技術(shù)特征：

1.一種檢測榴蓮根腐病棕櫚疫霉菌的試劑，其特征在于，所述試劑包括檢測榴蓮根腐病棕櫚疫霉菌基因組的引物對和/或檢測榴蓮根腐病棕櫚疫霉菌的crrna；

2.一種試劑盒，包含權(quán)利要求1所述的試劑和crispr-cas系統(tǒng)。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于：

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于：

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒，其特征在于：

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于：

7.權(quán)利要求1所述的試劑和/或權(quán)利要求2～6中任一項所述的試劑盒在1）~2）中任一項中的應(yīng)用：

8.一種基于rpa結(jié)合crispr/cas12a的榴蓮根腐病棕櫚疫霉菌的檢測方法，包括采用權(quán)利要求2～6中任一項所述的試劑盒的步驟。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的檢測方法，包括以下步驟：

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于現(xiàn)代化農(nóng)業(yè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種一種檢測榴蓮根腐病棕櫚疫霉菌的試劑盒及其應(yīng)用。本發(fā)明針對棕櫚疫霉菌的特異序列設(shè)計了引物及crRNA，開發(fā)了一種榴蓮根腐病棕櫚疫霉菌的快速可視化檢測試劑和試劑盒。該試劑或試劑盒對榴蓮根腐病棕櫚疫霉菌的檢測可在30分鐘內(nèi)完成，具有良好特異性且無交叉反應(yīng)，靈敏度達到10?fg/μL。且無需在RPA擴增結(jié)束后開蓋加入CRISPR/Cas12a反應(yīng)體系，避免了因開蓋導致的氣溶膠污染。本發(fā)明無需使用大型儀器設(shè)備，具有耗時短、操作簡便、靈敏性和特異性高等特點，適合臨床樣本及現(xiàn)場的快速可視化檢測。

技術(shù)研發(fā)人員：楊成東,周志明,陳慶河,劉曉珍,林明澤
受保護的技術(shù)使用者：海南大學三亞南繁研究院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/19