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一種細(xì)胞膜定位鋅離子熒光探針及其制備方法和應(yīng)用與流程

文檔序號(hào):12695066閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種細(xì)胞膜定位鋅離子熒光探針,其特征在于:具有如下結(jié)構(gòu)通式(I):

其中4≤n≤18,并且n為整數(shù)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述細(xì)胞膜定位鋅離子熒光探針,其特征在于:以1,8-萘酰亞胺為熒光母體,酰胺-二甲基吡啶胺為識(shí)別基團(tuán),烷基長(zhǎng)鏈為定位基團(tuán),烷基鏈長(zhǎng)度為n。

3.一種權(quán)利要求1或2所述的細(xì)胞膜定位鋅離子熒光探針的制備方法,其特征是:合成步驟如下:

1)4-硝基-1,8-萘酐的合成:將重鉻酸鈉用冰醋酸按0.1-0.5g/mL比例溶解,再加入相對(duì)于重鉻酸鈉0.1-0.5倍質(zhì)量的5-硝基苊,120–150℃下回流反應(yīng)3-8小時(shí),將反應(yīng)液與2-5倍體積的冰水混合,過(guò)濾得到濾餅進(jìn)行重結(jié)晶,得到4-硝基-1,8-萘酐;

2)4-氨基-1,8-萘酐的合成:將4-硝基-1,8-萘酐用無(wú)水乙醇按0.1-0.5g/mL比例溶解,將相對(duì)于4-硝基-1,8-萘酐3-5倍質(zhì)量的氯化亞錫用濃鹽酸按1-2g/mL溶解后,逐滴滴入上述4-硝基-1,8-萘酐和無(wú)水乙醇中,80-100℃下回流反應(yīng)8-12小時(shí)過(guò)夜,反應(yīng)液用1-5mol/L的碳酸鈉溶液調(diào)中性使產(chǎn)物析出,過(guò)濾,濾餅重結(jié)晶,得到4-氨基-1,8-萘酐;

3)4-(2-氯乙酰)氨基-1,8-萘酐的合成:將4-氨基-1,8-萘酐用干燥的THF按0.01-0.05g/mL比例溶解,加入相對(duì)于4-氨基-1,8-萘酐5-10倍質(zhì)量的的氯乙酰氯,室溫下攪拌3-10小時(shí)后,反應(yīng)體系由渾濁變澄清,旋干溶劑,柱層析分離,旋干得到4-(2-氯乙酰)氨基-1,8-萘酐;

4)4-(2-二甲基吡啶胺基乙酰)氨基-1,8-萘酐的合成:將4-(2-氯乙酰)氨基-1,8-萘酐、DPA、DIPEA和KI按質(zhì)量比1:0.5-0.8:1.5-2:0.2-0.5混合,加入乙腈按0.01-0.05g/mL比例溶解4-(2-氯乙酰)氨基-1,8-萘酐,氮?dú)獗Wo(hù)下80-100℃回流8-12小時(shí),反應(yīng)結(jié)束后旋干溶劑,用旋干產(chǎn)物5-10倍質(zhì)量的甲醇重結(jié)晶,得4-(2-二甲基吡啶胺基乙酰)氨基-1,8-萘酐;

5)探針?lè)肿拥暮铣桑簩?-(2-二甲基吡啶胺基乙酰)氨基-1,8-萘酐、烷基胺按質(zhì)量比1:1-2混合,加入乙醇按0.01-0.05g/mL比例溶解4-(2-二甲基吡啶胺基乙酰)氨基-1,8-萘酐,加熱至70-90℃回流8-12小時(shí),旋干溶劑后,柱層析分離得到探針?lè)肿印?/p>

4.按照權(quán)利要求1所述細(xì)胞膜定位鋅離子熒光探針的制備方法,其特征在于:步驟4)中,所述重結(jié)晶體系為甲醇。

5.按照權(quán)利要求3所述細(xì)胞膜定位鋅離子熒光探針的制備方法,其特征在于:步驟5)中,所述柱層析的洗脫劑為二氯甲烷:甲醇=50:1,流速10-20ml/min,溫度20-25℃。

6.按照權(quán)利要求3所述細(xì)胞膜定位鋅離子熒光探針的制備方法,其特征在于:步驟5)中所述烷基胺碳鏈長(zhǎng)為4-18的整數(shù)。

7.按照權(quán)利要求3所述細(xì)胞膜定位鋅離子熒光探針的制備方法,其特征在于:步驟3)中所述柱層析的洗脫劑為二氯甲烷,流速10-20ml/min,溫度20-25℃。

8.一種權(quán)利要求1或2所述的細(xì)胞膜定位鋅離子熒光探針在對(duì)細(xì)胞膜中鋅離子的檢測(cè)或在醫(yī)學(xué)中對(duì)鋅離子的檢測(cè)中的應(yīng)用。

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