專利名稱：：氣流吹射制備大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及大分子印跡聚合物微球的制備方法，特別是涉及一種氣流吹射制備大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球的方法。技術(shù)背景大分子印跡如蛋白質(zhì)印跡和重結(jié)合技術(shù)在分離、提純、生物傳感器和診斷方面得到廣泛應(yīng)用。水凝膠類材料作為一種疏松多孔軟濕材料，在蛋白質(zhì)印跡領(lǐng)域逐步得到重視。天然聚多糖類材料如海藻酸鹽和瓊脂糖等，由于具有較高含水量、溫和的凝膠條件以及很好的生物相容性而適合作蛋白質(zhì)印跡基材。目前制備蛋白質(zhì)印跡水凝膠微球的主要途徑是懸浮體系中的凝膠化或聚合反應(yīng)。在反相懸浮凝膠化工藝里，凝膠液滴在機械力攪拌下均勻分散于疏水懸浮介質(zhì)中，進而凝膠化生成凝膠微球。調(diào)節(jié)表面活性劑和攪拌速度可以獲得很好的均一性和球形度[陸書來，龐興收，張洪剛，蛋白質(zhì)印跡軟濕凝膠磁性雜化微球的磁感應(yīng)和特異識別性研究，國際高分子化學研討會，2004，126]。常用的懸浮介質(zhì)有垸烴或植物油。[張鳳菊，成國祥，英曉光，乳液和大分子模板海藻酸鹽基聚合物微球，反應(yīng)功能高分子，66(2006)712-719;李宇平，英曉光，李寅，成國祥，反相懸浮凝膠法制備蛋白質(zhì)印跡瓊脂糖微球，中國科技論文在線。http:〃雨.paper,edu.cn2008,200808-93]。雖然這些方法操作方便，可批量生產(chǎn)，然而殘留的油和表面活性劑不易完全去除，很可能造成污染，影響模板洗脫和重結(jié)合過程。使用水相懸浮介質(zhì)可有效避免上述情況。滴注法和噴射法是常用的兩種思路。滴注法(或射流法)可以用于制備細胞黏附性微球，細菌微囊和釋藥載體等。然而存在的問題是產(chǎn)率低下以及直徑過大(1.02.5mm)。為了實現(xiàn)連續(xù)化生產(chǎn)，可以對設(shè)備進行一些改進，如使用噴射氣流促使液滴以200m1/(小時針)的速率滴下，可以制備直徑在15mm的微球；可以通過將若干支針管排列于基座之上形成陣列來提高生產(chǎn)規(guī)模[R.E.Dorian,KC.Cochrum，膠囊微粒的生產(chǎn)過程。美國專利，4，814，274.1996];也可以用離心力代替重力實現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)[丄P.Renaudeaux，J.M.Chich印ortiche，高流速單分散噴霧生成器。歐洲專利，EP0446134.1991]。為了控制微球的粒徑，迭加同軸氣流可以使下落液滴的直徑減小至10120um;將針尖加工成15°45°的斜角可以將微球直徑減小至25~300um[J.Klein，J.Stock,andK.-D.Vorl叩，歐洲應(yīng)用微生物和生物技術(shù)，18(1983)86-91]。盡管上述技術(shù)從一個角度成功降低了微球粒徑或者從另一個角度提高了生產(chǎn)效率，然而卻都未能同時達到這兩個目的。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種氣流吹射制備大分子印跡海藻酸鹽3聚合物微球的方法。本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下氣流吹射制備大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球的方法，包括下述步驟(1)按質(zhì)量比為13:100的比例，將海藻酸鈉溶解于濃度為520umol/L的pH為4.09.0的蛋白質(zhì)分子水溶液中，得到海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液；(2)將所述海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液裝入針孔內(nèi)徑為0.330.75mm的注射器中，將注射器針頭豎直向下設(shè)置；(3)將表壓強為1.010.OkPa的工業(yè)氮氣，通過內(nèi)徑為0.5mm2.Omm的導管引至距注射器針尖2ram10mm處，所述導管的開口向斜下方，與注射器針頭成15度75度角；(4)在注射器推桿尾部施加垂直向下的質(zhì)量為200g500g的重物，使海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液滴入盛有質(zhì)量濃度為1.(F。10.(F。的CaCl2水溶液的容器中，所述注射器針尖距所述CaCl2水溶液液面的垂直距離為2.0cm8.Ocm，液體深度為1.0cm10.5cm;(5)滴加完畢后，靜置10min40min，去除CaCl2水溶液，得到微球；(6)將所述微球浸入盛有pH為6.09.0的Tris-HC1緩沖液中，浸泡36小時54小時移除模板蛋白分子，每2040分鐘搖動或攪拌1次，每610小時更換一次新鮮的Tris-HCl緩沖液，將移除模板的微球置于去離子水中靜置3648小時，制得大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球。所述蛋白質(zhì)分子水溶液中的蛋白質(zhì)分子為牛血清白蛋白、卵白蛋白、細胞色素C、溶菌酶、血紅蛋白或免疫球蛋白。所述海藻酸鹽為海藻酸鈣和海藻酸鈉。本發(fā)明的氣流吹射制備大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球的方法制得大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球，其平均直徑為300590微米，直徑標準偏差為15.820.0微米，按質(zhì)量百分比由2.5%15%的海藻酸鹽和85%97.5%的水組成。除了具備一般大分子印跡水凝膠聚合物微球的印跡效率、重結(jié)合特異性以及普通水相滴注法或離心法微球無污染和易分離等特點外，還能兼顧粒徑可控(達到較小的水平300590um)和連續(xù)化生產(chǎn)(600ml/(小時針))的要求，提高了生產(chǎn)效率，可進行實驗室及中試大量生產(chǎn)。圖1為本發(fā)明氣流吹射制備大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球的方法實驗裝置圖；圖2本發(fā)明的制備過程中液滴的受力情況Fg+Fp+Fccos30。-Fz=兀aY;其中的30°是氣流與垂直方向夾角，實際可以取15°75°之間各種度數(shù)；圖3微球體積和吹射氣流壓強之間的關(guān)系(圖示壓強為表壓強)；圖4不同吹射壓強下的微球粒徑統(tǒng)計柱狀分布圖；圖5不同壓強的吹射氣流下制得的微球形貌光學照片；圖6牛血清白蛋白印跡海藻酸鹽水凝膠微球重結(jié)合動力學曲線；圖7不同粒徑的牛血清白蛋白印跡海藻酸鹽水凝膠微球重結(jié)合動力學曲線；圖8不同粒徑微球的印跡效率；圖9印跡微球及非印跡微球的重結(jié)合熱力學曲線。具體實施方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步的說明。實施例1氣流吹射制備大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球的方法，包括下述步驟(1)按質(zhì)量比為2:100的比例，將海藻酸鈉溶解于濃度為15ixmol/L的pH為7.0的蛋白質(zhì)分子水溶液中，得到海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液；將上述溶液靜置脫泡20小時；(2)將所述海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液裝入針孔內(nèi)徑為0.50mm的注射器中，將注射器針頭豎直向下設(shè)置；注射器可以固定于鐵架臺上；(3)將表壓強為1.0kPa的工業(yè)氮氣，通過內(nèi)徑為0.5mm的導管引至距注射器針尖2mm處，所述導管的開口向斜下方，與注射器針頭成75度角；(4)在注射器推桿尾部施加垂直向下的質(zhì)量為200g的重物，使海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液滴入盛有質(zhì)量濃度為1.0y。的CaCl2水溶液的容器中，所述注射器針尖距所述CaCl2水溶液液面的垂直距離為2.0cm，液體深度為1.0cm;(5)滴加完畢后，靜置10min，去除CaCl2水溶液，得到微球；(6)將所述微球浸入盛有pH為7.0的Tris-HC1緩沖液中，浸泡48小時移除模板蛋白分子，每30分鐘搖動1次，每8小時更換一次新鮮的Tris-HC1緩沖液，將移除模板的微球置于去離子水中靜置36小時，制得蛋白質(zhì)分子印跡海藻酸鹽聚合物微球。本實施例中的蛋白質(zhì)選的是為卵白蛋白。其中海藻酸鹽的主要成分是海藻酸鈣，少量的海藻酸鈉。實施例2氣流吹射制備大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球的方法，包括下述步驟(1)按質(zhì)量比為1:100的比例，將海藻酸鈉溶解于濃度為20umol/L的pH為6.0的蛋白質(zhì)分子水溶液中，得到海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液；將上述溶液靜置脫泡20小時；(2)將所述海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液裝入針孔內(nèi)徑為0.33mm的注射器中，將注射器針頭豎直向下設(shè)置；(3)將表壓強為5.0kPa的工業(yè)氮氣，通過內(nèi)徑為1.0mm的導管引至距注射器針尖6mm處，所述導管的開口向斜下方，與注射器針頭成60度角；(4)在注射器推桿尾部施加垂直向下的質(zhì)量為300g的重物，使海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液滴入盛有質(zhì)量濃度為3.(m的CaCl2水溶液的容器中，所述注射器針尖距所述CaC;U7jC溶液液面的垂直距離為4.Ocm,液體深度為3cm;(5)滴加完畢后，靜置20min，去除CaCl2水溶液，得到微球；(6)將所述微球浸入盛有pH為6.0的Tris-HCl緩沖液中，浸泡36小時移除模板蛋白分子，每20分鐘搖動1次，每6小時更換一次新鮮的Tris-HC1緩沖液，將移除模板的微球置于去離子水中靜置48小時，制得大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球。本實施例中的蛋白質(zhì)選的是為牛血清白蛋白。其中海藻酸鹽的主要成分是海藻酸鈣，少量的海藻酸鈉。實施例3氣流吹射制備大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球的方法，包括下述步驟(1)按質(zhì)量比為3:100的比例，將海藻酸鈉溶解于濃度為10ixmol/L的pH為4.0的蛋白質(zhì)分子水溶液中，得到海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液；將上述溶液靜置脫泡20小時；(2)將所述海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液裝入針孔內(nèi)徑為0.60mra的注射器中，將注射器針頭豎直向下設(shè)置；(3)將表壓強為7.0kPa的工業(yè)氮氣，通過內(nèi)徑為1.5mm的導管引至距注射器針尖8mm處，所述導管的開口向斜下方，與注射器針頭成45度角；(4)在注射器推桿尾部施加垂直向下的質(zhì)量為400g的重物，使海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液滴入盛有質(zhì)量濃度為5.0%的CaCl2水溶液的容器中，所述注射器針尖距所述CaCl2水溶液液面的垂直距離為6.Ocm，液體深度為5cm;(5)滴加完畢后，靜置30min，去除CaCl2水溶液，得到微球；(6)將所述微球浸入盛有pH為9.0的Tris-HC1緩沖液中，浸泡48小時移除模板蛋白分子，每40分鐘攪拌1次，每8小時更換一次新鮮的Tris-HC1緩沖液，將移除模板的微球置于去離子水中靜置40小時，制得大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球。本實施例中的蛋白質(zhì)選的是為細胞色素C。其中海藻酸鹽的主要成分是海藻酸鈣，少量的海藻酸鈉。實施例4氣流吹射制備大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球的方法，包括下述步驟(1)按質(zhì)量比為2:100的比例，將海藻酸鈉溶解于濃度為5umol/L的pH為9.0的蛋白質(zhì)分子水溶液中，得到海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液；將上述溶液靜置脫泡20小時；(2)將所述海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液裝入針孔內(nèi)徑為0.i5mm的注射器中，將注射器針頭豎直向下設(shè)置；(3)將表壓強為10.0kPa的工業(yè)氮氣，通過內(nèi)徑為2.0咖的導管引至距注射器針尖lOrnm處，所述導管的開口向斜下方，與注射器針頭成15度角；(4)在注射器推桿尾部施加垂直向下的質(zhì)量為500g的重物，使海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液滴入盛有質(zhì)量濃度為10.0%的CaCl2水溶液的容器中，所述注射器針尖距所述CaCl2水溶液液面的垂直距離為8.Ocm，液體深度為10.5cm;(5)滴加完畢后，靜置40min，去除CaCl2水溶液，得到微球；(6)將所述微球浸入盛有pH為8.0的Tris-HC1緩沖液中，浸泡54小時移除模板蛋白分子，每30分鐘攪拌1次，每10小時更換一次新鮮的Tris-HC1緩沖液，將移除模板的微球置于去離子水中靜置38小時，制得大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球。本實施例中的蛋白質(zhì)選的是為溶菌酶，也可以選用血紅蛋白或免疫球蛋白替代溶菌酶組成新的實施例。其中海藻酸鹽的主要成分是海藻酸鈣，少量的海藻酸鈉。6實施例5氣流吹射制備大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球的方法，包括下述步驟(1)配制弱酸性緩沖溶液(pH=4.87)，將模板蛋白質(zhì)分子牛血清白蛋白(BSA)溶解于5ml的緩沖液中，配制濃度為20txmol/l的溶液；將海藻酸鈉溶于上述溶液中，常溫下充分混合溶解，使其濃度達到3%(wt/wt%)，得到海藻酸鈉/牛血清白蛋白復(fù)合溶液；(2)將所述海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液裝入容積為lml、針孔內(nèi)徑為0.33mm(商品型號為29G)的胰島素注射用一次性注射器，將注射器針孔朝下垂直固定于鐵架臺上(如圖l所示)；(3)由鋼瓶導出表壓強為2.0265kPa的工業(yè)氮氣，通過傾斜玻璃導管引至注射器針尖附近。玻璃導管內(nèi)徑為l.Omm，氣流出口朝下，與注射器針頭成30度角(如圖2所示)，圖中蛋白質(zhì)分子印跡海藻酸鹽聚合物微球制備過程中液滴的受力情況《+,p+尸cCos30。=《=萬ar&液滴所受重力；《；注射器活塞推力；尸。氣流吹力；&液滴與針尖處的粘滯阻力。(4)在針尖出口下方放置盛有CaCl2水溶液的燒杯接取下落液滴，在注射器推桿尾部施加垂直向下的質(zhì)量為450g的重物，使海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液滴入CaCl2水溶液中，CaCl2水溶液濃度為5.0%(wt/wt%)，CaCl2溶液體積為40.0ml，液體深度為3.Ocm，液面與針尖垂直距離為2.Ocm;(5)滴加完畢后，靜置硬化30min，去除CaCl2水溶液，得到微球；(6)將所述微球浸入盛有150mlpH為7.5的Tris-HC1緩沖液中，浸泡48小時移除模板蛋白分子，為了保證分子模板的充分移除，每30分鐘搖動1次，每8小時更換一次新鮮的Tris-HQ緩沖液，對緩沖液進行紫外-可見光度檢測(U-1800,HITACHI)不能檢測出萃取液中的BSA分子時，可以認為分子模板己洗脫完全；將移除模板的微球置于150ml去離子水中靜置38小時，制得大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球(如圖5b所示)。(注Tris-HC1=三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽，lmol/LTris-NaClbuffer配法的比例如下121.lgTris+70.2gNaCl+800ml水;pH=7.5是加入70ml的HC1)對比例1:制備大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球(沒有外加氣流)(1)配制弱酸性緩沖溶液(pH=4.87)，將模板蛋白質(zhì)分子牛血清白蛋白(BSA)溶解于5ml的緩沖液中，配制濃度為20pmol/l的溶液；將海藻酸鈉溶于上述溶液中，常溫下充分混合溶解，使其濃度達到3%(rt/wt%)，得到海藻酸鈉/牛血清白蛋白復(fù)合溶液；將上述復(fù)合溶液靜置脫泡20小時；(2)將所述海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液裝入容積為lml、針孔內(nèi)徑為0.33mm(商品型號為29G)的胰島素注射用一次性注射器，將注射器針孔朝下垂直固定于鐵架臺上(如圖1所示)；(3)在針尖出口下方放置盛有CaCl2水溶液的燒杯接取下落液滴，在注射器推桿尾部施加垂直向下的質(zhì)量為450g的重物，使海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液滴入CaCl2水溶液中，CaCl2水溶液濃度為5.0%(wt/wt%)，CaCl2溶液體積為40.0ml，液體深度為3.Ocm，液面與針尖垂直距離為2.0cm;(4)滴加完畢后，靜置硬化30min，去除CaCl2水溶液，得到微球；(5)將所述微球浸入盛有150mlpH為7.5的Tris-HC1緩沖液中，浸泡48小時移除模板蛋白分子，為了保證分子模板的充分移除，每30分鐘搖動1次，每8小時更換一次新鮮的Tris-HC1緩沖液，對緩沖液進行紫外-可見光度檢測(U-1800，HITACHI)不能檢測出萃取液中的BSA分子時，可以認為分子模板已洗脫完全；將移除模板的微球置于150ml去離子水中靜置38小時，制得大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球(如圖5a所示)。將實施例5中制備的大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球的體積作為吹射氣壓壓強的函數(shù)繪制成曲線，如圖3所示；不同吹射壓強下的微球粒徑統(tǒng)計柱狀分布圖如圖4所示；(圖4為制得各圖樣本所需壓強分別為No.1:2.0265kPa(20cmH20);No.2:3.0398kPa(30cmH20);No.3:4.053kPa(40cmH20);No.4:5.066kPa(50cmH20)。吹射氣流表壓強、微球直徑數(shù)據(jù)統(tǒng)計結(jié)果見表l:其中的各項參數(shù)依次為，樣品編號、氮氣流表壓強、平均直徑、標準差、直徑中值以及多分散系數(shù)。,將實施例5中制備的大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球微球放在連有數(shù)碼相機的光學顯微鏡下(型號Axiovert25CMicroscope.廠家CarlZeissCo.Ltd.Germany)拍攝得到附圖5b-圖5e，圖5中制得各圖樣品所需壓強分別為a:0kPa;b:2.0265kPa;c:3.0398kPa;d:4.053kPa;e:5.066kPa將對比例1制備的大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球拍攝得到附圖5a。將實施例5制備的大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球稱取相同質(zhì)量(1.500g)，置于Na+離子強度為0-0.5mol/kg(約為5.9Mw/v)和Ca"離子強度為0-0.5mol/kg(約為2.挑w/v)的若干組BSA蛋白質(zhì)溶液中，利用HCl調(diào)節(jié)溶液pH4.7。待吸附平衡時測定溶液濃度(紫外可見分光光度計，U-1800，HITACHI)并計算出微球印跡效率及一級反應(yīng)速率常數(shù)(如圖6a和6b所示)，繪制不同粒徑的牛血清白蛋白BSA印跡海藻酸鹽水凝膠微球重結(jié)合動力學曲線，如圖7a所示。a.微球的重結(jié)合量-時間曲線，所用樣品直徑分別為300izm;395ura;爭588um,b.重結(jié)合一級反應(yīng)動力學曲線，樣本直徑分別為▲:300uni;395iim;參588wm，一級反應(yīng)動力學系數(shù)^(/an必/G^，Q是印跡微球的重結(jié)合量，根據(jù)圖7a的結(jié)果可以計算出不同粒徑微球的印跡效率，如圖8所示，圖8中樣品直徑分別為300lim;■:395um;爭588ixro。可以發(fā)現(xiàn)粒徑較小的微球具有較高的重結(jié)合速率和初始印跡效率，這是由于其比表面積較高、擴散性能較好所導致。同時由印跡微球及非印跡微球的重結(jié)合熱力學曲線可以看出，直徑越小的樣品，重結(jié)合能力越強(如圖9所示)。'比較各種粒徑微球的印跡特異性(如表2所示)，可以發(fā)現(xiàn)印跡了BSA蛋白分子模板的微球，對于非模板蛋白(0VA)的選擇系數(shù)a均高于l，證明微球具有選擇性；同時發(fā)現(xiàn)粒徑越大的微球，其選擇系數(shù)越大，其原因是體積較大的微球，溶脹率相對較小，保持印跡準確性的能力較高。表l.制備不同直徑樣品所需氮氣流的表壓強和相應(yīng)直徑統(tǒng)計數(shù)據(jù)8<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>PDI由以下方法計算PDI=《/d其中《是標準差，c/是平均直徑表2.不同直徑的BSA印跡微球的分離因子《D和選擇系數(shù)a<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>權(quán)利要求1.氣流吹射制備大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球的方法，其特征是包括下述步驟(1)按質(zhì)量比為1～3∶100的比例，將海藻酸鈉溶解于濃度為5～20μmol/L的pH為4.0～9.0的蛋白質(zhì)分子水溶液中，得到海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液；(2)將所述海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液裝入針孔內(nèi)徑為0.33～0.75mm的注射器中，將注射器針頭豎直向下設(shè)置；(3)將表壓強為1.0～10.0kPa的工業(yè)氮氣，通過內(nèi)徑為0.5mm～2.0mm的導管引至距注射器針尖2mm～10mm處，所述導管的開口向斜下方，與注射器針頭成15度～75度角；(4)在注射器推桿尾部施加垂直向下的質(zhì)量為200g～500g的重物，使海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液滴入盛有質(zhì)量濃度為1.0％～10.0％的CaCl2水溶液的容器中，所述注射器針尖距所述CaCl2水溶液液面的垂直距離為2.0cm～8.0cm，液體深度為1.0cm～10.5cm；(5)滴加完畢后，靜置10min～40min，去除CaCl2水溶液，得到微球；(6)將所述微球浸入盛有pH為6.0～9.0的Tris-HCl緩沖液中，浸泡36小時～54小時移除模板蛋白分子，每20～40分鐘搖動或攪拌1次，每6～10小時更換一次新鮮的Tris-HCl緩沖液，將移除模板的微球置于去離子水中靜置36～48小時，制得大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的氣流吹射制備大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球的方法，其特征是所述蛋白質(zhì)分子水溶液中的蛋白質(zhì)分子為牛血清白蛋白、卵白蛋白、細胞色素C、溶菌酶、血紅蛋白或免疫球蛋白。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種氣流吹射制備大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球的方法，其特征是所述海藻酸鹽為海藻酸鈣和海藻酸鈉。全文摘要本發(fā)明公開了一種氣流吹射制備大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球的方法，包括下述步驟將配制的海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液裝入針孔內(nèi)徑為0.33～0.75mm的注射器中，將注射器針頭豎直向下設(shè)置；將氮氣通過導管引至距注射器針尖2mm～10mm處，導管的開口向斜下方，與注射器針頭成15度～75度角；在注射器推桿尾部施加垂直向下的重物，使海藻酸鈉/蛋白質(zhì)復(fù)合水溶液滴入盛有CaCl₂水溶液的容器中；靜置，去除CaCl₂水溶液，得到微球；將微球浸入Tris-HCl緩沖液中，浸泡移除模板蛋白分子，制得大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球。本發(fā)明的方法降低了大分子印跡海藻酸鹽聚合物微球的粒徑，提高了生產(chǎn)效率。文檔編號B01J13/02GK101564666SQ20091006897公開日2009年10月28日申請日期2009年5月22日優(yōu)先權(quán)日2009年5月22日發(fā)明者劉貴培,張立廣,成國祥,王月強,英曉光申請人:天津大學