3255個核巧酸組成，序列表序列1的核巧酸編碼序列表序 列2所示的氨基酸序列。
[0046] 上述任一所述白粉病可由白粉病菌P.xanthii2F感染植物引起。
[0047] 上述任一所述植物可為單子葉植物或雙子葉植物。所述雙子葉植物是如下 dl)-d5)中的任一種：dl)葫蘆科（Qicurbitaceae)植物；d2)黃瓜屬（Qicumis)植物；d3) 甜瓜種植物；d4)甜瓜；d5)甜瓜材料K7-1。
[0048] 所述甜瓜材料K7-1)為日本厚皮類型，高抗單囊殼白粉菌（Podos地aera xanthii)2F生理小種的甜瓜品種。
[0049] 實驗證明，利用本發(fā)明提供的植物白粉病抗性相關(guān)蛋白Pm-2F及其編碼基因能增 加植物白粉病抗性：與未轉(zhuǎn)基因的K7-2植株的白粉病抗性相比，甜瓜轉(zhuǎn)基因株系ML1的植 株、甜瓜轉(zhuǎn)基因株系ML2的植株、甜瓜轉(zhuǎn)基因株系ML3的植株、甜瓜轉(zhuǎn)基因株系ML4的植株、 甜瓜轉(zhuǎn)基因株系ML5的植株、甜瓜轉(zhuǎn)基因株系ML6的植株和甜瓜轉(zhuǎn)基因株系ML7的植株的 白粉病抗性明顯增強：未轉(zhuǎn)基因的K7-2植株和轉(zhuǎn)空載體ML8植株接種白粉病菌P.xanthii 2F10天后，子葉開始布滿白粉病菌P.xanthii2F，15天后子葉和莖上均布滿白粉病菌 P.xanthii2F，15天后真葉開始發(fā)病，病情級別為5級，即嚴重感白粉??；而甜瓜轉(zhuǎn)基因株 系ML1的植株、甜瓜轉(zhuǎn)基因株系ML2的植株、甜瓜轉(zhuǎn)基因株系ML3的植株、甜瓜轉(zhuǎn)基因株系 ML4的植株、甜瓜轉(zhuǎn)基因株系ML5的植株、甜瓜轉(zhuǎn)基因株系ML6和甜瓜轉(zhuǎn)基因株系ML7的植 株的子葉和莖上均有少量白粉，真葉無白粉病菌出現(xiàn)，抗病性病情級別均在1-3級之間。結(jié) 果表明，植物白粉病抗性相關(guān)蛋白Pm-2F及其編碼基因能增加植物白粉病抗性。
【附圖說明】
[0050] 圖1為BAC克隆的雙末端測序峰圖。
[0051] 圖2為載體pCHF3-Pm-2F構(gòu)建示意圖。
[0052] 圖3為甜瓜離體再生的過程。
[005引 圖4為轉(zhuǎn)基因甜瓜的PCR檢測結(jié)果。
[0054]圖5為轉(zhuǎn)基因甜瓜的PCR檢測結(jié)果。
[00巧]圖6為轉(zhuǎn)基因甜瓜的Southern雜交分析結(jié)果。
[0056] 圖7為轉(zhuǎn)基因甜瓜的實時定量PCR結(jié)果。
【具體實施方式】
[0057] 下面結(jié)合【具體實施方式】對本發(fā)明進行進一步的詳細描述，給出的實施例僅為了闡 明本發(fā)明，而不是為了限制本發(fā)明的范圍。
[0058] 下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
[0059] 下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0060]W下實施例中的定量實驗，均設(shè)置=次重復(fù)實驗，結(jié)果取平均值。
[0061] 下述實施例中所用的甜瓜品種記載在如下文獻中：Zhang CQ, Ren Y, Guo SG, et al (2013).Application of comparative genomics in developing markers tightly linked to the Pm-2F gene for powdery mildew resistance in melon(Cucumis melo L.).化地^ica，190:157-168.其中K7-1(即甜瓜材料K7-1)為日本厚皮類型，高抗單囊 殼白粉菌（Podosphaera xanthii)2F生理小種的甜瓜品種；K7-2為感白粉病新疆哈密瓜 (化州mis melo L.ssp. melo convar.ameri (Pang. )Greb.)的甜瓜品種；PI 124112、PMR 45、PMR 6、PI 124111、Topmark、V6drantais、WMR 29、Nantais Oblong、Edisto 47、PI 414723、PMR 5、IranH和MR 1為甜瓜白粉病病原生理小種鑒別寄主品種。公眾可從北京 市農(nóng)林科學(xué)院蔬菜研究中屯、獲得，W重復(fù)本實驗。
[0062] 載體PCHF3記載在如下文獻中：王愛萍，景瑞蓮，楊武德，董埼.小麥TaMyb2基因 轉(zhuǎn)化擬南芥表達載體的構(gòu)建與遺傳轉(zhuǎn)化.應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報（2008)，14(6):750-752.
[0063] 下述實施例中所用的培養(yǎng)基如下：
[0064]MS液體培養(yǎng)基：將NH4N〇3l650mg、KN〇3l900mg、KH2P〇4l70mg、M拆〇4? 7&0 370mg、 CaClz? 2電0 440mg、FeS〇4? 7電0 27. 80mg、化2抓TA37. 30mg、MnS〇4? 4電0 22. 30mg、 ZnS〇4? 7&08. 60mg、H3BO36. 20mg、KI0. 83mg、Na2M〇〇4? 2&0 0. 25mg、OiS〇4? 5&00. 025mg、、 C0CI2?6H2O0. 025mg、肌醇 100.OOmg、VBi〇.Img、VBe〇. 5mg、煙酸 0. 5mg、甘氨酸 2.Omg、薦糖 30g溶于IL蒸饋水，p冊.8。
[0065] MS固體培養(yǎng)基：向MS液體培養(yǎng)基中加入瓊脂，使瓊脂在培養(yǎng)基中濃度為7g/L得 到的培養(yǎng)基。
[0066]MS液體懸浮培養(yǎng)基：含有100yM的乙酷下香酬的MS液體培養(yǎng)基。
[0067]MS共培養(yǎng)培養(yǎng)基：含有1. Omg/L的6-BA和100 iiM的乙酷下香酬的MS固體培養(yǎng) 基。
[006引初步篩選培養(yǎng)基：含有1.Omg/L的6-BA、50mg/L卡那霉素和lOOmg/L的特美汀的MS固體培養(yǎng)基。
[0069] 再次篩選培養(yǎng)基：含有1.Omg/L的6-BA、70mg/L卡那霉素和lOOmg/L的特美汀的 MS固體培養(yǎng)基。
[0070] 芽伸長培養(yǎng)基：含有0.Img/L(實際應(yīng)用中0. 05~0. 15mg/L均可）的6-BA、 0. 05mg/L(實際應(yīng)用中0. 03~0. 07mg/L均可）的IAA、50mg/L(實際應(yīng)用中40~60mg/L均可）的Kan和lOOmg/L(實際應(yīng)用中90~llOmg/L均可）的Tim的MS固體培養(yǎng)基。 [007。生根培養(yǎng)基：含有0.Img/L(實際應(yīng)用中0. 05~0. 15mg/L均可）的IBA、3g/L(實 際應(yīng)用中2~4mg/L均可）的活性炭和50mg/L(實際應(yīng)用中40~60mg/L均可）的Tim的MS固體培養(yǎng)基。
[0072]實施例1、Pm-2F基因的獲得
[0073] 獲得Pm-2F基因的步驟如下：
[0074]1、甜瓜材料K7-1基因組BAC文庫的構(gòu)建
[00巧](1)將甜瓜材料K7-1的種子表面消毒后，28°C催芽，然后播種于滅菌±壤中， 25-28 °C光照培養(yǎng)。
[0076] (2)完成步驟（1)后，待長出3片真葉時，開始暗培養(yǎng)，=天后取幼嫩的莖尖，提取 大片段基因組DNA。
[0077] 做完成步驟似后，構(gòu)建BAC文庫。BAC文庫構(gòu)建過程中，載體為 CopyCont;rol?pCClBAC? Vector(美國Elpicentre公司產(chǎn)品），感受態(tài)細胞為用DH10B菌株 (美國Invitrogen公司產(chǎn)品）制備的感受態(tài)細胞。
[0078] 最終，構(gòu)建了 69, 120個克隆，每個克隆平均插入片段大小為85化，獲得覆蓋甜瓜 基因組13倍左右的甜瓜材料K7-1基因組BAC文庫。
[0079] 2、含目的基因的陽性BAC克隆的PCR篩選及鑒定
[0080] (1)構(gòu)建板池，然后利用標(biāo)記引物對板池進行PCR篩選，結(jié)果編號為A49、A59和 A81的板池為陽性板池，即運S個陽性板池均包含目的基因所在的陽性單克隆。
[00引]似完成步驟（1)后，將編號為A49、A59和A81的陽性板池所對應(yīng)的384孔板取 出，用復(fù)制針將384板中的臨近4個克隆的菌液混合，然后用步驟（1)中的標(biāo)記引物進行四 合一陽性混合菌液的篩選，篩選得到兩個陽性單克隆，分別命名為陽性單克隆A49-E16和 陽性單克隆A81-G15。
[008引做完成步驟似后，在培養(yǎng)基中接種陽性單克隆（陽性單克隆A49-E16或陽性單 克隆A81-G15)，培養(yǎng)12h，得到陽性克隆菌液。
[008引（4)完成步驟（3)后，用標(biāo)記引物對步驟做得到的陽性單克隆菌液進行PCR，均 得到含有目標(biāo)條帶的PCR擴增產(chǎn)物?；厥誔CR擴增產(chǎn)物，進行測序。
[0084] (5)W甜瓜材料K7-1的基因組DNA為模板，用標(biāo)記引物進行PCR，得到PCR擴增產(chǎn) 物2。回收PCR擴增產(chǎn)物，進行測序。
[00財測序結(jié)果顯示，步驟（4)獲得的PCR擴增產(chǎn)物和步驟（5)獲得的PCR擴增產(chǎn)物的 測序結(jié)果完全一致。結(jié)果表明，陽性單克隆為目標(biāo)陽性克隆。
[0086] 3、陽性克隆測序與序列分析預(yù)測
[0087] (1)陽性BAC克隆的測序
[008引將PCR篩選得到的陽性克隆A49-E16菌液進行劃線活化，挑取單克隆，用標(biāo)記引物 再次對該單克隆進行PCR，均得到含有目標(biāo)條帶的PCR擴增產(chǎn)物。然后將單克隆在北京六合 華大基因科技股份有限公司進行BAC克隆測序。
[0089] 似化otgun亞克隆文庫的構(gòu)建
[0090] 用堿裂解法提取陽性BAC克隆A49-E16的質(zhì)粒DNA，然后進行脈沖場電泳。結(jié)果表 明，陽性克隆A49-E16的插入片段大小約80化。
[0091]BAC雙末端測序結(jié)果表明（圖1)，末端序列為單一規(guī)則峰，無雙峰或套峰出現(xiàn)；并 且將BAC雙末端測序結(jié)果進行Blastn比對，均比對上高度相似的甜瓜序列。在確定陽性克 隆A49