一種植物乳桿菌th103及其用圖
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于微生物技術領域，涉及一種能抑制鼠傷寒沙門氏菌生長的植物乳桿菌 (Lactobacillus plantarum)TH103,還涉及所述植物乳桿菌TH103的用途。
【背景技術】
[0002] 鼠傷寒沙門氏菌（Salmonella typhimurium)是危害人類和動物的重要腸道致病 菌，如人類食源性污染引起的腸道感染和仔豬腹瀉等。鼠傷寒沙門氏菌通過消化道進入小 腸后首先粘附和定值于小腸上皮表面，然后入侵細胞，主要引起小腸結腸炎，可導致宿主腹 瀉、菌血癥等一系列病變，是小兒沙門氏菌感染中最常見者。鼠傷寒沙門氏菌自然疫源廣 泛，很多家禽、家畜、鼠、鳥和冷血動物是其自然宿主，蠅、蚤可帶菌傳播，常由污染的水、牛 奶和食物經口感染。據(jù)統(tǒng)計，鼠傷寒沙門氏菌每年感染數(shù)量約占沙門氏菌感染量的1/5,是 威脅人類健康的主要病原菌之一。
[0003] 益生菌是指能夠以一定數(shù)量存活并定殖于宿主腸道內，通過調節(jié)腸道菌群平衡， 拮抗腸道內病原菌，從而對宿主健康發(fā)揮有益作用的活性有益微生物的總稱。益生菌中有 很多屬于乳酸菌，乳酸菌是一群可以發(fā)酵碳水化合物，并產生大量乳酸的革蘭氏陽性桿菌 或球菌的統(tǒng)稱。在胃腸道400多種微生物中，乳酸菌約占10%，是腸道正常菌群的主要成 員。作為人和動物腸道的正常菌群，乳酸菌具有阻止病原菌對腸道的入侵和定殖，抑制病原 菌和抗感染，維持腸道的微生態(tài)平衡等益生功能。乳酸菌及其代謝產物可能對鼠傷寒沙門 氏菌的污染具有一定的預防或干預作用，有作為抗生素的輔助治療劑的潛能，篩選具有優(yōu) 良拮抗特性的乳酸菌對于抑制鼠傷寒沙門氏菌的污染很有必要。

【發(fā)明內容】

[0004] 本部分的目的在于概述本發(fā)明的實施例的一些方面以及簡要介紹一些較佳實施 例。在本部分以及本申請的說明書摘要和發(fā)明名稱中可能會做些簡化或省略以避免使本部 分、說明書摘要和發(fā)明名稱的目的模糊，而這種簡化或省略不能用于限制本發(fā)明的范圍。
[0005] 鑒于上述和/或現(xiàn)有植物乳桿菌TH103及其用途中存在的問題，提出了本發(fā)明。
[0006] 因此，本發(fā)明的一個目的是提供一種植物乳桿菌TH103,所述菌株已于2015年4 月23日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，其保藏登記入冊的編號 為CGMCC10739,其分類命名為：植物乳桿菌Lactobacillus plantarum。
[0007] 本發(fā)明的另一個目的是提供一種植物乳桿菌TH103在蔬菜發(fā)酵領域的應用。
[0008] 作為本發(fā)明所述植物乳桿菌TH103在蔬菜發(fā)酵領域的應用的一種優(yōu)選方案，其 中：包括，蔬菜經清洗瀝干后將所述蔬菜去皮、切分，加入按照所述蔬菜重量計1.0%~ 1. 2%的鹿糖與6%~8%的食鹽，攪拌均勾在室溫預腌制36~48h，瀝干水分，得到一種預 腌制蔬菜；稱取食用香辛料，使用以所述使用香辛料重量計8~10倍水在溫度75~80°C 下浸提4~6h，冷卻后添加食用香辛料重量計10%的白酒，混勻得到一種香辛料汁；將植 物乳桿菌TH103以液體培養(yǎng)基體積計1~3%接種于液體培養(yǎng)基中，37°C培養(yǎng)20~28h， 4500rpm的條件下進行離心10~15min，棄上清，收集得到的菌泥用無菌水重懸，使得植物 乳桿菌TH103的活菌濃度達到108cfu/mL以上，從而得到一種菌懸液；在所述預腌制蔬菜中 添加以所述預腌制蔬菜重量計10~12%的所述香辛料汁以及2~5%的所述菌懸液，混勻 裝罐，密封后在室溫下發(fā)酵直至發(fā)酵液pH值達3. 0~4. 0,得到發(fā)酵蔬菜。
[0009] 作為本發(fā)明所述植物乳桿菌TH103在蔬菜發(fā)酵領域的應用的一種優(yōu)選方案，其 中：所述的蔬菜是為白菜、萬筍、豆工豆、胡蘿卜、白蘿卜、萬筍、卷心、菜、甜椒、洋蔥或芹菜中的 一種或幾種。
[0010] 作為本發(fā)明所述植物乳桿菌TH103在蔬菜發(fā)酵領域的應用的一種優(yōu)選方案，其 中：所述香辛料是辣椒、花椒、姜、蒜、八角、茴香、橘皮、香葉中的一種或幾種。
[0011] 本發(fā)明的再一個目的是提供一種植物乳桿菌TH103在工作發(fā)酵劑領域的應用，其 在所述工作發(fā)酵劑中植物乳桿菌TH103的濃度是109cfu/g以上。
[0012] 作為本發(fā)明所述植物乳桿菌TH103在工作發(fā)酵劑領域的應用的一種優(yōu)選方案，其 中：包括，按照以培養(yǎng)基重量計1~2%接種量，將植物乳桿菌TH103原始菌種接種于培養(yǎng) 基中，在37°C的條件下培養(yǎng)20~28h進行活化，連續(xù)以相同方式進行活化2~3次，得到活 化培養(yǎng)物中植物乳桿菌TH103活菌數(shù)為不小于108cfu/mL ;在溫度2~6°C與轉速4500rpm 的條件下進行離心10~15min，棄上清，收集得到的菌泥用pH7. 2的緩沖液沖洗3~4次， 然后，往所述的菌泥中加入凍干保護劑懸液，調整菌液濃度為不小于109cfu/mL，混勻后進 行真空冷凍干燥得到所述的植物乳桿菌TH103發(fā)酵劑，其中，所述凍干保護劑懸液的組成 是以重量計蔗糖2%、脫脂乳15%、乳糖5%、甘油1 %和75%的水。
[0013] 本發(fā)明的另一個目的是提供一種植物乳桿菌TH103在發(fā)酵青貯飼料領域的應用， 其包括，將青貯飼料原料揉切分段后待用；稱取50~60kg青貯飼料原料，將0. 5~0. 6g如 權利要求7所述的植物乳桿菌TH103發(fā)酵劑與200~250mL無菌水混合均勻，噴灑到青貯 飼料原料中，翻拌混合均勻后裝入青貯飼料桶中壓實密封，常溫條件下貯存1~2個月后即 得到含植物乳桿菌TH103的青貯飼料。
[0014] 本發(fā)明的還有一個目的是提供一種植物乳桿菌TH103在發(fā)酵香腸領域的應用，其 包括，將選自豬肉、牛肉或羊肉的肉切碎，5°C~8°C的冷藏室中進行預凍24~36h后，與食 鹽、白砂糖、亞硝酸鈉按照重量比100:4:1. 5:0. 015充分混合；將混合物置于溫度0~4°C 下腌制24~48h，加入按照肉重量計5~10 %香辛料，攪拌混合，然后加入根據(jù)權利要求7 所述的植物乳桿菌TH103發(fā)酵劑，其加入量是以肉重量計0. 5~0. 8%，混合均勻后把含有 工作發(fā)酵劑的肉灌注到腸衣中，得到的灌腸在溫度14°C~15°C與相對濕度80%的條件下 發(fā)酵25~30天；發(fā)酵結束后在溫度65~70°C下進行烘烤，冷卻后得到所述的發(fā)酵香腸。
[0015] 本發(fā)明的植物乳桿菌TH103在體外對鼠傷寒沙門氏菌具有明顯的抑制作用，對人 工胃液、人工腸液具有強的耐受性，耐受NaCl能力尚達10%，在實際食品體系中可以顯者 抑制鼠傷寒沙門氏菌的生長。對鼠傷寒沙門氏菌感染腸上皮細胞株HT-29細胞具有保護作 用。所述植物乳桿菌TH103可以用于發(fā)酵蔬菜、制備生產青貯飼料、發(fā)酵香腸等產品。
【附圖說明】
[0016] 圖1為在有TH103條件下及其不加入TH103條件下鼠傷寒沙門氏菌在牛乳中的生 長曲線。
【具體實施方式】
[0017] 為使本發(fā)明的上述目的、特征和優(yōu)點能夠更加明顯易懂，下面結合說明書附圖對 本發(fā)明的【具體實施方式】做詳細的說明。
[0018] 在下面的描述中闡述了很多具體細節(jié)以便于充分理解本發(fā)明，但是本發(fā)明還可以 采用其他不同于在此描述的其它方式來實施，本領域技術人員可以在不違背本發(fā)明內涵的 情況下做類似推廣，因此本發(fā)明不受下面公開的具體實施例的限制。
[0019] 其次，此處所稱的"一個實施例"或"實施例"是指可包含于本發(fā)明至少一個實現(xiàn) 方式中的特定特征、結構或特性。在本說明書中不同地方出現(xiàn)的"在一個實施例中"并非均 指同一個實施例，也不是單獨的或選擇性的與其他實施例互相排斥的實施例。
[0020] 下面將更詳細地描述本發(fā)明。
[0021] 所述的植物乳桿菌TH103是采用下述篩選方法獲得的，并且對其性質進行了研 宄。
[0022] 一、篩選
[0023] 篩選方法的具體實施步驟如下：
[0024] 1、樣品采集
[0025] 原始樣品采自邯鄲涉縣和裕村當?shù)剞r民自制的自