專利名稱:用作pnp抑制劑的嘌呤和鳥嘌呤化合物的制作方法
發(fā)明領域本發(fā)明涉及嘌呤和鳥嘌呤衍生物(它們是嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)的特別強的抑制劑)及其制備方法、含有所述化合物的藥物組合物、它們抑制嘌呤核苷磷酸化酶以及用于治療對抑制嘌呤磷酸化酶敏感的哺乳動物疾病的用途。
發(fā)明背景與美國專利4772606相對應的歐洲專利申請178178報道了用作PNP抑制劑的9-芳甲基取代的嘌呤化合物(包括鳥嘌呤)；在歐洲專利申請465297和WO 92/05810中也報道了用作PNP抑制劑的9-芳甲基取代的嘌呤化合物(包括鳥嘌呤)，其中的芳環(huán)含有膦酸基團。在美國專利US4985434；US5008265；US4985433；US5236926；US5008270中也報道了作為PNP抑制劑的修飾的嘌呤化合物、即9-去氮雜嘌呤。
未來的藥物(Drugs of the Future)，13，654(1988)、藥物和作用(Agents and Actions)，21，253(1987)、Proc Natl Acad Sci USA，88，11540(1991)和WO 90/01021中列舉的PNP抑制數據表明，對鳥嘌呤堿基的修飾顯著地改變這些化合物的PNP抑制能力。另外，對9-去氮雜(9-芳甲基)嘌呤的芳環(huán)的修飾可以顯著地改變PNP抑制能力。即如ILFarmaco，48(2)，297(1993)中所表明的，用哌啶環(huán)代替吡啶環(huán)可使活性大大降低。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及結構式(I)的化合物
其中n＝0-2；R1是H、NH2或鹵素；R2是H或NH2；R3是如下四個基團中的任意一個
其中M＝0或1；X是O、NR5或S(O)0-2，并且在基團(b)中，各X可以相同或不同；R4是H或是一個或多個彼此獨立地選自C1-6烷基-R6和芳基-R6的基團；R5是H、C1-6烷基-R6、C2-6烯基、芳基、-芳基-C1-6烷基、-C1-6烷基-芳基、-C1-6烷基-雜(C1-6)烷基、CO2-C1-6烷基-R6、CONH-C1-6烷基-R6、CO-C1-6烷基-R6、或SO2-C1-6烷基-R6；并且R6是H、CO2H、CO2C1-6烷基、CONH2、CON(C1-6烷基)2、CONH(C1-6烷基)、CO-C1-6烷基、CO-芳基、CO-雜芳基、四唑基、NHSO2CF3、SO2NH-C1-6烷基、SO2N(C1-6烷基)2、SO2NH-芳基、NHCO-C1-6烷基、NHCONH-C1-6烷基、NHCONH-芳基、NHSO2-C1-6烷基、NHSO2-芳基、CN、NH2、OH、O-C1-6烷基或O-芳基；為任何互變異構、鹽、溶劑合和/或水合的形式。
本發(fā)明的化合物是特別有用的哺乳動物嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)抑制劑，可以用作T細胞的選擇性抑制劑并可用于抑制細胞免疫。因此可將它們用于治療哺乳動物的自身免疫性疾病、移植排斥、牛皮癬或痛風。它們還可以用于增強抗病毒或抗腫瘤嘌呤核苷的抗病毒和抗腫瘤效果。發(fā)明詳述可以理解，根據本發(fā)明的化合物可以含有一個或多個不對稱取代的碳原子。在結構式(I)的化合物中存在一個或多個這樣的不對稱中心可以產生立體異構體，本發(fā)明在各種情況下均應理解為可以擴展到所有的立體異構體，包括對映體和非對映體，以及包括外消旋混合物在內的它們的混合物。
在本文的結構式中，～線用在前不對稱中心，用來表示R-和S-構型的可能性；＜線和.....線表示不對稱中心的單一構型。在本說明書中單獨或聯合使用的術語“C1-6烷基”指含有一至六個碳原子的直鏈或支鏈烷基基團，包括，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基、戊基、己基等。
術語“C2-6烯基”指含有二至六個碳原子并且含有一個雙鍵的直鏈或支鏈烷基基團，其立體化學既可以是E也可以是Z。該術語包括，例如乙烯基、1-丙烯基、1-和2-丁烯基、2-甲基-2-丙烯基等。
術語“芳基”指被取代基選擇性取代的苯基或萘基基團，所述取代基選自，例如鹵素、三氟甲基、C1-6烷基、苯基等。術語“鹵素”指氟、氯、溴或碘。
術語“雜”指有H或C1-6烷基選擇性取代的氧、硫(所有可能的氧化狀態(tài))或氮。
術語“雜芳基”指含有5-10個原子的芳香系，其中至少有一個原子來自O、S或N。
術語“環(huán)烷基”指含有3-9個碳原子的飽和環(huán)，“取代的環(huán)烷基”指由取代基選擇性取代的環(huán)烷基，所述取代基選自，例如鹵素、三氟甲基、C1-6烷基、苯基等。
結構式(1)的化合物的鹽包括可藥用的鹽，例如由無機酸或有機酸得到的酸加合鹽，例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、對甲苯磺酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、高氯酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、丙酸鹽、枸櫞酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、乳酸鹽、草酸鹽、酒石酸鹽和苯甲酸鹽。鹽還可以是與堿形成的鹽。這樣的鹽包括由無機堿或有機堿得到的鹽，例如堿土金屬鹽如鎂鹽或鈣鹽、有機胺鹽如嗎啉、哌啶、二甲胺或二乙胺鹽。
作為本發(fā)明的一部分，化合物中的任何基團含有酯功能基(例如當R5是CO2-C1-6烷基-R6)時，該酯可采取易于代謝的酯的形式，其中醇的部分為，例如乙基、芐基、苯乙基、苯丙基、α或β-萘基、2，4-二甲基苯基、4-叔丁基苯基、2，2，2-三氟乙基、1-(芐氧基)芐基、1-(芐氧基)乙基、2-甲基-1-丙酰氧丙基、2，4，6-三甲基芐氧基甲基或新戊酰氧甲基。
本領域技術人員還應理解，結構式(I)的鳥嘌呤可以以下述互變異構的形式存在。
優(yōu)選的本發(fā)明的化合物包括，其中(彼此獨立地或以任何組合形式)n＝1；R1是NH2或鹵素；R2是NH2；R3是基團a)、b)或c)中的任意一個，并且X是O、S或NR5；R4是H或C1-6烷基-R6；R5是C1-6烷基-R6；并且R6是H、CO2H、CO2C1-6烷基、OH、NH2、四唑基或NHSO2CF3。
優(yōu)選的化合物包括這些化合物的鹽、溶劑化物和水合物。
在a)或b)或c)的各種情況中，化合物包括R4在環(huán)上的所有可能的取代形式，并且還可以包括R4在環(huán)一處以上位置的取代。
本發(fā)明的化合物特別適用于選擇性地抑制哺乳動物T細胞介導的免疫，用于治療與T細胞有關的哺乳動物疾病；這些疾病包括但不僅限于自身免疫性疾病、移植排斥、牛皮癬或痛風。被認為是由自身免疫引起的疾病包括，但不僅限于，類風濕性關節(jié)炎、全身性紅斑狼瘡、重癥肌無力、I型糖尿病和多發(fā)性硬化。
本發(fā)明的化合物還可通過磷酸分解作用抑制嘌呤核苷在體內的代謝降解，從而可用于增強2’和/或3’-單-或雙脫氧嘌呤核苷的抗病毒和抗腫瘤效果。例如，可將它們用于增強如2’，3’-雙脫氧腺苷、2’，3’-雙脫氧鳥苷、2’，3’-雙脫氧肌苷治療逆轉錄病毒感染如獲得性免疫缺損綜合征(AIDS)的效果。還可將它們用于增強如2’-脫氧鳥苷在哺乳動物中的抗腫瘤/細胞毒效果。本發(fā)明的化合物還可用于治療寄生蟲病，在該疾病中寄生蟲利用PNP生成其自己的DNA組成(即堿基)。在例如瘧疾中，通過用本發(fā)明的化合物抑制寄生蟲的PNP可導致寄生蟲的死亡。
上述性質用易得的哺乳動物，例如大鼠、小鼠、狗、小牛、以及它們的分離細胞在體外和體內試驗中證實。所述化合物可以以溶液的形式(例如優(yōu)選水溶液)在體外和體內應用，體內應用可以通過腸內或腸胃外，優(yōu)選口服和靜脈內的方式。體外的劑量范圍可以在大約10-5和10-8摩爾濃度之間。依據給藥途徑，體內的劑量范圍可以在大約0.01和50mg/kg之間。
對PNP的抑制作用可以用改進的方法通過測定從14C鳥苷形成的14C鳥嘌呤進行放射化學測定，該方法最初(J.C.Sircar等，藥物化學雜志，29 1804(1986))是用小牛的脾臟(作為酶源)和1mM的磷酸鹽。結果用IC50表示，對應于使鳥嘌呤的形成減少50％所需的化合物濃度。
本發(fā)明的化合物對于2’-脫氧鳥苷(d-Guo)抑制細胞生長活性(細胞毒性)的增效作用測定如下使MOLT-4細胞在RPMI-1640培養(yǎng)基中生長。將這些細胞的懸浮培養(yǎng)液中，以固定濃度(10mM)加入d-Guo并以變化的濃度加入PNP抑制劑。通過在72小時的整個培養(yǎng)期的最后16小時中加入3H-胸腺嘧啶核苷來測定細胞的增殖程度。通過液體閃爍光譜測定法分析3H-胸腺嘧啶核苷的摻入水平。從該數據計算出使3H-胸腺嘧啶核苷的摻入量減少至對照培養(yǎng)液的50％所需的PNP抑制劑的濃度作為IC50。該方法類似于前面測定PNP抑制劑使d-Guo的毒性增效的效果時所用的方法(I.S.Kazmers，科學，24，1137-1139(1981))；和其它的參考文獻。還可以按照藥物和作用，22，379(1987)中所記載的，通過測定化合物介導的大鼠血漿肌苷水平的增加在體內測定對PNP的抑制作用。
結構式I的化合物在T細胞介導的疾病的體內模型中的效果證明用二硝基氟苯(DNFB)致敏的接觸性皮炎小鼠模型進行。將DNFB和適當的賦性劑一起在第1和第2天局部涂抹于年輕成熟雌性Balb/c小鼠。在第6天，將DNFN涂抹于動物的一側耳部以激發(fā)動物。將本發(fā)明的化合物以適當的途徑和適當的賦性劑進行給藥。效果的測定可以通過多種方法進行，例如用雙腳規(guī)測定耳的厚度。結果以炎癥反應減少的百分數表示。該方法與WO94/23309中報道的方法相似。
通式(I)的化合物可以通過本領域已知的任何適當方法和/或下述方法制備，下述方法本身構成了本發(fā)明的一部分。
根據發(fā)明的第二個方面，本發(fā)明提供了一種制備如上定義的通式(I)的化合物的方法。應當理解，當需要結構式(I)的化合物的特定立體異構體時，在此描述的合成方法可以用適當的同手性起始原料和/或將異構體用常規(guī)的分離方法(例如HPLC)從混合物中拆分。
根據本發(fā)明的化合物可以提供如下方法制備。除非另有說明，如下的說明書和結構式中的基團R1、R2、R3、R4、R5、R6、X、n和m均如上所定義。應當理解，在下述各種化合物中存在并且需要保留的功能基如氨基、羥基或羧基，在任何反應開始前均需是保護的形式。在這種情況下，脫除保護基是一個反應的最后步驟。這些功能基的適當的保護基對于本領域技術人員是顯而易見的。詳細內容參見“有機合成中的保護基”Wiley Intersciene，T.W.Greene，P.G.M.Wutts。
因此，制備通式(I)的化合物(其中R1＝NH2)的所需過程包括脫除通式(II)的化合物的保護基
其中R8代表適當的易離去基團如烷基(例如乙基)或芳烷基(例如芐基)。
脫保護基的反應可以用這種類型的水解反應的標準條件進行。例如，反應可以在溶劑例如含有惰性有機溶劑如醚(例如環(huán)醚，如四氫呋喃)、酰胺(例如取代的酰胺，如二甲基甲酰胺)、或醇(例如乙醇)的水中，在無機堿例如碳酸鉀或氫氧化鈉的存在下，在從室溫到溶劑混合物的回流溫度之間的溫度下完成，優(yōu)選溶劑混合物的回流溫度。
或者，當R8含有易于氫化的基團時，可以進行氫化作為脫保護的方法。例如，反應可以在惰性有機溶劑如醇(例如乙醇)中、在過渡金屬催化劑(例如碳載鈀)的存在下、在低溫下完成，優(yōu)選室溫。
應當理解，當需要結構式(I)的特定立體異構體時，可以通過常規(guī)的拆分技術如高效液相色譜得到。如需要，可在偶聯反應中使用適當的同手性起始原料以得到結構式(I)的特定立體異構體。
通式(II)的中間體可以通過中間體(III)化合物的重排反應制備
重排反應可以在Wang等所概述的該反應的標準條件下進行(有機化學雜志，53，5617(1988))。例如，反應可以在溶劑如惰性有機溶劑，例如醚(例如環(huán)醚，如四氫呋喃)、酰胺(例如取代的酰胺，如二甲基甲酰胺)、醇(例如乙醇)中、在從環(huán)境溫度到溶劑的回流溫度之間的溫度下，優(yōu)選溶劑的回流溫度，在無機堿如碳酸鉀或氫氧化鈉的存在下完成。
通式(III)的中間體可以從通式(IV)的硫脲制備。
這種轉變可以用J.Wang等所概述的方法進行(有機化學雜志，53，5617(1988))。例如，該反應可以在惰性有機溶劑例如醚(例如環(huán)醚，如四氫呋喃)、酰胺(例如取代的酰胺，如二甲基甲酰胺)、或腈(例如乙腈)的存在下，在環(huán)境溫度、優(yōu)選20-30℃下，在二亞胺如二環(huán)己基碳二亞胺的存在下完成。
本發(fā)明的又一方面是，結構式(II)的中間體可以從結構式(IV)的中間體通過將上述步驟合并成一步進行制備。
通式(IV)的硫脲可以從通式(V)的胺
和通式(VI)的異硫氰酸酯制備。
S＝C＝NCO2R8(VI)這種轉變可以用J.Wang等所概述的方法進行(有機化學雜志，53，5617(1988))。例如，該反應可以在惰性有機溶劑例如醚(例如環(huán)醚，如四氫呋喃)、腈(例如乙腈)或鹵代烴(例如二氯甲烷)的存在下，在低溫、優(yōu)選環(huán)境溫度下，在選擇性地存在堿例如有機堿(例如胺，如三乙胺)的條件下完成。
通式(VI)的硫脲可以用J.Wang等(有機化學雜志，53，5617(1988))的通用方法制備。
通式(V)的胺可以通過還原通式(VII)的硝基衍生物進行制備。
本領域技術人員可以理解，這種類型的還原反應可以通過多種方法，例如高等有機化學(第4版)，J，March，Wiley Interscience，1216-1218頁中所概述的方法完成。這種轉變的一個非限制性的例子是用水作為溶劑，在選擇性地存在惰性有機溶劑例如醚(例如環(huán)醚，如四氫呋喃)或酰胺(例如取代的酰胺，如二甲基甲酰胺)的條件下，在連二亞硫酸鈉的存在下，在升高的溫度、優(yōu)選65-80℃下完成。
通式(VII)的硝基衍生物可以通過將通式(VIII)的嘧啶酮
與通式(IX)的胺反應進行制備。
該反應可以用本領域技術人員所設想的標準條件進行。例如，該反應可以在溶劑，例如惰性有機溶劑例如醚(例如環(huán)醚，如四氫呋喃)、酰胺(例如取代的酰胺，如二甲基甲酰胺)、或醇(例如乙醇)的存在下，在高溫、優(yōu)選溶劑的沸點下，在堿例如有機堿，例如胺(例如三乙胺)或環(huán)胺(例如N-甲基嗎啉)的存在下完成。
硝基衍生物(VIII)的制備記載于C.Temple等，核酸化學，卷(I)(1978)，Wiley New York，L.B.Townsend等編，47-52頁。
作為本發(fā)明的進一步延伸，結構式(V)的中間體還可以從結構式(X)的嘧啶通過與本領域技術人員已知的引入氮取代基的試劑反應進行制備。
該反應可以用這種類型的胺化反應所用的標準條件進行。例如，該反應可以在溶劑、例如水或有機酸(例如乙酸)或它們的混合物中，在亞硝酸鈉的存在下，在低溫例如0℃至周圍溫度(例如10℃至周圍溫度)下進行。經過本領域技術人員熟知的濃縮過程之后，將殘余物溶于適當的溶劑例如水中，在選擇性地存在共溶劑、例如惰性有機溶劑例如醚(例如環(huán)醚，如四氫呋喃)或酰胺(例如取代的酰胺，如二甲基甲酰胺)的條件下，在還原劑、例如連二亞硫酸鈉的存在下，在從環(huán)境溫度至溶劑的回流溫度之間的溫度下。
通式(X)的嘧啶可以從結構式(XI)的中間體
和通式(IX)的胺制備，使用制備通式(VII)的中間體所概述的參照條件，和藥物化學雜志，5，558(1962)(C.W.Noell等)中記載的條件。通式(IX)的胺可以購買到，或者可以從可購買到的化合物用本領域技術人員公知的方法方便地制得。隨需要，它包括用以生成結構式(I)的化合物的單一異構體的同手性起始原料。
作為本發(fā)明的進一步延伸，結構式(I)的化合物(其中R1是H并且R2是H或NH2)可以從通式(XII)的中間體通過水解制備。
水解反應可以用這種類型的水解反應的標準反應條件進行。例如，該反應可以在溶劑、例如水中，在選擇性地存在共溶劑、例如惰性有機溶劑例如醇(例如甲醇)或酰胺(例如取代的酰胺，如二甲基甲酰胺)的條件下，在無機氫氧化物堿例如氫氧化鈉的存在下，在升高的溫度、例如溶劑的回流溫度下進行。
通式(XII)的中間體可以通過通式(XIII)的嘌呤
與通式(XIV)的中間體的偶聯反應制備
其中R9代表鹵素或適當的離去基團例如烷基磺酸酯(例如甲磺酸酯)或芳基磺酸酯(例如4-甲苯磺酸酯)。
通式(XIII)的中間體可購買到，或可以用本領域技術人員熟知的方法制備。
偶聯反應可以用這種類型反應的標準條件進行。例如，該反應可以在溶劑、例如惰性有機溶劑例如醚(例如環(huán)醚，如四氫呋喃)、酰胺(例如取代的酰胺，如二甲基甲酰胺)或醇(例如甲醇)的存在下，在適當的堿、例如無機堿(例如碳酸鉀)或有機堿(例如胺，如三乙胺)的存在下，在從環(huán)境溫度至溶劑的回流溫度之間的溫度下進行，優(yōu)選80℃。
通式(XIV)的胺可以購買到，或者可以從可購買到的化合物用本領域技術人員公知的方法方便地制得。隨需要，它包括用以生成結構式(I)的化合物的單一異構體的同手性起始原料。
作為本發(fā)明的進一步延伸，結構式(I)的化合物可以從通式(XV)的中間體通過脫保護制備。其中R10代表可以用脫除這些基團的標準條件脫除的基團，例如芐基或取代的芐基。例如，該反應可以在溶劑例如醇(如乙醇)中，在選擇性地存在酸例如無機酸(如鹽酸)的存在下，在催化劑(例如碳載鈀催化劑)的條件下，在氫氣氛圍和環(huán)境溫度下進行。
通式(XV)的中間體可以通過通式(XVI)的嘌呤
與通式(XIV)的中間體的偶聯反應制備，其中的R9和R3如上所定義。
偶聯反應可以用這種類型反應的標準條件進行。例如，該反應可以在溶劑、例如惰性有機溶劑例如酰胺(例如取代的酰胺，如二甲基甲酰胺)中，在適當的堿例如無機堿(例如氫化鈉)的存在下，在從環(huán)境溫度至溶劑的回流溫度之間的溫度下進行，優(yōu)選80℃。
通式(XVI)的中間體可以通過S.Ram等在雜環(huán)，1978，22(1984)或M.-Y.Chae等在藥物化學雜志，359，38(2)(1995)中給出的方法的改進方法制備。
作為本發(fā)明的又一方面，可以用通式(XVI)的中間體制備通式(I)的化合物(其中R3與如上定義的基團不同)，使用與制備通式(XV)的中間體(其中R還可以代表H、C1-6烷基-R6、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、C3-9環(huán)烷基或取代的C3-9環(huán)烷基，并且R6如上所定義)相同的方法。對于R3＝芳基或雜芳基，n＝1或2。
結構式(I)的化合物還可以通過其它結構式(I)的化合物的互變進行制備。例如，利用本領域技術人員熟知的方法，可以將結構式(I)的化合物(其中R3含有基團R4，其中R4是C1-6烷基-R6并且R6是CO2H)轉變?yōu)榱硪粋€這樣的結構式(I)的化合物(其中R6代表CO2C1-6烷基)。
本發(fā)明還涉及任何新的起始原料及其制備方法。
任何得到的最終產物或中間體的混合物均可以利用各組分的物理-化學性質的差異，以公知的方式、例如色譜法、蒸餾、分級結晶、或通過成鹽(如果恰當或可行的話)分離成純凈的最終產物或中間體。
本發(fā)明的化合物或中間體還可以以其水合物或含有其它重結晶所用溶劑的形式得到。
本發(fā)明還涉及對患有與上述的嘌呤核苷磷酸化酶有關的疾病患者(包括人和/或牛奶、肉或毛皮工廠飼養(yǎng)的或作為寵物飼養(yǎng)的哺乳動物)的治療方法，更具體地講，是一種涉及施用結構式(I)的嘌呤核苷磷酸化酶抑制劑作為活性成分的治療方法。
因此，結構式(I)的化合物可用于治療自身免疫性疾病、移植排斥、牛皮癬、痛風、類風濕性關節(jié)炎、重癥肌無力、I型糖尿病、盤狀紅斑狼瘡、全身性紅斑狼瘡、多發(fā)性硬化、T細胞癌(包括但不僅限于T細胞白血病和皮T細胞淋巴瘤)、特應性皮炎、接觸性皮炎或其它慢性過敏性疾病、濕疹、過敏性腸疾病或瘧疾。另外，結構式(I)的化合物還可用于增強可被PNP代謝降解的抗病毒或抗腫瘤嘌呤核苷的抗病毒或抗腫瘤效果。因此，本發(fā)明的又一個實施方案涉及在哺乳動物中抑制抗病毒或抗腫瘤嘌呤核苷的磷酸化和代謝破壞的方法，該方法包括與嘌呤核苷一起(分別地或以聯合的方式)向所需哺乳動物施用抑制嘌呤核苷磷酸化酶有效量的本發(fā)明的化合物或所述化合物與一種或多種可藥用載體的聯合。更具體地講，本發(fā)明涉及抑制本領域已知的嘌呤核苷(例如2’-脫氧鳥苷、2’，3’-二脫氧肌苷、2’，3’-二脫氧鳥苷或2’，3’-二脫氧腺苷)的磷酸化和代謝破壞的方法。
此外，本發(fā)明涉及在哺乳動物中增強2’或3’-一脫氧嘌呤核苷或2’，3’-二脫氧嘌呤核苷的抗病毒或抗腫瘤效果的方法，該方法包括，與所述嘌呤核苷一起(分別地或以聯合的方式)向所需哺乳動物施用抑制嘌呤核苷磷酸化酶有效量的本發(fā)明的化合物，優(yōu)選與一種或多種可藥用載體聯合使用。
更具體地講，本發(fā)明涉及提高或增強本領域已知的2’，3’-二脫氧嘌呤核苷(例如2’，3’-二脫氧肌苷、2’，3’-二脫氧鳥苷或2’，3’-二脫氧腺苷)用于治療逆轉錄病毒、例如HIV-逆轉錄病毒感染(獲得性免疫缺損綜合征，AIDS)的效果的方法。如生化藥理學，22，3797(1987)中所記載的，2’，3’-二脫氧嘌呤核苷是本領域已知的HIV逆轉錄病毒感染的抑制劑并由PNP代謝降解。它們以對抑制HIV-逆轉錄病毒感染有效的藥理學可接受的劑量進行給藥。優(yōu)選使用最低的可能有效劑量。本發(fā)明進一步涉及適用于腸內(例如口服或直腸給藥)、局部和腸胃外給藥、或通過吸入噴霧向哺乳動物(包括人)給藥的藥物組合物，該組合物可用于抑制嘌呤核苷磷酸化酶的活性并用于治療相關的疾病，該組合物單獨地、或以與一種或多種可藥用載體的組合的形式含有有效量的本發(fā)明的藥理學活性化合物。在此使用的術語“胃腸外”包括皮下注射、靜脈內、胸骨內注射或輸液。
含有活性成分的藥物組合物可以是適于口服使用的劑型，例如片劑、錠劑、糖錠、水或油懸浮液、可分散粉末或顆粒、乳劑、硬或軟膠囊、或糖漿或酏劑。用于口服使用的組合物可根據任何本領域公知的制備藥物組合物的方法劑型制備，并且該組合物可以含有一種或多種選自如下組成的物質甜味劑、矯味劑、著色劑和防腐劑，以提供美觀可口的藥物制劑。片劑含有活性成分和適于生產片劑的無毒可藥用賦性劑的混合物。這些賦性劑可以是，例如惰性稀釋劑，例如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；成粒劑和崩解劑，例如玉米淀粉或藻酸；粘合劑，例如淀粉、明膠或阿拉伯膠；和潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。該片劑可以是不包衣的，也可以是通過公知技術包衣了的，以延緩其在胃腸道內的崩解和吸收，從而在更長的時間內提供持續(xù)的作用。例如，可使用延時材料如一硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。還可以通過美國專利42561058、4166452和4265874中記載的技術進行包衣，以形成控釋的滲透治療片劑。
口服應用的制劑還可以是硬明膠膠囊的形式，其中的活性成分與惰性固體稀釋劑(例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土)相混合；或者是軟明膠膠囊的形式，其中的活性成分與水或油性基質(例如花生油、液體石蠟或橄欖油)相混合。
水懸浮液含有活性成分和適于生產水懸浮液的賦性劑的混合物。這些賦性劑是懸浮劑，例如羧甲基纖維素鈉、羥丙甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍膠和阿拉伯膠；分散劑或濕潤劑可以是天然的磷脂(例如卵磷脂)、或氧化烯與脂肪酸的縮合產物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)、或環(huán)氧乙烷與長鏈脂肪醇的縮合產物(例如十七烷乙烯氧基鯨蠟醇)、環(huán)氧乙烷與由脂肪酸和己糖醇形成的偏酯(例如聚氧乙烯與由脂肪酸和己糖醇酐形成的偏酯)的縮合產物(例如聚氧乙烯山梨糖醇酐一油酸酯)。所述水懸浮液還可以含有一種或多種防腐劑(例如對羥基苯甲酸乙酯或正丙酯)、一種或多種著色劑、一種或多種矯味劑，以及一種或多種甜味劑(例如蔗糖或糖精)。
油性懸浮液可以通過將活性成分懸浮于植物油(例如花生油、橄欖油、芝麻油、或可可油)或礦物油(例如液體石蠟)中進行配制。油性懸浮液可以含有增稠劑(例如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇)。還可以加入甜味劑(例如前述的那些)和矯味劑以提供可口的口服制劑。這些組合物可以通過加入抗氧劑如抗壞血酸進行保藏。適于通過加水制備水懸浮液的分散粉末或顆粒提供活性成分和分散劑或濕潤劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑形成的混合物。列舉了適當的分散劑或濕潤劑和懸浮劑，還可以含有例如甜味劑、矯味劑和著色劑。
本發(fā)明的藥物組合物還可以是水包油型乳劑。油相可以是植物油(例如橄欖油或花生油)或礦物油(例如液體石蠟)或它們的混合物。適當的乳化劑可以是天然的膠(例如阿拉伯膠或黃蓍膠)、天然的磷脂(例如大豆卵磷脂)、和由脂肪酸和己糖醇酐形成的酯或偏酯(例如山梨糖醇酐一硬脂酸酯)、和由所述偏酯和環(huán)氧乙烷形成的縮合產物(例如聚氧乙烯山梨糖醇酐一油酸酯)。這些乳劑還可以含有甜味劑和矯味劑。糖漿和酏劑可以用甜味劑(例如甘油、丙二醇、山梨糖醇和蔗糖)配制。這些制劑還可以含有潤藥、防腐劑、矯味劑和著色劑。藥物組合物可以是無菌注射用水質或油質懸浮液的形式。這些懸浮液可以根據已知技術用上述的適當分散劑或濕潤劑和懸浮劑配制。無菌注射用制劑還可以是在無毒的胃腸外可接受稀釋劑或溶劑中形成的無菌注射用溶液或懸浮液，例如在1，3-丁二醇中的溶液。在可接受的賦性劑和溶劑中，可以使用的是水、Ringer’s溶液和等滲氯化鈉溶液。另外，無菌的固定油通常用作溶劑或懸浮基質?；谠撃康模梢允褂酶鞣N品牌的固定油，包括合成的一或二甘油酯。另外，脂肪酸如葉酸也可用于注射用制劑。
結構式(I)的化合物還可以以栓劑的形式進行直腸給藥。這些組合物可以通過將藥物與適當的無刺激性賦性劑混合進行制備，所述賦性劑在常溫下為固體而在直腸無毒溫度下為液體，從而可以在直腸內溶解以釋放藥物。這些物質是可可脂和聚乙二醇。
進行局部應用時，可以使用含有結構式(I)的化合物的霜劑、軟膏、凝膠、溶液或懸浮液等。(為了該應用目的，局部應用應包括漱口劑和含漱劑)。在治療上述疾病時，可使用從大約0.05mg到大約2000mg/公斤體重/天的劑量水平(大約每位患者2.5mg至大約100g/天)。例如，通過施用從大約0.01到100mg化合物/公斤體重/天(大約每位患者0.5mg到大約7g/天)，可使類風濕性關節(jié)炎得到有效的治療。
與載體物質組合以制備單一劑型的活性成分的量可以依據所治療的宿主及具體的給藥方式而改變。例如，用于人的口服給藥的配方可以在組合物總量的大約5％至大約95％之間變動。劑量單位劑型通常含有大約1mg至大約500mg的活性成分。
然而，應當理解，對于任何具體患者的具體劑量水平取決于各種因素，包括所用的具體化合物的活性、年齡、體重、健康狀況、性別、飲食、給藥時間、給藥途徑、排泄速度、藥物的組合以及所治療的具體疾病的嚴重程度。
如下實施例1至19說明了本發(fā)明的化合物及其制備(通過給出的適當中間體)在實施例中使用如下縮寫DEAD 重氮二草酸二乙酯DMF 二甲基甲酰胺DCC 二環(huán)己基碳二亞胺RT 室溫THF 四氫呋喃MsCl 甲基磺酰氯中間體12-氨基-5-硝基-4-(2’-四氫呋喃基甲氨基)-嘧啶-6-[1H]-酮向攪拌下的2-氨基-4-氯-5-硝基嘧啶-6-[1H]-酮(Temple等，核酸化學，第I卷(1978)，Wiley NY，47-52頁)(2g)的乙醇(45ml)懸浮液中加入三乙胺(1.1g)和四氫呋喃胺(1.1g)并將其加熱回流1.5小時。將反應液混合物冷卻至室溫并過濾。殘余物用水(2×20ml)和乙醇(5ml)洗滌并將固體真空干燥過夜，得到淺黃色固體(2.5g)。
TLC Rf＝0.10(20％MeOH/CH2Cl2)中間體22-氨基-4-(2’-四氫呋喃基甲氨基)-5-[1-[3-(乙氧羰基)硫脲基]]嘧啶-6-[1H]-酮將中間體1(1.0g)在65-80℃下懸浮于水中，小批量地加入連二亞硫酸鈉(4.5g)。0.5小時后，濾出固體沉淀并將其重新懸浮于乙腈(40ml)中。然后加入乙氧羰基異硫氰酸酯(1.5g)并將反應混合物加熱回流3小時。用冰冷卻后，濾出懸浮的固體并用乙腈(10ml)洗滌，真空干燥得到標題化合物(0.5g)。
TLC Rf＝0.3(10％MeOH/CH2Cl2)中間體36-氨基-4-(2’-四氫呋喃基甲氨基)惡唑-[5，4-d]-嘧啶-2-氨基甲酸乙酯將中間體2(0.42g)溶于DMF(20ml)并一次性加入DCC(0.73g)。室溫下反應48小時后減壓蒸除溶劑。將殘余物用熱的甲苯處理，將固體過濾并用熱甲苯洗滌。將殘余物真空干燥得到標題化合物(0.31g)。
TLC Rf＝0.45(10％MeOH/CH2Cl2)中間體42-氨基-5-硝基-4-(2’-四氫吡喃基甲氨基)嘧啶-6-[1H]-酮標題化合物用與中間體1相似的方法從2-氨甲基四氫吡喃(GB1031916)制得。
TLC Rf＝0.6(10％MeOH/CH2Cl2)中間體52-氨基-4-(2’-四氫吡喃基甲氨基)-5-[1-[3-(乙氧羰基)硫脲基]]嘧啶-6-[1H]-酮標題化合物用與中間體2相似的方法從中間體4制得。
TLC Rf＝0.3(10％MeOH/CH2Cl2)中間體66-氨基-4-(2’-四氫吡喃基甲氨基)惡唑-[5，4-d]-嘧啶-2-氨基甲酸乙酯標題化合物用與中間體3相似的方法從中間體5制得。
TLC Rf＝0.5(10％MeOH/CH2Cl2)中間體7(R)-2-羥甲基四氫吡喃向攪拌下的(R)-2-羥甲基-2，3-二氫吡喃(S.-Kang等，Tet.Asym.1995，6(I)，97-100)(0.23g)的乙醇(40ml)溶液中加入碳載鈀催化劑(10％Pd)。將反應液置于Parr反應器內并在100psi的氫氣下攪拌5小時，然后將溶液過濾并減壓濃縮，得到黃色油狀標題化合物(0.2g)。1H NMR(400MHz，DMSOd6)1.0(m，1H)，1.5(m，1H)，1.8(bs，1H)，3.3(m，3H)，3.8(d，1H)，4.5(bs，1H)中間體8(R)-2-甲基磺?；跫谆臍溥拎珜⒅虚g體7(0.85g)、CH2Cl2(27ml)和三乙胺(2ml)合并并在氮氣下冷卻至0℃(冰浴)。通過注射器向其中滴加MsCl(0.62ml)，繼續(xù)攪拌并將反應升至室溫。繼續(xù)攪拌5小時，然后將產物濃縮到硅膠上并閃式柱色譜進行純化，得到黃色油狀標題化合物(1.31g)。
TLC Rf＝0.6(50％EtOAc/己烷)中間體9(R)-2，8-二氨基-6-芐氧基-9-[2(四氫吡喃基甲基)]嘌呤向攪拌下的2，8-二氨基-6-芐氧基嘌呤(Chea等，藥物化學雜志，1995，38(2)，359-365)(0.23g)的DMF(2ml)溶液中加入LiH(8.2mg)，并將該混合物在N2下攪拌45分鐘。然后加入中間體8(0.17g)的DMF(1.5ml)溶液，將反應液逐漸加熱至80℃并在該溫度下保持20小時。然后將產物濃縮到硅膠上并通過閃式柱色譜進行純化，得到米色固體狀標題化合物(43.7mg)。
TLC Rf＝0.8(10％MeOH/CH2Cl2)中間體10(S)-2-羥甲基四氫吡喃中間體10用與中間體7相似的方法制備，得到淺黃色油。1H NMR(400MHz，CDCl3)1.3(m，1H)，1.5(m，4H)，1.8(m，1H)，2.3(bs，1H)，3.5(m，4H)，4.0(m，1H)中間體11(S)-2-甲基磺?；跫谆臍溥拎虚g體11用與中間體8相似的方法制備，得到淺黃色粘稠的油。
TLC Rf＝0.49(50％EtOAc/己烷)中間體12(S)-2，8-二氨基-6-芐氧基-9-[2’-(四氫吡喃基甲基)]嘌呤標題化合物用與中間體9相似的方法從中間體11制得。
TLC Rf＝0.8(10％MeOH/CH2Cl2)中間體132-甲基磺酰氧基甲基-6-甲基四氫吡喃中間體11用與中間體8相似的方法從2-羥甲基-6-甲基四氫吡喃(E.I.Kilmova等，Zh.Org.Khim，1970，6，413-418)制得。
TLC Rf＝0.26(50％EtOAc/己烷)中間體142，8-二氨基-6-芐氧基-9-[2’-(6’-甲基四氫吡喃基)甲基]嘌呤標題化合物用與中間體9相似的方法從中間體13制得。
TLC Rf＝0.82(10％MeOH/CH2Cl2)中間體152-甲基磺酰氧基甲基-4-甲基四氫吡喃中間體15用與中間體8相似的方法制備，由2-羥甲基-4-甲基四氫吡喃(B.L.Eliel等，Org.Mag.Res.，1983，21，95-107)(0.35g)制得0.43g黃色油狀的中間體15。
TLC Rf＝0.64(50％EtOAc/己烷)中間體162，8-二氨基-6-芐氧基-9-[2’-(4’-甲基四氫吡喃基)甲基]嘌呤標題化合物用與中間體9相似的方法從中間體15制得。
TLC Rf＝0.87(10％MeOH/CH2Cl2)中間體172-甲基磺酰氧基甲基-反-4，6-二甲基四氫吡喃中間體17用與中間體8相似的方法從4，6-二甲基-2-羥甲基四氫吡喃(B.L.Eliel等，Org.Mag.Res.，1983，21，95-107)制得。
TLC Rf＝0.83(50％EtOAc/己烷)中間體182，8-二氨基-6-芐氧基-9-[2’-(4’，6’-二甲基四氫吡喃基)甲基]嘌呤中間體18用與中間體9相似的方法從中間體17制得。
TLC Rf＝0.85(10％MeOH/CH2Cl2)中間體196-(乙酰氧甲基)四氫-2H-吡喃-2-乙酸叔丁酯將三氯化鋁(1g)在氮氣氛圍下冷卻至-78℃并加入二氯甲烷(15ml)。然后滴加反-6-(苯磺酰基)四氫-2H-吡喃-2-甲醇乙酸酯(1g)(S.V.Ley等，四面體，(1989)，45(13)，4293)和1-叔丁氧基-1-三甲基硅烷基氧乙烯(1.37g)的二氯甲烷(10ml)溶液。將反應液在-78℃攪拌2.5小時，然后在室溫下攪拌1.5小時。用1N HCl終止反應并用二氯甲烷提取，粗產物經閃式柱色譜純化(50％EtOAc/己烷)得到標題化合物(187mg)。
TLC Rf＝0.6(50％EtOAc/己烷)中間體206-(羥甲基)四氫-2H-吡喃-2-乙酸叔丁酯將中間體19(0.19g)、碳酸鉀(0.19g)和甲醇(3.5ml)混合，并在室溫下攪拌2.5小時。用水稀釋并用乙酸乙酯提取得到標題化合物(0.1 1g)。
TLC Rf＝0.33(50％EtOAc/己烷)中間體216-(甲基磺酰氧甲基)四氫-2H-吡喃-2-乙酸叔丁酯該中間體用與中間體8相似的方法從中間體20制得。
TLC Rf＝0.4(50％EtOAc/己烷)中間體222，8-二氨基-6-芐氧基-9-(2’-(6’-叔丁氧羧甲基)四氫-[2H]-吡喃甲基)嘌呤標題化合物用與中間體9相似的方法從中間體21制得。
TLC Rf＝0.3(EtOAc)中間體23反-四氫-2-乙酰氧甲基-6-丙-2-烯基-[2H]-吡喃將三氯化鋁(1g)在氮氣氛圍下冷卻至-78℃并加入二氯甲烷(15ml)。然后滴加反-6-(苯磺?；?四氫-2H-吡喃-2-甲醇乙酸酯(S.V.Ley等，四面體，(1989)，45(13)，4293)(1g)和烯丙基三甲基硅烷(835mg)的二氯甲烷(10ml)溶液。將反應液在-78℃攪拌2小時，然后在-35℃攪拌1小時。用1N HCl終止反應并用二氯甲烷提取，粗產物經閃式柱色譜純化(40％EtOAc/己烷)得到標題化合物(414mg)。
TLC Rf＝0.6(50％EtOAc/己烷)中間體24反-四氫-2-羥甲基-6-丙-2-烯基-2H-吡喃標題化合物用與中間體20相似的方法從中間體23制得。
TLC Rf＝0.37(50％EtOAc/己烷)中間體25反-四氫-2-甲基磺酰氧甲基-6-丙-2-烯基-2H-吡喃標題化合物用與中間體21相似的方法從中間體24制得。
TLC Rf＝0.45(50％EtOAc/己烷)中間體26(S*，S*)-2，8-二氨基-6-芐氧基-9-(2’-(6’-丙基)-四氫-2H-吡喃甲基)嘌呤標題化合物用與中間體9相似的方法從中間體25制得。
TLC Rf＝0.55(10％MeOH/CH2Cl2)中間體27反-四氫-2-叔丁基二甲基硅氧甲基-6-丙-2-烯基-2H-吡喃將中間體24(3.75g)、DMF(20ml)、咪唑(3.6g)和叔丁基二甲基氯硅烷(4g)合并，并在室溫下攪拌18小時。用水稀釋，二氯甲烷提取并將粗產物用閃式柱色譜純化(50％EtOAc/己烷)得到標題化合物(5.18g)。
TLC Rf＝0.65(50％EtOAc/己烷)中間體28反-2-叔丁基二甲基硅氧甲基-6-羥丙基-四氫-2H-吡喃將中間體27(2.7g)和四氫呋喃(10ml)在氮氣氛圍下混合并在冰浴中冷卻。滴加BH3·THF(1M的THF溶液)(5ml)并將反應液在室溫下攪拌18小時。將反應液再次冷卻至0℃并加入1N NaOH(30ml)和過氧化氫(27％w/w)(10ml)。將反應液在室溫下攪拌3.5小時。用乙酸乙酯提取并將粗產物用閃式柱色譜純化(30％EtOAc/己烷)得到標題化合物(0.54g)。
TLC Rf＝0.3(50％EtOAc/己烷)中間體29反-6-芐氧丙基-2-叔丁基二甲基硅氧甲基四氫-2H-吡喃在室溫和氮氣條件下，向攪拌下的氫化鈉(60％的礦物油分散液)(90mg)在無水四氫呋喃(5ml)的懸浮液中加入中間體28(0.54g)。將混合物升溫至30℃，在該溫度下攪拌15分鐘后再冷卻至室溫。加入溴化芐(0.27ml)并將反應混合物在室溫下攪拌4.5小時。將反應混合物減壓蒸發(fā)到硅膠上，經閃式柱色譜(SiO2，50％EtOAc/己烷)純化得到無色澄清液體(1.1g)。
TLC Rf＝0.6(50％EtOAc/己烷)中間體30反-6-芐氧丙基-2-羥甲基四氫-[2H]-吡喃室溫下，將中間體29(0.6g)在1M的四丁基氟化銨的THF(3.5ml)溶液中攪拌16小時。將反應混合物減壓蒸發(fā)到硅膠上，經閃式柱色譜(SiO2，50％EtOAc/己烷)純化得到無色澄清液體(0.28g)。
TLC Rf＝0.2(50％EtOAc/己烷)中間體31反-6-芐氧丙基-2-甲基磺酰氧羥甲基四氫-[2H]-吡喃標題化合物用與中間體8相似的方法從中間體30制得。
TLC Rf＝0.3(50％EtOAc/己烷)中間體326-芐氧基-9[反-2’-(6’-芐氧丙基)四氫-[2H]-吡喃甲基]-2，8-二氨基嘌呤中間體32用與中間體9相似的方法從中間體31制得。
TLC Rf＝0.7(10％MeOH/CH2Cl2)中間體33反-2-叔丁基二甲基硅氧甲基-6-甲氧羰酰基乙基四氫-[2H]-吡喃將乙腈(4ml)、四氯化碳(4ml)和水(6ml)加入中間體28(0.98g)和高碘酸鈉(2.18g)中。加入氯化釕(III)水合物(5mg)，將混合物在室溫下劇烈攪拌2.5小時。將反應混合物用1M HCl稀釋并用CH2Cl2提取。將有機提取液合并、干燥(MgSO4)，減壓蒸除溶劑得到膠狀物并將其溶于二乙醚中。將溶于冷卻至0℃，用重氮甲烷(H.J.Backer等，有機合成，合訂本，V卷，351)(8.3mmol)處理。將反應液在室溫下攪拌22小時。減壓蒸除溶劑并將殘余物用閃式色譜(SiO2，50％EtOAc/己烷)純化得到無色澄清液體(0.50g)。
TLC Rf＝0.6(50％EtOAc/己烷)中間體34反-2-羥甲基-6-甲氧羰基乙基四氫-2H-吡喃標題化合物用與中間體30相似的方法從中間體33制得。
TLC Rf＝0.1(50％EtOAc/己烷)中間體35反-6-甲氧羰基乙基-2-甲基磺酰氧甲基四氫-2H-吡喃標題化合物用與中間體8相似的方法從中間體34制得。
TLC Rf＝0.7(EtOAc)中間體366-芐氧基-2，8-二氨基-9-(反-2’-(6’-甲氧羰基乙基)四氫-[2H]-吡喃甲基)嘌呤標題化合物用與中間體9相似的方法從中間體35制得。
TLC Rf＝0.7(10％MeOH/CH2Cl2)中間體37(±)甲基磺酰氧甲基-1，4-二氧雜環(huán)己烷標題化合物用與中間體8相似的方法從(±)羥甲基-1，4-二氧雜環(huán)己烷(R.I.Duclos等，有機化學雜志1992，57，6156-6163)制得。
TLC Rf＝0.4(50％EtOAc/己烷)中間體386-芐氧基-2，8-二氨基-9-[2’-(1’，4”-二氧雜環(huán)己烷基)甲基]嘌呤標題化合物用與中間體9相似的方法從中間體37制得。
TLC Rf＝0.7(10％MeOH/CH2Cl2)中間體392-羥甲基四氫噻吩將氯化鈣(10g)加入四氫噻吩-2-甲酸甲酯(J.Wrobel和E.Hejchman，Bull.Polish Acad.Sci.Chem.1987，3521)(10.0g)的乙醇(200ml)溶液中，并將混合物攪拌30分鐘。加入硼氫化鈉(5.2g)并將該懸浮液攪拌過夜，然后倒入冰冷的1M HCl(500ml)中并用CH2Cl2提取。將合并的提取液用水和鹽水洗滌并真空干燥，得到無色液體狀標題化合物(7.05g)。
TLC Rf＝0.22(20％EtOAc/CH2Cl2)中間體402-鄰苯二甲酰亞氨甲基四氫噻吩將DEAD(11g)在干燥THF(20ml)中的溶液加入中間體39(7.3g)、鄰苯二甲酰亞胺(10.2g)和三苯膦(17g)的干燥THF溶液中并將該溶液攪拌過夜，然后蒸發(fā)并將殘余物與乙醚一起研制。濾除固體殘余物，將濾液蒸發(fā)并通過閃式色譜純化(15％EtOAc/己烷)，得到白色固體狀標題化合物(10.5g)。
TLC Rf＝0.38(20％EtOAc/己烷)中間體412-氨甲基四氫噻吩將水合肼(2.52g)加入到中間體40的EtOH(60ml)溶液中并將混合物加熱回流3小時，然后冷卻、過濾并將濾液蒸發(fā)。殘余物將色譜分離(5％MeOH/CH2Cl2)得到淺黃色液體狀標題化合物(3.25g)。
TLC Rf＝0.41(5％MeOH/CH2Cl2)中間體422-氨基-5-硝基-4-(2’-四氫噻吩基甲氨基)-嘧啶-6-[1H]-酮標題化合物用與中間體1相似的方法從中間體41制備。
TLC Rf＝0.15(20％MeOH/CH2Cl2)中間體432-氨基-4-(2’-四氫噻吩基甲氨基)-5-[1-[3-(乙氧羰基)硫脲基]]嘧啶-6-[1H]-酮標題化合物用與中間體2相似的方法從中間體42制備。
TLC Rf＝0.32(10％MeOH/CH2Cl2)中間體446-氨基-4-(2’-四氫噻吩基甲氨基)惡唑[5，4-d]嘧啶-2-甲酸乙酯標題化合物用與中間體3相似的方法從中間體43制備。
TLC Rf＝0.53(10％MeOH/CH2Cl2)中間體452-氨基-5-硝基-4-(2’-(1-叔丁氧羰?；?-吡咯烷基甲氨基-5-硝基嘧啶-6-[1H]-酮標題化合物用與中間體1相似的方法從1-叔丁氧羰?；?2-氨甲基吡咯烷制備。
TLC Rf＝0.14(20％MeOH/CH2Cl2)中間體462-氨基-4-(2’-(1-叔丁氧羰酰基吡咯烷甲基)氨基)-5-[1-[3-乙氧羰基硫脲基]]嘧啶-6-酮標題化合物用與中間體2相似的方法從中間體46制備。
TLC Rf＝0.23(10％MeOH/CH2Cl2)中間體476-氨基-4-(2’-(1’-叔丁氧羰?；量┩榧谆?氨基)惡唑[5，4-d]嘧啶-2-甲酸乙酯標題化合物用與中間體3相似的方法從中間體46制備。
TLC Rf＝0.42(10％MeOH/CH2Cl2)中間體488-氨基-9-(2’-(1’-叔丁氧羰酰基吡咯烷基))鳥嘌呤標題化合物用與實施例1相似的方法從中間體47制備。
TLC Rf＝0.45(25％MeOH/CH2Cl2)中間體495-(叔丁基二甲基硅烷基氧甲基)吡咯烷-2-酮標題化合物用與中間體27相似的方法從5-羥甲基吡咯烷-2-酮制備。
TLC Rf＝0.4(5％MeOH/CH2Cl2)中間體501-叔丁氧羰?；谆?5-叔丁基二甲基硅烷基氧甲基吡咯烷-2-酮將中間體49(1.0g)的四氫呋喃(5ml)溶液加入到氫化鈉(0.21g)的四氫呋喃(20ml)懸浮液中并攪拌0.5小時，加入溴乙酸叔丁酯(0.94g)的THF(5ml)溶液。1.5小時后，將混合物用水稀釋并用二氯甲烷提取，用水洗滌并干燥(MgSO4)。濃縮得到無色油，將其用硅膠色譜進一步純化。得到無色油狀標題化合物(1.5g)。
TLC Rf＝0.65(5％MeOH/CH2Cl2)中間體511-叔丁氧羰酰基甲基-5-羥甲基吡咯烷-2-酮標題化合物用與中間體30相似的方法從中間體50制備。
TLC Rf＝0.3(5％MeOH/CH2Cl2)中間體521-叔丁氧羰?；谆?5-甲磺?；跫谆量┩?2-酮標題化合物用與中間體8相似的方法從中間體51制備。
TLC Rf＝0.45(5％MeOH/CH2Cl2)中間體531-叔丁氧羰?；谆?5-疊氮基甲基吡咯烷-2-酮將疊氮化鈉(0.55g)加入到中間體52(1.3g)的DMF(15ml)溶液中并加熱至50℃48小時。將反應混合物用水(50ml)稀釋并用乙醚(3×100ml)提取。將合并的醚層用水(4×50ml)洗，干燥(MgSO4)并濃縮至干，得淺黃色油狀標題化合物(0.7g)。
TLC Rf＝0.6(5％MeOH/CH2Cl2)中間體541-叔丁氧羰酰基甲基-5-氨甲基吡咯烷-2-酮將中間體53(4.8g)和三苯膦(10.5g)溶于THF(100ml)和水(8ml)中。攪拌48小時后將反應混合物蒸發(fā)至干并通過硅膠色譜純化(5％MeOH/CH2Cl2)。得黃色油狀標題化合物(2.7g)。
TLC Rf＝0.4(5％MeOH/CH2Cl2)中間體552-氨基-4-(1’-(叔丁氧羰?；谆?吡咯烷-2-酮甲氨基)-5-硝基嘧啶-6-[1H]-酮標題化合物用與中間體1相似的方法從中間體54制備。
TLC Rf＝0.6(10％MeOH/CH2Cl2)中間體562-氨基-4-(1’-叔丁氧羰?；谆量┩?2’-酮基-5’-甲氨基)-5-[1-[3-(乙氧羰基)硫脲基]]嘧啶-6-[1H]-酮標題化合物用與中間體2相似的方法從中間體55制備。
TLC Rf＝0.45(10％MeOH/CH2Cl2)中間體576-氨基-4-(1’-叔丁氧羰?；谆量┩?2’-酮基-5’-甲氨基)-惡唑[5，4，d]嘧啶-2-甲酸乙酯標題化合物用與中間體3相似的方法從中間體56制備。
TLC Rf＝0.55(10％MeOH/CH2Cl2)中間體589-(1’-羧甲基吡咯烷-2’-酮-5’-基甲基)-8-乙氧羰酰氨基鳥嘌呤向中間體57(0.85g)的水(30ml)溶液中加入碳酸鉀(0.14g)并回流24小時。然后將得到的混合物在環(huán)境溫度下攪拌1周，濾出沉淀。將濾液蒸發(fā)至干得標題化合物(0.36g)。[M+H]+＝394實施例18-氨基-9-(2’-四氫呋喃基甲基)鳥嘌呤將中間體3(0.27g)和碳酸鉀(0.23g)一起在甲醇(25ml)中加熱回流6小時。減壓蒸除甲醇并用水(25ml)代替，繼續(xù)加熱回流6小時。將冷卻的反應混合物用飽和氯化銨溶液中和。將得到的固體溶于氫氧化鈉水溶液并加入乙酸使之沉淀。濾出沉淀，用水洗滌并干燥得標題化合物(0.23g)。
TLC Rf＝0.2(30％MeOH/CH2Cl2)1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ1.6-2.1(m，4H)，3.7(m，1H)，3.95(m，3H)，4.25(m，1H)，5.5(bs，2H)6.1(bs，2H)，10.3(bs，1H)實施例28-氨基-9-(2’-四氫吡喃基甲基)鳥嘌呤標題化合物用與實施例1相似的方法從中間體6制備。
TLC Rf＝0.1(10％MeOH/CH2Cl2)1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ1.0-1.9(m，6H)，3.3(m，1H)，3.6(m，1H)，3.8(m，3H)，5.8(bs，2H)6.3(bs，2H)，10.6(bs，1H)實施例38-氨基-9-(2’-四氫吡喃基甲基)鳥嘌呤鹽酸鹽0℃下，將乙酰氯(14ml)加入到甲醇中并將溶液攪拌10分鐘。將實施例2的化合物加入溶液中并將該化合物在室溫下攪拌1小時。減壓蒸除溶劑得到白色固體并將其在80℃下用真空干燥箱干燥(0.64g)。HPLC(Novapak C-18 100×8mm，2∶3MeOH/H2O，1ml/min)Rt8.75分鐘。1H NMR(200MHz；DMSO-d6)δ1.1-1.9(m，6H)，3.3(m，1H)，3.7(m，1H)，3.8-4.2(m，3H)，7.1(bs，2H)8.2(s，2H)，11.4(s，1H)實施例4(R)8-氨基-9-[2’-(四氫吡喃基甲基)]鳥嘌呤二鹽酸鹽在N2流下將中間體12(38mg)和HCl(1ml)一起在乙醇(9ml)中攪拌。然后加入Pd/碳催化劑(10％)(5mg)并將反應液在氫氣氛圍下攪拌3小時。將反應液過濾并減壓蒸除溶劑，得到白色固體狀標題化合物(22.6mg)。
TLC Rf＝0.43(20％MeOH/CH2Cl2)[M+H]+＝338實施例5(S)8-氨基-9-(2’-四氫吡喃基甲基)鳥嘌呤二鹽酸鹽標題化合物用與實施例4相似的方法從中間體9制備。
TLC Rf＝0.25(20％MeOH/CH2Cl2)[M+H]+＝338實施例68-氨基-9-[2’-(6’-甲基四氫吡喃基)甲基]鳥嘌呤二鹽酸鹽標題化合物用與實施例4相似的方法從中間體14制備。
TLC Rf＝0.05(10％MeOH/CH2Cl2)[M+H]+＝279實施例78-氨基-9-[2’-(4’-甲基四氫吡喃基)甲基]鳥嘌呤二鹽酸鹽標題化合物用與實施例4相似的方法從中間體16制備。
TLC Rf＝0.1(10％MeOH/CH2Cl2)[M+H]+＝279實施例88-氨基-9-[2’(4’，6’-二甲基四氫吡喃基甲基)]鳥嘌呤二鹽酸鹽標題化合物用與實施例4相似的方法從中間體18制備。
TLC Rf＝0.15(10％MeOH/CH2Cl2)[M+H]+＝293實施例98-氨基-9-[2’-(6’-羧甲基)四氫吡喃基甲基)鳥嘌呤二鹽酸鹽標題化合物用與實施例4相似的方法從中間體22制備。
TLC Rf＝0.1(10％MeOH/CH2Cl2)[M+H]+＝323實施例10(S*，R*)8-氨基-9-(2’-(6’-丙基)四氫-2H-吡喃基甲基)鳥嘌呤二鹽酸鹽標題化合物用與實施例4相似的方法從中間體26制備。
TLC Rf＝0.1(10％MeOH/CH2Cl2)[M+H]+＝307實施例11反8-氨基-9-(2’-(6’-羥丙基)四氫-2H-吡喃基甲基)鳥嘌呤二鹽酸鹽標題化合物用與實施例4相似的方法從中間體32制備。
TLC Rf＝0.05(10％MeOH/CH2Cl2)[M+H]+＝323實施例12反8-氨基-9-(2’-(6’-甲氧羰基乙基)-四氫吡喃基甲基)鳥嘌呤二鹽酸鹽標題化合物用與實施例4相似的方法從中間體36制備。
TLC Rf＝0.1(10％MeOH/CH2Cl2)[M+H]+＝351實施例138-氨基-9-(2’-[1，4-二氧雜環(huán)己烷基]甲基)鳥嘌呤二鹽酸鹽標題化合物用與實施例4相似的方法從中間體38制備。
TLC Rf＝0.12(10％MeOH/CH2Cl2)[M+H]+＝267實施例148-氨基-9-(2’-四氫噻吩基)鳥嘌呤標題化合物用與實施例1相似的方法從中間體46制備。
TLC Rf＝0.26(25％MeOH/CH2Cl2)1H NMR(DMSO-d6)δ1.65(m，2H)，1.92-2.20(m，2H)，2.62-2.90(m，2H)，3.70-3.97(m，3H)，6.00(br s，2H)，6.38(br s，2H)，10.81(br s，1H)實施例158-氨基-9-(2’-(1’-氧四氫噻吩基甲基))鳥嘌呤將過氧化氫(18ml)加入到實施例14的化合物(41mg)的乙酸(3ml)溶液中并將混合物攪拌3小時，然后蒸發(fā)并將殘余物溶于氫氧化鈉溶液。加入飽和氯化銨水溶液，過濾收集標題化合物并用水洗滌。產量17.5mg。
TLC Rf＝0.20(20％MeOH/CH2Cl2)[M+H]+＝283實施例168-氨基-9-(2’-(1’，1’-二氧四氫噻吩基甲基))鳥嘌呤將過氧化氫(100ml)加入到實施例14的化合物(67mg)的乙酸(3ml)溶液中并將混合物攪拌18小時，然后蒸發(fā)并將殘余物在碳酸鉀水溶液中攪拌。過濾收集固體沉淀并用水洗滌，得到灰棕色固體狀標題化合物(40mg)。
TLC Rf＝0.32(20％MeOH/CH2Cl2)[M+H]+＝299實施例17二水合8-氨基-9-(2’-吡咯烷基甲基)鳥嘌呤三鹽酸鹽將中間體48(56mg)、甲醇(4.5ml)和3N鹽酸(4.5ml)混合并在室溫下攪拌1小時。然后將混合物減壓蒸發(fā)得到標題化合物(35mg)。
TLC Rf＝0.2(20％MeOH/CH2Cl2)[M+H]+＝250實施例188-氨基-9-(2’-吡咯烷基甲基)鳥嘌呤標題化合物用與實施例1相似的方法從實施例17的化合物制備。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ1.4-2.0(m，4H)，2.8-3.0(m，2H)，3.2-4.0(m，4H)，6.1-6.5(m，4H)，9.7(brs，1H)[M+H]+＝250實施例198-氨基-9-(1’-羧甲基吡咯烷-2’-酮-5’-基甲基)鳥嘌呤二鹽酸鹽將中間體58(0.1g)溶于2M鹽酸(10ml)并加熱回流48小時。蒸發(fā)至干得到白色固體狀標題化合物(0.10g)。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ1.8(m，1H)，2.0(m，1H)，2.2(m，1H)，2.4(m，1H)，4.0(m，5H)，37.5(bs，2H)，8.5(s，2H)，11.5(s，1H)[M+H]+＝322
權利要求
1.結構式(I)的化合物
其中n＝0-2；R1是H、NH2或鹵素；R2是H或NH2；R3是如下四個基團中的任意一個
其中M＝0或1；X是O、NR5或S(O)0-2，并且在基團(b)中，各X可以相同或不同；R4是H或是一個或多個彼此獨立地選自C1-6烷基-R6和芳基-R6的基團；R5是H、C1-6烷基-R6、C2-6烯基、芳基、-芳基-C1-6烷基、-C1-6烷基-芳基、-C1-6烷基-雜(C1-6)烷基、CO2-C1-6烷基-R6、CONH-C1-6烷基-R6、CO-C1-6烷基-R6或SO2-C1-6烷基-R6；R6是H、CO2H、CO2C1-6烷基、CONH2、CON(C1-6烷基)2、CONH(C1-6烷基)、CO-C1-6烷基、CO-芳基、CO-雜芳基、四唑基、NHSO2CF3、SO2NH-C1-6烷基、SO2N(C1-6烷基)2、SO2NH-芳基、NHCO-C1-6烷基、NHCONH-C1-6烷基、NHCONH-芳基、NHSO2-C1-6烷基、NHSO2-芳基、CN、NH2、OH、O-C1-6烷基或O-芳基；為任何互變異構、鹽、溶劑合和/或水合的形式。
2.權利要求
1的化合物，其中n＝1。
3.權利要求
1或2的化合物，其中R1是NH2或鹵素。
4.權利要求
1或2的化合物，其中R2是NH2。
5.權利要求
1或2的化合物，其中R3是基團(a)、(b)或(c)，并且X是O、S或NR5。
6.權利要求
1或2的化合物，其中R4是H或C1-6烷基-R6.
7.權利要求
1或2的化合物，其中R5是C1-6烷基-R6。
8.權利要求
1或2的化合物，其中R6不是SO2N(C1-6烷基)2或CN。
9.權利要求
8的化合物，其中R6是H、CO2H、CO2C1-6烷基、OH、NH2、四唑基或NHSO2CF3。
10.權利要求
8或9的化合物，其中R3是基團(a)或(c)，其中m＝0。
11.權利要求
8或9的化合物，其中R3是基團(a)或(c)，其中m＝1。
12.權利要求
8或9的化合物，其中R3是基團(b)或(d)。
13.權利要求
1的化合物，所述化合物為8-氨基-9-(2’-四氫吡喃基甲基)鳥嘌呤或8-氨基-9-(2’-四氫呋喃基甲基)鳥嘌呤
14.權利要求
1或2的化合物，所述化合物為單一的對映體、非對映異構體、或這些異構體的混合物的形式。
15.用于治療的藥物組合物，含有權利要求
1至14中的任意一項的化合物和可藥用的稀釋劑或載體。
16.制備權利要求
1至14中的任意一項的化合物的方法，其中R2是NH2，包括a)將結構式(XVI)的化合物
其中R10是易脫除的保護基如芐基，與結構式(XIV)的化合物反應
其中R9是鹵原子或離去基團；和b)將生成的結構式(XV)的中間體脫除保護基R10
例如，在氫氣和催化劑的存在下，在溶劑或酸性溶液中。
17.權利要求
1至14中的任意一項的化合物用于生產治療或預防與T細胞的增殖有關或由T細胞增殖所介導的疾病如自身免疫疾病的藥物的用途。
18.根據權利要求
18的用途，其中所述疾病為牛皮癬、特應性皮炎、接觸性皮炎或濕疹。
19.根據權利要求
18的用途，其中所述疾病為慢性過敏性疾病如哮喘。
20.根據權利要求
18的用途，其中所述疾病為重癥肌無力或多發(fā)性硬化。
21.根據權利要求
18的用途，其中所述疾病為類風濕性關節(jié)炎、全身性紅斑狼瘡或痛風。
22.根據權利要求
18的用途，其中所述疾病為T細胞白血病、皮T細胞淋巴瘤或T細胞癌。
23.根據權利要求
18的用途，其中所述疾病為器官或或骨髓移植后的組織排斥反應。
24.根據權利要求
18的用途，其中所述疾病為病毒或原生動物感染，或瘧疾。
25.根據權利要求
18的用途，其中所述疾病為過敏性腸疾病如Crohn’s病或潰瘍性結腸炎。
26.根據權利要求
18的用途，其中所述疾病為I型糖尿病。
專利摘要
可用作PNP抑制劑的結構式(Ⅰ)的化合物。
文檔編號A61P31/12GKCN1045088SQ95195541
公開日1999年9月15日 申請日期1995年10月5日
發(fā)明者S·C·比斯雷, A·F·哈格翰, J·蒙塔納, R·J·瓦特森 申請人:奇羅斯恩有限公司導出引文BiBTeX, EndNote, RefMan