一種沙棗膠多糖的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明涉及一種沙棗膠多糖的制備方法。
【背景技術(shù)】：
[0002] 沙率（Elaeagnus angustifolia L.)、尖果沙率（E.oxycarpa Schlecht.)是胡頹 子科胡頹子屬植物，生長(zhǎng)于半干旱、干旱、半荒漠、荒漠地區(qū)，是沙漠里的"寶樹(shù)"。在美國(guó)、加 拿大、地中海沿岸、伊朗、西亞、印度地區(qū)都有分布，我國(guó)境內(nèi)新疆、青海、甘肅、內(nèi)蒙古西部 和寧夏生長(zhǎng)面積較大，產(chǎn)量高，河北、河南和東北的部分省份也有分布，據(jù)統(tǒng)計(jì)，在我國(guó)沙棗 林總面積約200萬(wàn)畝。沙棗是集多種功能為一體的經(jīng)濟(jì)型樹(shù)種。具有"強(qiáng)壯、鎮(zhèn)靜、健胃、止 瀉、利尿"等保健功效。目前廣泛應(yīng)用于食品、藥物、造紙、飼料、木材、家具等方面。
[0003] 沙棗膠是沙棗莖枝膠汁的干燥品，文獻(xiàn)記載可治療骨折，在民間用作護(hù)發(fā)劑。其主 要成分為多糖，多糖是一種天然高分子，廣泛存在于植物、微生物(真菌和細(xì)菌）、藻類(lèi)和動(dòng) 物體。是單糖通過(guò)糖苷鍵連接而成的聚合物，也是生命體不可缺少的重要組成部分，在細(xì)胞 與細(xì)胞信息交流、細(xì)胞吸附、以及免疫系統(tǒng)分子識(shí)別方面扮演著極其重要的作用。關(guān)于多糖 的研究越來(lái)越受到人們的關(guān)注，已成為當(dāng)今研究的"熱點(diǎn)"。近年來(lái)，從自然資源提取得到的 一些多糖已經(jīng)引起生物化學(xué)和藥理學(xué)領(lǐng)域的極大重視。多糖已成為天然藥物及保健品研發(fā) 中的重要組成部分，國(guó)外多數(shù)制藥公司都有從事糖類(lèi)藥物的研發(fā)。研究發(fā)現(xiàn)多糖具有抗氧 化，抗腫瘤，抗凝血及免疫調(diào)節(jié)等多種功能。我國(guó)也十分重視多糖和糖復(fù)合物的研究工作， 如國(guó)家基金委2011項(xiàng)目指南將扶持和鼓勵(lì)多糖和糖復(fù)合物的研究列入生命科學(xué)重點(diǎn)資助 方向。隨著國(guó)內(nèi)外對(duì)多糖研究的不斷深入，已建立了一系列多糖提取純化方法、結(jié)構(gòu)分析方 法及生物活性篩選方法，發(fā)現(xiàn)了許多具有重要生理活性的多糖。目前關(guān)于沙棗膠化學(xué)組成 的研究?jī)H見(jiàn)一篇報(bào)道[1]，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:沙棗膠含糖酸11.2%，由L-鼠李糖(L-rhamnose) 7 · 47%，L_阿拉伯糖（L_arabinose)53 · 15%，D_甘露糖（D_mannose)2 · 00%，D_半乳糖（D-galactose)23.28%和糖醛酸(glycuronic acid) 11 · 12%所組成，可代替阿拉伯膠使用。
[0004] 隨著社會(huì)的發(fā)展和生活質(zhì)量的提高，藥品消費(fèi)也逐漸從以化學(xué)藥品為主向以天然 資源為原料的植物藥轉(zhuǎn)變，中藥在治療、康復(fù)保健和提高人體免疫能力方面有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)， 己成為世界醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的重要組成部分。
[0005] 多糖的種類(lèi)繁多，不同種多糖其提取分離方法各不相同。多糖是極性大分子化合 物，大多采用不同溫度的水、稀堿溶液或氯化鈉水溶液作提取溶劑盡量避免在酸性條件下 提取，因?yàn)樗嵝詶l件能引起多糖中糖昔鍵的斷裂。多糖的提取方法大致分為以下幾種。
[0006] (1)溶劑提取法
[0007] 溶劑提取分為水浸提法、水加酶提取法。用水作溶劑來(lái)提取多糖，可以用熱水浸煮 提取，也可以用冷水浸提。水提取的多糖多是中性多糖。該法所得多糖提取液可直接或離心 除去不溶物;或者利用多糖不溶于高濃度乙醇的性質(zhì)，用高濃度乙酵沉淀提純多糖。
[0008] (2)酶法提取
[0009] 酶法是通過(guò)酶反應(yīng)將原料組織分解，加速有效成分的釋放和提取，選擇適宜條件 將影響提取的雜質(zhì)分解去除，促進(jìn)某些極性低的脂溶性成分轉(zhuǎn)化成糖，酶法提取中常用的 酶有蛋白酶、纖維素酶、果膠酶等。由于酶具有專(zhuān)一性和選擇性的特點(diǎn)，應(yīng)用時(shí)多采用復(fù)合 酶。同時(shí)需要注意的是一組酶之間的協(xié)同關(guān)系、底物、抑制劑和酶的濃度，酶解設(shè)備與工藝 參數(shù)等也是需要考慮的。由于酶法條件溫和、易去除雜質(zhì)、回收率高和節(jié)約能耗等優(yōu)點(diǎn)，因 此酶法提取的應(yīng)用前景十分廣闊。
[0010] ⑶超聲波提取
[0011] 超聲波對(duì)媒質(zhì)能產(chǎn)生獨(dú)特的機(jī)械振動(dòng)作用和空化作用。當(dāng)超聲波振動(dòng)時(shí)能產(chǎn)生并 傳遞強(qiáng)大的能量，使媒質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，促使有效成分進(jìn)入溶劑中。同時(shí)在液體中還會(huì)產(chǎn)生 空化作用，即在有相當(dāng)大的破壞應(yīng)力的作用下，液體內(nèi)形成空化泡的現(xiàn)象，伴隨有強(qiáng)大的沖 擊波和微聲流，從而破壞細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，使其在瞬間破裂，植物細(xì)胞內(nèi)的有效成分得以釋放、 直接進(jìn)入溶劑并充分混合，從而提高提取率。
[0012] ⑷微波提取
[0013] 微波技術(shù)應(yīng)用于提高提取得率主要因?yàn)橐韵聝牲c(diǎn)：熱效應(yīng)和細(xì)胞收縮。提取過(guò)程 中，微波輻射導(dǎo)致植物細(xì)胞內(nèi)的極性物質(zhì)產(chǎn)生大量熱量，使得細(xì)胞內(nèi)的溫度迅速上升，液態(tài) 水汽化產(chǎn)生的壓力將細(xì)胞膜和細(xì)胞壁沖破，形成微小的孔洞，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)部和細(xì)胞壁水分 減小，細(xì)胞收縮，表面出現(xiàn)裂紋，胞外溶劑容易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，溶解并釋放胞內(nèi)多糖，因此應(yīng)用 微波加熱提取手段能夠顯著縮短萃取時(shí)間，較大程度地提高多糖的萃取效率。
[0014] (5)超臨界流體萃取法
[0015] 在超臨界狀態(tài)下，超臨界流體與目標(biāo)物接觸，使其依次把極性、沸點(diǎn)和分子量大小 不同的成分萃取出來(lái)，當(dāng)恢復(fù)到常壓和常溫時(shí)，溶解在流體中的成分立即以溶于吸收液的 液體狀態(tài)與氣態(tài)流體分開(kāi)，從而達(dá)到萃取目的。超臨界萃取技術(shù)萃取能力強(qiáng)，提取效率高， 生產(chǎn)周期短，容易發(fā)現(xiàn)新的活性成分，極少損失易揮發(fā)組分或破壞生理活性物質(zhì)，沒(méi)有溶劑 殘留，廣品質(zhì)量尚。
[0016] 沙棗膠含豐富的多糖，由于其粘性較大，多糖提取的操作不容易實(shí)施。目前國(guó)內(nèi)關(guān) 于沙棗膠提取多糖的工藝路線未見(jiàn)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0017] 本發(fā)明目的在于，提供一種沙棗膠多糖的制備方法，該方法采用將夏天采集的沙 棗樹(shù)膠自然干燥，機(jī)械粉碎，并過(guò)篩分離雜質(zhì)，制備樹(shù)膠水溶液，并加熱，保溫，離心分離，再 加熱，攪拌滴加鹽酸，再用過(guò)氧化氫處理1-3分鐘之后加入丙酮得到沉淀物，將沉淀物用丙 酮沖洗至過(guò)濾得到多糖沉淀物，再將多糖沉淀物進(jìn)行低溫或真空干燥或冷凍干燥，過(guò)濾，粉 碎，得到白色沙棗膠多糖粉末。該方法提取得到的總多糖的得率達(dá)到90%以上，具有很好的 水溶型，水溶液具有很好的透光率和高強(qiáng)度的粘度;保留了其多糖的物理化學(xué)性質(zhì)，同時(shí)， 本發(fā)明所述方法在一定程度上解析了新疆傳統(tǒng)民間用的護(hù)發(fā)化妝品秘方沙棗樹(shù)膠的物質(zhì) 基礎(chǔ)提供了科學(xué)依據(jù)。
[0018] 本發(fā)明所述的一種沙棗膠多糖的制備方法，該方法以沙棗樹(shù)膠為原料，利用弱酸 水溶液提取，丙酮沉淀，冷凍干燥或烘干得到的沙棗樹(shù)膠多糖白色粉末，具體操作按下列步 驟進(jìn)行：
[0019] a、在夏季8-9月份采集沙棗樹(shù)膠，將收集的沙棗樹(shù)膠在陰涼處自然晾干，機(jī)械粉 碎，粉碎時(shí)間為60秒-180秒，使用圓形不銹鋼網(wǎng)篩過(guò)濾100-400目，分離雜物，得到樹(shù)膠粉末 物；
[0020] b、將步驟a中得到的樹(shù)膠粉末物用蒸餾水配置濃度為0.1-5%的樹(shù)膠溶液；
[0021] c、將步驟b中樹(shù)膠溶液加熱，并在保溫的狀態(tài)下以1000-10000 r/min轉(zhuǎn)的速度離 心2-6分鐘，分離除去機(jī)械雜質(zhì)和有機(jī)雜質(zhì)，得到樹(shù)膠溶液備用；
[0022] d、將步驟c中的樹(shù)膠溶液加熱至溫度80°C，并攪拌滴加濃度為8 %-10 %的鹽酸，再 用體積濃度為6-15 %過(guò)氧化氫處理1-3分鐘脫色，得到多糖溶液；
[0023] e、將步驟d脫色處理的多糖溶液中加入3-6倍體積的丙酮進(jìn)行沉淀，并離心分離得 到多糖沉淀物，將多糖沉淀物用丙酮沖洗3-4次至沉淀表面雜志去掉為至，再將多糖沉淀物 進(jìn)行低溫或真空干燥或冷凍干燥，過(guò)濾，粉碎，得到白色沙棗膠多糖粉末。
[0024] 步驟a中機(jī)械粉碎采用不銹鋼搖螺紋式小型粉碎機(jī)。
[0025] 本發(fā)明所述的一種沙棗膠多糖的制備方法，該方法采用10%弱酸協(xié)助提取，并離 心分離除雜之后由丙酮沉淀干燥得到總多糖，其多糖提取率到達(dá)95%，粘度為12.90;提取 方法簡(jiǎn)便，提取得率較高，見(jiàn)多糖粘度測(cè)定結(jié)果表1:
[0026]表1多糖粘度測(cè)定結(jié)果：
[0027] T = 25〇C
[0028]
[0029] 本發(fā)明所述的本發(fā)明所述的一種沙棗膠多糖的制備方法，其優(yōu)點(diǎn)是得到多糖得率 高，易于放大中試，而其在保留多糖原有的物理和化學(xué)性質(zhì)以及營(yíng)養(yǎng)成分基礎(chǔ)上，通