質(zhì)分子印記的超順磁性復(fù)合納米球包括超順磁性納米顆粒、聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)和聚多巴胺(PDA),所述聚甲基丙烯酸甲酯包裹超順磁性納米顆粒構(gòu)成復(fù)合納米球的內(nèi)核,所述聚多巴胺包裹在所述內(nèi)核的外圍構(gòu)成復(fù)合納米球的外殼層,所述外殼層含有蛋白質(zhì)分子印記。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述制備方法,其特征在于,包括以下步驟:(1)制備羥基功能化的聚甲基丙烯酸甲酯磁性復(fù)合納米球:1)配制磁流體:將超順磁性納米顆粒均勻分散于正己烷中形成磁流體,2)形成微乳液:將富羥基表面活性劑溶解于水中,與所述磁流體和甲基丙烯酸甲酯單體充分混合,超聲振蕩8min以上形成微乳液,3)聚合反應(yīng):在保護(hù)氣氛下將步驟2)中的微乳液攪拌加熱,加入引發(fā)劑進(jìn)行聚合反應(yīng),反應(yīng)結(jié)束后,經(jīng)磁分離、去離子水洗滌,獲羥基功能化的聚甲基丙烯酸甲酯磁性復(fù)合納米球;(2)將步驟(1)中制備的羥基功能化的聚甲基丙烯酸甲酯磁性復(fù)合納米球均勻分散于緩沖溶液中,加入蛋白質(zhì)作為模板分子,在冰浴下探頭超聲5~15min,然后再室溫下磁力攪拌0.5-3h;(3)加入多巴胺,在冰浴下探頭超聲5~15min,然后再室溫下磁力攪拌4~6h,多巴胺在聚甲基丙烯酸甲酯磁性復(fù)合納米球表面自聚合并包裹蛋白質(zhì)模板分子,形成外殼層,得到包裹蛋白質(zhì)模板分子的超順磁性復(fù)合納米球;(4)在外加磁場(chǎng)下,利用復(fù)合納米球的超順磁性進(jìn)行磁分離,棄去未復(fù)合成功的聚多巴胺和緩沖溶液,再用蛋白洗脫液充分洗滌上述分離步驟中得到的復(fù)合納米球,除去蛋白質(zhì)模板分子,在外殼層中形成與所述蛋白質(zhì)模板分子尺寸相對(duì)應(yīng)的空腔,即蛋白質(zhì)分子印記,然后用去離子水充分洗滌即制得所述具有蛋白質(zhì)分子印記的超順磁性復(fù)合納米球,所得具有蛋白質(zhì)分子印記的超順磁性復(fù)合納米球包括超順磁性納米顆粒、聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)和聚多巴胺(PDA),所述聚甲基丙烯酸甲酯包裹超順磁性納米顆粒構(gòu)成復(fù)合納米球的內(nèi)核,所述復(fù)合納米球的內(nèi)核的外圍具有羥基化改性層,所述聚多巴胺包裹在所述內(nèi)核的外圍構(gòu)成復(fù)合納米球的外殼層,所述外殼層含有蛋白質(zhì)分子印記。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述制備方法,其特征在于,其特征在于,所述富羥基表面活性劑為三甘醇、吐溫-80、司盤、聚乙二醇辛基苯基醚中的至少一種。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述制備方法,其特征在于,其特征在于,所述富羥基表面活性劑為三甘醇和吐溫-80,所述三甘醇和吐溫-80的體積比為8~10:1。5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述制備方法,其特征在于,所述蛋白洗脫液為十二烷基磺酸鈉和冰醋酸的混合溶液。6.根據(jù)權(quán)利要求2所述制備方法,其特征在于,所述羥基功能化的聚甲基丙烯酸甲酯磁性復(fù)合納米球在所述緩沖溶液中的濃度為1~5mg/mL,所述蛋白質(zhì)模板分子在所述緩沖溶液中的濃度為0.1~0.8mg/mL,所述多巴胺在所述緩沖溶液中的濃度為0.5~2mg/mL。7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述制備方法,其特征在于,所述蛋白洗脫液為十二烷基磺酸鈉(SDS)和冰醋酸的混合溶液,其中十二烷基磺酸鈉(SDS)的質(zhì)量體積濃度為1mg/ml,冰醋酸的體積濃度為3%,其余為水。8.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述制備方法,其特征在于,所述緩沖溶液為pH=8的濃度為10mM的tris緩沖溶液。9.一種根據(jù)權(quán)利要求1或2中所述的具有蛋白質(zhì)分子印記的超順磁性復(fù)合納米球的應(yīng)用,其特征在于,將其用于分離特定的蛋白質(zhì)。10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的具有蛋白質(zhì)分子印記的超順磁性復(fù)合納米球的應(yīng)用,其特征在于,具體方法為:根據(jù)所要分離的目標(biāo)蛋白的種類制備具有該目標(biāo)蛋白質(zhì)分子印記的超順磁性復(fù)合納米球,將所述超順磁性復(fù)合納米球與被分離對(duì)象充分混合接觸,使目標(biāo)蛋白質(zhì)吸附到分子印記中,然后在外加磁場(chǎng)的作用下進(jìn)行磁分離,得到吸附了目標(biāo)蛋白質(zhì)的超順磁性復(fù)合納米球,將目標(biāo)蛋白質(zhì)從超順磁性復(fù)合納米球上洗脫,得到目標(biāo)蛋白質(zhì)。
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