>[0056] 其中，步驟3的純化中，各組分的組成如下：
[0057] 洗滌液：三氯甲烷：甲醇（體積比）=98:2
[0058] 洗脫液：三氯甲烷：甲醇（體積比）=96:4
[0059] 本發(fā)明的方法是經過篩選獲得的，篩選過程如下：
[0060] 1、在羊精囊的粉碎過程中，我們分析了粉碎粒度與產品總收率的關系。在保持其 他工藝參數不變的基礎上，設定羊精囊的粉碎粒度為1. 5mm、1. 0mm、0. 8mm，通過三組平行試 驗將相同質量的羊精囊進行粉碎所得的最終產品收率進行比較，優(yōu)選出羊精囊的粉碎度參 數。其分析結果如下：
[0061] 表一、羊精囊粉碎粒度實驗結果
[0063] 由上表結果可知，隨著羊精囊粉碎度的提高，產品收率也相應提高，所以最終選擇 將羊精囊粉碎至〇. 8_。
[0064] 2、在濕酶提取過程中，我們研究了不同離心條件對濕酶的提取收率的影響。
[0065] 表二、離心條件實驗結果
[0067] 上表正交試驗得出的結果表明，在轉速為2000r/min及3000r/min時，羊精囊勾衆(zhòng) 液中的懸浮物不能達到有效的分離效果；當轉速為4000r/min時，離心20min時及30min時 的濕酶收率相差僅為0. 1%，在可接受范圍之內。所以最終確定離心條件為轉速4000r/min 以上，離心20min。
[0068] 3、在產品純化時，我們還考察了柱層析時的洗滌液及洗脫液不同配制比例的純化 洗脫效果。通過調整兩次純化過程中洗滌液及洗脫液中三氯甲烷與甲醇的配制比例，檢測 兩次純化后所得產品的收率及含量，進行最終比較得出結果如下：
[0069] 表三、純化過程洗滌液及洗脫液配制比例實驗結果
[0071] 通過以上篩選結果，對兩次純化后的產品收率及含量進行綜合分析考量后，選擇 洗滌液配制比例為98:2 ;洗脫液配制比例為96:4。
[0072] 以上通過實驗數據說明本發(fā)明的有益效果。
[0073] 和現有技術相比，本發(fā)明的有關數據列表如下：
[0075] a、本發(fā)明實例中涉及的收率均以二高-γ-亞麻酸用量計算
[0076] 從上表可知，本發(fā)明的方法優(yōu)于現有技術。
[0077] 本發(fā)明的優(yōu)點還在于：
[0078] 1、本發(fā)明通過優(yōu)化合成反應步驟，降低了合成操作的技術難度，利用生物酶催化 合成前列腺素 E1原料藥，提高產品收率。
[0079] 2、本發(fā)明涉及的生產工藝均由簡單設備儀器完成，全過程不涉及大型機械設備； 操作方法簡單，少量人員即可完成所有操作，進一步降低了產品的前期投入。
[0080] 3、本發(fā)明所述生產工藝過程中，不涉及重金屬物質催化，并且化學試劑使用量較 小，降低了外源致敏性物質出現的風險，減少有機試劑的排放。
【具體實施方式】
[0081] 以下通過實施例進一步說明本發(fā)明。
[0082] 實施例1 :
[0083] 1、前列腺素酶的提?。?br>[0084] (1)新鮮冷凍羊精囊用0. 154mol/L氯化鉀溶液浸泡60min。
[0085] (2)將羊精囊用膠體磨粉碎至0· 8mm左右。
[0086] (3)勻漿液離心后，取上清液調pH = 5. 4,離心得一次濕酶。
[0087] (4)將勻漿液離心后的沉淀再次勻漿得二次濕酶。
[0088] (5)將兩次所得濕酶混合、稱重，記錄濕酶質量。
[0089] 2、酶促反應：
[0090] 前列腺素 E1的原料配方，該配方按重量組成：
[0091] 二高-γ-亞麻酸： 0,08% 谷胱甘肽： 0.08% 對苯二酚:： 0.003% 磷酸鹽/EDTA-2Na混合液： 59.907% 濕 酶： 39.93%
[0092] (1)將濕酶用磷酸鹽/EDTA-2Na混合液分散，調pH至7. 8,加入磷酸鹽緩沖液溶解 的還原型谷胱甘肽、對苯二酚、二高-γ -亞麻酸混合溶液參與反應。
[0093] (2)調pH至4. 3,離心后濾除上清液，沉淀用丙酮分散。
[0094] (3)抽濾分散液，濾餅用丙酮洗滌，合并濾液及洗滌液。減壓蒸除溶劑，水層調pH 至8. 2,用石油醚脫脂后，調pH至3. 2,用無水乙醚萃取。合并醚層，用純化水洗滌，并干燥 8小時以上。
[0095] (4)干燥后的醚層經過濾后，減壓蒸除溶劑，得前列地爾粗品。
[0096] 3、純化：
[0097] (1)將前列地爾粗品加入硅膠柱中，待洗脫液走完1個柱體積后開始收集流出液。
[0098] (2)將收集液減壓蒸除溶劑，得一次純化品。
[0099] (3)將得到的一次純化品重復上述步驟，得二次純化品。
[0100] 4、精制：
[0101] ⑴將前列地爾二次純化品溶于乙酸乙酯中，過濾后室溫下放置，待析出結晶后過 濾，所得結晶抽干后得一次重結晶產品。
[0102] (2)將一次重結晶產品溶于乙酸乙酯中，過濾后室溫放置，待析出結晶后過濾，所 得結晶用乙酸乙酯洗滌并抽干，得二次重結晶產品。
[0103] (3)將二次重結晶產品放入真空干燥箱內，真空干燥得前列地爾精制產品。
[0104] 實施例2 :
[0105] 1、前列腺素酶的提?。?br>[0106] (1)去羊精囊用0. 154mol/L氯化鉀溶液浸泡50min。
[0107] (2)將羊精囊用膠體磨粉碎至0. 8mm左右的勻漿。
[0108] (3)勻漿液離心后，取上清液調pH = 5. 7,離心得一次濕酶。
[0109] (4)將勻漿液離心后的沉淀再次勻漿得二次濕酶。
[0110] (5)將兩次所得濕酶混合、稱重，記錄濕酶質量。
[0111] 2、酶促反應：
[0112] 前列腺素 E1的原料配方，該配方按重量組成：
[0113] 二高-γ-亞麻酸： 0,10% 谷胱甘肽： 0.10% 對苯二酚： 0.004% 磷酸鹽/EDTA-2Na混合液： 59,876% 濕 酶.; 39.92%
[0114] (1)將濕酶用磷酸鹽緩沖液分散，調pH至7. 4,加入磷酸鹽緩沖液溶解的還原型谷 胱甘肽、對苯二酚、二高-γ -亞麻酸混合溶液參與反應。
[0115] (2)調pH至4. 2,離心后濾除上清液，沉淀用丙酮分散。
[0116] (3)抽濾分散液，濾餅用丙酮洗滌，合并濾液及洗滌液。減壓蒸除溶劑，水層調pH 至8. 2,用石油醚脫脂后，調pH至3. 5,用無水乙醚萃取。合并醚層，用純化水洗滌，并干燥 8小時以上。
[0117] (4)干燥后的醚層經過濾后，減壓蒸除溶劑，得前列地爾粗品。
[0118] 3、純化：
[0119] (1)將前列地爾粗品加入硅膠柱中，待洗脫液走完1個柱體積后開始收集流出液。
[0120] (2)將收集液減壓蒸除溶劑，得一次純化品。
[0121] (3)將得到的一次純化品重復上述步驟，得二次純化品。
[0122] 4、精制：
[0123] (1)將前列地爾二次純化品溶于乙酸乙酯中，過濾后室溫下放置，待析出結晶后過 濾，所得結晶抽干后得一次重結晶產品。
[0124] (2)將一次重結晶產品溶于乙酸乙酯中，過濾后室溫放置，待析出結晶后過濾，所 得結晶用乙酸乙酯洗滌并抽干，得二次重結晶產品。
[0125] (3)將二次重結晶產品放入真空干燥箱內，真空干燥得前列地爾精制產品。
【主權項】
1. 一種用羊精囊提取前列腺素El的制備方法，其特征在于，所述方法步驟如下： 步驟1、前列腺素濕酶的提?。? (1) 取新鮮的羊精囊，除去脂肪、肌肉及結締組織； (2) 加入氯化鐘水溶液，浸泡； (3) 研磨成勻漿； (4) 離屯、得到清液，過濾，濾液調抑為4-6 ; 妨離屯、得到的沉淀再次勻漿，離屯、得到清液，過濾，濾液調抑為4-6， (6) 混合步驟（4)和（5)得到的產物即為前列腺素濕酶； 步驟2、酶促反應： (1)前列腺素濕酶中加入分散液，調抑至7-8,加入還原型谷脫甘膚、對苯二酪、二 高-丫 -亞麻酸混合溶液，反應； 似反應液調抑至4-5,離屯、得到沉淀，沉淀加入